第十一章 非发酵革兰阴性杆菌第十一章 非发酵革兰阴性杆菌第一节 第一节 概述第二节 第二节 假单胞菌属第三节 第三节 不动杆菌属第四节 第四节 寡养单胞菌属第五节 第五节 产碱杆菌属第六节 第六节 军团菌属第七节 其他非发酵第七节 其他非发酵革兰阴性杆菌

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第二节 假单胞菌属第二节 假单胞菌属 一、概述一、概述

二、二、铜绿假单胞菌三、三、荧光假单胞菌荧光假单胞菌四、恶臭假单胞菌四、恶臭假单胞菌五、斯氏假单胞菌五、斯氏假单胞菌

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荧光假单胞菌荧光假单胞菌产青脓素，但不能产绿脓素， 4℃ 生长 ,

42℃ 不生长 , 最适温度 25-30℃ 。

见于水和土壤中，都可作为咽部的正常菌群存在，是人类少见的条件致病菌

荧光假单胞菌和污染的血制品关系密切，可见于近期接受过血液制品而致菌血症的患者。

二、铜绿假单胞菌二、铜绿假单胞菌

（一）（一）细菌特性（二）临床意义（二）临床意义（三）微生物学检验（三）微生物学检验

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（一）检验程序（一）检验程序（二）标本采集（二）标本采集（三）检验方法（三）检验方法（四）耐药性 （四）耐药性 （五）结果分析与报告 （五）结果分析与报告

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微生物学检验微生物学检验

铜绿假单胞菌的耐药性铜绿假单胞菌的耐药性

细菌耐药机制– 外膜通透性降低– 产生灭活酶或钝化酶– 主动外排系统将抗生素泵出胞外– 抗菌药物作用靶位改变

本菌对氨苄西林、安美汀、四环素、优力新、一、二代头孢菌素、头霉素、大环内酯类、磺胺等天然耐药

各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可能发生耐药。

铜绿假单胞菌感染的控制铜绿假单胞菌感染的控制

易感危重病人不应安排在已有过铜绿假单胞菌感染的病房

各种抗菌药物、溶液、软膏、器械等应避免被铜绿假单胞菌污染

采取适当的分型方法对感染菌株进行流行病学调查和监控

第三节 不动杆菌属第三节 不动杆菌属

一、分类一、分类二、二、细菌特性三、临床意义三、临床意义四、四、微生物学检验

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不动杆菌属不动杆菌属 AcinetobacterAcinetobacter 开始被归于奈瑟氏菌科，但最近又被归入莫拉

氏菌科。根据 DNA-DNA 杂交和营养特征将不动杆菌属分为 17 个基因种，但只有 7 个基因种有菌名：– 基因种 1 ：乙酸钙不动杆菌，主要分离自土壤– 基因种 2 ：鲍曼不动杆菌– 基因种 4 ：溶血不动杆菌– 基因种 5 ：琼氏不动杆菌– 基因种 7 ：约氏不动杆菌– 基因种 8 ：洛菲不动杆菌

广泛分布于自然和医院环境中，能在潮湿和干燥的表面生存，也可存在于健康人的皮肤，在非发酵菌中本菌是在临床标本中的分离阳性率仅次于铜绿假单胞菌而居第二位的条件致病菌，通常不动杆菌对健康人体不致病，但对体弱者可引起感染。

本菌能够获得多重耐药性和能够在大多数环境表面生存，所以由本菌引起的医院获得性感染有增加的趋势，医院获得性感染最常见的是呼吸道或手术部位、应用器械或 ICU 的住院患者。

不动杆菌所致疾病包括肺炎、心内膜炎、脑膜炎、皮肤和伤口感染、腹膜炎和尿道感染等。

不动杆菌对青霉素、氨苄青霉素和头孢他啶均耐药，大多数菌株对氯霉素耐药，对氨基糖苷类抗生素耐药的菌株也逐渐增多，不同菌株对二代和三代头孢菌素耐药性不同，所以每个分离菌株都应进行药敏试验。多重耐药菌株最常多见于鲍曼不动杆菌和溶血不动杆菌。

第四节 寡养单胞菌属第四节 寡养单胞菌属

一、分类一、分类二、细菌特性二、细菌特性三、三、临床意义四、微生物学检验四、微生物学检验

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第五节 产碱杆菌属第五节 产碱杆菌属

一、分类一、分类

二、二、细菌特性

三、临床意义三、临床意义四、微生物学检验四、微生物学检验

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产碱杆菌科产碱杆菌科 // 产碱杆菌属产碱杆菌属

有医学意义的产碱杆菌属主要有木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种 A.xylos

oxidans subsp. Xylosoxidans木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种 A.xylosoxida

ns subsp.denitrificans粪产碱杆菌 A.faecalis皮氏产碱杆菌 A.piechaudii

产碱杆菌属产碱杆菌属木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种通过使 OF葡萄糖和 OF木糖产酸而很容易和其他产碱杆菌区别，可从血、脑脊液、支气管冲洗液和伤口等分离到，本菌可引起医院内感染，如使住院病人引起肺炎，菌血症和脑膜炎等。

木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种较少从临床标本分离到，主要见于血、耳、脑脊液和尿。

粪产碱杆菌大部分感染是条件致病，主要来自潮湿环境，如雾化器、呼吸机和灌洗液等，血、痰、尿是常见发现部位。

第六节 军团菌属第六节 军团菌属

一、分类一、分类

二、二、细菌特性

三、三、临床意义

四、四、微生物学检验返回

概述概述

非发酵菌是一群需氧、无芽孢、氧化分解利用糖类或是不利用糖做为能量来源的革兰阴性杆菌。

非发酵菌与其它苛养或非糖发酵的革兰阴性杆菌之间的界限只是传统意义上的，并不是根据明确的遗传或表型特点来划分。

通常所讲的非发酵菌指在 KIA 表面 24小时内能够生长，在底部不生长的需氧革兰阴性杆菌。

非发酵菌常见菌属非发酵菌常见菌属假单胞菌属假单胞菌属 ((PseudomonasPseudomonas))

不动杆菌属不动杆菌属 ((AcinetobacterAcinetobacter))

寡养单胞菌属寡养单胞菌属 ((StenotrophmonaStenotrophmona

ss))

伯克菌属（伯克菌属（ BurkholderiaBurkholderia ））产碱杆菌属产碱杆菌属 ((AlcaligenesAlcaligenes))

无色杆菌属无色杆菌属 ((AchromobacterAchromobacter))

莫拉菌属莫拉菌属 ((MoraxellaMoraxella))

金氏杆菌属金氏杆菌属 ((KingellaKingella))

黄杆菌属黄杆菌属 ((FlavobateriumFlavobaterium))

艾肯杆菌属艾肯杆菌属 ((EikenellaEikenella))

土壤杆菌属土壤杆菌属 ((AgrobacteriumAgrobacterium))

黄单胞菌属黄单胞菌属 ((XanthomonasXanthomonas))

丛毛单胞菌属丛毛单胞菌属 ((ComamonasComamonas))

食酸菌属（食酸菌属（ AcidovoraxAcidovorax ））

非发酵菌的基本鉴定要求非发酵菌的基本鉴定要求 1 、缺少糖发酵的证据，通常是在 KIA或 TSI培

养基中无酸产生，斜面和底部均呈红色。

2 、氧化酶阳性（不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌寡养单胞菌、唐菖蒲伯克菌、浅黄华丽单胞菌、栖稻黄素单胞菌阴性），但并非所有氧化酶阳性的革兰阴性杆菌都是非发酵菌。

3 、麦康凯上生长很差或不生长

重要的鉴定试验重要的鉴定试验 1 、葡萄糖利用（ OF试验） OF培养基 : 蛋白胨和糖类的比例为 1:5 而不同

于发酵菌的 1:2 。 2 、动力半固体培养基 :应只穿刺培养基顶部 4mm，在培养 4-6 小时后首次观察结果 ,24 和 48 小时后再次观察结果。更准确的方法是湿片法和鞭毛染色。

3 、色素形成非发酵菌可形成多种色素，有助于菌种的鉴定。

重要的鉴定试验（续）重要的鉴定试验（续）硝酸盐还原 / 产气

是硝酸盐还原成亚硝酸盐，进而释放氮的生化过程。

吲哚试验需用含色氨酸丰富的培养基，产吲哚黄杆菌、脑膜败血黄杆菌、食酸丛毛单胞菌等阳性。

硫化氢 腐败希瓦菌是非发酵菌中唯一在 KIA 和 TSI上产硫化氢的菌种。

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细菌特性细菌特性形态特征培养特性生化反应生化反应抗原结构抗原结构抵抗力抵抗力

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铜绿假单胞菌革兰染色铜绿假单胞菌革兰染色

铜绿假单胞菌电镜图铜绿假单胞菌电镜图返回

生物学特性生物学特性

细长革兰阴性杆菌， 极单鞭毛，严格需氧，氧化利用葡萄糖、 McC 生长

在普通琼脂平板上产生特征性的蓝绿色水溶性绿脓素和黄绿色青脓素（荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌也可产生）

血平板上形成大而扁平，湿润，边缘不齐，有金属光泽，有生姜气味的灰绿色菌落，并形成透明溶血环

有时可产生水滴样样菌落，无色素不溶血（囊性纤维化病人）

最适生长温度 35℃ ， 4℃不生长， 42℃可生长

铜绿假单胞菌菌落特征（铜绿假单胞菌菌落特征（普通普通琼脂平板）琼脂平板）

铜绿假单胞菌菌落特征（血琼脂平板）铜绿假单胞菌菌落特征（血琼脂平板）

铜绿假单胞菌菌落特征（铜绿假单胞菌菌落特征（ MACMAC ））

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铜绿 荧光 恶臭 斯氏 门多萨 类产碱 产碱铜绿 荧光 恶臭 斯氏 门多萨 类产碱 产碱 氧化酶 99 97 100 100 100 100 96

麦康凯 100 100 100 100 100 100 96 42℃ 100 0 0 69 100 94 0硝酸盐还原 98 19 0 100 100 100 94荧光素 65 96 93 0 0 0 0精氨酸 100 97 100 0 100 78 12 明胶液化 82 100 0 0 0 0 0葡萄糖 97 100 100 96 100 9 0木糖 90 100 100 93 75 18 0乳糖 1 24 25 0 0 0 0麦芽糖 1 2 31 100 0 0 0甘露醇 70 53 25 89 0 0 0鞭毛数 1 >1 >1 1 1 1 1

氧化酶试验（＋）氧化酶试验（＋）

O/FO/F试验（氧化型）试验（氧化型）

硝酸盐还原试验（＋）硝酸盐还原试验（＋） 返回

致病物质

所致疾病所致疾病

临床意义临床意义

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致病物质致病物质侵袭力 粘附素、荚膜多糖侵袭力 粘附素、荚膜多糖外毒素 外毒素外毒素 外毒素 A A 、溶血素、肠毒素、、溶血素、肠毒素、 杀白细胞素 杀白细胞素 内毒素内毒素 绿脓素绿脓素侵袭性酶类 弹性蛋白酶、侵袭性酶类 弹性蛋白酶、胞外酶胞外酶 SS 、、 磷脂酶磷脂酶 CC

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分布广泛，是非发酵菌中最具临床意义的细菌，也是医院内感染最多见的细菌，主要引起条件感染。

感染多发生于烧伤、急性白血病、器官移植病人及静脉药瘾者，感染多位于潮湿部位，如气管造口、留置的导管、创面、外耳道、角膜和渗出性皮肤伤口处 .

囊性纤维化病人呼吸道分离的铜绿假单胞菌具有生物膜（其产生的大量藻酸盐包围了菌体所致），导致本病的治疗困难和高死亡率。其淡蓝色脓性渗出物及闻到绿脓素的生姜样气味具有特征性。

铜绿假单胞菌检验程序铜绿假单胞菌检验程序 返回

细菌特性细菌特性

形态特征培养特性培养特性生化反应生化反应

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鲍曼不动杆菌革兰染色鲍曼不动杆菌革兰染色返回

鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌严格需氧、无动力、氧化酶阴性、硝酸盐还原

阴性的革兰染色阴性球杆菌。 常似双球菌，有时不易脱色，易误认阳性菌； 血平板培养 24小时后，菌落大小 .05-2mm ，半透明到不透明，凸起，边缘整齐，无色素形成；

大多数菌株麦康凯平板上生长良好，呈无色或淡粉红色

鲍曼不动杆菌菌落特征（血琼脂平板）鲍曼不动杆菌菌落特征（血琼脂平板）

鲍曼不动杆菌菌落特征（鲍曼不动杆菌菌落特征（ MACMAC ））

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临床意义临床意义条件致病菌，医院感染的常见病原菌。 所致疾病包括肺炎、尿路感染、皮肤和

伤口感染、心内膜炎、脑膜炎和腹膜炎等。

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不动杆菌属检验程序不动杆菌属检验程序 返回

细菌特性细菌特性形态特征形态特征培养特性培养特性生化反应生化反应

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嗜麦芽嗜麦芽寡养单胞菌寡养单胞菌嗜麦芽寡养单胞菌为有动力杆菌，具有丛极鞭毛，血平板上菌落粗糙呈淡黄色或浅绿色，有氨气味。

根据 赖氨酸和 DNA酶阳性、氧化酶阴性可很容易与其他假单胞菌区别，本菌葡萄糖氧化缓慢，可快速氧化分解麦芽糖。

本菌的一个重要特征是对氨基糖苷类抗生素、碳青霉烯类天然耐药，但 TMP/SMZ天然敏感。

嗜麦芽寡养单胞菌菌落特征（嗜麦芽寡养单胞菌菌落特征（ MACMAC ））

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临床意义临床意义引起本菌定植和感染的危险因素有：机械

通气、广谱抗生素的预防性应用、化疗、插管和中性粒细胞减少等。

嗜麦芽寡养单胞菌分布广泛，可引起条件感染是一种重要的医院获得性病原体，本菌可分离于几乎所有部位，最常见的是呼吸道

嗜麦芽寡养单胞菌可致多种疾病，包括肺炎、菌血症、心内膜炎、胆管炎、脑膜炎、尿道感染和严重的伤口感染等。

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细菌特性细菌特性形态特征形态特征培养特性生化反应生化反应

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粪产碱杆菌菌落特征（粪产碱杆菌菌落特征（ MACMAC ））

返回 氧化酶阳性的革兰氏阴性杆菌

麦康凯上生长通过周鞭毛运动

在含蛋白的肉汤中产氨

细菌特性细菌特性

形态特征

培养特性生化反应生化反应抵抗力抵抗力

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嗜肺军团菌革兰染色嗜肺军团菌革兰染色

嗜肺军团菌嗜肺军团菌免疫荧光染色免疫荧光染色

嗜肺军团菌菌落扫描电镜图嗜肺军团菌菌落扫描电镜图 返回

嗜肺军团菌菌落特征（嗜肺军团菌菌落特征（ BCYEBCYE平板）平板）

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临床意义临床意义军团菌广泛存在于土壤及自然和人工的军团菌广泛存在于土壤及自然和人工的

水环境中，尤其是在空调冷凝水中的检出率水环境中，尤其是在空调冷凝水中的检出率最高，最高，是医院感染的重要病原菌之一。是医院感染的重要病原菌之一。

临床表现多种多样，最常见的是肺炎型。临床表现多种多样，最常见的是肺炎型。

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军团菌检验程序军团菌检验程序 返回