对人有致病性的球菌主要引起化脓性炎症 ,又称化脓性球菌。

G+C ：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌

G-C ：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌

1. 了解病原性球菌的概念及种类。

2. 熟悉常见病原性球菌的主要生物学特性、致病性和免疫性。

3. 掌握葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的检验程序和检验方法。

学习目的与要求

第一节 葡萄球菌属第一节 葡萄球菌属(Staphylococcus)(Staphylococcus)

（一）形态与染色 G+ ， 球形，无鞭毛、无芽孢，呈葡萄串状排列。

一、一、生 物 学 特 性生 物 学 特 性

（二）培养特性　　营养：要求不高，耐盐。

　　 液体：均匀浑浊生长

　　 普通琼脂平板：

　　 血液琼脂平板：　高盐甘露醇平板：金黄色葡萄球菌为淡橙黄色菌落；

　　　　　　　　其他葡萄球菌为白色菌落。　

（三）生化反应

　　活泼　分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。(如：葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，甘露醇）

　　触酶（＋）（区别于链球菌属）

（四）抗原构造

　１、蛋白抗原（ＳＰＡ）

　２、多糖抗原

　　金黄色葡萄球菌：核糖醇磷壁酸

　　　　（检测磷壁酸Ａｂ有助于金葡菌感染诊断）

　　凝固酶（－）：甘油磷壁酸

（五）分类 :　　　３２个种及亚种　１、按色素分类：金、白、柠　２、按凝固酶分类：　　　凝固酶阴性、凝固酶阳性葡萄球菌　３、按噬菌体分类：金葡菌分为 5群 26 型

4. 据色素、生化反应分： 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌

三种葡萄球菌的主要性状

性状 金黄色葡萄球菌

表 皮葡萄球菌

腐 生葡萄球菌

色 素 金黄色 白色 白色或柠檬色血浆凝固酶 + － －

α 溶血素 + － －耐热核酸酶 + － －

甘露醇 + － －SPA + － －

致病性 强 弱 无

（六）抵抗力 无芽胞菌中最强，耐干燥，对石炭酸、升汞、龙胆紫敏感。 易产生耐药性变异，如：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA ）。 MRSA 常呈多重耐药，对青霉素、氧氟沙星及红霉素的敏感率分别为 1.3% 、 3% 及 14% 。

长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与 MRSA 定植或感染的病人接触都是造成院内 MRSA 流行的危险因素。 MRSA 定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。

MRSA 定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA ）

二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性

( 一 )致病物质 金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。

1 ．血浆凝固酶（ coagulase) ：

分：结合型凝固酶、游离型凝固酶。

鉴别金黄色葡萄球菌的重要指标。

2．葡萄球菌溶血素（ staphylolysin ）

3 ．杀白细胞素（ leukocidin）

4．肠毒素（ enterotoxin ）：

（ A、 B、 C1、 C2 、 C3 、 D、 E、 G、 H

9个血清型）

5．表皮剥脱毒素（ exfoliative toxin）

6. 毒性休克综合征毒素 1（ toxic shock synd

rome toxin 1, TSST1 ）

（二）所致疾病 　 1 ．侵袭性疾病：

　（ 1）皮肤软组织感染　特点：病灶局限且脓汁粘稠

（ 2）内脏器官感染

（ 3）全身感染

（ 4）尿路感染

2 ．毒素性疾病　（ 1）食物中毒　（ 2）烫伤样皮肤综合征 由表皮剥脱毒素引起。

（ 3）毒性休克综合征 　　由 TSST1 引起

（ 4）假膜性肠炎

人类凝固酶阴性葡萄球菌（ CNS ）感染中以表皮葡萄球菌的感染最为常见。

CNS 主要引起以下几种感染：泌尿系感染，细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。

3、凝固酶阴性葡萄球菌的致病性

三、微 生 物 学 检 验

（一）标本采集

（二）检验程序

（三）检验方法

三、微 生 物 学 检 验

（一）标本采集

　　　根据病情采集标本

　　　种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。

注意：无菌操作，避免污染。

（二）葡萄球菌检验程序脓液、咽拭子、穿刺液

尿液、痰液脑脊液　　　血液 粪便、呕吐

物

直接涂片染色 增菌培养分离培养

（血平板）

分离培养

（高盐甘露醇平板）

取可疑菌落

鉴定试验　　　　　药敏试验

涂片染色

血浆凝固酶

耐热核酸酶

其他鉴定试验

涂片染色

血浆凝固酶

耐热核酸酶

其他鉴定试验 报　告

初 报

（三）检验方法 1 、直接涂片 适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液）

伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等

初步报告：

　　“查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌”

　或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌”

初步报告：

　　“查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌”

　或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌”

2 、分离培养

50ml葡萄糖肉汤（增菌）

浑浊无菌（ 7

天）

报告：

无菌生长

脑脊液、脓液、

穿刺液、咽拭、尿液

血平板

血液标本 5ml 粪便、

呕吐物

高盐甘露醇平板

（三）检验方法3 、鉴定试验（ 1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（ +）

（ 2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（ +）

（ 3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（ +）

（４）肠毒素测定： 金黄色葡萄球菌产生

（ 5） SPA 检测： 金黄色葡萄球菌

（ 6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定

（ 7） API葡萄球菌鉴定试剂盒

（四）结果评价和报告 1 、金黄色葡萄球菌：无论任何标本中分离到均 应鉴定并报告临床。

2 、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：从输液导管、人工植入组织中分离到，应视为致病菌。

3 、尿培养计数： >103-104为阳性菌尿标准。 4 、其他凝固酶阴性葡萄球菌：引起感染流行或治疗失败时，应鉴定到种。

5 、金黄色葡萄球菌（ MRSA) ：头孢菌素类抗生素体外药敏试验为敏感时，不应报告，因体内试验已证实 MRSA 对该类抗生素耐药。

第二节 链球菌属第二节 链球菌属((StreptococcusStreptococcus))

一、 链 球 菌一、 链 球 菌

一、生 物 学 特 性一、生 物 学 特 性

（一）形态与染色

G+ ，球形或椭圆形，呈链状排列，无鞭毛、无芽胞，有荚膜。

一、生 物 学 特 性一、生 物 学 特 性（二）培养特性　　条件：营养要求较高，多数为兼性厌氧菌，少

数专性厌氧。

　　液体：沉淀生长（絮状或颗粒状）。

　　普通琼脂平板：不生长。

　　血液琼脂平板：　

（三）生化反应

　 活泼　分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。

　 菊糖（ -）

胆汁溶菌试验（ -）

optochin敏感试验（ -）　　

触酶（ -）（区别于葡萄球菌属）

（区别甲链与肺链）

（四）抗原构造

　１、多糖抗原（ C抗原）：

群特异性。

　２、蛋白抗原（ M、 T、 R、 S）

型特异性，与致病有关的是 M蛋白抗原。

3 、核蛋白抗原：无特异性。　　

多糖抗原蛋白质抗原

核蛋白抗原

链球菌抗原构造模式图

荚膜

（五）分类 40个种及亚种　１、按溶血情况分类： （ 1）甲型溶血性链球菌：菌落周围有 1～ 2mm 宽的草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。为条件致病菌。 （ 2）乙型溶血性链球菌：菌落周围形成一个 2～4mm 宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血。又称溶血性链球菌。致病力强，引起多种疾病。 （ 3）丙型链球菌：无溶血环，不致病

２、按抗原结构分类：

按 C抗原分群： ABCD…20群，对人致病的以 A

群为主。

按 M蛋白分型：如 A群： 100个型， B群： 4型，C群： 13 个型。

（五）分类

（六）抵抗力不强， 60℃30min 杀死，对多种消毒剂敏感。乙链：对青霉素、四环素、红霉素等敏感。

二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）致病物质 1 、链球菌溶血素

（ 1）链球菌溶血素 O (SLO) SLO抗体

抗链球菌溶血素 O 试验：协助诊断风湿热（ >1:400)

（ 2）链球菌溶血素 S (SLS) ：无抗原性。2、致热外毒素（猩红热毒素 /红疹毒素）

3、 M蛋白

4 、透明质酸酶

5 、链激酶

6 、链道酶

4 、透明质酸酶

5 、链激酶

6 、链道酶

（二）所致疾病 主要由 A 群链球菌引起。 1 、化脓性感染：由皮肤伤口侵入，经呼吸道侵入，其他

途径（如产褥热、蜂窝组织炎）

特点：病灶界限不清 , 脓汁稀薄2 ．中毒性疾病：猩红热 由产生致热外毒素的 A族链球菌所致的急性呼吸道传染病。

3 ．变态反应性疾病： 风湿热 急性肾小球肾炎

二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性

4 ．其他疾病： 甲型（草绿色）链球菌：引起亚急性细菌性心内膜炎。

三、微生物学检验

（一）标本采集

（二）检验程序

（三）检验方法

（一）标本采集

　　　根据病情采集标本

　　　种类：脓液、鼻咽拭子、血液等

风湿热查血清抗体

（二）　链球菌的检验程序痰、脓、穿刺

液咽拭子等痰、脓、穿刺

液咽拭子等 脑脊液 血 液

直接涂片染色

测抗原 分离培养 增菌培养

(5%CO2 葡萄糖肉汤 )血平板（ 5%C

O2 ）可疑菌落鉴定试验

初步报告

血清学鉴定

（分群）

杆菌肽试验 optochin 胆汁溶菌试验 其他鉴定

敏感试验 试验

（三）　链球菌的检验方法

（ 1 ）直接镜检：

（痰、脓、穿刺液、

咽拭子等）

初报：发现 G+ 球菌，

呈链状排列

（ 2 ）分离培养：

① 血液、脑脊液 肉汤增菌

② 脓液、咽拭子等 血平板分离

（ 3 ）鉴定链球菌的主要试验：

根据形态、菌落、溶血情况进行： ①杆菌肽敏感试验： A 群敏感 (d>10mm)

②Optochin敏感试验：肺炎链球菌 d>18mm，

d<15mm为阴性。

③胆汁溶菌试验：肺炎链球菌 + ④CAMP 试验：Ｂ群无乳链球菌为＋

⑤血清学鉴定：

试剂盒 STREPTEX。用亚硝酸抽提待测菌的群特异性抗原，分别与包被有抗体的胶乳颗粒反应。

⑥抗 O 试验：

风湿性关节炎、急性肾小球肾炎，

效价 >400为 +

二、肺炎链球菌二、肺炎链球菌((S.pneumoniaeS.pneumoniae))

属链球菌科，链球菌属。 广泛分布于自然界，主要寄生于人类上呼吸道，多数不致病。

一、生 物 学 特 性一、生 物 学 特 性

（一）形态与染色

G+ ， 矛头状，成双（或短链）排列，无鞭毛、无芽胞，有荚膜。

（二）培养特性　条件：营养要求较高，兼性厌氧菌， 5-10% C02 生长最好。 产生自溶酶。

　液体：培养 24h 呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄清。

　普通琼脂平板：不生长。

　血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（ α 溶血）

（三）生化反应

　　活泼　分解多种糖类。

　　 菊糖（多数 + ）

胆汁溶菌试验（ +）　　

Optochin 试验 (+)

区别甲链与肺链

（四）抗原构造

　１、荚膜多糖抗原：

据此将肺炎链球菌分 85 型，对人致病的有 20多型。 Ⅰ -Ⅲ型引起大叶性肺炎。

　２、菌体多糖抗原：

可与 CRP反应，产生沉淀。

3 、 M蛋白抗原： 型特异性。　　

（五）抵抗力

较弱，加热 56℃ ， 20min 即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。

荚膜变异：有荚膜的光滑（ S ）型菌有毒力，失去荚膜的粗糙（ R ）型毒力减低或消失。

（六）变异性

二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性

（一）致病物质 1 、荚膜： 肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。 2 、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素 O 等 溶血毒素“ O”：自溶后释放，能溶解人和动物的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。

（二）所致疾病

存在于正常人上呼吸道，为条件致病菌，仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。 可引起：大叶性肺炎，胸膜炎，脓胸，慢性支气管炎，中耳炎，脑膜炎，败血症等。

三、微生物学检验三、微生物学检验

（一）标本采集 痰液，脓液，血液，脑脊液等。

（二）检验程序

（三）检验方法

检验程序痰、脓痰、脓 脑脊液脑脊液 血液血液

直接涂片 分离培养

革兰染色、美兰染色

荚膜肿胀试验

增菌培养（葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤）（血平板）

挑选可疑菌落纯培养

初报兔血清肉汤

小白鼠毒力试验

涂片 荚膜肿胀试验

胆汁溶菌试验 菊糖发酵 Optochin 试验

药敏试验

报 告

检验方法1 、直接镜检

适用于：痰、脓、脑脊液标本。

报告：“找到肺炎链球菌”

2 、分离培养

硫酸镁肉汤：均匀混浊生长，有绿色荧光。

血平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（ α 溶血）

3 、鉴定试验

（ 1 ）荚膜肿胀试验

（ 2 ）胆汁溶菌试验： +

（ 3 ） Optochin 试验： +

（ 4 ）菊糖发酵试验： +（ 5 ）小鼠毒力试验： 有毒力的菌株，接种后 12-36h ，死亡。

胆汁溶菌试验阳性：

加入胆汁或10% 去氧胆酸钠， 37℃ ，5-10min ，激活本菌的自溶酶，出现溶菌现象。

Optochin 敏感试验阳性：

取肉汤培养液均匀涂于血平板上用 optochin纸片贴于接种区中央（或分区划线法，纸片贴于 1-2区）， 35℃需氧培养过夜，抑菌圈 >18mm。

Optochintest

肺炎链球菌的主要鉴定依据

1 、镜下形态：革兰阳性球菌，矛头状成双排列，平端相对，尖端向外；

2 、血平板菌落特点：直径 0.5-1.5mm，灰白色，半透明，光滑（有些菌株为粘液状），扁平，周围有草绿色溶血环。

培养或放置 24h以上，菌落中央可塌陷，呈脐窝状。

3 、生化鉴定：

Optochin 试验 + ，胆汁溶菌试验 + 。

肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的鉴别

形态 菌落 血清 胆汁 菊糖 Opto- 小鼠

肉汤 溶菌 chin 毒力试验

肺链

甲链

矛头状， 稍大，湿润 浑浊 + + + +

成双， 扁平，

有荚膜 脐窝状

圆形， 较小，稍干， 沉淀 — — — —

无荚膜 圆，凸起

（四）结果评价和报告

乙型溶血性链球菌和肺炎链球菌为毒力强的致病菌，无论从任何临床标本中分离出均应报告临床。

及时鉴定和报告咽部标本中分离出的化脓性链球菌，有利于早期治疗，以减少并发症（如风湿热，肾小球肾炎）的产生。

草绿色链球菌在重症感染时，应鉴定到种。

第三节 肠球菌属

是肠道中的正常菌群

导致医院内感染：如尿路感染尿路感染、腹部和

盆腔感染、败血症、脑膜炎。

一、生物学特性（一）形态染色 G+ 球菌，单个、成双或短链状排列。无荚膜、芽胞，部分菌株有鞭毛。

营养要求较高。能在高盐（ 6.5%NaCl）、高碱（ PH9.6）、高胆汁（ 40% ）、 10~45℃生长。

菌落：圆形、中等大小、灰白色、不透明、 S 型，有 γ或 α 溶血。

（二）培养特性

能分解多种糖类

触酶（ -）

PYR （吡咯烷酮 -β-萘基酰胺）试验（ +）

（三）生化反应

目前分 18种。引起医院内感染常见的是粪肠球菌和屎肠球菌。

常用的分型方法： rRNA 基因探针分型法。

（四）分型

（五）抵抗力

对理化因素抵抗力弱。

但对大多数抗生素天然耐药。

二、微生物学检验

（一）标本采集

尿液、血液、脑脊液、脓汁分泌物等。

（二）检验程序尿液、脓汁、

穿刺液尿液、脓汁、

穿刺液血 液血 液

涂片染色 分离培养（血平板、 5%CO2 ）

初 报挑选可疑菌落

增菌培养（葡萄糖肉汤、 5%CO2 ）

PYR 试验 胆汁七叶苷试验

6.5%NaCl生长试验

血清学试验

其他鉴定试验

报 告

（三）检验方法

1 、直接镜检

适用于：痰、脓、脑脊液、穿刺液标本。

2 、分离培养

血平板：灰白色，圆形，中等大小，不透明，S 型菌落，周围有 α 溶血或 γ溶血。

选择培养基：叠氮胆汁七叶苷琼脂平板。

3 、鉴定试验

（ 1 ）菌属鉴定试验：

①PYR 试验：肠球菌、 A群链球菌、某些凝固酶阴性葡萄球菌为（ + ）

②胆汁七叶苷试验： +

③ 盐耐受试验： +

（ 4 ）种间鉴定试验： P175 表 17-3

第四节 奈瑟菌属第四节 奈瑟菌属((NeisseriaNeisseria))

特点：为一群 G- 双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛，需氧，氧化酶及触酶 + 。 种类：共九种，主要致病菌是 脑膜炎奈瑟菌 (merningococcus) 淋病奈瑟菌 (gonorrhoeae)

一、脑膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis)

一、脑膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis)

即脑膜炎球菌，

是流行性脑脊髓膜炎的病原体

（一）生物学性状

1 ．形态结构 2 ．培养特性 3 ．生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点

（一）形态结构 G- ，肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内 无芽胞、无鞭毛，具有荚膜、菌毛。

2 ．培养特性 营养要求高，必须在含有血清或多种氨

基酸、无机盐的培养基上生长良好。

血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润光滑露滴样菌落。

易自溶。

巧克力平板：圆形，扁平，蓝灰色，半透明，光滑湿润的菌落。

卵黄双抗（ EPV）平板：较大，无色，光滑湿润，扁平，边缘整齐的菌落。

血清肉汤：呈微混浊。

3. 生化反应

分解葡萄糖、麦芽糖： +

硝酸盐还原试验阴性，不分解尿素

氧化酶试验阳性

4. 抗原结构 可分 9个血清群，对人致病的主要是 A群5 ．抵抗力特点

对寒冷、光、热力，干燥等十分敏感。室温 3h，60 ℃ 5min 死亡。

采集标本：注意保温迅速送检。

对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。

（二）致病性与免疫性 1 ．致病物质：菌毛、荚膜、内毒素

　 2．所致疾病：传染源、传播途径　　　寄生在正常人鼻咽部，存在易患人群，与患者补体介导的杀菌活性缺陷有关。约 2%-3% 的人表现为流脑症状。3. 免疫性

　 病原可产生群特异性抗体，但不持久。

( 三 ) 微生物学检验

1 ．标本采集

菌血症期病人采集血液

有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液

有脑膜刺激症状，抽取脑脊液

　带菌者：咽拭子

注意事项：

　　立即送检

　注意保温（勿放冰箱）

防干燥

防紫外线

注意事项：

　　立即送检

　注意保温（勿放冰箱）

防干燥

防紫外线

２、脑膜炎球菌的检验程序 血 液

增菌培养（葡糖肉汤）

分离培养

（巧克力、血平板）

鉴定试验

涂染检 氧化酶 葡、麦糖 多价血清 药敏试验

结果报告

鼻咽拭子

卵黄双抗平板

5~10%co2

37 18~24h℃ 37 18~24h℃

37 18~24h℃

脑脊液 瘀血点离心

上　沉

清　淀

液　物 5~10%ＣＯ2

涂片

染色

初步

报告

直接凝集

脑膜炎球菌的鉴定依据

菌落特征符合

形态染色符合

分解葡、麦糖产酸

氧化酶、触酶阳性

血清凝集试验阳性

二、淋病奈瑟菌（ N.gonorrhoeae）

二、淋病奈瑟菌（ N.gonorrhoeae）

即淋球菌

为淋病的病原体，人是唯一天然宿主和传染源

（一）生物学性状（一）生物学性状

1 ．形态结构

2 ．培养特性

3. 生化反应

4 ．抵抗力特点

1 ．形态结构 G- ，球形或肾形，成对排列

有荚膜，无芽胞和鞭毛

22．培养特性．培养特性 营养要求高， 30-37 ℃ 生长，须在含有血液或血清的培养基上培养，常用血液、巧克力等培养基

初次分离，须 5-10%CO2才能生长发育 菌落：凸起，光滑、圆形，灰褐色，半透明

3.3. 生化反应生化反应

氧化酶试验：（ +）

触酶： （ +）

葡萄糖（ +） ，麦芽糖（ -）

易自溶

44 ．抵抗力特点．抵抗力特点

抵抗力弱，在干燥环境中仅能存活 1-2h，湿热 55 ℃ 5min,100 ℃立即死亡。室温下存活 1-2d。

对消毒剂极敏感

１、致病物质：菌毛、外膜蛋白、等

２、所致疾病：

　　侵犯人类泌尿生殖系统引起淋病 (首位性病 )

　 新生儿眼炎

（二）致病性与免疫性（二）致病性与免疫性

11 ．标本采集 ．标本采集 标本：男性：尿道分泌物

　女性：阴道分泌物

全身性淋病：血液、泌尿、生殖道的各种分泌物、尿液

立即送检

２．检验程序 ２．检验程序

(( 三三 ) ) 微生物学检验微生物学检验

脓汁、分泌物

直接涂片染色 分 离 培 养

血、巧克力、 TM 平板

5 － 10%co2 35℃18－ 24h鉴定试验

涂染检 氧化酶 糖发酵 药敏试验

报 告

初步报告

35℃ 18－ 24h

（１）直接涂片镜检

急性淋病：　嗜中性粒细胞内大量 G- ，肾形双球菌——具有诊断意义

慢性淋病：镜检较困难

３．检验方法３．检验方法

（２）分离培养

即采集即培养，常用含有两种以上抗生素（万古霉素、粘菌素、磺胺类等）的选择培养基上培养（如 ML、 TM ） 5-10%CO2

培养基先预温。

氧化酶试验： （ +）

触酶： （ +）（多数奈瑟菌为阴性）

葡萄糖（ +），麦芽糖（ -）

PCR ：灵敏，特异，标本不受限制 ( 不需活

菌 )

（３）鉴定

1.名词解释：

血浆凝固酶、 SPA 、抗链“ o”试验、 Optochin 试验。

2.根据色素和生化反应将葡萄球菌分成哪几种？

3. 金黄色葡萄球菌的鉴定依据有哪些？ 4. 根据链球菌在血平板上的溶血现象，将其分成哪些类型？甲链和乙链有何区别？

5. 简述链球菌的检验程序和检验方法。

6. 脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有哪些异同点？

7.采集脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的标本进行细菌检验应该注意哪些问题？为什么？

复习思考题

中等大，突起，

有色素， S型菌落。

葡萄球菌菌落形态

（普通琼脂平板）

金黄色葡萄球菌

表皮葡萄球菌

金黄色葡萄球菌有透明溶血环。

表皮葡萄球菌无溶血环。

葡萄球菌 A蛋白（ SPA ）的意义：

（ 1）降低抗体的调理作用，抗吞噬

（ 2）协同凝集试验 :辅助诊断疾病。

血浆凝固酶试验

［原理］致病性葡萄球菌能产生２种血浆凝固酶：

一种为结合型凝固酶（凝聚因子）：细菌表面的纤维蛋白原受体与血浆中的纤维蛋白原结合，导致细菌凝集。

另一种为游离型凝固酶，可被人或兔血浆中的协同因子激活，成为凝血酶样物质，使纤维蛋白原变为纤维蛋白，从而使血浆凝固。　［检测方法］结合型凝固酶：玻片法

　　　　　　游离型凝固酶：试管法

耐热核酸酶试验

液体培养物

煮沸 15min 　37℃3h

甲苯胺蓝核酸琼脂

肠毒素测定病人呕吐物、粪便、剩余食物

高盐肉汤37℃24h

分离培养肉汤煮沸 30min， 离心，取上清夜

幼 猫

观察症状（ 4h出现）

SPA 的检测

致病性葡萄球菌 （ SPA)

兔抗羊红细胞 Ab

（ IgGFc ）SRBC

致敏羊红细胞

凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别

结合型 游离型 耐热核酸 VP 鸟氨酸脱

血浆凝固酶 血浆凝固酶 酶试验 试验 羧酶试验金黄色 + + + + —

葡萄球菌中间型 — + + — —

葡萄球菌 （罕见）

希氏 + — + + +

葡萄球菌

凝固酶阴性葡萄球菌的鉴别

见 P167表 17-1

表 3 几种常见葡萄球菌的鉴别细菌 菌落颜色 溶血 触酶 凝固酶 甘露醇 新生霉素

金黄色 金黄色 β + + + S

葡萄球菌

表皮葡萄 白色 γ + - - S

球菌

溶血葡萄 白色 β + - - S/R

球菌

腐生葡萄 柠檬黄 γ + - - R

球菌

Staphylococcus aures （ -）表皮葡萄球菌（ S）腐生葡萄球菌 (R)

阴性结果

（ S ）

新生霉素耐药试验

链球菌菌落（血平板）：

细小，灰白色，圆形，突起，光滑，湿润，边缘整齐，不同菌种菌落周围有不同溶血环。

甲型溶血性链球菌

（草绿色链球菌）

丙型链球菌

乙型溶血性

链球菌

猩红热

蜂窝织炎

Neisseria gonorrhoeae

Neisseria gonorrhoeae

烫伤样皮肤综合征 多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人，开始有红斑， 1～ 2天有皮起皱，继而形成水疱，至表皮脱落。由表皮剥脱毒素引起。

ＣＡＭＰ试验（ B群无乳链球菌

+ ）

-

+ ：溶血环呈箭头状

金黄色葡萄球菌

杆菌肽试验（ A群链球菌 + ）