《 医学遗传学 》 网络课程
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《 医学遗传学 》 网络课程. 主讲人：郭奕斌 中山医学院医学遗传学教研室. 第十一章、遗传病的诊断. 第五节、基因诊断. 基因诊断又称分子诊断，是运用分子生物学技术方法（如连锁分析、分子杂交、 PCR 或 DNA 测序等 ) ，测定特定基因的存在与否或是否有缺陷或表达水平的变化情况，从而对被检者的状态或疾病做出诊断。和传统诊断不同，基因诊断是直接从基因型推断表型，即越过产物（酶和蛋白质）直接检测基因结构而做出诊断，改变了传统的表型诊断方式，故又称逆向诊断。它不仅可对患者做出直接诊断，还可在发病前做出症状前诊断，也可对有发病风险的胎儿做出产前基因诊断。. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
《医学遗传学》网络课程
主讲人：郭奕斌
中山医学院医学遗传学教研室
第十一章、遗传病的诊断
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第五节、基因诊断 基因诊断又称分子诊断，是运用分子生物学技术方法（如连
锁分析、分子杂交、 PCR 或 DNA 测序等 ) ，测定特定基因的存在与否或是否有缺陷或表达水平的变化情况，从而对被检者的状态或疾病做出诊断。和传统诊断不同，基因诊断是直接从基因型推断表型，即越过产物（酶和蛋白质）直接检测基因结构而做出诊断，改变了传统的表型诊断方式，故又称逆向诊断。它不仅可对患者做出直接诊断，还可在发病前做出症状前诊断，也可对有发病风险的胎儿做出产前基因诊断。
一、基因诊断的特点
1 、可越过蛋白质 / 酶直接检查基因的突变；
2 、了解遗传异质性，有效检出携带者；
3 、不受基因表达的时空限制；
4 、不受取材细胞类型和发病年龄的限制；
5 、针对性强，特异性高，灵敏度高，适应性强。
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二、基因诊断的条件：
1 、待测基因已被定位；
2 、基因的结构顺序已经弄清；
3 、基因的突变性质已经阐明；
4 、致病基因与遗传标记的连锁关系已经确定；
三、基因诊断材料： DNA 、 RNA 和蛋白质。 DNA 用于分
析基因的结构， RNA 和蛋白质用于分析基因的功能。
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四、基因诊断的途径
( 一 ) 直接诊断：直接检测特定基因是否存在结构异常。通常
使用基因内探针或紧密连锁的探针，或通过 PCR 扩增等，以
检测特定基因有无缺失、插入、碱基置换等突变。
1 、适用于已知基因异常的疾病诊断。
2 、常用方法：基因内探针杂交， PCR ， ARMS ， PCR-RE ，
PCR-ASO ， PCR-SSCP ， PCR-DHPLC ，测序。
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23/4/20 **** 省妇幼产前诊断提高班讲座 ****
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DHPLC 仪器设备
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DHPLC 筛检—示突变双峰峰形
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DHPLC 筛检—示正常单峰峰形
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DHPLCDHPLC 结果结果
① 父亲（正常）；②母亲（携带者）；③先证者
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插入 TT 的正向测序结果
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Exon9比对（ F）
正 常正 常
杂合子杂合子
先证者先证者
女 胎女 胎
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( 二 ) 间接诊断：与致病基因连锁 / 紧密连锁的遗传标记一般
会与该基因一起传递。可通过家系分析待检者是否获得该
遗传标记，从而判断其是否获得致病基因。
1 、用于未知基因或未知基因突变。
2 、 常 用 方 法 有 ： RFLP ， STR ， SNP ， Amp-
FLP ， PCR-SSCP ， PCR-DHPLC 。
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3 、连锁分析时应注意的事项：
① 基因与标记物之间可能发生重组；
② 所选遗传标记在人群中的杂合度的高低；
③ 最好进行单倍型分析。
单倍型（ haplotype ）是指一条染色体上两个或两个以上多
态位点的状态组合，它有助于区分两条同源染色体并追踪致病
基因的分离情况。
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遗传病的基因诊断方法
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酶切分析或 VNTR分析示意图
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酶切鉴定结果
M. 100bp ladder
1. 野生型 COMP E10 的 PCR 产物（ 284bp/284bp 纯合子）
2. 酶切野生型 COMP E10 的 PCR 产物（ 100bp 和 184bp ）
3. 患者 COMP E10 的 PCR 产物（ 254bp/284bp 杂合子）
4. 酶切患者 COMP E10 的 PCR 产物（ 100bp 、 184bp 、 254bp ）
184
254
284300
200
100
M 31 2 4bp bp
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针对 c.262del 5 突变采用的普通引物及特异引物扩增产物的酶切电泳图
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图 50 D16S3121 多态性①父亲；②母亲；③先证者
STRs 连锁分析图
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