如何从临床工作中去发现科研问题？

汇报人：廖昭平指导老师：陶志华教授 2013.8.22

临床

科研

方法方法

问题

一 . 临床科研的重要性

临床科研设计分类 设计方案

病因研究 随机对照试验、前瞻性队列研究、病例对照研究

临床疗效评估 随机对照试验、自身前后对照、交叉研究

诊断试验评估 与标准诊断相对照

预后和自然病程评估 队列研究疾病在人群中的定量分布 横断面研究

特殊病例描述和介绍 病例报告、病例分析

二 . 如何进行科研设计和临床科研

科学研究基本步骤

课题的 实施

课题的总结和交流

课题的 选择

提出问题

查阅文献

课题可行性评估

实验方案的构建

实验实施 数据积累

数据统计分析

论文发表 学术讨论

成果申报

三 . 实例解析案例

入院情况：患者，男，因消瘦半年入院。既往有睡眠障碍病史3-4 年，长期服用安眠药（氯硝西泮 1/3 片 qn ），现睡眠尚可。查体： T37.4℃， R18 次 / 分， P50 次 / 分 ,Bp114/81mmHg ，意识清，面容消瘦，无皮肤瘀点瘀斑，无鼻衄。查体：浅表淋巴结未触及肿大，未闻及心前区病理杂音，双肺呼吸音清，未闻及干湿罗音，腹部平坦，未见胃肠型和蠕动波，未见腹壁曲张静脉，无压痛、反跳痛，未触及腹部包块，肝脾肋下未触及肿大， Murphy 征阴性，移动性浊音阴性，无肝区叩痛，肠鸣音 4 次 / 分，无亢进，双下肢无水肿。

辅助检查：

其他检测结果：患者 HBsAb 阳性；尿蛋白 +1 （ 0.3g/l ）；糖脂肝肾功能、免疫球蛋白、补体、大便常规、 ADA 、血沉、输血前四项、糖化血红蛋白、抗结核抗体 IgG 、抗核抗体 +ANCA 均无特殊， PPD 阴性。 B 超提示： 1. 肝囊肿； 2. 胆囊、胰腺、脾脏未见异常； 3. 双肾囊肿，右肾多发； 4. 膀胱未见明显异常； 5. 前列腺增生； 6. 淋巴结未见明显肿大。肺部 CT 正常，全腹部 CT 显示：肝囊肿，双肾囊肿，右肾小结石。结肠镜未见异常。骨穿常规缺乏血液病特征性改变。

纤维蛋白原？

纤维蛋白原

纤维蛋白原由三条同源多肽链 Aα ， Bβ ， γ 聚合，通过 29 个二硫键连接最终形成结构对称的六聚物 (AαBβγ)2 。三条多肽链的 N 末端形成了六聚体的中间 E 区域， E 区域通过 coiled-coils 向两侧延伸连接由 Bβ ， γ 链 C末端形成的外周 D 区域。编码纤维蛋白原三条多肽链的基因 FGA(Aα),FGB(Bβ),FGG(γ) 单独转录和翻译，经过转录后修饰形成分子量为 340kd 成熟蛋白，最终释放到外周血液循环。

凝血各项指标

已被被报道的病例中，有大约 55% 的病例无临床症状， 25% 的病例有出血症状还有约 20% 的病例有血栓形成倾向。

测序结果

遗传性异常纤维蛋白原血症大多以杂合显性遗传为特点，小部分为纯合显性遗传或隐性遗传。

先证者家系图谱

突变体筛查

FGG 第 8 外显子上 308 位 Asn 突变现象已有 4 例报导。已报导的突变无论是 308Asn 突变为 308Lys 还是 308Ile, 在还原性 SDS-PAGE 条件下均能检测到了 γ 链突变体，其分子量比正常 γ 链低。这是由于中性氨基酸（ Asn ）突变为疏水性氨基酸（ Ile ）或者碱性氨基酸（ Lys ）导致其与 SDS 结合能力更强，从而在还原性 SDS-PAGE 条件下比正常 γ 链泳动更迅速。

TEG 分析

其中第 308位的天冬酰胺（ Asn308 ）位于纤维蛋白原之间的结合界面处，对于纤维蛋白原聚合为纤维蛋白具有重要贡献。如果此位点发生突变，将影响纤维蛋白结构的稳定性。

分子结构模型