混合浓缩血小板和冰冻血小板临床应用研究

混合浓缩血小板和冰冻血小板临床应用研究解放军总医院第一附属医院解放军总医院第一附属医院

欧阳锡林欧阳锡林

解放军总医院第一附属医院解放军总医院第一附属医院解放军总医院第一附属医院解放军总医院第一附属医院

血小板是唯一具有止凝血功能的血细胞，其体积微小，寿命短，容易激活，活性成分衰减快。当前血小板输注具有不可替代性。

血小板供应严重短缺


供求矛盾从左至右依次加重

平平时时

假假期期

急急诊诊

战战时时

血小板供应严重短缺


每治疗量8 克

1400 元

宝贵的血小板资源


丰富的血小板资源


丰富的血小板资源

血小板是由骨髓中成熟的巨核细胞的细胞质脱落而成的，每个巨核细胞可产生2000 ～ 7000 个血小板。一个健康人每天生成血小板约 1200 亿个。维基百科


国外应用情况

• 德国手工分离血小板：德国手工分离血小板： 36% 36% • 欧洲其他国家手工采集浓缩血小板：欧洲其他国家手工采集浓缩血小板： 65%65%• 美国主要用手工浓缩血小板美国主要用手工浓缩血小板 • 加拿大两种血小板均使用加拿大两种血小板均使用


我国血小板资源的严重浪费 2007 年我国血小板 99% 单采血小板。我国每年有超过 2000 万人捐献超过 4000吨血液，远超过 2000 万单位血小板，其中 99%的全血中的血小板被白白浪费掉。


《健康报》报道与血液管理处的回应

“ 机采血小板价格不菲，每治疗量病人需缴纳1400 元，巨额利润都流进谁的腰包了呢？” “ 外国仪器设备商。”

机采血小板肥了谁的腰包

要求全国各级血站开展手工分离血小板业务。

血液管理处的回应


三日味变，四日色香味尽去


深低温保存—— 开启自体血小板金矿的金钥匙


国家战略资源的重要地位血小板的不可替代性资源浪费与财政亏损

血液是国家战略资源


尴尬局面的主要原因

高效分离纯化关键技术1. 高效分离（离心机）2. 纯化（去红细胞白细胞）3. 治疗剂量（汇集）

长期保存关键技术1.22℃ 振荡保存2.冰冻保存

对国家资源开发和保护意识


第三部分深低温保存血小板临床应用

第一部分混合浓缩血小板

第五部分不同血小板制剂的选择

第四部分深低温保存血小板的特点

第二部分混合浓缩血小板与单采血小板的比较主

要内容


第一部分


离心机去除白细胞ACD

200ml采血袋全血采血

汇集去红细胞

手工汇集血小板


离心机汇集

去红细胞去除白细胞

00ml采血袋

全血


必要性开发资源，避免浪费血小板供求矛盾尖锐单采血源动员难减少国家财政外汇支出

可行性资源丰富，唾手可得输血安全性显著提高解决了关键技术和设备难题成品质量标准提高市场需求持续快速增长

共识已经形成


第二部分


去除白细胞

采血

汇集去红细胞混合浓缩血小板混合浓缩血小板

汇集去红细胞去白细胞

单采血小板单采血小板离心

离心机

制作原理和程序类似

采血


使用仪器设备和耗材


临床效果基本相同且各有优势


外观浓度基本相同


误区一数量少

对手工分离血小板的认识误区

误区二纯度低

误区三输血反应多

误区五临床疗效差

误区四容易产生抗体

误区六欧美使用少


第三部分


血小板降复温模型仅仅提供了一个定性的概略图。该模型必须建立在了解血小板的生物学、低温生物学和热物理学基本特性，量化测定具体参数的基础上，才能得到理想的保存技术，达到有效保存血小板功能活性的目标。


22℃ 保存液体血小板保存期短，需要提前预

约，已不能满足日益增长的临床需要，严重供不应求。

深低温保存冰冻血小板，可使保存期延长至一

年，随需随取，可从根本上解决血小板供不应求的难

题。

我们对多年来 -80℃ 冰冻保存血小板在临床外

科、内科以及自体冰冻血小板在择期手术患者中的应

用进行了有效性观察和分析，解决了临床外科手术出

血、内科出血，尤其是急危重症血小板保障供应难题。


由海军医学和发展司令部和 richard warren 外科研究与教育基金两种基金资助的五家单位（哈佛大学医学院、马萨诸赛大学医学中心、波士顿海军血液研究中心、马萨诸赛退伍军人流行病学研究和信息中心等）共同研究结果：※ 在减少失血和输血方面冰冻血小板明显优于液体保存血小板※输注冰冻血小板的患者血清血栓素水平显著高于输注液体保存血小板的患者※这反映冰冻血小板止血功能优于液体血小板※说明当前血小板体外功能测定没有反映血小板体内功能实际情况

止血功能止血功能


解放军总医院临床外科应用研究证明，术中和术后伤口渗血严重或严重出血倾向的病人输注冰冻保存血小板后，出血时间明显缩短，伤口渗血得到有效控制。如腹膜后肿瘤、冠状动脉搭桥或瓣膜置换心脏手术，手术时间长，创面大，术中出血较多，外周血血小板计数术后比术前明显下降，术后伤口渗血严重。输注冰冻保存血小板后术中出血减少，手术可继续进行，术后在 ICU 病房伤口渗血可得到有效的控制。



我院冰冻保存血小板在临床外科的应用表明，冰冻保存血小板具有良好的止血效果。

典型病例：我院和外院有数例外科手术出血病人，通过其他各种血液成分应用，出血难以控制，手术不能继续进行，在输注我科的冰冻血小板后出血得到控制，手术继续进行。



解放军总医院血液内科应用研究证明，冰冻血小板对出血患者或者出血倾向的患者止血效果和纠正出血倾向的效果显著。但是对预防性输注患者提高患者血小板计数能力明显减弱，输注间隔时间明显缩短。



解放军总医院第一附属医院择期手术患者自体冰冻血小板的临床应用研究证明，术前采集一治疗剂量的自体血小板冰冻保存，术中输注后，手术视野出血显著减少，视野更干净，避免异体输血效果显著。



解放军总医院第一附属医院仅骨一科 2012 年使用冰冻自体血小板 257例。在收入增加 41% 的情况下， 2012 骨一科年总用血量同比减少了 70% 。 2013 年全院使用冰冻自体血小板 264例，在收入增加 24% 情况下，用血继续减少了 3% 。




典型病例：烧伤五科， 403576，陈爱坤，女， 39岁，神经纤维瘤。术前备自体血 2 次，共 8 单位红细胞和 2 治疗剂量血小板。术中切除肿瘤 54

公斤，未用异体血。耳鼻喉科， 407693，李雪红，女， 42岁，神经纤维瘤，从颅底沿脊柱内侧贯穿颈、胸和腹部。术前备自体血 2 次，共 8 单位红细胞和2 治疗剂量血小板。手术 8 小时，术中未用异体血。



中央台 10频道“走近科学”栏目 8 月 5 日进行了专题报道

《病案 407693》 < 现代输血技术创造奇迹 >


实验研究和临床实践证明， -80℃ 冰冻保

存的血小板具有良好的止血功能。冰冻保存血小

板与液体血小板比较，在减少非手术出血和减少

各种血液成分需求量方面，前者明显优于后者。



冰冻保存血小板回收率较高，通常＞ 95% 。

动物实验和临床应用研究表明，冰冻血小板输入体内后有部分血小板在较短的时间内在外周血中消失，体内存活率约为 50-60% 。

由于血小板输注临床止血功能，以消耗方式发挥功效。因此我们理解这是冰冻保存血小板止血功能增强的相关具体表现之一。

回收率和体内存活率回收率和体内存活率


冰冻保存血小板输血反应率较液体保存血

小板低，可能由于冰冻血小板在保存期间基本处

于休眠状态。

而 22℃ 液体保存血小板代谢活跃，能产

生许多活性物质，增加输血反应率。

输血反应率输血反应率


第四部分


在静脉出血或创面渗血时血小板的分泌释放功能和促

凝血活性是最关键的功能，而其他功能可能并不必要。

动脉出血时，由于动脉内血液剪切力很高，止血作用可

能还需要血小板的大多数功能以外的措施如压迫、结扎等

所以我们认为血小板保存技术或血小板替代品的研究，

应该主要根据第一种情况的需要来设计。


提供一个理想的磷脂表面，促进凝血过程中的许多步骤。

Ⅴa 、Ⅹ a 、Ⅷ a 、Ⅻ 、Ⅺ、 vWF受体

凝血酶原受体、纤维蛋白原受体结合而抑制抗凝血酶Ⅲ等对它们的灭活。某些血小板因子可以中和肝素、抑制纤溶

血小板释放多种血小板因子、凝血因子和促凝血活性物质发挥促凝血作用。

α

α

α

α

α

提供磷脂表面释放促凝血活性物质


◆ 能提供有促凝血活性的膜表面

◆ 能被充分激活并释放促凝血活性物质

血小板能够发挥促凝血功能重要前提血小板能够发挥促凝血功能重要前提


①

①

①

②

②

①

②

冰冻血小板

新鲜血小板

冰冻血小板产生新的亚群


冰冻血小板

新鲜血小板

结合凝血酶原复合物能力的比较

0

100

200

300

400

500

600

700

FPRP CryoFPRP

荧光

强度

结合凝血酶原复合物能力显著增强


冰冻血小板

新鲜血小板

0

50

100

150

200

250

300

350

FPRP CryoFPRP

CD42a密

度

膜表面 GPIb-IX-V密度增加

膜表面 GPIb-IX-V密度的比较


0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

200

FPRP Cryo-FPRP

Clot

ting

Tim

e (s

ec.)

促凝血活性显著增强冰冻血小板

新鲜血小板

促凝血活性的比较


研究发现，利用流式细胞仪将冰冻保存血小板分为明显不同的而数量基本相等的两个亚群： GPⅠb减少亚群和 GPⅠb 正常亚群。二者都对因子Ⅴ结合能力增强， CD62表达增高。 GPⅠb减少亚群体内存活期极短（约 5 分钟），拥有发挥立即止血功能倾向的特性。我们认为冰冻保存后新的血小板亚群产生是其促凝血功能活性增加，止血功能显著增强的重要分子基础。


GPⅡb/Ⅲa激活率显著降低

0

5

10

15

20

25

30

35

40

FPRP CryoFPRP

GPⅡ

b/Ⅲ

a阳

性率

冰冻血小板

液体血小板


有衰减

三个三个亚群亚群

αα

α

③③

α 颗粒储备亚群

α

α

CD62p

α

αα

①①

α

②②

血小板的生理性退化

α 颗粒释放亚群

α 颗粒缺陷亚群

有激活


无衰减

三个三个亚群亚群

αα

α

③③

α 颗粒储备亚群

α

CD62p

α

αα

①①

α

②②

深低温保存血小板

α 颗粒释放亚群

α 颗粒缺陷亚群

有激活


深低温保存血小板


一、不同于液体血小板的另一种新产品

二、促凝血活性显著提高，即刻止血功能显著增强

三、体内存活寿命显著缩短（ 50%即刻消失）

四、输血反应率低

五、稳定性更好

冰冻血小板

液体血小板


★ 可长期大量保存，节约和开发血小板资源★ 防止细菌繁殖★ 有利于病原体筛检★ 有利于血小板配型★ 可进行血小板自体输血★ 良好的止血功能，即刻止血功能明显优于液体血小板★ 随需随取，可以解决假期手术和急诊血小板供应难题，救治突发的出血患者的生命，切中临床血小板输注的真正目的

冰冻血小板


第五部分


止凝血功能参与炎症反应

粘附聚集促进凝血血块收缩

呼吸爆发

参与同种免疫

HLA抗原


血小板减少血小板减少症

严重外伤、复合伤、大手术、产妇大出血

持续大量失血（消化道、术后创面）

血小板功能障碍服用药物的手术患者、体外循环、低体温


提高血小板计数

止血

凝血功能改善

血小板输注临床疗效判断指标


冰冻血小板液体血小板促凝血活性显著增强逐渐减弱即刻止血功能显著增强逐渐减弱功能活性物质不衰减快速衰减

体内存活寿命显著缩短逐渐缩短提高计数能力下降 50% 逐渐下降

形态变化胞膜部分受损逐渐膨胀而崩解

冰冻血小板液体血小板


提高血小板计数

改善止凝血功能

有出血

无出血

血小板减少或者功能障碍

止血冰冻血小板

液体血小板

血小板制剂

有出血倾向冰冻血小板


外科手术、出血或出血倾向的患者首选冰冻血小板

（可能合并稀释性凝血病，血小板和凝血因子丢失过多同时存在）冰冻保存血小板促凝血活性明显提高即刻止血功能好同时含有同体积新鲜冰冻血浆全部的凝血因子检测到患者血清血栓素水平显著提高


没有出血的患者

首选液体血小板也可选择冰冻血小板

纠正出血倾向的能力强

而提高外周血血小板计数能力弱

输注间隔时间缩短

欧阳锡林13381361899

[email protected]

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谢谢！

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