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乙型肝炎临床免疫学和乙型肝炎临床免疫学和

相关免疫治疗的研究进展相关免疫治疗的研究进展

王福生解放军第三○二医院 生物治疗研究中心解放军传染病研究所（北京 100039 ）

2008 年 5 月 10 日 重庆

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慢性乙肝慢性乙肝

肝硬化肝硬化

22 ？？

11？？

HBVHBV感染感染

急性乙肝急性乙肝 急性肝衰竭急性肝衰竭

自限性肝炎自限性肝炎

隐匿性肝炎隐匿性肝炎

肝癌肝癌

33 ？？

44 ？？

免疫应答影响疾病的进展、转归和抗病毒疗效

完全应答完全应答

部分应答部分应答

无应答无应答

治疗

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病毒病毒

肝脏细胞肝脏细胞（包括遗传因素）（包括遗传因素）

免疫系统

“ 三驾马车”共同驱动

Wang FS. Hepatology Research 2007

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病毒特异性 CTL 损伤的机制尚未完全阐明

ALT leve

ls

高

低病毒特异性 CD8 T 细胞

急性乙肝

慢乙肝 ？激活的

部分衰竭

严重 衰竭

完全衰竭

克隆缺失

病毒载量

低

高

我们的研究证明：调节性 T 细胞、 DC 和 PD-1 抑制途径发挥重要的作用。

5

91.1%

95%

CD4+CD25high

CD4+CD25low

CD4+CD25 －

调节性 T 细胞鉴定 (Treg): CD4+CD25highFoxP3+

6

调节性 T 细胞的表型特征 (Treg): CD4+CD25highFoxP3+

7

a b

c d

慢乙肝外周血 Treg 数量与病毒复制水平呈正相关

Xu P, Fu JL et al. Journal of Immunology 2006 ， 177 ： 739-747

8

急性乙肝 (AHB) 时 Treg 动态变化有助于通过免疫应答机制清除病毒

Xu P, Fu JL et al. Journal of Immunology 2006 ， 177 ： 739-747

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随着慢性乙肝合并肝癌的疾病进展病人外周血 Treg 逐渐增加

Fu J, Xu D, et al. Gastroenterology 2007 ， 132 ： 2328-2339

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晚期肝癌病人的肝癌组织的 TIL 中 , 有大量的 Treg 浸润

Fu J, Xu D, et al. Gastroenterology 2007 ， 132 ： 2328-2339

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Treg 抑制 CD8 T 细胞增殖

Treg 抑制 CD8 T 细胞分泌 IFN-

Treg 抑制 CD8 T 细胞分泌 TNF-

Fu J, Xu D, et al. Gastroenterology 2007 ， 132 ： 2328-2339

呈现剂量效应关系

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肝癌病人外周血 Treg 增加可以预示患者生存期缩短

Fu J, Xu D, et al. Gastroenterology 2007 ， 132 ： 2328-2339

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PD-L1

CoR

Costimulatio

n

PD-1

IFN-Apoptosi

sCell c

ycle

arrest

- - + +

+ + +/- -

PD-1/PD-L1 抑制途径及作用模式

CD4 & CD8 T cellsAPC, T cellsHepatocytes

PD-1: Program cell death 1 ( 程序性死亡分子 )

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慢性病毒感染时 , 病毒特异性 CD8T 细胞高表达 PD-1 是导致其功能衰竭的机制之一

HIV • Day CL, et al. Nature 2006, 443:350.• Trautmann L, et al. Nat Med 2006, 12:1198.• Petrovas C, et al. J Exp Med 2006, 203:2281.• Zhang JY, et al. Blood 2007, 109:4671.• D’Souza M, et al. J Immunol, 2007, 179:1979• Sauce D, et al. AIDS, 2007, 21: 2005.

HCV• Urbani S, et al. J Virol 2006, 80:11398.• Radziewicz H, et al. J Virol 2006, 81: 2545• Penna A, et al. Hepatology 2007, 45:588.• Golden-Mason L, et al. J Virol 2007, 81:9249.• Jeong HY, et al. J Leukoc Biol, 2007• Karsprowicz V, et al. J Virol, 2008

Sharpe AH, et al. Nat Rev Immunol, 2007

Su L. Blood, 2007

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在慢性乙肝时， PD-1/PD-L1 抑制性途径参与介导 CD8 T 细胞的功能衰竭

Blocking Restoring T-cellfunction

Chen L, et al. Journal of Immunology 2007, 178, 6634-6641

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PD-1 may induce the exhaustion of HBV-specific CD8 T cells in chronic hepatitis B of humans

Chronic Chronic HepatitisHepatitis

CHB+LCCHB+LC

22 ？？

11？？

HBVHBVInfectionInfection

Acute Acute HepatitisHepatitis RecoveryRecovery

CHB+HCCCHB+HCC

33 ？？

44 ？？

PD-1 mediates T-cell dysfunction!

Peng G, et al. Mol Immunol, 2008, 45: 963.

Chen L, et al. J Immunol, 2007, 178:6634

Boni C, et al. J Virol 2007, 81: 4215VirlVirol

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Dynamic PD-1 expression is closely correlated with the outcome of acute self-limited hepatitis B in humans.

Zhang Z,--Wang FS.

Gastroenterology. 2008

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PD-1 dynamic balance the antiviral specific immunity and liver damage during the acute resolved HBV infection in humans.

Chronic Chronic HepatitisHepatitis

CHB+LCCHB+LC

22 ？？

11？？

HBVHBVInfectionInfection

Acute Acute HepatitisHepatitis RecoveryRecovery

CHB+HCCCHB+HCC

33 ？？

44 ？？

Zhang Z, ---- Wang FS. Gastroenterology. 2008 In press

Boettler T, et al. J Virol

2006, 80: 3532

PD-1 is indeed involved in the outcome of AHB!!!

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主 要 结 论1. 慢性乙肝病人体内增加的调节性 T 细胞与病毒复制水平曾正相

关；乙肝合并肝癌病人体内显著增加的 Treg 严重抑制 CD8 T 细胞的应答，而且增加的程度与肝癌病人生存期呈负相关。

2. 慢性乙肝病人体内 DC 表达高水平的 PD-L1, 这是导致 HBV 特异性 CD8 T 细胞功能低下的原因之一。

3. 在急性自限性乙肝病人体内， HBV 特异性 CD8 T 细胞表达 PD-1 的方式和动态变化影响疾病的转归和预后。

Gastroenterology 2007, 2008; J Hepatol 2007, 2008

J Gastroenterol Hepatol 2005 ; J Immunol 2006a, 2006b, 2007

Clin Immunol 2005, 2007a, 2007b; Hepatol Res 2007

Clin Exp Immunol 2005, 2007a, 2007b; J Clinical Immunology 2004

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慢性乙肝

病毒完全抑制、肝功正常

HBeAg 转换

HBsAg 转换

无应答

部分应答

完全应答

疗效评价 Immune response

unaltered no dataImmunological parameters

blood liver

unaltered no dataImmunologicalparameters

CTL pDC,mDC NK

no data

No data

抗病毒治疗（ NA 、 IFN ）

持续应答

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慢性乙肝慢性乙肝

肝硬化肝硬化

22 ？？

11？？

HBVHBV感染感染

急性乙肝急性乙肝 急性肝衰竭急性肝衰竭

自限性肝炎自限性肝炎

隐匿性肝炎隐匿性肝炎

肝癌肝癌

33 ？？

44 ？？

慢性乙肝的重要临床特征：免疫应答功能缺陷

固有免疫固有免疫

特异性免疫特异性免疫

肝脏免疫耐受肝脏免疫耐受

免疫损伤

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HBeAg conversionHBeAg conversion

HBsAg conversion

Full viral suppression

Active viral replication

“ 楼梯概念”——药物抗病毒和免疫调节的联合治疗