الحيوية المضادات استخدامالدقيقة الكائنات من المنتجة

الصناعه في465 MIC

إلى 1يضاف 1. التربة من الفسيولوجي )100جرام الماء من NaClمل8.5 g/l. معلق( لعمل

سرعة 2. على هزاز حضان في المعلق أنابيب في 200تحضين لفةحرارة 30لمدة( rpmالدقيقة ) درجة وعند ْ م.28دقيقة

لدينا 3. يتكون حتى لفترة تترك الحضان من األنابيب إخراج بعدبعمل نقوم ثم ومن رائق و راسب من 5طبقتين تبدأ 1-10تخفيفات

. 5-10إلى الفسيولوجي الماء باستخدام وذلك

جهاز 4. على المخففة األنابيب وضع المحتويات Vortexيتم لخلط. سرعة أعلى على جيدا

اآلجار على الزراعه وظروف األكتينوميسيتات عزل

اآلجار على األكتينوميسيتات نمو يوضح شكل

سحب 5. من 0.1يتم التخفيفات كل من آجار 5-10إلى 2-10مل بيئة تلقيح ويتماألكتينومايسيتات ) الكمية( actinomycetes isolation agarعزل ونفس

النشا ) كازين بيئة بها (.starch caseinنلقح

الحيوي 6. المضاد إضافة تمت مضاد riphampicin 2.5 mg/mlوقد وamphotericin B 75mg/ml. التوالي على الفطريات و البكتيريا نمو لتثبيط

حرارة 7. درجة عند األطباق تحضين حرارة 28يتم درجة و ْ م.37ْ م

بعد 8. النتيجة قراءة .96و 72و 48تتم ساعة

على 9. حصولنا إلى يؤدي مما النشا كازين آجار بيئة تلقيح إعادة يrفضل. األكتينوميسيتات بكتيريا مستعمرات

اآلجار على الزراعه وظروف األكتينوميسيتات عزل

: جرام مستعمرات صبغ من معتاد بكتيري غشاء عمل يتمومن جرام صبغ خطوات بإتباع وصبغها األكتينوميسيتات

. الضوئي الميكروسكوب تحت فحصها ثمأنابيب في عليها حصلنا التي المستعمرات حفظ يتم

حرارة درجة عند عليها 4مائلة وللحفاظ شهرين لمدة ْ م،. باستمرار بتجديدها القيام يمكننا اطول لمدة

وظروف األكتينوميسيتات عزلاآلجار على الزراعه

االلكتروني بالمجهر األكتينوميسيتات جراثيم

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

لفطر بكتيرية ساللة تضادللنبات ممرض

البكتيري النمو خطللمادة المفرز المضاد

الطبق في المضادةيوضح الكونترول طبق

الفطري النمو طبيعة

الفطري النمو

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

لبكتيريا الحيوي التضاد Paenibacillus alvei strain K-165تأثيرفطر القطن Thielaviopsis basicolaعلى لنبات ممرض

رط

فضد

يارتي

بك

يوضح الكونترول طبقالفطري النمو طبيعة

البكتيري النمو خطللمادة المفرز المضاد

الطبق في المضادة

الفطري النمو

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

بكتيريا فطر Pseudomonasتأثير على بكتيريا من Pesudomonas fluorescensساللةلفطر Pyricularia oryzaeمضادة

رط

فضد

يارتي

بك

يوضح الكونترول طبقالفطري النمو طبيعة

البكتيري النمو خطللمادة المفرز المضاد

الطبق في المضادة

الفطري النمو

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

لفطر مضادة Aspergillus flavusبكتيريا

رط

فضد

يارتي

بكالفطري النمو

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

Paenibacillus polymyxa strain SG-6بكتيريا فطر لنمو Penicillium digitatumمضاده

رط

فضد

يارتي

بك

للمقارنه الكونترول

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

الخميره فطر من سالالت Metschnikowiaتأثيرpulcherrima فطر .Alternaria spعلى

رط

فضد

ةرمي

خال

رط

ف

2تكرار 1تكرار

المضاده للخميرة النمو خط

المثبط الفطري النمو

األكتينوميسيتات قدرة الختبار طريقتين هناك : أوالهما الحيوية، المضادات إنتاج على

: conventional spotطريقة وثانيهما .single line streakطريقة

من المنتجة الحيوية المضادات أثرالبكتيريا على المعزولة األكتينوميسيتات

الممرضة:

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

:conventional spotطريقة

في 1. بيضاوية هيئة على النشا كازين بيئة على األكتينوميسيتات تلقيح يتمحرارة درجة عند الطبق يحضن ثم ومن بتري طبق ْ م 28طرف

. أيام ستة لمدةطريق 2. عن للكلورفورم الطبق تعريض يتم التحضين فترة انقضاء بعد

النامي بتري طبق قلب ثم من و بتري طبق غطاء في الكلورفورم وضعلمدة الغطاء على أكتينوميسيتات .40عليه دقيقة

_ضاف 3. قبل% 0.6ي الممرضة بالبكتيريا الملقحة المغذي اآلجار بيئة من. األكتينوميسيتات عليها النامية النشا كازين بيئة على تتصلب أن

لمدة الطبق حرارة 24تحضين درجة عند ْ م.37ساعة

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

:single line streakطريقة

خط 1. هيئة على األكتينوميسيتات تلقيح يتم

لمدة 2. وتحضينها النشا كازين بيئة حرارة 4على درجة عند ْ م 28أيام. الحيوية المضادات إلنتاج فرصة إلعطائها

األكتينوميسيتات 3. مع عمودي بشكل الطبق تلقيح يتم التحضين فترة بعدلمدة حرارة 24وتحضن درجة عند ْ م.37ساعة

أمل الغامدي - رؤى القفيدي - هيا الدوسري

) مثال ) الحيوية المضادات أنواع تختلفوجه

االختالفالبنسلينات األمينوجليكوسيد،

األمينوسيكليتول، ماكرولويد،

الفيوران، كيتولونات،الببتيد عديدات

لينكوساميد، الفيومورات، الباسيتراسين

تتراسيكلين، السلفوناميد

الكائن المنتج

فطريات األكتينوميسيتات موجبة) بكتيريا

الجرام(

بكتيريا بكتيريا

الكائن الحساس

البكتيريا s غالبااجرام الموجبة

السالبة البكتيريابها تأثرا أكثر لجرام

الموجبة البكتيرياوالميكوبالزما لجرام

البكتيريا على يؤثىوالسالبة الموجبه

والميكوبالزما لجرام

طريقة التأثير

الجدار تصنيع البروتين تصنيعمن mRNAوالترجمه

األنواع الشائعه

؟ ؟ ؟ ؟

لحسن شكرا�االستماع