Савичева Алевтина Михайловна

Савичева Савичева Алевтина Алевтина

МихайловнаМихайловна

Научно – исследовательский Научно – исследовательский институт акушерства и гинекологии институт акушерства и гинекологии

им. Д.О. Отта РАМНим. Д.О. Отта РАМНСанкт-ПетербургСанкт-Петербург

Целесообразность стандартизации лабораторных технологий в

диагностике ИППП

Вопросы для врача - Вопросы для врача - клиницистаклинициста

Можете ли Вы доверять Можете ли Вы доверять результату анализа, полученному результату анализа, полученному в Вашей лаборатории?в Вашей лаборатории?

Получите ли Вы тот же результат, Получите ли Вы тот же результат, если отправите свою пробу в если отправите свою пробу в другую лабораторию? другую лабораторию?

Савичева А.М., 2008Савичева А.М., 2008

Система качества лабораторной Система качества лабораторной диагностикидиагностики

терминологиятерминология

1.1. Обеспечение качестваОбеспечение качества – полная процедура, – полная процедура, гарантирующая, что заключительный результат, гарантирующая, что заключительный результат, сообщаемый лабораторией, точен настолько, насколько это сообщаемый лабораторией, точен настолько, насколько это возможно. Включает в себя документацию, контроль возможно. Включает в себя документацию, контроль образцов, образцов, описание стандартных процедур (технологии),описание стандартных процедур (технологии), использование самых надежных методов и верификация использование самых надежных методов и верификация заключений.заключений.

2.2. Контроль качестваКонтроль качества – это те меры, которые необходимы во – это те меры, которые необходимы во время каждого исследования для обеспечения должной его время каждого исследования для обеспечения должной его работы. Включает в себя правильные температурные работы. Включает в себя правильные температурные условия, контроли в составе набора и т.п. Таким образом, условия, контроли в составе набора и т.п. Таким образом, контроль качества указывает, что исследование выполнено контроль качества указывает, что исследование выполнено правильно и получены достоверные результаты. правильно и получены достоверные результаты.

3.3. Исследование качестваИсследование качества – средство определения качества – средство определения качества результатов. Обычно это система внешней оценки качества результатов. Обычно это система внешней оценки качества лабораторий. лабораторий.

4.4. Управление качествомУправление качеством – система менеджмента качества в – система менеджмента качества в соответствии с международным стандартом соответствии с международным стандартом ISO 15189ISO 15189

Контроль качества исследований должен быть Контроль качества исследований должен быть

включен в государственную программувключен в государственную программу Первичные задачиПервичные задачи

оценить качество лабораторной работы на оценить качество лабораторной работы на общенациональной основеобщенациональной основе

предоставить гарантию потребителям (врачам и предоставить гарантию потребителям (врачам и пациентам), что лабораторные результаты надежныпациентам), что лабораторные результаты надежны

Вторичные задачиВторичные задачи идентифицировать общие ошибки и рекомендовать идентифицировать общие ошибки и рекомендовать

корректирующие мерыкорректирующие меры поощрять лаборатории, использующие поощрять лаборатории, использующие

стандартизированные процедуры, адекватные тесты и стандартизированные процедуры, адекватные тесты и высококачественные реактивывысококачественные реактивы

поощрять выполнение проверки качества и мер поощрять выполнение проверки качества и мер контроля в лабораторияхконтроля в лабораториях

стимулировать информационный обмен и связь между стимулировать информационный обмен и связь между лабораториями на национальном и/или лабораториями на национальном и/или международном уровнемеждународном уровне

предоставлять обновленную информацию о предоставлять обновленную информацию о диагностикедиагностике

АктуальностьАктуальность

Отсутствие общепринятых стандартов назначения и Отсутствие общепринятых стандартов назначения и проведения лабораторных исследований в рамках проведения лабораторных исследований в рамках отдельных нозологических форм и на различных этапах отдельных нозологических форм и на различных этапах оказания медицинской помощи приводит к оказания медицинской помощи приводит к повсеместному повсеместному снижению качества выполняемых снижению качества выполняемых исследований, их многократному дублированию, исследований, их многократному дублированию, выполнению излишних, не имеющих достаточного выполнению излишних, не имеющих достаточного клинического обоснования исследованийклинического обоснования исследований..

Активные исследования и ряд открытий в области Активные исследования и ряд открытий в области медицины за последние десятилетия пополнили медицины за последние десятилетия пополнили лабораторную диагностику большим количеством лабораторную диагностику большим количеством новых методикновых методик. .

Спектр лабораторных исследованийСпектр лабораторных исследований значительно значительно расширился, предоставив врачу-клиницисту огромный расширился, предоставив врачу-клиницисту огромный выбор диагностических методик. выбор диагностических методик.

Интенсификация работы в лаборатории поставила Интенсификация работы в лаборатории поставила перед специалистами задачу усовершенствования перед специалистами задачу усовершенствования мероприятий по контролю качества лабораторных мероприятий по контролю качества лабораторных исследований.исследований.

преаналитика

68,2%

аналитика13,3%

постаналитика

18,5%

M.Plebani, P.Carraro; Clin.Chem. (1997) 43:8, 1348-1351

Структура ошибокСтруктура ошибок

Преаналитический этап лабораторного Преаналитический этап лабораторного исследованияисследования

Создание стандарта, регламентирующего Создание стандарта, регламентирующего организацию и контроль состояния организацию и контроль состояния преаналитического этапа лабораторного преаналитического этапа лабораторного исследованияисследования

назначение врачом лабораторного анализаназначение врачом лабораторного анализа получение клинического материалаполучение клинического материала транспортировкатранспортировка поступление пробы в лабораторию поступление пробы в лабораторию

До создания такого документа в каждом лечебно-До создания такого документа в каждом лечебно-профилактическом учреждении необходимо написать профилактическом учреждении необходимо написать протокол преаналитического этапа. протокол преаналитического этапа.

Врач клинической лабораторной диагностики отвечает за Врач клинической лабораторной диагностики отвечает за весь цикл лабораторного анализа, в том числе и за весь цикл лабораторного анализа, в том числе и за преаналитический этаппреаналитический этап

Факторы влияющие на качество Факторы влияющие на качество микроскопической диагностикимикроскопической диагностики

Получение образцов. Варьирующее качество: (данные, Получение образцов. Варьирующее качество: (данные, полученные во время обучения микроскопии):полученные во время обучения микроскопии): Толстые, поцарапанные стекла, старые микроскопы Толстые, поцарапанные стекла, старые микроскопы

(лаборатории)(лаборатории) В 30% образцов отсутствовали эпителиальные клетки;В 30% образцов отсутствовали эпителиальные клетки; В 65% случаев мазки слишком толстые (ложечка В 65% случаев мазки слишком толстые (ложечка

Фолькмана)Фолькмана) В 75% случаев материал из женской уретры не В 75% случаев материал из женской уретры не

обнаружен (реакции лаборатории не отмечено)обнаружен (реакции лаборатории не отмечено) В 25% при постановке диагноза цервицита, не В 25% при постановке диагноза цервицита, не

соблюдались основные критериисоблюдались основные критерии В 30% случаев диагноз цервицита поставлен на В 30% случаев диагноз цервицита поставлен на

основании просмотра вагинального материалаосновании просмотра вагинального материала

Domeika M.Domeika M., 200, 20077

Факторы влияющие на качество Факторы влияющие на качество диагностикидиагностики

Ведение пациентовВедение пациентовНа какие инфекции исследовать? На На какие инфекции исследовать? На

все 25?все 25?Какие тесты использовать? Всегда ли Какие тесты использовать? Всегда ли

ПЦР лучше? Или просто хорошо ПЦР лучше? Или просто хорошо звучит для пациента?звучит для пациента?

Лечить или не лечить партнера?Лечить или не лечить партнера?

Domeika M.Domeika M., 200, 20077

Аналитический этапАналитический этап

Порядок проведения Порядок проведения аналитического этапааналитического этапа подробно подробно изложен в Приложении №1 к изложен в Приложении №1 к Приказу МЗ РФ № 45 “Положение Приказу МЗ РФ № 45 “Положение об организации управления об организации управления качеством клинических качеством клинических лабораторных исследований в лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения”.учреждениях здравоохранения”.

Что такое «контроль качества» лабораторной Что такое «контроль качества» лабораторной

диагностикидиагностики Контроль качестваКонтроль качества – это весь процесс, – это весь процесс,

обеспечивающий выдачу качественного обеспечивающий выдачу качественного лабораторного продукта, т.е. результата лабораторного продукта, т.е. результата лабораторного исследованиялабораторного исследования

Контроль качества призван минимизировать Контроль качества призван минимизировать любую вариабельность в результатах любую вариабельность в результатах исследований, обусловленную различиями в:исследований, обусловленную различиями в: Квалификации исследователейКвалификации исследователей Технологии получения клинического материала Технологии получения клинического материала Качестве реагентов и питательных средКачестве реагентов и питательных сред Используемой аппаратуры (своевременная Используемой аппаратуры (своевременная

поверка, техобслуживание и т.д.)поверка, техобслуживание и т.д.) Методологии исследованияМетодологии исследования

Система обеспечения контроля Система обеспечения контроля качества лабораторной качества лабораторной

диагностикидиагностикиКонтроль качества лабораторной диагностики

Оценка качества диагностикиОбеспечение качества диагностики

Валидация тестов

(оценка нового теста путем сравнения с референс тестом)

Внутренний контроль качества

(использование отрицательного

и положительного

контролей реакции и др.)

Систематический мониторинг

работы оборудования

Внутренний контроль качества

(периодическое повторное

тестирование зашифрованных

клинических проб и др.)

Внешний контроль качества (тестирование контрольных панелей,

выпускаемых национальными и международными

референс организациями)

Источники ошибок при Источники ошибок при микробиологических исследованияхмикробиологических исследованиях

Методы лабораторной диагностики ИПППМетоды лабораторной диагностики ИППП

МикроскопичесМикроскопические кие

КультуральныеКультуральные СерологическиСерологическиее

МолекулярныеМолекулярные

Неправильное взятие и Неправильное взятие и транспортировка транспортировка материаламатериала

×× ×× ×× ××

Нарушение методики Нарушение методики тестированиятестирования

×× ×× ×× ××

Низкая квалификация Низкая квалификация персоналаперсонала

×× ×× ×× ××

Использование Использование некачественных и/или некачественных и/или нестандартизованных нестандартизованных сред, клеточных линий и сред, клеточных линий и красителейкрасителей

×× ××

Нарушение условий Нарушение условий приготовления и приготовления и хранения питательных хранения питательных сред и красителейсред и красителей

×× ××

Нестандартизованная Нестандартизованная технология технология приготовления приготовления препаратовпрепаратов

×× ××

Субъективизм в оценке Субъективизм в оценке результатоврезультатов

×× ××

КонтаминацияКонтаминация ××

Микроскопические методыМикроскопические методы

Процедура окрашиванияПроцедура окрашиванияТехнология работы с микроскопомТехнология работы с микроскопомПорядок проведения Порядок проведения

микроскопического исследованиямикроскопического исследованияФормулировка заключенияФормулировка заключенияВозможные ошибкиВозможные ошибки

Микроскопическое исследование Микроскопическое исследование материалов из цервикального канала и материалов из цервикального канала и

уретры, окрашенных МСуретры, окрашенных МС

Определение числа полиморфно-ядерных Определение числа полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) при просмотре лейкоцитов (ПМЯЛ) при просмотре > 5 > 5 полей полей

зрения при увеличении микроскопа х1000зрения при увеличении микроскопа х1000

Уретрит женщины:Уретрит женщины: ≥ 10 ПМЯЛ в ≥ 10 ПМЯЛ в пп//зрениязрения

Цервицит: Цервицит: ≥ 10 ПМЯЛ в поле ≥ 10 ПМЯЛ в поле зрениязрения

+ наличие слизисто-+ наличие слизисто-гнойных гнойных выделений из выделений из цервикального каналацервикального канала

Уретрит мужчины:Уретрит мужчины: ≥ 4 ПМЯЛ в ≥ 4 ПМЯЛ в пп//зрениязрения

Савичева А.М., 200Савичева А.М., 20088

Результат исследования:

ВЛАГАЛИЩЕВЛАГАЛИЩЕ

Соотношение лейкоцитов (ПМЯЛ) к Соотношение лейкоцитов (ПМЯЛ) к клеткам плоского эпителия (ЭК)клеткам плоского эпителия (ЭК)

□ □ ПМЯЛ < ЭК □ ПМЯЛ >ЭК ПМЯЛ < ЭК □ ПМЯЛ >ЭК ПМЯЛ : ЭК равно ___:1ПМЯЛ : ЭК равно ___:1

Лактобациллы и другие Лактобациллы и другие микроорганизмымикроорганизмы

□ □ только лактобациллы только лактобациллы □ □ лактобациллы превалируют лактобациллы превалируют □ □ лактобациллы в меньшинствелактобациллы в меньшинстве□ □ преобладают др. микроорганизмыпреобладают др. микроорганизмы□ □ микроорганизмов нетмикроорганизмов нет

Ключевые клеткиКлючевые клетки □ □ обнаружены □ не обнаруженыобнаружены □ не обнаружены

Дрожжеподобные грибыДрожжеподобные грибы □ □ дрож. клетки □ псевдомицелийдрож. клетки □ псевдомицелий□ □ не обнаруженыне обнаружены

ТрихомонадыТрихомонады □ □ обнаружены □ не обнаруженыобнаружены □ не обнаружены

ЦЕРВИКАЛЬНЫЙ КАНАЛЦЕРВИКАЛЬНЫЙ КАНАЛ

Клетки цилиндрического эпителияКлетки цилиндрического эпителия □ □ есть □ нетесть □ нет

Клетки плоского эпителия Клетки плоского эпителия (влагалища)(влагалища)

□ □ есть □ нетесть □ нет

Лейкоциты (ПМЯЛ) Лейкоциты (ПМЯЛ) СлизьСлизь

□ □ < 10 □10-20 □ >20< 10 □10-20 □ >20□ □ есть □ нетесть □ нет

Внутриклеточные и внеклеточные Внутриклеточные и внеклеточные Гр(-) диплококкиГр(-) диплококки

□ □ обнаруженыобнаружены□ □ не обнаружены не обнаружены

УРЕТРАУРЕТРА

Лейкоциты (ПМЯЛ)Лейкоциты (ПМЯЛ) □ □ < 10 □ >10 < 10 □ >10

МикроорганизмыМикроорганизмы □ □ есть □ нет есть □ нет


□ □ обнаруженыобнаружены□ □ не обнаруженыне обнаружены

ПРЯМАЯ КИШКА ПРЯМАЯ КИШКА


□ □ обнаружены обнаружены □ □ не обнаруженыне обнаружены

Культуральные методыКультуральные методы

Технология приготовления Технология приготовления питательных средпитательных сред

Технология первичного выделения Технология первичного выделения микроорганизма из клинического микроорганизма из клинического материаламатериала

Процедура идентификацииПроцедура идентификацииКонтроль качестваКонтроль качестваФормулировка заключенияФормулировка заключения

Количество положительных проб при исследовании на N. gonorrhoeae разными

методамиКультураКультура МикроскопияМикроскопия ПЦР*ПЦР* NASBANASBA

КомплегоКомплегонн

VCA3VCA3

Жен. Жен. ((n=286)n=286)

Ц.кЦ.к 44 44 44 1313 1212

Ур.Ур. 33 22 33 99 88

Муж.Муж.(n=48)(n=48)

Ур.Ур. 11 22 33 44 44

* - все результаты подтверждены секвенированием фрагмента гена 16S рРНК

Молекулярно-биологические Молекулярно-биологические методыметоды

Существуют инструкции Существуют инструкции производителейпроизводителей

Всегда ли известны параметры Всегда ли известны параметры чувствительности и чувствительности и специфичности?специфичности?

Всегда ли известны пределы Всегда ли известны пределы детекции?детекции?

Валидация тестовВалидация тестов

Любой коммерческий или Любой коммерческий или “in-house” “in-house” метод, а также любая модификация метод, а также любая модификация метода, перед внедрением в метода, перед внедрением в практику должны быть практику должны быть валидированывалидированы

Цель валидации – убедиться, что Цель валидации – убедиться, что новый метод/модификация новый метод/модификация работают, по меньшей мере, не работают, по меньшей мере, не хуже, чем уже существующий метод хуже, чем уже существующий метод

Параметры тестов, оцениваемых в ходе Параметры тестов, оцениваемых в ходе валидациивалидации

ЧувствительностьЧувствительность - - способность метода правильно способность метода правильно идентифицировать пробы, содержащие возбудителя идентифицировать пробы, содержащие возбудителя (положительные референс методом)(положительные референс методом)СпецифичностьСпецифичность - способность метода правильно - способность метода правильно идентифицировать пробы, не содержащие возбудителя идентифицировать пробы, не содержащие возбудителя (отрицательные референс методом)(отрицательные референс методом)

Прогностическая значимость отрицательных Прогностическая значимость отрицательных результатоврезультатов - - вероятность того, что пациент с вероятность того, что пациент с отрицательным результатом теста действительно не отрицательным результатом теста действительно не инфицированинфицирован

Прогностическая значимость положительных Прогностическая значимость положительных результатоврезультатов - - вероятность того, что пациент с вероятность того, что пациент с положительным результатом теста действительно положительным результатом теста действительно инфицирован инфицирован

Предел детекцииПредел детекции – – наименьшее количество возбудителя, наименьшее количество возбудителя, которое выявляется данным методомкоторое выявляется данным методом

ВоспроизводимостьВоспроизводимость - - способность способность получать одинаковые получать одинаковые результаты вне зависимости от лаборатории, оператора, результаты вне зависимости от лаборатории, оператора, серии среды/теста и т.д. серии среды/теста и т.д.

Референс-лабораторииРеференс-лаборатории

ССhlamydia trachomatishlamydia trachomatis - - ШвецияШвеция Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae - - НорвегияНорвегия Mycoplasma genitaliumMycoplasma genitalium - - Дания Дания Trichomonas vaginalisTrichomonas vaginalis - - СШАСША

Референс-тестыРеференс-тесты

C. trachomatisC. trachomatis: : Roche COBAS Roche COBAS Amplicor PCRAmplicor PCR

N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae: real-time : real-time porAporA PCR PCR ((Hjelmevoll et al, 2006)Hjelmevoll et al, 2006)

M. genitaliumM. genitalium: real-time MgPa PCR : real-time MgPa PCR (Jensen et al, 2004)(Jensen et al, 2004)

Несовпадающие результаты тестов на Несовпадающие результаты тестов на C. trachomatisC. trachomatis

((n=15n=15))ДНК-технология

Литех ЦНИИ Эпидемиологии Roche Число проб

ПЦР э/ф

ПЦР rt

ПЦР э/ф

ПЦР э/ф

ПЦР rt

NASBA

Жен. Цер. + + - - - + + 1

+ + - - - - + 1

+ + + - - - - 1

- - - - - - + 3

Ваг. + + - - - + + 2

+ + + - - - - 1

- - - - - - + 3

Муж. Ур. - - + + + + + 1

- - - - - + + 1

Моча + + - - - - - 1

Чувствительность тестов на Чувствительность тестов на C. trachomatis C. trachomatis (%)(%)

ДНК-технология

Литех ЦНИИ Эпидемиологии

NASBAПЦРэ/ф

ПЦРR-t

ПЦР э/ф

ПЦР э/ф

ПЦР R-t

Жен. Цер. 92,3 92,3 87,2 87,2 87,2 89,7

Вагина 91,7 91,7 86,1 86,1 86,1 91,7

Муж. Уретра 92,9 92,9 100 100 100 100

Моча 92,3 92,3 92,3 92,3 92,3 100

Специфичность тестов на Специфичность тестов на C. trachomatisC. trachomatis (%)(%)



NASBAПЦРэ/ф

ПЦРR-t

ПЦР э/ф

ПЦР э/ф

ПЦР R-t

Жен. Ц.к. 99,6 99,6 99,6 100 100 100

Вагина 99,6 99,6 99,6 100 100 100

Муж. Уретра 99,1 100 100 100 100 100

Моча 99,1 100 100 100 100 100

Предел детекции ПЦР тестов на Предел детекции ПЦР тестов на C. trachomatisC. trachomatis

ДНК-ДНК-технологиятехнология

ЛитехЛитех ЦНИИ ЦНИИ ЭпидемиологЭпидемиолог

ииии

ПЦРПЦР

э/фэ/фПЦРПЦР

R-tR-tПЦР ПЦР э/фэ/ф

ПЦР ПЦР э/фэ/ф

ПЦР ПЦР

R-tR-t

Предел Предел детекции* детекции* (копий на (копий на реакцию)реакцию)

2-42-4 4-64-6 4-64-6 2-42-4 2-42-4

* определяли путем последовательных разведений коммерческого количественного стандарта (VIRCELL)

Несовпадающие результаты тестов на Несовпадающие результаты тестов на N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae

((n=3n=3))



NASBA

Real-time porA PCR

Число проб

ПЦРэ/ф

ПЦРR-t

ПЦР э/ф

ПЦР э/ф

ПЦР R-t

Жен. Цер. + + - + + + + 1

Моча + + - + + + + 1

- - - + + + + 1

Чувствительность тестов на Чувствительность тестов на N. gonorrhoeae N. gonorrhoeae (%)(%)



NASBAПЦРэ/ф

ПЦРR-t

ПЦР э/ф

ПЦР э/ф

ПЦР R-t

Жен. Цер. 100 100 83,3 100 100 100

Моча 83,3 83,3 66,7 100 100 100

Муж. Уретра 100 100 100 100 100 100

Моча 100 100 100 100 100 100

Специфичность тестов на Специфичность тестов на N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae (%)(%)



NASBAПЦРэ/ф

ПЦРR-t

ПЦР э/ф

ПЦР э/ф

ПЦР R-t

Жен. Ц.к. 100 100 100 100 100 100

Вагина 100 100 100 100 100 100

Муж. Уретра 100 100 100 100 100 100

Моча 100 100 100 100 100 100

Предел детекции ПЦР тестов на Предел детекции ПЦР тестов на N. gonorrhoeaeN. gonorrhoeae

ДНК-ДНК-технологиятехнология

ЛитехЛитех ЦНИИ ЦНИИ ЭпидемиологЭпидемиолог

ииии

ПЦРПЦР

э/фэ/фПЦРПЦР

R-tR-tПЦР ПЦР э/фэ/ф

ПЦР ПЦР э/фэ/ф

ПЦР ПЦР

R-tR-t

Предел Предел детекции* детекции* (копий на (копий на реакцию)реакцию)

1-31-3 1-31-3 3-63-6 1-31-3 11

* определяли путем последовательных разведений коммерческого количественного стандарта (Advanced Biotechnologies)

Несовпадающие результаты тестирования проб от женщин (n=7)

+–+/––––––Моча

–––––––Вагина383

++++–+–Моча

++++–++Вагина327

++/––––––Моча

–––––––Вагина280

++++–+–Моча

–––––––Вагина167

––+––––Моча

++++–+–Вагина129

++++–––Моча

+++++++Вагина95

++/–++–+–Моча

+++++++Вагина86

321ПЦР-рвПЦР-эфПЦР-эфПЦР-рвПЦР-эф

Референс тестыЦНИИ эпидемиологииЛитехДНК-технология

ПробаПациент

Несовпадающие результаты тестирования проб от мужчин (n=9)

––+/––––––Моча

++–––––Уретра402

+++++–+–Моча

–––––––Уретра428

++++–+–Моча

+–+/–+++++Уретра450

+–+/––––––Моча

–––––––Уретра350

+++++++Моча

–––––––Уретра279

–––––––Моча

+++++++Уретра274

––+/–+––––Моча

+++++++Уретра248

––+/–+––––Моча

––+––+–Уретра66

–––––––Моча

+–+/––––––Уретра34

321ПЦР-рвПЦР-эфПЦР-эфПЦР-рвПЦР-эф

Референс тестыЦНИИ эпидемиологииЛитехДНК-технологияПробаПациент

Состав контрольной панели Состав контрольной панели

-1M. buccale

-1M. penetrans

-1M. gallisepticum

-1M. orale

-1M. faucium

-1M. amphoriforme

-1M. lipophilum

-1M. primatum

-1M. pirum

-1M. arginini

-1M. alvi

-1M. fermentans

-1M. hominis

-5M. pneumoniae

14010M. genitalium M2321




68M. genitalium M30

1 10M. genitalium G37

Концентрация ДНК в конечном разведении штаммов M. genitalium Количество образцовМикроорганизм

Аналитические характеристики ПЦР тестов, определенные с помощью контрольной панели

1-55-1550-1001-55-50Предел детекции

(копий на реакцию)

10010010088,9

(2 случая

M. pneumoniae)

100Специфичность, %

10098,3

(57/58)

79,3

(46/58)

10089,7

(52/58)

Чувствительность, %

ПЦР-рвПЦР-эфПЦР-эфПЦР-рвПЦР-эф

ЦНИИ Эпидемиологии

ЛитехДНК-технология

Сравнение тестов на Сравнение тестов на T. vaginalisT. vaginalis::несовпадающие результатынесовпадающие результаты


Литех ЦНИИ Эпидемиологии Число

пробПЦРЭ/ф

ПЦРR-t

ПЦР Э/ф

ПЦР Э/ф

ПЦР R-t

Жен. Вагина + + - + + 1

Число случаев ингибированияЧисло случаев ингибирования

Методика выделения нукл. кислот

Тест Женщины Мужчины

Ц. к. Ваг. Ур. Моча

ДНК-экспресс (неокраш.)

ДНК-технология ПЦР э/ф 8 8 7 2

ДНК-технология ПЦР r-t 1 2 2 0

Литех э/ф 8 8 7 2

ДНК-сорб А ЦНИИ эпид. ПЦР э/ф 0 2 0 0

ЦНИИ эпид. ПЦР r-t 0 2 0 0

NucliSens Isolation Reagents

NASBA 1 1 0 0

Постаналитический этапПостаналитический этап формулирование заключения по результатам формулирование заключения по результатам

лабораторного исследованиялабораторного исследования доставка результатов анализа до клиницистадоставка результатов анализа до клинициста интерпретация лабораторных данных с учетом интерпретация лабораторных данных с учетом

клинического состояния пациентаклинического состояния пациента Актуальная задача постаналитического этапаАктуальная задача постаналитического этапа - -

подготовка клиницистов по вопросам лабораторной подготовка клиницистов по вопросам лабораторной диагностики. диагностики.

Основой для оптимизации клинического использования Основой для оптимизации клинического использования лабораторных тестов должна быть система протоколов лабораторных тестов должна быть система протоколов (национальных стандартов) ведения больных(национальных стандартов) ведения больных, , определяющих, в частности, выбор наиболее определяющих, в частности, выбор наиболее информативных тестов, рациональную частоту информативных тестов, рациональную частоту повторения исследований и параметры интерпретации их повторения исследований и параметры интерпретации их результатов. результатов.

Практическое применение лечащими врачами протоколов Практическое применение лечащими врачами протоколов ведения больных в части лабораторной диагностики и ведения больных в части лабораторной диагностики и мониторинга состояния больных должно осуществляться мониторинга состояния больных должно осуществляться при сотрудничестве с лабораторными специалистами. при сотрудничестве с лабораторными специалистами.

Формулировка ответов при диагностике гонореиФормулировка ответов при диагностике гонореи

Микроскопический методМикроскопический метод обнаружены грамотрицательные обнаружены грамотрицательные

внутриклеточные и/или внеклеточные внутриклеточные и/или внеклеточные диплококки, морфологически сходные с диплококки, морфологически сходные с гонококками;гонококками;

грамотрицательные внутриклеточные и/или грамотрицательные внутриклеточные и/или внеклеточные диплококки, морфологически внеклеточные диплококки, морфологически сходные с гонококками, не обнаружены.сходные с гонококками, не обнаружены.

Культуральный методКультуральный метод Neisseria gonorrhoeae Neisseria gonorrhoeae выделенывыделены Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae не выделены не выделены

ПЦР (другие МАНК)ПЦР (другие МАНК) ДНК ДНК Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae обнаружена обнаружена ДНКДНК Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae не обнаружена не обнаружена

Формулировка ответов при диагностике Формулировка ответов при диагностике хламидийной инфекциихламидийной инфекции

ПЦР (другие МАНК)ПЦР (другие МАНК) ДНК ДНК Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis обнаружена обнаружена ДНК ДНК Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis не обнаружена не обнаруженаКультуральныйКультуральный Chlamydia trachomatis Chlamydia trachomatis выделенывыделены Chlamydia trachomatis Chlamydia trachomatis не выделены не выделены Анализ повторить по причине Анализ повторить по причине

цитопатического эффектацитопатического эффектаПИФПИФ Методом ПИФ Методом ПИФ Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis

обнаруженыобнаружены Методом ПИФ Методом ПИФ Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis не не

обнаруженыобнаружены

Национальный стандартНациональный стандарт

1.1. Национальный стандарт Национальный стандарт «Гонококковая инфекция»«Гонококковая инфекция»

2.2. Технологии выполнения простой Технологии выполнения простой медицинской процедурымедицинской процедуры

3.3. ???????????? Алгоритм применения Алгоритм применения методов лабораторной методов лабораторной диагностики …… инфекции диагностики …… инфекции (Протокол лабораторной (Протокол лабораторной диагностики)диагностики)

Протоколы по лабораторной Протоколы по лабораторной диагностике ИППП диагностике ИППП

создавались в рамках создавались в рамках международной ассоциации международной ассоциации

по репродуктивному здоровью по репродуктивному здоровью и праву (руководитель Марюс и праву (руководитель Марюс

Домейка, Швеция) при Домейка, Швеция) при поддержке Шведского поддержке Шведского

правительства и Восточно-правительства и Восточно-Европейского комитетаЕвропейского комитета

Цель создания Протоколов по Цель создания Протоколов по диагностике ИПППдиагностике ИППП

Стандартизация Стандартизация лабораторной диагностики лабораторной диагностики ИППП в странах Восточной ИППП в странах Восточной Европы, в частности, в Европы, в частности, в Российской ФедерацииРоссийской Федерации

СтраныСтраны

Российская Российская ФедерацияФедерация

Республика Республика БеларусьБеларусь

Украина Украина ЛитваЛитва ЛатвияЛатвия ЭстонияЭстония БолгарияБолгария ВенгрияВенгрия

АрменияАрмения АзербайджанАзербайджан ГрузияГрузия КиргизияКиргизия КазахстанКазахстан ТаджикистанТаджикистан УзбекистанУзбекистан

Алгоритм создания Алгоритм создания Протоколов по диагностике Протоколов по диагностике

ИПППИППП Написание Протоколов по диагностике ИППП на русском Написание Протоколов по диагностике ИППП на русском

языкеязыке Перевод на английский языкПеревод на английский язык Чтение и правка Протоколов Чтение и правка Протоколов тремя!!!тремя!!! международными международными

экспертами (по каждой инфекции)экспертами (по каждой инфекции) Перевод на русский язык с английского исправленных Перевод на русский язык с английского исправленных

ПротоколовПротоколов Обсуждение Протоколов на двух языках с участием Обсуждение Протоколов на двух языках с участием

представителей всех стран и международных экспертовпредставителей всех стран и международных экспертов Достижение консенсуса всех специалистов из всех странДостижение консенсуса всех специалистов из всех стран Представление Протоколов главным специалистам или Представление Протоколов главным специалистам или

министерствам каждой страныминистерствам каждой страны Публикация Протоколов в каждой стране (в виде Публикация Протоколов в каждой стране (в виде

журнальной статьи или методических рекомендаций)журнальной статьи или методических рекомендаций) Утверждение Протоколов Министерством Утверждение Протоколов Министерством

здравоохранения в качестве государственного здравоохранения в качестве государственного стандарта (в ряде стран) стандарта (в ряде стран)

Созданные ПротоколыСозданные Протоколы

Протоколы лабораторной Протоколы лабораторной диагностики сифилисадиагностики сифилиса

Протоколы лабораторной Протоколы лабораторной диагностики инфекций, вызванных диагностики инфекций, вызванных Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae

Протоколы лабораторной Протоколы лабораторной диагностики инфекции, вызванной диагностики инфекции, вызванной Chlamydia trachomatisChlamydia trachomatis

Готовятся к обсуждениюГотовятся к обсуждению

Протоколы лабораторной диагностики Протоколы лабораторной диагностики бактериального вагинозабактериального вагиноза

Протоколы лабораторной диагностики Протоколы лабораторной диагностики инфекции, вызванной инфекции, вызванной Trichomonas Trichomonas vaginalisvaginalis

Протоколы лабораторной диагностикиПротоколы лабораторной диагностики урогенитального кандидозаурогенитального кандидоза

Протоколы лабораторной диагностики Протоколы лабораторной диагностики инфекций, вызванных инфекций, вызванных Herpes simplex Herpes simplex vvirusirus

Технологии выполнения простой Технологии выполнения простой медицинской услугимедицинской услуги

(21 технология)(21 технология) Получение клинического материалаПолучение клинического материала (секрета (секрета

простаты, секрета больших парауретральных и простаты, секрета больших парауретральных и вестибулярных желез, из цервикального канала, из вестибулярных желез, из цервикального канала, из влагалища, из уретры, из прямой кишки, из влагалища, из уретры, из прямой кишки, из конъюнктивы, из ротоглотки)конъюнктивы, из ротоглотки)

Микроскопическое исследованиеМикроскопическое исследование отделяемого отделяемого женских половых органов, уретрального отделяемого женских половых органов, уретрального отделяемого и секрета простаты, отделяемого больших и секрета простаты, отделяемого больших парауретральных и вестибулярных желез парауретральных и вестибулярных желез

Бактериологическое исследованиеБактериологическое исследование отделяемого отделяемого женских половых органов, уретры, прямой кишки, женских половых органов, уретры, прямой кишки, конъюнктивы (слезная жидкость) ротоглотки на конъюнктивы (слезная жидкость) ротоглотки на гонококк (гонококк (Neisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeae) )

Молекулярно-биологическое исследованиеМолекулярно-биологическое исследование отделяемого уретры, женских половых органов, отделяемого уретры, женских половых органов, секрета больших парауретральных и вестибулярных секрета больших парауретральных и вестибулярных желез, конъюнктивы (слезная жидкость), секрета желез, конъюнктивы (слезная жидкость), секрета предстательной железы на гонококк (предстательной железы на гонококк (Neisseria Neisseria gonorrhoeaegonorrhoeae))

Савичева Алевтина Михайловна

Documents