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BD Phosflow Technology フローサイトメーターによる細胞内リン酸化タンパク質の解析

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  • BD™ Phosflow Technologyフローサイトメーターによる細胞内リン酸化タンパク質の解析

  • 1 www.bd.com/jp/

    細胞内シグナル伝達に関わっているタンパク質の活性化にはそのタンパク質に含まれているセリン/スレオニン、チロシン残基のリン酸化が大きく関わっており、様々なキナーゼやホスファターゼによって制御されています。

    リン酸化タンパク質は、T細胞/B細胞シグナリング、アポトーシス、細胞成長コントロール、細胞周期、細胞骨格の再構成、転写などの重要な細胞プロセスで中心的な役割を果たしています。細胞内リン酸化タンパク質の検出は従来、ウェスタンブロッティング、免疫沈降、免疫組織染色などの技法が汎用されていますが、これらの技法の場合、解析時間がかかる、1つのサンプルで多項目の解析が難しい、比較的多くのサンプルを必要とするなどの限界がありました。

    2002年、米国スタンフォード大学のギャリー・ノーラン博士の研究室より、“フローサイトメーターを用いた細胞内リン酸化タンパク質の解析”が発表されました。BDではマルチカラー解析も可能なこの新しい技法を“BDTM Phosflow Technology”としてご紹介致します。

    特 長

    • 全血、末梢血単核細胞などの細胞内リン酸化タンパク質をフローサイトメーターを用いて解析

    • 迅速、高感度に検出

    • ウェスタンブロッティング法よりも操作が簡便、測定時間短縮

    • 細胞表面抗原用の蛍光標識抗体と組み合わせるなどのマルチカラー解析を実現

    ウェスタンブロッティングとフローサイトメーターによる解析の比較(イメージ)

    図1 状態の異なる細胞集団におけるリン酸化の解析サンプル1:非リン酸化状態、サンプル2およびサンプル3:リン酸化状態サンプル2と3について、ウェスタンブロッティングでは大きな違いは認められませんが、フローサイトメーターではCでみられるようにリン酸化状態の違いを異なるパターンとして結果を得ることができます。

    出典:P.O. Krutzik et al. Clinical Immunology 110 (2004)

    1

    1

    11

    1

    1 11 1

    1

    1 11

    11

    111

    11

    10

    10 1010

    5010

    111 1

    11

    Sample

    1

    1 2 3

    2 3

    1 ~5 ~5AverageValue

    WesternBlot

    Flow Cytometry

    Fluorescence Intensity

    Cel

    l Nu

    mb

    er

    A

    B

    C

    1 10 100 1 10 100 1 10 100

    Western Blotting Flow Cytometry

    細胞集団を解析 単一細胞レベルで解析

    ホモジニアスなサンプルであることがことが必要 ヘテロジニアスな細胞でも解析可能

    ワンパラメータ解析 マルチパラメータ解析

    多くの細胞が必要 少ない細胞数でサブセット解析可能

    多くの時間を要する 迅速である

    BDTM Phosflow Technology

  • www.bd.com/jp/ 2

    BD Phosflow Protocol(概略)と解析パターン(イメージ)

    図2 フローサイトメーターによる、異なるリン酸化タンパク質の解析BDTM Phosflow Technologyを用いることにより1度に異なるリン酸化タンパク質を1細胞レベルで解析することができます。

    出典:P.O. Krutzik et al. Clinical Immunology 110 (2004)

    Stimulus A Stimulus B Stimulus A+B

    Green Fluorecence

    Red

    Flu

    ore

    scen

    ceUntreatedcellsStim AStim BStim A+B

    準備していただくもの

    • サンプル(全血や末梢血単核細胞など)

    • 細胞刺激剤

    • 細胞固定試薬*• 細胞膜透過試薬*• リン酸化タンパク質特異的抗体 Phosflow Reagents*• その他特異的抗体(マルチカラー解析を実施する場合に必要となります)

    • Stain Buffer*

    細胞表面抗原との同時染色解析例(Human)

    CD3-PerCP-Cy5.5

    CD

    4-PE

    0.1 46.9

    25.427.7

    Alexa Fluor® 488 - Stat60

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f M

    ax

    Alexa Fluor® 488 - Stat60

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f M

    ax

    Alexa Fluor® 488 - Stat60

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f M

    ax

    Alexa Fluor® 647 - Stat30

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f M

    ax

    Alexa Fluor® 647 - Stat30

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f M

    ax

    Alexa Fluor® 647 - Stat30

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f M

    ax

    CD3+ CD4+

    CD3+ CD4+

    CD3+ CD4 -

    CD3+ CD4–

    CD3 - CD4 -

    CD3– CD4–

    解析例1 ヒト末梢血単核細胞をIL-6およびIL-4で刺激した場合の解析図抗ヒト CD3 PerCP-Cy5.5、抗ヒト CD4 PE、抗ヒト リン酸化Stat6(pY641) Alexa Fluor® 488、抗ヒト リン酸化Stat3(pY705) Alexa Fluor® 647で染色後フローサイトメーターで解析。これらの解析図より、CD3+/CD4+、CD3+/CD4–、CD3–/CD4–の細胞集団においてStat6がリン酸化されていることがわかります。

    細胞の刺激

    細胞の固定

    細胞膜透過処理

    特異的抗体の反応

    フローサイトメーターによる解析

    リン酸化特異的抗体、細胞表面抗原に対する抗体

    * 巻末のProduct Listをご参照ください。

  • 3 www.bd.com/jp/

    細胞表面抗原との同時染色解析例(Mouse)および Protocol(概略)

    Untreated cells (unshaded) vs treated cells (shaded)

    Alexa Fluor® 488 - B220

    Treated with PMA+LPS

    100 101 10 2 103 10 410 0

    10 1

    10 2

    10 3

    10 4

    52.952.9

    5.695.69

    40.640.6 52.952.9

    5.695.69

    40.640.6

    PerC

    P-C

    y5.5

    - C

    D11

    b

    PerC

    P-C

    y5.5

    - C

    D11

    b

    Alexa Fluor® 488 - B220

    Untreated

    100 101 10 2 103 10 410 0

    10 1

    10 2

    10 3

    10 4

    60.260.2

    1.911.91

    37.837.8 60.260.2

    1.911.91

    37.837.8

    CD11b-B220-CD11b-B220+CD11b+B220-

    CD11b-B220-CD11b-B220+CD11b+B220-

    Alexa Fluor® A647 - ERK1/2 (pT202/pY204)

    PE - p38 MAPK (pT180/pY182)

    100 101 10 2 103 10 40

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f Max

    100 101 10 2 103 10 40

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f Max

    100 101 10 2 103 10 40

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f Max

    100 101 10 2 103 10 40

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f Max

    100 101 10 2 103 10 40

    20

    40

    60

    80

    100

    % o

    f Max

    100 101 10 2 103 10 40

    20

    40

    60

    80

    100%

    of M

    ax

    解析例2 C57BL/6 マウス脾臓細胞をPMA+LPS で刺激した場合の解析図抗マウス CD11b PerCP-Cy5.5、抗マウス CD45R/B220 Alexa Fluor® 488、抗マウスリン酸化p38 PE、抗マウス リン酸化ERK1/2 Alexa Fluor® 647 で染色後フローサイトメーターで解析。これらの解析図より、p38は主にCD11b+/B220– 細胞集団が刺激により活性化されリン酸化されていることがわかりますが、一方ERK1/2ではどの細胞集団においてもリン酸化されていることがわかります。

    解析例2を得るために、実施した Protocol (概略)

    サンプル、リン酸化タンパク質、同時に測定したい細胞表面抗原などによって周辺試薬(細胞固定試薬、細胞膜透過試薬)の組み合わせが異なる場合があります。(詳しくはアプリケーションハンドブックをご覧ください。)

    マウス脾臓細胞を PMA+LPSを用いて15分間刺激

    BD PhosflowTM Lyse/Fix Buffer (Cat. No. 558049)を用いて細胞を固定(37℃10分間)

                      

    BD PhosflowTM Perm Buffer III (Cat. No. 558050)を用いて細胞膜透過処理(氷上30分間)

    BD Fc BlockTM (Cat. No. 553141)を用いて、Fc Receptor を ブロック(氷上15分間)

    蛍光標識抗体で細胞を染色(室温暗所30分間)

    フローサイトメーターによる解析

  • www.bd.com/jp/ 4

    テクニカルデータシートの入手方法

    BDのウェブサイトにアクセスします。(http://www.bd.com/jp/)

    左端の「製品情報」をクリックします。

    バイオサイエンスの中の「試薬・抗体」をクリックします。

    右下のカラム「データシート検索」をクリックします。

    検索がヒットするとこのような画面が出てきます。

    右から2番目のTDS(テクニカルデータシート)をクリックします。

    抗体の必要な情報が、PDFファイル形式で入手できます。

    データシート検索用の画面が表示されます。〜ここでお気に入りに登録することをお奨めします。〜

    本誌で紹介されている製品のテクニカルデータシートは弊社ウェブサイトよりダウンロードすることができます。

    ■ BDTM Phosflow に関する詳細な情報やProtocolにつきましては、下記ウェブサイト、もしくはアプリケーションハンドブック

    でもご確認いただけます。

    【ウェブサイト】

    http://www.bdbiosciences.com/research へアクセスしていただき、

    “BDTM Phosflow Technology”をご覧ください。

    【アプリケーションハンドブック】

    http://www.bdbiosciences.com/documents/Phosflow_Application_Handbook.pdf へアクセスしていただき

    “Techniques for Phospho Protein Analysis Application Handbook 1st Edition”をご覧ください。

  • 5 www.bd.com/jp/

    Product List

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    AKT (pT308) Hu J1-223,371 Ms IgG1,κ PE 50 tests 558275 40,000

    Akt (pS473) Hu M89-61 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560404 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560343 40,000

    PE 50 tests 560378 40,000

    Purified 50 tests 560397 40,000

    Akt1 (PKBα, RAC-PK) Hu 55 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560048 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560050 40,000

    PE 50 tests 560049 40,000

    BLNK (pY84) Hu J117-1278 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558444 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558443 40,000

    PE 50 tests 558442 40,000

    BLNK (SLP-65, BASH, BCA) Hu, Ms 2B11 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558693 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558692 40,000

    PE 50 tests 558688 40,000

    Btk Hu 53/Btk Ms IgG2a Alexa Fluor® 647 50 tests 558528 40,000

    PE 50 tests 558527 40,000

    Btk (pY551) & Itk (pY511) Hu 24a/BTK(Y551) Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 558130 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558134 40,000

    PE 50 tests 558129 40,000

    βCatenin (pS45) Hu K63-363 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558666 40,000

    PE 50 tests 558638 40,000

    c-Cbl (pY700) Hu 47/c-Cbl Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558101 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558100 40,000

    PE 50 tests 558087 40,000

    c-Cbl (pY774) Hu 29/c-Cbl Ms IgG1 Alexa Fluor® 647 50 tests 558103 40,000

    PE 50 tests 558102 40,000

    CD3ζ(pY142) (CD247) Hu K25-407,69 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558486 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558489 40,000

    PE 50 tests 558448 40,000

    CD221 (pY1131) (IGF-1 Receptor) Hu K74-218 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558588 40,000

    CD22 (pY822) Ms 12a/CD22 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560075 40,000

    PE 50 tests 560076 40,000

    CREB (pS133)/ATF-1(pS63) Hu J151-21 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558435 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558434 40,000

    PE 50 tests 558436 40,000

    EGFR (pY845) Hu 12A3 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558523 40,000

    EGFR (pY1173) Hu 9H2 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558524 40,000

    elF4E (pS209) Hu J77-925 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560240 40,000

    PE 50 tests 560229 40,000

    eNOS Hu 33/eNOS Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560102 40,000

    PE 50 tests 560103 40,000

    Elk-1 (pS383) Hu M21-1721 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560417 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560413 40,000

    PE 50 tests 560412 40,000

    ERK1/2 (pT202/pY204) Hu, Ms, Rat 20A Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 612592 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 612593 40,000

    PE 50 tests 612566 40,000

    PerCP-Cy5.5 50 tests 560115 40,000

    PE-Cy7 50 tests 560116 40,000

    Pacific BlueTM 50 tests 560314 40,000

    ERK2 Hu, Ms G263-7 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558525 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558526 40,000

    PE 50 tests 558530 40,000

    Antibodies - Single Color

    NEW

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  • www.bd.com/jp/ 6

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    Ezrin (pY353) Hu I66-386 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558627 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558628 40,000

    PE 50 tests 558601 40,000

    FAK (pS910) Hu K73-480 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558544 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558545 40,000

    PE 50 tests 558540 40,000

    Histon H3 (pS28) Hu, Ms HTA28 Rat IgG2a,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558217 40,000

    IRAK4 Hu L29-525 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560315 40,000

    PE 50 tests 560303 40,000

    IRF-7 (pS477/pS479) Hu K47-671 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558629 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558630 40,000

    PE 50 tests 558621 40,000

    IRF-7 Hu K40-321 Ms IgG1,κ PE 50 tests 558706 40,000

    Alexa Fluor® 488 50 tests 558707 40,000

    IRS-1 (pY896) Hu K9-211 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558441 40,000

    PE 50 tests 558440 40,000

    JNK (pT183/pY185) Hu Polyclonal Rabbit IgG Purified 50 tests 558268 40,000

    LAT (pY171) Hu I58-1169 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558519 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558518 40,000

    PE 50 tests 558487 40,000

    LAT (pY226) Hu J96-1238,58,93 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558430 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558432 40,000

    PE 50 tests 558433 40,000

    Lck Hu MOL 171 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558504 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558505 40,000

    PE 50 tests 558496 40,000

    Lck (pY505) Hu 4/Lck-Y505 Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 557879 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558577 40,000

    PE 50 tests 558552 40,000

    MEK1/2 (pS222) Hu Polyclonal Rabbit IgG Purified 50 tests 558281 40,000

    MEK1(pS298) Hu J114-64 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560192 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560043 40,000

    PE 50 tests 560042 40,000

    MEK1 Chick 25/MEK1 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560101 40,000

    PE 50 tests 560099 40,000

    MEK2 Hu 96/MEK2 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560387 40,000

    PE 50 tests 560388 40,000

    NF-κB p65 (pS529) Hu K10-895,12,50 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558421 40,000Alexa Fluor® 647 50 tests 558422 40,000

    PE 50 tests 558423 40,000

    PE-CyTM7 50 tests 560335 40,000

    p38 MAPK (pT180/pY182) Hu, Ms, Rat 36 Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 612594 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 612595 40,000

    PE 50 tests 612565 40,000

    PerCP-CyTM5.5 50 tests 560406 40,000

    Pacific BlueTM 50 tests 560313 40,000

    p53 (acK382) Hu L82-51 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560231 40,000

    p53 (pS37) Hu J159-641,79 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560282 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560280 40,000

    p120 Catenin (pS268) Hu 9A,390 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558558 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558559 40,000

    p120 Catenin (pS288) Hu 17/Catenin(cl.17) Ms IgG2a Alexa Fluor® 488 50 tests 558562 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558561 40,000

    PE 50 tests 558567 40,000

    Antibodies - Single Color

    NEW

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  • 7 www.bd.com/jp/

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    p120 Catenin (pS879) Hu K114-1011 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558635 40,000

    PE 50 tests 558634 40,000

    p120 Catenin (pT310) Hu 22/p120(pT310) Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558667 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558668 40,000

    PE 50 tests 558596 40,000

    p120 Catenin (pT916) Hu 1/Catenin Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558669 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558670 40,000

    PE 50 tests 558637 40,000

    p130Cas (pY249) Hu J169-757,12,2 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558546 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558547 40,000

    PE 50 tests 558538 40,000

    PDGF Receptorβ(pY771) (CD140b) Hu, Ms J23-1044 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558424 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558425 40,000

    PE 50 tests 558426 40,000

    PDGF Receptorβ(pY857) (CD140b) Hu, Ms J24-618 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558427 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558428 40,000

    PE 50 tests 558429 40,000

    PDGF Receptorβ(pY1009) (CD140b) Hu, Ms J25-602 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558323 40,000

    PE 50 tests 558322 40,000

    PDGF Receptorβ(pY1021) (CD140b) Hu J105-412 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558419 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558418 40,000

    PE 50 tests 558417 40,000

    PDPK1 (pS241) Hu J66-653,44,17 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560090 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560091 40,000

    PE 50 tests 560092 40,000

    PKA RIIα (pS99) Hu I65-856-286 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560164 40,000

    PE 50 tests 560165 40,000

    PKA RIIβ (pS114) Hu 47/PKA Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560204 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560205 40,000

    PKCα Hu 3/PKC Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560242 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560243 40,000

    PKCα (pT497) Hu, Ms K14-984 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560139 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560140 40,000

    PE 50 tests 560141 40,000

    PKCα (pT638) Hu 35/PKC Ms IgG1 PE 50 tests 560267 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560266 40,000

    PKCθ Hu 27 Ms IgG2a,κ PE 50 tests 560216 40,000

    APC 50 tests 560344 40,000

    PLCγ1 Hu 10/PLCgamma Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558566 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558565 40,000

    PE 50 tests 558575 40,000

    PLCγ1 (pY783) Hu 27/PLC Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 557884 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 557883 40,000

    PLCγ2 (pY759) Hu K86-689,37 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558507 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558498 40,000

    PE 50 tests 558490 40,000

    PLC-γ2 Hu K86-1161 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560135 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560136 40,000

    PE 50 tests 560134 40,000

    PLK1 (pT210) Hu K50-483 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558446 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558447 40,000

    PE 50 tests 558445 40,000

    Antibodies - Single Color

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    Product List

  • www.bd.com/jp/ 8

    Antibodies - Single Color

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    PTEN Hu A2B1 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560003 40,000

    PE 50 tests 560002 40,000

    Phosphotyrosine Hu, Ms, Rat PY20 Ms IgG2b PE 50 tests 558008 40,000

    Pyk2 (pY402) Hu L68-I256,272 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560256 40,000

    PE 50 tests 560255 40,000

    Rb (pS780) Hu J146-35 Ms IgG1,k Alexa Fluor® 488 50 tests 558554 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558555 40,000

    PE 50 tests 558548 40,000

    Rb (pS807/pS811) Hu J112-906 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558589 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558590 40,000

    PE 50 tests 558549 40,000

    S6 (pS240) Hu N4-41 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560431 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560432 40,000

    PE 50 tests 560430 40,000

    S6 (pS235/pS236) Hu N7-548 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560434 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560435 40,000

    PE 50 tests 560433 40,000

    S6 (pS244) Hu, Ms N6-676 Ms IgG1,κ PE 50 tests 560462 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560465 40,000

    SHP2 (pY542) Hu L99-921 Ms IgG1,κ PE 50 tests 560389 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560390 40,000

    SLP-76 (pY128) Hu J141-668,36,58 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558439 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558438 40,000

    PE 50 tests 558437 40,000

    SLP-76 Hu H3 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560056 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560057 40,000

    PE 50 tests 560058 40,000

    Src (pY418) Hu K98-37 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560095 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560096 40,000

    Stat1 (pY701) Hu, Ms 4a Ms IgG2a Alexa Fluor® 488 50 tests 612596 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 612597 40,000

    PE 50 tests 612564 40,000

    PerCP-Cy5.5 50 tests 560113 40,000

    Pacific BlueTM 50 tests 560310 40,000

    Stat1 (N-Terminus) Hu 1/Stat1 Ms IgG1 Alexa Fluor® 647 50 tests 558560 40,000

    PE 50 tests 558537 40,000

    Stat1 (pS727) Hu K51-856 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560191 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560190 40,000

    PE 50 tests 560069 40,000

    Sat3 (pS727) Hu 49/p-Stat3 Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 558085 40,000

    M59-50 Alexa Fluor® 647 50 tests 558099 40,000

    PE 50 tests 558557 40,000

    Stat3 (pY705) Hu, Ms 4/P-STAT3 Ms IgG2a Alexa Fluor® 488 50 tests 557814 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 557815 40,000

    PE 50 tests 612569 40,000

    PerCP-Cy5.5 50 tests 560114 40,000

    Pacific BlueTM 50 tests 560312 40,000

    Stat3 Hu M59-50 Ms IgG1,λ PE 50 tests 560391 40,000

    APC 50 tests 560392 40,000

    Stat4 (pY693) Hu, Ms 38/p-Stat4 Ms IgG2b Alexa Fluor® 488 50 tests 558136 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558137 40,000

    PE 50 tests 558249 40,000

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  • 9 www.bd.com/jp/

    Product ListAntibodies - Single Color

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    Stat5 (pY694) Hu, Ms 47 Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 612598 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 612599 40,000

    PE 50 tests 612567 40,000

    PE-Cy7 50 tests 560117 40,000

    PerCP-Cy5.5 50 tests 560118 40,000

    Pacific BlueTM 50 tests 560311 40,000

    Stat6 Hu 23/Stat6 Ms IgG1 Alexa Fluor® 647 50 tests 560000 40,000

    PE 50 tests 560001 40,000

    Stat6 (PY641) Hu 18/P - Stat6 Ms IgG2a Alexa Fluor® 488 50 tests 612600 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 612601 40,000

    PE 50 tests 612701 40,000

    Ms J71-773,58,11 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558243 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558242 40,000

    PE 50 tests 558252 40,000

    Syk (pY348) Hu I120-772 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560081 40,000

    PE 50 tests 558529 40,000

    TBK1 (pS172) Hu J133-587 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558602 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558603 40,000

    PE 50 tests 558604 40,000

    TBK1 Hu 637Ig11.2 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558697 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558698 40,000

    PE 50 tests 558696 40,000

    TIE2 (pY992) (TEK,VMCM,CD202b) Hu K91-860 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560051 40,000

    TIE2 (pY1102) (TEK,VMCM,CD202b)Hu K93-754 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560053 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560054 40,000

    PE 50 tests 560052 40,000

    WIP (pS488) Hu K32-824 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558674 40,000

    PE 50 tests 558673 40,000

    ZAP70 (pY292) Hu J34-602 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558516 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558515 40,000

    PE 50 tests 558510 40,000

    ZAP70 (pY319) /Syk (pY352) Hu, Ms 17A Ms IgG1 Alexa Fluor® 488 50 tests 557818 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 557817 40,000

    PE 50 tests 557881 40,000

    4EBP1 (pT36/pT45) Hu M31-16 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560287 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560286 40,000

    PE 50 tests 560285 40,000

    4EBP1 (pT69) Hu M34-273 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560290 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 560289 40,000

    PE 50 tests 560288 40,000

    NEW

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  • www.bd.com/jp/ 10

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    Dual-ColorHu

    4D10 Ms IgG2a FITC50 tests 557952 78,000

    Pan/Phopho-Syk (Y352) Kit 17A/p-ZAP70 Ms IgG1 PE

    Antibodies - Dual Color

    Description React Clone Isotype Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    Rabbit IgG PE F(ab')2 Rabbit Polyclonal Donkey PE 50 tests 558416 25,000

    2nd Step Reagents

    Description Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    BDTM Phosflow Fix Buffer I 250 mL 557870 30,000

    BDTM Phosflow Lyse/Fix Buffer 250 mL 558049 30,000

    BDTM Phosflow Perm/Wash Buffer I 125 mL 557885 25,000

    BDTM Phosflow Perm Buffer II 125 mL 558052 25,000

    BDTM Phosflow Perm Buffer III 125 mL 558050 25,000

    BDTM Phosflow Perm Buffer IV 10x 50 mL 560746 35,000

    BD Cytofix/CytopermTM Fixation/Permeabilization Solution 125 mL 554722 36,000

    BD CytofixTM Fixation Buffer 100 mL 554655 30,000

    BD PharmingenTM Stain Buffer (BSA) 500 mL 554657 32,000

    BD PharmingenTM Stain Buffer (FBS) 500 mL 554656 30,000

    BDTM Phosflow Reagents 周辺試薬 (細胞固定試薬、細胞膜透過試薬 など)

    Description Clone Format Size Cat. No. 希望小売価格(円)

    Mouse IgG1,κ Isotype Control MOPC-21 Alexa Fluor® 488 50 tests 557782 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 557783 40,000

    Mouse IgG2a,κ Isotype Control MOPC-173 Alexa Fluor® 488 50 tests 558055 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558053 40,000

    PE 50 tests 558595 40,000

    Mouse IgG2b,κ Isotype Control 27-35 Alexa Fluor® 488 50 tests 558716 40,000

    Alexa Fluor® 647 50 tests 558713 40,000

    Isotype Controls

    ※サンプル、リン酸化タンパク質、同時に測定したい細胞表面抗原などによって周辺試薬の組み合わせが異なる場合があります。

    (詳しくはアプリケーションハンドブックをご覧ください。)

    医薬用外劇物

    ■ ご不明な点などございましたら以下お問い合わせ窓口へご連絡ください。

    E-Mailによるお問い合わせ : [email protected]

    お電話によるお問い合わせ :   0120-4890-77

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  • 66-005-03R0-1001-001-200

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