慢性萎缩性胃炎（ cag ）动物实验

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慢性萎缩性胃炎（ CAG ）动物实验中医学综合实验 PBL 课程第三小组：章渊源贾友冀杜倩吴瑕石建才杨芮姗王国栋2009-3-20

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人类疾病动物模型Animal models for human diseases ：是指为生物医学研究和阐明人类疾病的发生机理及建立诊断、预防和治疗方法而制作的具有人类疾病模拟表现的实验动物。


CAG 动物造模法生物制模法 ——CHLO 、 Hp 感染猫、鼠、猴等动物造模（简便、价廉、易于建立。对 Hp 疫苗在防治 Hp 感染的实验研究中意义重大）理化损伤法 —— 放射损伤法、口服氨水法、幽门放置弹簧改良法、胃肠吻合术、化学致癌物诱变（大多以单一因素试验 , 虽然造成慢性胃炎 , 但没能建立典型的模型 , 且很不稳定。）主动免疫结合胃粘膜损伤的造模方法 —— 大鼠：皮下注射佐剂抗原 0.3ml,1 个月后重复注射 1 次，结合胆汁及 50 热水灌胃连续 70d （与人类免疫因素造成的 CAG 相似，但制作复杂，技术成本高，不稳定，难以大规模的推广）有中医特色的证病结合模型疾病局部结构性变化＋中医临床证候表现 [1] 刘友章，欧志穗 . 慢性萎缩性胃炎实验动物模型研究 . 中国中西医结合消化杂志， 2004 ， 4 （ 12 ）： 119 － 121


CAG 中医辨证分型肝胃不和证脾胃虚弱证脾胃湿热证胃阴不足证胃络瘀血证


CAG 病证结合模型脾气虚型肝郁型

肾虚型气虚血瘀型

阳虚型和阴虚型

脾胃湿热型胃肠燥热型


脾气虚模型（ 1 ）耗气破气加饮食失节法普通级 Wistar 大鼠 24 只 , 雌雄各半平均体重为 235 g( 雌 ) 和 310 g( 雄 ) 。以厚朴、枳实、大黄按 3∶3∶2 比例常规制成 100% 煎剂 , 隔日 1次灌服 , 每只 4 mL/ 次 ( 雄 ), 或每只 3 mL/ 次 ( 雌 ) 。同时隔日喂饲料 ,

共 26 w 。实验结束后处死动物 , 取肝脏、肺脏、脾脏、胸腺肾脏、心脏和胃进行观察。苦寒泻下法昆明系健康雄性小鼠 40 只 , 随机编号称重分为大黄泻下组和番泻叶泻下

组 , 每组 20 只 , 于谷雨时节造模。大黄泻下组每日上午灌服 100% 大黄煎剂 0.5 mL/ 只 , 番泻叶泻下组每日上午灌服 100% 番泻叶水浸液 0.5 mL/ 只 , 持续 8 d 。造模成功后处死小鼠 , 取全肝、全脾。刘汶等 [7] 选取健康 2 月龄纯系雌性 Wister 大鼠 , 平均体重 (220±50)g 。将印度产番泻叶以 20 mL 水中放入 1 g 番泻叶的比例投入沸水中浸泡 ,冷却后使用。然后按每次 20 mL/kg,2 次 /d 的量给大鼠灌胃 ,20 d 造模。

过劳加饮食失节法 Wistar 雄性大鼠隔日在跑步机上跑步 30 min; 单日以精炼猪油灌胃 , 每次2 mL, 每天 2 次 ; 双日喂大白菜 , 不限量 ,自由进水。分别于造模第 15 d 、20 d 、 25 d 随机处死动物。


脾气虚模型（ 2 ） X 射线照射法 60 日龄 Wistar 大鼠 60 只 , 雌雄均有 , 体重 (200±30)g 。每只大鼠单笼饲养 , 按 250 rad/min照射剂量进行腹外照射 ,7 d 后进行第 2 次加强 ,造模后次日即进行实验观察 , 第 33 d 处死动物 , 取样并作各种检查。秋水仙碱法 60 日龄 wistar 大鼠 , 雌雄均有 , 体重 (200±30)g, 造模时间共 25 d, 每只大鼠单笼饲养 , 每日按规定用量喂饲秋水仙碱水溶液。造模后 , 次日即进行实验观察 , 第 26 d 处死动物 , 取大鼠胃窦部、空肠及回肠组织作各种检查。其病理改变与 X 线照射法所造成的病理改变十分相似。利血平法 80 日龄 SD 大鼠 , 体重 220 g ～ 250 g, 雌雄均有 ,用利血平 0.2

mg(/kg·d-1)肌注连续 14 d, 第 6 d加喂生理盐水 3 mL(/ 只 ·d-1) 造模。 [2]贺燕，鲍书哲，徐惠波 . 脾虚动物模型的造模方法及其病理改变 .山西中医学院学报， 2008 ，9 （ 1 ）， 55-57.

http://ckrd.cnki.net/GRID20/Navi/Bridge.aspx?LinkType=BaseLink&DBCode=cjfd&TableName=cjfdbaseinfo&Field=BaseID&Value=SHAN&NaviLink=%E5%B1%B1%E8%A5%BF%E4%B8%AD%E5%8C%BB%E5%AD%A6%E9%99%A2%E5%AD%A6%E6%8A%A5


肝郁模型夹尾加肾上腺素注射法 0.3％脱氧胆酸钠水溶液和 0.6％阿斯匹林水溶液隔周交替代饮水至实验结束。并取同批大鼠胃粘膜组织生理盐水溶液 (30% ) , 与等量完全弗氏佐剂混合 ,充分乳化后 ,足跖部皮内注射 , 在实验第 10 、 24 和 48d 作免疫注射 (末次注射浓度为 60%, 不加弗氏佐剂 ) ,0.1ml/ 只 ; 造模时

间 35 ～ 51周。实验第 8 周开始 ,用钳子夹大鼠尾部 , 使之保持激怒、争斗状态, 每天

30min, 同时每 3 周用 0.1% 肾上腺素腹侧皮下注射 2 次 ,0.1ml/ 只 /次 (含肾上腺素 0.1mg) , 造模时间 28 ～ 44 周

[3]陈小野，邹世洁 . 大鼠 CAG 证病结合模型的造模方法和思路 . 实验动物科学与管理， 2002 ，19 （ 3 ）： 63


肾虚模型甲基硫氧嘧啶（ MTU ）药物法 0.3％脱氧胆酸钠水溶液和 0.6％阿斯匹林水溶液隔周交替代饮水至实验结束。并取同批大鼠胃粘膜组织生理盐水溶液 (30% ) , 与等量完全弗氏佐剂混合 ,充分乳化后 ,足跖部皮内注射 , 在实验第 10 、 24 和 48d 作免疫注射 (末次注射浓度为 60%, 不加弗氏佐剂 ) ,0.1ml/ 只 ; 造模时

间 35 ～ 51周。实验第 6 周开始 ,甲基硫氧嘧啶（ MTU ）以 0.08%浓度加入脱氧胆酸钠溶液或阿斯匹林溶液中自饮 , 造模时间 30 ～ 46 周。

[3]陈小野，邹世洁 . 大鼠 CAG 证病结合模型的造模方法和思路 . 实验动物科学与管理， 2002 ，19 （ 3 ）： 63


气虚血瘀模型甲硝基亚硝基胍 (MNNG)+ 雷尼替丁 + 饥饱失常法 ①甲硝基亚硝基胍用水配成 50μg/ml 的溶液 , 装入避光饮水瓶给大鼠自由饮用 ②盐酸雷尼替丁胶囊按每天 0103g/kg 灌胃 , 每日 1 次 ③饥饱失常　 2d 喂食 , 保证足量 ,1d 停食

[4]尹军祥，田金洲 . 气虚血瘀证动物模型制作方法与评价 . 中华中医药杂志， 2006 ， 21 （ 7 ）： 424


脾胃湿热模型高脂高糖饮食＋人工气候模拟法用 MNNG100ug/mL避光作为大鼠自由饮水，同时用 40%乙醇液灌胃，

2mL/ 只，每周一、四各灌胃 1 次。第 7 周始给大鼠饲料换为高脂、高糖饲料喂养，同时每天将大鼠置人造模箱内 (恒温干燥箱内置超声雾化器和湿温度表 ) ，调节箱内温度 (33 士 2)℃ ，相对湿度 (95 士 3)% ，每天 1 次 2h ，共 4 周。

[5]徐珊，周嘉鹤 . 慢性萎缩性胃炎证病结合模型的复制 . 中国中医药科技， 2008 ， 15 （ 1 ）： 6

－ 8


胃肠燥热模型热性中药饲喂法附子、干姜、肉桂按 1 ： 1 ： 1 比例组成，常规制成 100％煎剂，室温下灌胃， 4ml/ （只 ·d ），一日一次。

[6] 高碧珍，黄爱民 . 不同证候模型大鼠胃黏膜细胞凋亡与证的相关性研究 . 中华中医药杂志， 2005 ， 20 （ 9 ）： 557 － 558


阳虚型和阴虚型阳虚型以 0.1% 去氧胆酸钠+0.3% 甲巯基咪唑 , 水溶液代替饮水，让小鼠自由饮用 4 个月阴虚型 0.1% 去氧胆酸钠+0.02% 甲状腺片+0.0001% 利血平水溶液代替饮水 ,让小鼠自由饮用 4 个月并设单纯 CAG 模型 ( 单予以 0.1% 去氧胆酸钠 ) 。 [7] 陈艳芬，陈蔚文 . 中医胃病证动物模型研究揽要 .河南中医学院学报， 2003 ， 5 （ 3 ）： 23


中医证候动物模型的特征1. 普适性2. 可重复性3. 定量和定性相结合4. 开放性5. 累积性6. 特异性或专门性7. 易化性


中医证候动物模型的评价成功的模型建立必须满足三个条件 :

①模型与原型之间有相似关系。②模型能够代替原型。③对模型的研究，应该能够得出原型的信息。就中医证候动物模型而言，所谓原型就是指中医证候以及具有中医特色病证结合的病理反应 [9]肖芸，方肇勤 . 中医证候动物模型的研究进展 . 内蒙古中医药， 2008(10)


CAG 证候动物模型的问题简单化、单因素造模致 CAG 因素的选择不尽合理病理模型可靠性差以方验证、药物反证的模式推导出的证候属性，值得推敲。以简单的实验室指标，来判断证候属性，实则中医整体观的特色相悖。 [8]孟庆云 . 动物模型——现代中医学实验研究的核心方法 . 北京实验动物科学与管理

1994 ， 22 （ 3 ） . [9]肖芸，方肇勤 . 中医证候动物模型的研究进展 . 内蒙古中医药， 2008(10)


我们的思考 CAG 是一个慢性疾病，“慢性”并非仅为疾病的一个简单性质，由于它为时间维度，而使疾病病理立体化，故其病证结合模型应选择较长的造模时间。人体虚证多因先天禀赋不足，后天失养所致。但现有模型均未重视先天禀赋不足，唯重后天失养，考虑的是正常机体在病因影响下的病理变化。 CAG 临床辩证分型尚缺乏统一标准，如果有统一标准可以结合动物自身特点，制作动物证候模型。许多造模方法的文献中成功与否的评价标准不统一，或仅用较少或片面的指标进行检测。目前急需一个统一的评价标准。应该采用非创伤性的检测指标，以防使实验动物受到实验因素外的刺激，影响实验结果。


分工贾友冀：查阅文献沟通讨论杜倩：查阅文献沟通讨论 PPT 制作章渊源：查阅文献沟通讨论课堂讲解石建才：查阅文献沟通讨论吴瑕：查阅文献沟通讨论王国栋：查阅文献沟通讨论杨芮姗：查阅文献沟通讨论


文献检索方式计算机检索： CNKI期刊医药卫生专辑、万方 -医药信息系统、 VIP 中文科技期刊数据库互联网信息检索（ baidu 、 google 、免费期刊网等）

手工检索：图书馆藏书


参考文献[1] 刘友章，欧志穗 . 慢性萎缩性胃炎实验动物模型研究 . 中国中西医结合消化杂志， 2004 ， 4 （ 12 ）：

119 － 121[2]贺燕，鲍书哲，徐惠波 . 脾虚动物模型的造模方法及其病理改变 .山西中医学院学报， 2008 ， 9 （ 1

）， 55-57.[3]陈小野，邹世洁 . 大鼠 CAG 证病结合模型的造模方法和思路 . 实验动物科学与管理， 2002 ， 19

（ 3 ）： 63[4]尹军祥，田金洲 . 气虚血瘀证动物模型制作方法与评价 . 中华中医药杂志， 2006 ， 21 （ 7 ）： 424[5]徐珊，周嘉鹤 . 慢性萎缩性胃炎证病结合模型的复制 . 中国中医药科技， 2008 ， 15 （ 1 ）： 6 － 8 [6] 高碧珍，黄爱民 . 不同证候模型大鼠胃黏膜细胞凋亡与证的相关性研究 . 中华中医药杂志， 2005 ， 20

（ 9 ）： 557 － 558[7]陈艳芬，陈蔚文 . 中医胃病证动物模型研究揽要 .河南中医学院学报， 2003 ， 5 （ 3 ）： 23[8]孟庆云 . 动物模型——现代中医学实验研究的核心方法 . 北京实验动物科学与管理 1994 ， 22 （ 3 ） .[9]肖芸，方肇勤 . 中医证候动物模型的研究进展 . 内蒙古中医药， 2008(10)[10] 陈小野 . 实用中医证候动物模型学 .北京 :北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社 ,1993:320-

322,47-57.[11]陈小野 . 证候动物模型诊断依据的设想与评价 . 中国医药学报， 1987 ， 2 （ 1 ）， 50-56.[12]呼海涛，卢旻 . 黄芪建中汤对脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠消化系统多脏器和骨骼肌细胞代谢的影响 . 中

国中医基础医学杂志， 2008 ， 14 （ 3 ）


参考文献[13]蒋渝 . 中医药研究中实验动物模型的研制进展 . 重庆中草药研究， 1999 ， 39 ， 46 － 53[14]李守朝，王峰，蔺焕萍 .周晓燕参佛胃康对慢性萎缩性胃炎大鼠血清胃泌素和血浆胃动素水平的影响 [A]. 江西中医药 ,2007,12(300):68-69

[15]邹世洁，陈小野 . 大鼠 CAG 证病结合模型的宏观症征观察 [A].长春中医药大学学报 ,2007,23(5):13-15[16]陆为民，单兆伟，吴静等 . 大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变气虚血瘀证动物模型的研制 .南京：南京中医药

大学学报 [A].2000 ， 16 （ 3 ）： 156-158[17]陈蔚文 . 消化道药理与临床（第一版） [M].北京：学苑出版社， 2001 ： 49-57[18]翦林宏，彭志辉，陈立峰等 . 大鼠慢性萎缩性胃炎模型的建立 . 中国比较医学杂志 .2007 ， 17 （ 3 ）：

161-163[19]张光荣，段广才，范清堂，等 . 幽门螺杆菌感染的昆明小鼠模型的建立 [J]. 中华医学杂志， 2006 ， 86

（ 12 ）： 857-859[20]杨鸿，候家玉 . 胆汁反流致慢性萎缩性胃炎的实验研究 [J].北京中医药大学学报， 2001 ， 24 （ 5 ）：

26-29[21]姒健敏，吴加国，曹倩，等 . 鼠慢性萎缩性胃炎模型的建立及之萎缩因素探讨 [J]. 中华消化杂志， 2001 ，

21 （ 2 ）： 75-78[22]张沥，张玲霞，徐俊荣，等 . 热盐水致大鼠萎缩性胃炎动物模型建立 [J].世界华人消化杂志， 2002 ， 10

（ 5 ）： 571-574[23]Field J, Biondo MA, Murphy K, et al. Experimental autoimmune gastritis :mouse models of

human organ-specific autoimmune disease[J]Int Rev Immunol,2005,24(1-2):93-110


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