˘ˇˆ˙ clostridium ˛˚ ˜ - 一般社団法人日本臨床微生物学会 2. (continued) species...
TRANSCRIPT
�� ��
����������� ��������������Clostridium������� �
��!"1)#�$%2)#�� �2)
1) &����'�(�)�* +,2) -��./�,.�01234567�#���12��
8�9 21� 6: 19�;�< �9 21� 11: 2�;�=
�>? @ A�B�CD������EF�����������G H!IJK Clos-
tridium�K��< L�/M.�N�K��� �IO�PQ���"#BR$�NI%S�TUH!&'(< V)*'W+�X%YZ 16S ribosomal RNA[,\-.�]^������T Clostridium hathewayi, Clostridium clostridioforme, Clostridium bolteae, Clostridium citro-
niae, Clostridium aldenense, Clostridium symbiosum� 6_`< a/���b�� (API 20
A, Rapid ID32A)I0#�T/M.�N%YZcd1e�Yfg�YC�R$��TU Indole
W/_` C. citroniae C. aldenensehif< j� 2_�R$�N��`< rhamnose,
b-glucuronidase, b-galactocidase@2���TU Indole3W/� 4_�Ck C. symbiosum
�l@ a-galactocidase��himTU C. hathewayi`< cellobiose4�< a-arabinosidase%YZ b-N-acetylglucosaminidase4��YfR$n5himTU C. clostridioforme C. bol-
teae�R$�K��`< �N@6o��%fR$`��p7himTU qT< C. symbiosum`cd1eI#�Br�Js8H!tAR$n5himTU
Key words: Clostridium clostridioforme, Clostridium bolteae, Clostridium hathewayi, Clos-
tridium citroniae, Clostridium aldenense
� ��������i��`9u��v��wx�y
BH!���������z{��� Clostri-
dium clostridioforme `< |:h`�*}~;BClostridium<����K���%f1)<=�>�@ A��j2)��*�?tA��@�@ Clostri-
dium<�%�� 2AB�C�j3)@D������U E �%��`< j�qh'� �����B�@< ���v�v�� �4)hJ< ��������Clostridium`��������@������E�tA�@��< =�>���J��TU�������� Clostridium�`< C. clostridio-
formeH!tA`C. clostridioforme�R$@p7
F�GH�� (�629�2261) &���'��'�IJ�481&����'�(�)�* +,��!"TEL: 0772�46�3371 8K� 3150=FAX: 0772�46�3371
B Clostridium symbiosum5�8)@i�U �t�B@A< C. clostridioforme����T_`< �LCMB�NI���h< �� 16S ribosomal RNA (16S
rRNA)[,\�-.�X�Y��\/+.&�N�/M.&�N�O tA¡ ���< �� C. clos-
tridioforme, Clostridium bolteae9), Clostridium hathe-
wayi 10�14)� 3_�¡�6����T@1)< ¢�< �A � £ 6 ¤ � � W / ¥ @ ¦ _ Clostridium
citroniae15)%YZ Clostridium aldenense15)��P��TU j�A 5_` C. clostridioforme group�§���1, 16)U �T@m�< ������¨����C��������� Clostridium �` C.
symbiosumI�©� 6_@Qª��j�B�UC. clostridioforme`j�YC�¡�6��T@<«¬=��;�����Rh®Bf2, 4, 17)< j�AI������@i�¯DA��U qT< °±&²S�T��Yf"#B³DIU´���CzRtA< �V&B�* +µhJn5B_$i��`i�WX�_¶·�qh���N@¸�h��¹�º
�E�*Y/+.»¼ Vol. 20 No. 1 2010.
��E�*Y/+.½ 2010
9
9
�������� Vol. 20 No. 1 2010.
� ����� ����
10
10
��������� � ���� �����������
�������������� � !"#$�%%&�'��(��)��*+,��� API 20A-�. Rapid ID32A/�0���1(�%2�0��
�����1. ��2004 113%� 2006 93� 23435��6
278��9����� �:� ;<� =:� ����������>?�%������ @����� �AB�C�DEFGH,� IJK���L��MN��O-�. 16 S ribosomal RNAPQ� (1,486R1,489 bp)�!�$2S�QT������� C.
hathewayi 16U� C. clostridioforme 10U� C. bolteae
11U� C. citroniae 6U� C. aldenense 5U� C. sym-
biosum 12U�V 60U/����2. �� ����������������W� XYGZG[\X]^_;<`
"#$ aAC#$�%&bF,[cdJ+*[e[f��g�#'h a3%5#'f �� !"#�-i�"#$� @�-�.j(�)*/kl0�� m�� +2�U/ AC#$�nopqr�s�#'0� 24h5�48h5� 72h5#'t�u,$v a-w�� @���f /x.0��
3. ���������� ���� !"#$�%y�/�0z�/{|}1~0���*+, API
20A a20A� %&\����Kf ~z23�/y4�{|}1~0� Rapid ID32A a32A� �f /��� ���5-�.�� $v/6���789�������0�� :�W�'��1����� �GI�J�;�~~����/�<0�� 32A����W� a-
galactosidase (a-GAL), b-galactosidase (b-GAL), b-
galactosidase-6-phosphate (b-GP), a-glucosidase (a-
GLU), b-glucosidase (b-GLU), a-arabinosidase (a-
ARA), b-glucuronidase (b-GUR), b-N-acetylgluco-
saminidase (b-NAG)� 8}1W=��3��>$~0�� m�� 20A����W#'h5/ 72h5~0��m����*+,�W��?����@� C. clos-
tridioforme���������1� ��?t����1� ��*+,��� C. clostridioforme~�����xA����2�0��
& '1. �� ��������� (Fig. 1)
g���#'��� !"#�-i�@�W� �������I+,�K�����WB���� ! $C���������@��D�%�!¡W.��%��� j(/.��UW 26U (43¢)����� ��E�W� C. hathewayi (63¢)£ C. citroniae (67¢)
�j(@¤A1¥%��1� C. aldenense (20¢)£ C.
symbiosum (17¢)�WF%�� (Table 2)� 60U����-��� �������/ AC#$�nopqr� 24h5� 48h5� 72h5#'0�u,/G¦0�� ����� u,1-w§��U~¨��U1H©0� 72h5#'�W� 48UWIª 3R5 mm�u,/� «� 12UW� 2 mm�r�D�%�¨��u,/@¤0�¬E1(�~���� ���¨��u,/@¤0�UW� ��� C. symbiosum����� @����W� ���®� 24h5�#'�WJ¯�°�%�±@� K²1££L³0�u,�� -w��u,®W-w�� ´k~� Bacteroides�?µ0���1� 72h5�¶�#'�W� 0·��J¯1M¸N~��� (Fig. 1)� #OW� �'��P#���W££¹#�MQD����� C. symbiosum�´� 5������Wu,@��!¡/.��%���
2. (��)*+,$ Clostridium $���������� ��-.$/0(12+$342�0�R�U���*+, 32A-�. 20A
���6�����5/ Table 1�º0��C. hathewayi 16U� 20 A�-i���xAW
36.4R98.5¢� 32AW��� 99.9¢~¥���xA
Fig. 1. Cellular morphologies and colonies of C. clostridioforme group and C. symbiosuma) Spore stain of C. hathewayib) Gram stain of C. clostridioformec) Gram stain of C. bolteaed) Gram stain of C. citroniaee) Gram stain of C. aldenensef) Gram stain of C. symbiosum
g) C. clostridioforme group and C. symbiosum on Anaero-Columbia agar with rabbit blood after 72h of incubation. Colonies of C. clostridioforme group (right) are circular with slight irregular
edges and attained a diameter of 3�5 mm. In comparison, C. symbiosum (left) forms small colony.
Clostridium clostridioforme group����»��2�Clostridium clostridioforme group����»��2�
%&�>=�� ¼½ Vol. 20 No. 1 2010. 11
11
Tab
le1
.Id
enti
fica
tio
nb
yu
seo
fA
PI
20
Aan
dR
apid
ID3
2A
Sp
ecie
s
(No
.of
iso
late
s)
AP
I2
0A
AP
I2
0A
Rap
idID
32
AR
apid
ID3
2A
Pro
file
No
.S
pec
ies
and�
IDo
bta
ined
by
AP
I2
0A
No
.of
iso
late
sP
rofi
leN
o.
Sp
ecie
san
d�
IDo
bta
ined
by
Rap
idID
32
AN
o.o
f
iso
late
s
C.
hat
hew
ayi
(16
)4
67
46
30
1C
.cl
ost
rid
iofo
rme
56
.01
45
71
04
00
00
C.
clo
stri
dio
form
e9
9.9
14
67
56
33
0C
.cl
ost
rid
iofo
rme
49
.22
45
75
04
40
00
C.
clo
stri
dio
form
e9
9.9
14
67
56
33
1C
.cl
ost
rid
iofo
rme
98
.52
45
77
04
00
00
C.
clo
stri
dio
form
e9
9.9
54
67
56
73
0C
.cl
ost
rid
iofo
rme
36
.44
45
77
04
40
00
C.
clo
stri
dio
form
e9
9.9
64
67
56
73
1C
.cl
ost
rid
iofo
rme
62
.87
45
77
04
40
20
C.
clo
stri
dio
form
e9
9.9
3
C.
clos
trid
iofo
rme
(10
)0
01
00
02
0P
.pr
opio
nic
us/
avid
um
58
.01
41
50
00
00
00
C.
bara
tii
49
.8,
C.
clo
stri
dio
form
e3
2.6
30
06
04
00
0F
uso
bact
eriu
mm
orti
feru
m8
6.1
14
55
00
00
00
0C
.cl
ost
rid
iofo
rme
56
.3,C
.be
ijer
inck
ii/b
uty
ricu
m2
7.9
54
00
44
23
1C
.cl
ost
rid
iofo
rme
14
55
00
40
00
0C
.cl
ost
rid
iofo
rme
99
.92
42
14
42
31
C.
clo
stri
dio
form
e,B
.d
ista
son
is1
42
64
40
30
B.d
ista
son
is1
44
04
42
30
Fu
soba
cter
ium
mor
tife
rum
65
.61
44
70
40
20
Fu
soba
cter
ium
mor
tife
rum
98
.91
46
75
40
10
B.
dis
taso
nis
27
.91
46
75
40
31
C.
clo
stri
dio
form
e8
9.0
14
67
54
23
0C
.cl
ost
rid
iofo
rme
11
.71
C.
bolt
eae
(11
)0
00
00
00
0�
44
50
00
00
00
0C
.be
ijer
inck
ii/b
uty
ricu
m8
9.4
30
00
00
00
1C
.his
toly
ticu
m5
1.3
34
54
00
00
00
0C
.be
ijer
inck
ii/b
uty
ricu
m5
2.0
,C.
fall
ax1
8.2
,C.
clo
stri
dio
form
e1
6.2
70
45
14
33
1C
.cl
ost
rid
iofo
rme
99
.91
47
50
00
00
00
C.
tert
ium
36
.6,C
.be
ijer
inck
ii/b
uty
ricu
m3
5.4
,C.
bara
tii
23
.21
20
01
00
20
B.
ure
olyt
icu
s1
44
10
43
31
C.
clo
stri
dio
form
e1
44
75
40
31
C.
clo
stri
dio
form
e9
7.5
1
C.
citr
onia
e(6
)1
00
00
01
0F
.n
ecro
phor
um
/nu
clea
tum
95
.91
00
40
20
00
00
F.
nec
roph
oru
m9
1.1
11
01
00
03
1C
.bo
tuli
nu
m/s
poro
gen
es1
00
40
60
00
00
F.
nec
roph
oru
m9
9.8
45
41
04
03
0P
.in
term
edia
/dis
ien
s9
7.0
14
04
02
00
00
0F
.n
ecro
phor
um
84
.61
54
14
40
31
C.
clo
stri
dio
form
e1
54
55
40
31
C.
clo
stri
dio
form
e1
54
55
60
31
C.
clo
stri
dio
form
e1
C.
ald
enen
se(5
)1
00
00
00
0F
.n
ecro
phor
um
/nu
clea
tum
68
.01
41
00
20
00
00
C.
clo
stri
dio
form
e8
7.7
11
04
54
20
0B
.st
erco
ris/
egge
rth
ii9
9.9
14
12
02
00
00
0C
.cl
ost
rid
iofo
rme
96
.32
14
51
02
01
C.
clo
stri
dio
form
e1
41
20
60
00
00
C.
clo
stri
dio
form
e2
50
55
42
20
B.
ster
cori
s/eg
gert
hii
2
C.
sym
bios
um
(12
)0
00
00
00
0�
60
00
00
00
00
0�
10
01
00
00
0P
.in
term
edia
/dis
ien
s1
01
00
00
00
00
C.
sept
icu
m4
4.3
,C.
fall
ax2
6.1
,C.
botu
lin
um
13
.91
14
00
10
00
1C
.ca
dav
eris
14
10
00
00
0E
.li
mos
um
97
.62
41
01
00
01
C.
cad
aver
is1
41
01
40
00
P.
prop
ion
icu
s/av
idu
m5
0.0
1
������������
12
12
�� ����� Vol. 20 No. 1 2010.
Tab
le2
.R
esu
lts
of
bio
chem
ical
reac
tio
nin
com
mer
cial
iden
tifi
cati
on
kit
sfo
rst
rain
sid
enti
fied
by
16
SrR
NA
seq
uen
cin
g
Sp
ecie
s(N
o.o
fis
ola
tes)
Str
ain
No
.
AP
I2
0A
pro
file
No
.
DNI
ULG
NA M
C AL
C AS
L A M
L AS
L YX
ARA
CSE
LEC
E N M
ZL M
F AR
ORS
AHR
ERT
er opS
Rap
idID
32
Ap
rofi
leN
o.
L AG- a
L AG- b
ULG- a
ULG- b
ARA- a
RUG- b
GAN- b
E N M
F AR
DNI
L AP
AGL
Ar yP
C.
hat
hew
ayi
(16
)
74
67
56
33
0������������������
45
77
04
40
00�������������
84
67
56
73
1������������������
45
75
04
40
00�������������
12
46
75
67
30������������������
45
77
04
40
00�������������
18
46
75
67
30������������������
45
77
04
40
20�������������
19
46
75
67
31������������������
45
77
04
40
20�������������
20
46
74
63
01������������������
45
77
04
00
00�������������
21
46
75
67
31������������������
45
77
04
00
00�������������
32
46
75
67
31������������������
45
77
04
00
00�������������
35
46
75
67
31������������������
45
77
04
40
00�������������
43
46
75
67
31������������������
45
77
04
40
00�������������
44
46
75
63
30������������������
45
77
04
00
00�������������
46
46
75
67
30������������������
45
77
04
00
00�������������
47
46
75
63
31������������������
45
77
04
40
20�������������
57
46
75
67
30������������������
45
77
04
40
00�������������
58
46
75
63
31������������������
45
71
04
00
00�������������
61
46
75
67
31������������������
45
77
04
40
00�������������
C.
clos
trid
iofo
rme
(10
)
94
67
54
01
0������������������
45
50
04
00
00�������������
14
42
64
40
30������������������
45
50
04
00
00�������������
17
00
60
40
00������������������
41
50
00
00
00�������������
22
42
14
42
31������������������
41
50
00
00
00�������������
31
46
75
40
31������������������
45
50
00
00
00�������������
36
00
10
00
20������������������
45
50
00
00
00�������������
37
44
70
40
20������������������
45
50
00
00
00�������������
39
46
75
42
30������������������
45
50
00
00
00�������������
56
40
04
42
31������������������
45
50
00
00
00�������������
62
44
04
42
30������������������
41
50
00
00
00�������������
C.
bolt
eae
(11
)
20
00
00
00
0������������������
45
40
00
00
00�������������
60
00
00
00
0������������������
45
40
00
00
00�������������
16
04
51
43
31������������������
45
00
00
00
00�������������
24
44
75
40
31������������������
45
40
00
00
00�������������
27
00
00
00
00������������������
45
00
00
00
00�������������
29
00
00
00
00������������������
45
40
00
00
00�������������
40
00
00
00
01������������������
45
00
00
00
00�������������
41
00
00
00
01������������������
47
50
00
00
00�������������
49
44
10
43
31������������������
45
40
00
00
00�������������
52
20
01
00
20������������������
45
40
00
00
00�������������
54
00
00
00
01������������������
45
40
00
00
00�������������
Clostridium clostridioforme group�������Clostridium clostridioforme group�������
13
13
� �������� Vol. 20 No. 1 2010.
Tab
le2
.(C
on
tin
ued
)
Sp
ecie
s(n
um
ber
of
iso
late
s)S
trai
nN
o.
AP
I2
0A
pro
file
No
.
DNI
ULG
NA M
C AL
C AS
L A M
L AS
L YX
ARA
CSE
LEC
E N M
ZL M
F AR
ORS
AHR
ERT
er opS
Rap
idID
32
Ap
rofi
leN
o.
L AG- a
L AG- b
ULG- a
ULG- b
ARA- a
RUG- b
GAN- b
E N M
F AR
DNI
L AP
AGL
Ar yP
C.
citr
onia
e(6
)
10
54
55
40
31������������������
00
40
60
00
00�������������
11
54
55
60
31������������������
00
40
60
00
00�������������
34
54
14
40
31������������������
00
40
20
00
00�������������
42
10
00
00
10������������������
00
40
60
00
00�������������
45
54
10
40
30������������������
00
40
60
00
00�������������
51
10
10
00
31������������������
40
40
20
00
00�������������
C.
ald
enen
se(5
)
31
04
54
20
0������������������
41
00
20
00
00�������������
45
05
54
22
0������������������
41
20
20
00
00�������������
15
14
51
02
01������������������
41
30
60
00
00�������������
25
10
00
00
00������������������
41
20
20
00
00�������������
30
50
55
42
20������������������
41
20
60
00
00�������������
C.
sym
bios
um
(12
)
10
00
00
00
0������������������
01
00
00
00
00�������������
54
10
00
00
0������������������
01
00
00
00
00�������������
13
41
00
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
23
00
00
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
26
00
00
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
28
40
01
00
01������������������
00
00
00
00
00�������������
33
00
00
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
50
00
00
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
53
00
00
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
55
41
01
00
01������������������
01
00
00
00
00�������������
59
00
10
00
00������������������
01
00
00
00
00�������������
60
41
01
40
00������������������
01
00
00
00
00�������������
Ab
bre
via
tio
ns:
IND
,in
do
lep
rod
uct
ion
;G
LU
,g
luco
se;
MA
N,
man
nit
ol;
LA
C,
lact
ose
;S
AC
,su
cro
se;
MA
L,
mal
tose
;S
AL
,sa
lici
n;
XY
L,
xy
lose
;A
RA
,ar
abin
ose
;E
SC
,es
culi
ne
hy
dro
lysi
s;C
EL
,ce
llo
bio
se;
MN
E,
man
no
se;
ML
Z,
mel
ezit
ose
;R
AF
,ra
$n
ose
;S
OR
,so
rbit
ol;
RH
A,
rham
no
se;
TR
E,
treh
alo
se;
a-G
AL�
a-g
alac
tosi
das
e;b
-GA
L�
b-g
alac
tosi
das
e;a
-GL
U�
a-g
luco
sid
ase;
b-G
LU�
b-g
luco
sid
ase;
a-A
RA�
a-a
rab
ino
sid
ase;
b-G
UR�
b-g
lucu
ron
idas
e;b
-NA
G�
b-N
-ace
tylg
luco
sam
inid
ase;
PA
L,
alk
alin
ep
ho
sph
atas
e;L
GA
,le
ucy
l-g
lyci
ne
ary
lam
idas
e;P
yrA
,p
yro
glu
tam
icac
idar
yla
mid
ase;�
,p
osi
tiv
ere
acti
on
tob
ioch
emic
al;��
neg
ativ
ere
acti
on
.
14
14 ������������
�� ����� Vol. 20 No. 1 2010.
� C. clostridioforme������� C. clostridio-
forme 10� 20A 4�� C. clostridioforme������ 1� ���������� �� Fu-
sobacterium mortiferum�� ������������� !�"�#�� 32A$%& C. clostridio-
forme �������� ���� 32.6'99.9(�))��#�� C. bolteae 11� 20A� 2� �97.5'99.9(��#�� ��*��+,����-� �.�������� 32A 7�� C.
clostridioforme ���������� 16.2(��, �� Clostridium species/�������� C.
citroniae012 C. aldenense�3�&4 20A�����56&�, �.������ !��#�� 32A� C. citroniae $%& Fusobacterium
necrophorum � � � � � � � � � � � � C.
aldenense C. clostridioforme �����������#�� C. symbiosum�7� 89:�0�&4 C. clostridioforme���������#��;� <��89: =�>?@ABCD Table 2
��E+�� -� Table 3��F��G�+�H�I��3�&JK LM��N+�� C. symbiosum
12�O�+&�N�PQ�>?@ABCDE+��89: 32A� b-GAL ������$%& *��� $�RS profile No.� 0100000000
��� 0000000000��� C. clostridioforme
group� H���T��#�� -� BUVWC�X��. �� C. symbiosum �� a-GAL����#�� 20A�4*��+�� QY�����6 C. bolteae��� H�))Z���#��
C. clostridioforme group [S C. hathewayi, C.
citroniae, C. aldenense 3�.�3�&��89:� �\]����F 5), 9), 10), 15)�^_����\]�� (Table 3)��`Q�+��$�RS C. hathewayi� 20A�0a� lactose
(LAC), salicin (SAL), melezitose (MLZ), ra$nose
(RAF), cellobiose (CEL), 32A� b-GAL, a-GAL,
b-NAG, a-ARA�� ���� 100(��#�� +�+ �� �.� H��b4���I� CEL, b-
NAG, a-ARA��� BUVWC�X� �� �.�c�� I�$%&����#�� C. citro-
niae, C. aldenense $%&BUVWCDX�+���� �.�X���#�� c�� 2�. b4���H�I� rhamnose (RHA)� b-GUR, b-
GAL��� �d�<e �� �� �� fd�<e �� �� ����#��Q� C. clostridioforme� C. bolteae�3�&
20A�>?@ABC� !����Q�."�g#+�*�DE$I��h�, -� $�.D�i�H�j������#�� 32A� b-GLU
� C. clostridioforme �$%&�� C. bolteae � 1
�Dk�&����#��
� �l� R�R� m%4)� C. clostridioforme
group� C. symbiosum �7�4no�� &'pq ��r(s)t) $�RSufr()*+v�w,+�r(s -.r( xC:yU/01 @Cz{|2 }~30� �������45�&'��&'s6 60.4(D�\���uf 7;r(�86&��� -� C. hathewayi9�:� !DE+�c�) C. clostridiofome) C. symbiosum��;<��&'��[��.���c��� c��@9:�WC� Clostridium��=��� r(s�0�&�>�no����������c�� R���0�& C. clostridioforme
group�?$�@���A��%&56&�, �B� C������� �����D��+&������� ��89:�1� Bacteroides) Fusobac-
terium����������$�c�� ��c�� �B Clostridium QE��F-�
�+��G��������� JK m%� �H no������I;J��� AC;J�0�& c �O 43(�?zW ���(K��F ���j���� C� C. hathewayi� 62(��FD@6�� +��#& LpM,��$�c����N5���DO�c��j����������� -� �F�������P��0�&4 �C�WC�1��FQR ¡18) Ryu ¡18) xUU�¢B£U (VCM)r¤� S¥ TU� Fusobacte-
rium ) Bacteroides Dk�$��6 VW FM;J)x¦§?B¨©Xª{©¦yU (BBE);J� Y« ¡��Di¬$�Z�j�����������
C. clostridioforme�® 1[�¯&S����c�� �O °G�.� ��±��H��89: ¨W²³W©�´_��&���� -� ¨W²³W©�´_��&�� C. clostridioforme�3�&4µ[ !� ���O����6��\5��, QE]�^m¶·� ��Z���#�� ¸c� JK &}�^]�¹W���1������c�� <�.�3�& �H��89:D_�+��\]���1�ºT���W012�F�^_���
Clostridium clostridioforme group ���w$�m%Clostridium clostridioforme group ���w$�m%
`ab»]�^]¼½ Vol. 20 No. 1 2010. 15
15
Tab
le3
.C
om
per
iso
no
fp
hen
oty
pic
char
acte
rist
ics
of
fiv
esp
ecie
sin
the
C.
clos
trid
iofo
rme
gro
up
and
C.
sym
bios
um
bet
wee
nth
eo
ur
iso
late
san
dre
fere
nce
s5,9
,10
,15
)
Ph
eno
typ
ic
char
acte
rist
ics
Res
ult
for
spec
ies
(No
.of
stra
ins
test
ed)a
C.
hat
hew
ayi
C.
hat
hew
ayi
C.
clos
trid
iofo
rme
C.
clos
trid
iofo
rme
C.
bolt
eae
C.
bolt
eae
C.
citr
onia
eC
.ci
tron
iae
C.
ald
enen
seC
.al
den
ense
C.
sym
bios
um
C.
sym
bios
um
Iso
late
s
(n�
16
)R
efer
ence
Iso
late
s
(n�
10
)R
efer
ence
Iso
late
s
(n�
11
)R
efer
ence
Iso
late
s
(n�
6)
Ref
eren
ceIs
ola
tes
(n�
5)
Ref
eren
ceIs
ola
tes
(n�
12
)R
efer
ence
Gra
mst
ain
app
eara
nce
GN
RG
NR
GN
RG
NR
GN
RG
NR
GN
RG
NR
GN
RG
NR
GN
RG
NR
Sp
ore
s6
33
05
56
72
01
7E
scu
lin
eh
yd
roly
sisb
10
0�
70
�9
�5
06
00
�In
do
lep
rod
uct
ion
b0
00
00
01
00
10
01
00
10
00
�F
erm
enta
tio
no
fb :L
acto
se1
00
10
05
01
00
27
17
01
07
70
�S
alic
in1
00
97
60
10
09
16
00
08
0�
Mel
ezit
ose
10
09
80
01
88
30
00
00
�S
orb
ito
l6
9�
0�
0�
00
0�
Ra$
no
se1
00
96
40
10
01
87
00
08
01
00
0�
Rh
amn
ose
94
69
70
10
02
77
11
00
10
00
00
�G
luco
se1
00
�8
01
86
74
04
2M
ann
ito
l0
00
00
33
Su
cro
se1
00
60
27
67
20
0M
alto
se1
00
�6
02
78
36
08
Xy
lose
10
0�
60
18
33
80
0A
rab
ino
se9
4�
30
27
33
80
25
Cel
lob
iose
10
0�
00
17
00
Man
no
se1
00
�9
02
76
76
08
Tre
hal
ose
94
�8
03
68
34
00
En
zym
ere
acti
on
c
b-G
lucu
ron
idas
e1
00
�1
00
�7
3�
10
00
0b
-Gal
acto
sid
ase
10
01
00
10
05
01
00
10
00
01
00
10
09
2a
-Gal
acto
sid
ase
10
01
00
10
05
01
00
10
01
70
10
01
00
0b
-N-A
cety
lglu
cosa
min
idas
e1
00
10
00
00
00
00
00
a-A
rab
ino
sid
ase
10
01
00
00
00
00
80
92
0a
-Glu
cosi
das
e1
00
70
10
00
00
b-G
luco
sid
ase
10
01
00
90
20
0A
lkal
ine
ph
osp
hat
ase
00
00
00
67
10
04
09
20
Leu
cyl-
gly
cin
ear
yla
mid
ase
10
02
00
00
0P
yro
glu
tam
icac
idar
yla
mid
ase
63
00
00
0G
asli
qu
idch
rom
ato
gra
ph
y0
Bu
tyri
cac
id�
��
��
��
��
aN
um
ber
sre
pre
sen
tp
erce
nta
ges
of
po
siti
ve
resu
lt.�
,p
osi
tiv
ere
acti
on
tob
ioch
emic
al;��
neg
ativ
ere
acti
on
.b
Tes
ted
by
AP
I2
0A
.c
Tes
ted
by
Rap
idID
32
A.
������������
16
16
�� ����� Vol. 20 No. 1 2010.
������������ � ������������� C. clostridio-
forme group���������������� � C. hathewayi�� !"�� ������#$�% C. clostridioforme������&'���(� $($� )�*(� C. clostridioforme group��+�&���� 32 A� C. clostridioforme � C.
aldenense �� �, C. clostridioforme ����-���.-� �� ���/� ��(� *(��+�0����� C. clostridioforme group�1� �2� 3�� C. symbiosum �� ��45� 72
45�6�7�8��� 9:;<��-����=� >��?'� �� ��������@��$�(A%�� �B�?�C�� �D�E��=�����FG���HI����JK�8L� C. hathewayi, C. citro-
niae, C. aldenense�M���� WarrenA� N$�FG��15)� !� LAC, SAL, MLZ, RAF, RHA�O�"�PQRST<UV��W#�$�� ����� 20AQ 32A���@�$$%��� >��?� $($� CX bolteae� C. clostridioforme�M���� �FG����=�3��?'/Y������Z�&G �� '(�[\A�� SongA��C. clostridioforme � C. bolteae� 16S rRNA]H)*�+ 3^�,_�?� � 2�+�=��� �FG���=�>��?'� -`�� sorbitol (SOR), MLZ
a�� LAC, SAL, esculin (ESC)� b-GLU.�� b`�� SOR, MLZ.�� LAC, SAL, ESCa��?��cd���9)� $($� !"������ 8��e/$��f g�,�(� 7�hi� C. clostridio-
forme�M���� h�h� �Z�&G j0���$f�� LAC, SAL, ESC a��f%g�,�(� � C. bolteae��� SOR, MLZ a��f 1( (Table 3)� WarrenA%� C. clostridio-
forme��@kl<S� LAC�27��@ 13�LAC�W#�$ C. clostridioforme� C. bolteae�=��3�m�cd��� 15)� !"����%LAC�M���no 13�� 8�A 2�+5�=�W#�7���456�[\A�� �� RST<Ua�� 3�+�pi� C. hathewayi ������1,�Jqr7�.��E7��2$�� C. clos-
tridioforme� C. bolteae� 2�+�s�%.��E7r7 g�,� C. hathewayi�b` 2�+��5�������t:uvRUkl<S��-'�$w xA�8��M��%� !"�h�h��no�WarrenA���no��y�?� WarrenA
�� 8��p�t:uvRUkl<S �(��8��z$�� C. clostridioforme � C. bolteae � 2�+ {89�G �|�}:z~�?���2$� C.
hathewayi ;�}:�?�<�M����$���15)� Finegold A�� C. hathewayi, C. clostridio-
forme, C. bolteae� 3�+���7��� PCR0� N$��� 16)� C. clostridioforme, C. bolteae�2�+�=����%��$�&'4)� ���>������U� PCR���8� 2�+�=�7�������[\A��� $ �� RST<U?V�� C. clostridioforme group����M���� �B�������B�=��-��@���� C.
hathewayi��@���� C. clostridioforme/bolteae
�=���O��� 56�[\A�� RST<U.�� 2�+�� FinegoldA��-� N1)�������&A � C. clostridioforme group� 3�+�K�������� $($� WarrenA��'RST<UV�f�RST<U?V��@� 3�+�A�1 ���8�� 16S rRNA�]H)*�/� ��B� 3�+� 96�98^�?�8�(A� C�+�$�D���� !"� h�h�%8�A 2�+����;������ � RST<U.��8�A 2�+5�!"��E�����������&��%� Warren E$�p� RAF� RHA��@�O��B�=��-� 8�A�=���� 16S
rRNA�]H)*PF������*��/$(Table 2)�!"JK�p�� 8�A����M����;�
�����������@�$7�8���m�+�%����>��?'� ��$��;���� �¡�� �B�G¢>��?�� 7�hi� 3
H5�£¤��� Bacteroides�����-��QQ¥u�¦I 9§$¨e�� ©¥ªJ«�Y¬$KL��©¥ªa�M��?¨e�N���>���[\�� )$� Ryu�JqQ VCM��'©¥ª.���?�8��/O$�������$7�¡� ������+�M��%��>��?�� !�N������®(A�;��¨e��¯��°(�?�� ®���±�U(A�©¥ªJ«²x��� Bacteroides�O£¤�©¥ªa�M��J«� ³���2$� PQ´����$1��J«��?��� 1�R�� ����N����=��¯��°(�?'� E. coli�O��0P���µS¶T�·¸�%?�4)� $ �� 8�A����¹���p�Uº(A%!bV�$�W»�G¢$��,d-���[\A��
Clostridium clostridioforme group����z7���Clostridium clostridioforme group����z7���
HN>�X�&G¼½ Vol. 20 No. 1 2010. 17
17
� �1) Finegold, S. M. 2004. Changes in taxonomy,
anaerobes associated with humans, 2001�2004.Anaerobe 10: 309�312.
2) Finegold, S. M., S. S. John, A. W. Vu, et al. 2004.In vitro activity of ramoplanin and comparatordrugs against anaerobic intestinal bacteriafrom the perspective of potential utility inpathology involving bowel flora. Anaerobe 10:205�211.
3) Allen, S. D., C. L. Emery, D. M. Lyerly. 2003�Clostridium. p. 835�856, In: Manual of clinicalmicrobiology, 8th ed. (P. R. Murray, E. J. Baron,J. H. Jorgensen, et al. ed.), American Society forMicrobiology, Washington, D.C.
4) ����� ���� ���� 2008.��������� Clostridium�������� !"#$%&'()� '*+,-. 82: 205�212.
5) Kaneuchi, C., K. Watanabe, A Terada, et al.1976. Taxonomic study of Bacteroides clos-tridiiformis subsp. clostridiiformis (Burri andAnkersmit) Holdeman and Moore and of re-lated organisms: Proposal of Clostridium clos-tridiiforme (Burri and Ankersmit) comb. nov.and Clostridium symbiosum (Stevens) comb.nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 26: 195�204.
6) Elsayed, S., K. Zhang. 2004. Bacteremia causedby Clostridium symbiosum. J. Clin. Microbiol.42: 4390�4392.
7) /012� ���� 3456� 7� 1996.89:;<=>9��� !$?�@ABCDEFGH)IJ+� 1+K� L���MNO,-. 6:56�60.
8) Decousser, J. W., C. Bartizel, M. Zamni, et al.2007. Clostridium symbiosum as a cause ofbloodstream infection in an immunocompetentpatient. Anaerobe 13: 166�169.
9) Song, Y., C. Liu, D. R. Molitoris, et al. 2003.
Clostridium bolteae sp. nov., isolated from hu-man sources. Syst. Appl. Microbiol. 26: 84�89.
10) Steer, T., M. D. Collins, G. R. Gibson, et al. 2001.Clostridium hathewayi sp. nov., from humanfaeces. Syst. Appl. Microbiol. 24: 353�357.
11) Woo, P. C., S. K. Lau, G. K. Woo, et al. 2004.Bacteremia due to Clostridium hathewayi in apatient with acute appendicitis. J. Clin. Micro-biol. 42: 5947�5949.
12) Elsayed, S., K. Zhang. 2004. Human infectioncaused by Clostridium hathewayi. Emerg. In-fect. Dis. 10: 1950�1952.
13) Linscott A. J., R. B. Flamholtz, D. Shukla, et al.2004. Fatal septicemia due to Clostridiumhathewayi and Campylobacter hominis. Anaer-obe 11: 97�98.
14) Ramlachan, N., R. C. Anderson, K. Andrews, etal. 2007. Characterization of an antibiotic resis-tant Clostridium hathewayi strain from a con-tinuous-flow exclusion chemostat culture de-rived from the cecal contents of a feral pig.Anaerobe 13: 153�160.
15) Warren, Y. A., K. L. Tyrell, D. M. Citron, et al.2006. Clostridium aldenense sp. nov. and Clos-tridium citroniae sp. nov. isolated from humanclinical infections. J. Clin. Microbiol. 44: 2416�2422.
16) Song, Y., C. Liu, S. M. Finegold. 2005. MultiplexPCR for rapid di#erentiation of three species inthe “Clostridium clostridioforme group.” FEMSMicrobiol. Lett. 244: 391�395.
17) Finegold, S. M., Y. Song, C. Liu, et al. 2005.Clostridium clostridioforme : A mixture of threeclinically important species. Eur. J. Clin. Micro-biol. Infect. Dis. 24: 319�324.
18) PQRS TU� 1997. ��GH)IVWX ’97.@AVWX� L�M. 7(S-1): 91�106.
L���MNO,-. Vol. 20 No. 1 2010.
����Y7����Y7
18
18
Morphological and Biochemical Identification of Cigar-Shaped Clostridia
Yasushi Daimon,1) Kaori Tanaka,2) Kunitomo Watanabe2)
1) Clinical Laboratory, Kyoto Prefectural Yosanoumi Hospital2) Division of Anaerobe Research, Life Science Research Center, Gifu University
Clostridium clostridioforme has been known to be phenotypically heterogeneous species with cigar-shaped morphology. Recent taxonomic studies have shown that C. clostridioforme represents five distinctspecies in the C. clostridioforme group: Clostridium hathewayi, C. clostridioforme, Clostridium bolteae,Clostridium citroniae, and Clostridium aldenense. A total of 60 strains isolated in our laboratory as thecigar-shaped clostridia were identified through end-product analysis and 16S rRNA sequencing as follows:C. hathewayi (16 strains), C. clostridioforme (10), C. bolteae (11), C. citroniae (6), C. aldenense (5), and C.symbiosum (12). Biochemical characteristics for those isolates were investigated using commerciallyavailable identification kits. C. citroniae and C. aldenense were distinguished from each other by the resultsfor rhamnose, b-glucuronidase, b-galactocidase (C. citroniae : �, �, �, C. aldenense � �, �, �, respectively),although both of them were indole positive. C. hathewayi was di#erentiated from other species in C.clostridioforme group by the positive reaction of cellobiose, a-arabinosidase, N-acetylglucosaminidase. Itwas di$cult to distinguish between C. clostridioforme and C. bolteae by phenotypic characteristics. C.symbiosum was distinguishable from C. clostridioforme group in colonial size.
Clostridium clostridioforme group�������Clostridium clostridioforme group�������
��������� Vol. 20 No. 1 2010. 19
19