Ö øøöÿ ê üdî - fisheries · ö....
TRANSCRIPT
การใชแผนฟลมและการฉดพนไคโตซานและไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมในการ
ถนอมผลตภณฑประมง
The Application of Chitosan Film and Spraying Chitosan with Garlic Extract
for Preservation of Seafood Product
สรรตน จงฤทธพร Sirirat Jongrittiporn
กองพฒนาอตสาหกรรมสตวนา Fishery Technological Development Division
กรมประมง Department of Fisheries
กระทรวงเกษตรและสหกรณ Ministry of Agriculture and Cooperatives
เอกสารวชาการฉบบท ๒/๒๕๔๙ Technical Paper No. 2/2006
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
การใชแผนฟลมและการฉดพนไคโตซานและไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมในการ
ถนอมผลตภณฑประมง
The Application of Chitosan Film and Spraying Chitosan with Garlic Extract
for Preservation of Seafood Product
สรรตน จงฤทธพร Sirirat Jongrittiporn
กองพฒนาอตสาหกรรมสตวนา Fishery Technological Development Division
กรมประมง Department of Fisheries
๒๕๔๙ 2549
รหสทะเบยนวจย 47 – 0805 - 47015
Technical Paper No. 2/2006 เอกสารวชาการฉบบท ๒/๒๕๔๙
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
สารบญ
เรอง หนา
บทคดยอ 1
Abstract 3
คานา 5
วตถประสงค 6
วธดาเนนการ 7
1.วสดและอปกรณ 7
2.วธการทดลอง 7
1.การทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol 1% แผนฟลมไคโตซาน 7
ผสม dextrin 0.5% และการทดสอบคณสมบตของแผนฟลมทได
2.การทาแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม และ 8
ทดสอบการยบย งการเจรญเตบโตของ Aspergillus awamori และ Penicillium
roqueforti
3.การใชไคโตซานในการเกบรกษากงแหงโดยวธการฉดพนและแผนฟลม 9
ผลการทดลองและวจารณ 10
1.การทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol 1% แผนฟลมไคโตซานผสม 10
dextrin 0.5% และการทดสอบคณสมบตของแผนฟลม
2.การทาแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม และทดสอบการ 11
ยบย งการเจรญเตบโตของ Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti
3.การใชแผนฟลมไคโตซานและการฉดพนในการเกบรกษากงแหง 15
สรปผลการทดลอง 20
คาขอบคณ 21
เอกสารอางอง 22
ภาคผนวกท 1 24
ภาคผนวกท 2 28
ภาคผนวกท 3 29
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
สารบญตาราง
ตารางท หนา
1. ผลการทดสอบคณสมบตดานตางๆ ของแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสม 11
dextrin 0.5%
2. ผลการเจรญของ Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti บนอาหารเลยงเชอ PDA 13
ทเวลาตางๆ
ตารางภาคผนวกท
1.การวเคราะหความแปรปรวนของคะแนนการยอมรบทางดานลกษณะปรากฏ ส กลน รสชาต 24
และเนอสมผสของกงแหงขณะเกบรกษา
2. การวเคราะหความแปรปรวนของแบคทเรยทงหมดของกงแหงขณะเกบรกษา 25
3. การวเคราะหความแปรปรวนของราของกงแหงขณะเกบรกษา 25
4. การวเคราะหความแปรปรวนของปรมาณดางระเหยไดของกงแหงขณะเกบรกษา 26
5.จานวนแบคทเรยทงหมด (TPC) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห 26
6.จานวนราทงหมดในอาหารเลยงเชอ Potato dextrose agar (PDA) ทสปดาหตาง ๆ 27
ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
7.ปรมาณ Total volatile base (TVB) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห 27
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
สารบญภาพ
ภาพท หนา
1. ลกษณะแผนฟลมไคโตซานผสมdextrin 0.5% แผนฟลมไคโตซาน 10
แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol 1%ทได
2. โซนใสทเกดขนรอบแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม 14
ในอาหารเลยงเชอ PDA ทม Penicillium roqueforti และ Aspergillus awamori เจรญอย
3. คะแนนการประเมนคณภาพดานลกษณะปรากฏ ส กลน รสชาต และเนอสมผส ของกงแหงขณะ 17
เกบรกษา
4.จานวนแบคทเรยทงหมด (TPC) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห 18
5.จานวนราทงหมดในอาหารเลยงเชอ Potato dextrose agar (PDA) ทสปดาหตาง ๆ 18
ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
6.ปรมาณ Total volatile base (TVB) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห 19
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
การใชแผนฟลมและการฉดพนไคโตซานและไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมในการ
ถนอมผลตภณฑประมง
สรรตน จงฤทธพร ๑
กลมวจยเทคโนโลยชวภาพ กองพฒนาอตสาหกรรมสตวน า กรมประมง
บทคดยอ
ทดลองทาแผนฟลมไคโตซาน โดยใชไคโตซานความเขมขน 0.5 % และไคโตซาน 0.5 % ผสม
dextrin 0.5 % และไคโตซานผสม glycerol 1% พบวาแผนฟลมไคโตซานและแผนฟลมไคโตซานผสม
dextrin 0.5 % มลกษณะเปนแผนฟลมคงรปรางสมบรณ แตแผนฟลมไคโตซานผสม glycerol 1%
มลกษณะเปนแผนฟลมทมวนงอไมคงรป ในการทดสอบคณสมบตของแผนฟลมไคโตซานผสมd e x t r i n
0.5 % และแผนฟลมไคโตซานมผลดงนคอคาตานทานแรงดง 12.4 (N) และ 4.24 (N) คาความตานทานการ
ซมผานไอนา 84.1 และ 62.96 g/m2/day และคาการซม ผานออกซเจนเทากบ 3136 และ 2797 cc/m2/day
ตามลาดบ
การทดสอบประสทธภาพการยบย งการเจรญของรา Penicillium roqueforti และ Aspergillus
awamori ของแผนฟลมไคโตซานและแผนฟลมไคโตซานทผสมสารสกดกระเทยม 2.5% บนเพลทอาหาร
เลยงเชอทใสราลงไปจานวน 103 CFU/ml พบวาแผนฟลมไคโตซานสามารถยบย งการเจรญของราทงสอง
ชนด โดยไมพบการเจรญของราบนแผนฟลมตลอดระยะเวลา 10 วน ทอณหภม 30oC สวนการผสมสารสกด
กระเทยมในแผนฟลมชวยเพมประสทธภาพการยบย งการเจรญของราโดยสงเกตเหนบนอาหารเลยงเชอพบ
สวนใสรอบๆ แผนฟลมดงกลาว การผลตแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมพบวา สารสกด
กระเทยมจบตวกนเปนกอนขณะขนรปเปนแผนฟลมซงทาใหพนผวแผนฟลมทไดไมเรยบสมาเสมอ มรและ
รอยแตก ไมสามารถนาไปใชเปนบรรจภณฑได
การทดลองการเกบรกษากงแหง โดยใชแผนฟลมไคโตซาน และการฉดพนไคโตซานและ
ไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม แบงการทดลองออกเปน 7 ชดทดลอง ไดแก A :กงแหงชดควบคม B:กง
แหงทฉดพนดวยสารละลายไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม C : กงแหงฉดพนสารละลายไคโตซาน และ
D: กงแหงฉดพนสารสกดกระเทยม E:กงแหงทหอดวยแผนฟลมไคโตซานและแผนฟลมพลาสตก F: กง
แหงทหอดวยแผนฟลมพลาสตก และ H : กงแหงทหอดวยแผนฟลมไคโตซาน ตามลาดบ ระหวางการเกบ
รกษาทอณหภมหอง ( 3 0 - 3 5 o C ) สมตวอยางตรวจคณภาพโดยผทดสอบและวเคราะหจานวนแบคทเรย
ทงหมด (TPC) ยสตและรา และวเคราะหคาดางระเหยทงหมด (TVB) ตวอยาง B และ C มคา TPC ยสต
และรา ตากวาตวอยางอน ๆ แตพบวาคา TVB ของ A –D มคาสงกวา E, F, และ H สวนคะแนนประเมน
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
2
คณภาพโดยผทดสอบพบวาตวอยาง B C E F และH มคณภาพเปนทยอมรบทกดาน ลกษณะปรากฏ, ส,
กลน, รสชาต, และเนอสมผสตลอดระยะเวลาการเกบรกษา 9 สปดาห สวน A และ D ไมเปนทยอมรบดาน
ลกษณะปรากฏ เพราะพบราในตวอยางหลงจากเกบรกษาได 3 สปดาห
คาสาคญ : แผนฟลมไคโตซาน สารสกดกระเทยม กงแหง การเกบรกษา
๑เกษตร-กลาง ลาดยาว จตจกร กรงเทพฯ ๑๐๙๐๐ โทร. ๐ ๒๙๔๐๖๑๓๐-๔๕ e-mail :
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
3
The Application of Chitosan Film and Spraying Chitosan with Garlic Extract
for Preservation of Seafood Product
Sirirat Jongrittiporn 1
Aquatic Biotechnology Unit, Fishery Technological Development Division
Department of Fisheries
ABSTRACT
C h i to sa n f i lm we re p rep a red by so lu t ion c a s t in g t ec hn iq ue s u s in g 0 .5 %
chitosan in 1% acetic acid. Two binders; 0.5% dextrin and 1% glycerol were added to chitosan solution in
order to improve the film property. The obtained chitosan film and 0.5% dextrin-chitosan film showed
smooth surface and complete feature, while the 1% glycerol – chitosan film exhibited cling and curling
edges unproper film feature. The properties of chitosan film and 0.5% dextrin-chitosan film; as tensile
strength, water vapor transmission rate, and oxygen transmission rate were 4.24 (N) and 12.4 (N), 62.96
and 84.1g/m2/day, 2797 and 3136 cc/m2/day respectively.
The inhibition effect of chitosan film and 2.5 % allicin-chitosan film on
Aspergillus awamori and Penicillium roqueforti were studied by using spot on lawn technique. No growth
of these two molds was observed on the film surface during ten –day of incubation at 30 0C. The clear zone
was observed around the allicin-chitosan film indicated the antimicrobial enhancement of allicin. However
the addition of allicin in chitosan solution resulted to the uneven surface and failure of film
feature.
The shelf-life of dried shrimp B, C, D treated with the spray of 0.5% chitosan solution with
and without adding of allicin and the spray of allicin respectively were conducted and compared to the
control dried shrimp (A). Dried shrimp ; E, F and H; were wrapped with chitosan film and plastic (PVC)
film , plastic film and chitosan film, respectively.
The changes of total bacterial count; TPC, yeast and mold count, total volatile base (TVB)
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
4
and sensory evaluation were observed during storage at room temperature (30-35 oC) The results showed
TPC and yeast-mold count of B and C were lower than other samples. The TVB of A,B,C and D were
higher than E,F and H. The sensory evaluations showed that all samples were accepted by the panalists
althrough the storage period of 9 weeks The appearance of A and D were unaccepted after three-week of
storage because the appearance of mold were observed.
Key word : Chitosan Film, Garlic Extract(Allicin), Dried Shrimp, Preservation 1 Kaset-klang, ladyaw, chatuchak, Bangkok 10900 Tel. 0 29406130-45 e-mail : [email protected]
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
5
คานา
ปจจบนผบรโภคมความใสใจในความปลอดภยของอาหารเพมมากขน รวมทงหนวยงาน
ราชการ กไดเพมความเขมงวดในเรองการใชสารเคมในกระบวนการผลตและการเกบรกษาผลตภณฑ
อาหาร ดงนนผประกอบการดานอาหารจงหนมาสนใจการใชสารธรรมชาตเพอมาทดแทนการใชสารเคม
ในอาหาร ไคโตซานซงเปนสารธรรมชาตทไดจากเปลอกกงและปกาลงเปนทสนใจ เพราะเปนสารทสกดได
จากเศษเหลอโรงงานแปรรปทมอยเปนจานวนมาก คณสมบตเดนของไคโตซานคอสารไคโตซานละลายไดด
ในกรดอนทรย (organic acid) สารละลายไคโตซานมสมบตเปนแคทอออนกพอลเมอร (cationic polymer)
จากคณสมบตดงกลาวของไคโตซาน ทาใหมสมบตเฉพาะตวในการเกดปฏกรยากบสารหลายชนด และ
มสมบตพเศษในการดดซบทงอออนบวกและอออนลบ (สวล, 2542) จงมการนาไคโตซานมาใชในหลายดาน
เชน การนามาใชในกระบวนการบาบดนาเสยในอตสาหกรรม การเปนสารกระตนภมตานทานของโรคพช
การนามาใชเปนสารยบย งแบคทเรยในการถนอมอาหาร เชน การศกษาผลของไคโตซานตอคณภาพ และ
การเกบรกษา สตรอเบอรรสด พบวา ผลสตรอเบอรรสดทเคลอบดวยไคโตซานฟลมมการเนาเสยชากวา
สตรอเบอรรทไมไดเคลอบไคโตซานฟลม (Ahmed,1991) สวนในลกกวาด พบวา การใชไคโตซานทปรมาณ
3.0-5.0 mg/ml สามารถยบย งรา Aspergillus parasiticus, Aspergillus niger และยงสามารถยดอายการเกบ
รกษาลกกวาดไดอกดวย ( S h a o , 1 9 9 4 ) และการผสมไคโตซานลงในมายองเนส มผลทาใหจลนทรยท
ทาใหเกดการเนาเสยในมายองเนสลดลง 10 4 เทาเมอเทยบกบตวอยางควบคม (Sibel and Covill,2000)
นอกจากน ในการศกษาการยบย งการเจรญของแบคทเรยทผวหนาในระหวางการเกบรกษาเนอ โดยการ
ประยกตใชฟลมไคโตซานทผสมสารยบย งแบคทเรย พบวาแบคทเรยชนด S e r r a t i a l i q u e f a c i e n s ,
Lactobacillus sakei ถกยบย งการเจรญเตบโตในระหวางการเกบรกษา (Blaise, et al, 2000) การประยกตใช
ไคโตซานฟลมในอาหารสามารถใชในรปของการพนสารละลายไคโตซานเคลอบทผวใหเกดเปนฟลม หรอ
การนาสารละลายไคโตซานมาขนรปเปนแผนฟลม นอกจากนยงมการใชสารธรรมชาตตาง ๆ ทมฤทธในการ
ยบย งจลนทรยเพมขน เชน การผสม essential oil (oregano) ในแผนฟลมไคโตซาน เพอยบย งการเจรญ กบ
Listeria monocytogenes และ Escherichia coli 0157:H7 (Zivanovic, et al, 2005)
กงแหงเปนผลตภณฑสตวนาทมความสาคญทางเศรษฐกจ จากสถตการสงออกป 2 5 4 5 ไทย
สงออกกงแหงจานวน 336.63 ตนคดเปนมลคา 92.08 ลานบาท (ทมา : กองประมงตางประเทศ รวบรวมจาก
กรมศลกากร) แตมกพบปญหาในการเกบรกษาคอ การเสอมคณภาพทเกดจากจลนทรยโดยเฉพาะ
ราซงผประกอบการจะตองเกบรกษาในหองเยนรวมกบการใชสารเคม (เบนโซอก/ซอรบก) ดงนนในการ
วจยนจงนาไคโตซานมาใชในการเกบรกษาผลตภณฑดงกลาวโดยวธการพนเคลอบทตวผลตภณฑโดยตรง
และการขนรปเปนแผนฟลมแลวจงใชเปนบรรจภณฑ นอกจากนยงไดนาสารสกดกระเทยม (Allicin) ซงม
คณสมบตในการยบย งการเจรญของราและแบคทเรย (Micheal,1993) มาใชรวมกบไคโตซานเพอชวย
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
6
เพมประสทธภาพในการยบย งจลนทรยอกดวย
วตถประสงค
1.ทดลองทาแผนฟลมไคโตซานรปแบบตางๆ และศกษาถงคณสมบตของแผนฟลมทไดทางดาน
การซมผานของกาซออกซเจน การตานแรงดงขาด และการตานทานไอนา
2.ศกษาผลของการผสมสารสกดกระเทยมในแผนฟลมไคโตซานเพอยบย งการเจรญของรา
3.ศกษาการใชไคโตซานเพอการเกบรกษากงแหง โดยการฉดพนสารลงบนกงแหงและการ
ขนรปเปนแผนฟลมใชหอกงแหง
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
7
วธดาเนนการ
วสดและอปกรณ
1. ไคโตซานจากเปลอกกง : จากบรษท ซเฟรชไคโตซาน (แลบ) จากด นาหนกโมเลกล 785,000
ดาลตน Deacetylation 90 %
2. Dextrin (Merck)
3. Glycerol (Merck)
4. สารสกดกระเทยม (garlic extract powder) : Allicin potential 1 % คารโบไฮเดรท 68.69 %
Pathogenic bacteria – negative จากบรษท ขาวละออเภสช จากด
5. กรดอะซตกความเขมขน 100%
6. แอมโมเนยมไฮดรอกไซดความเขมขน 10 %
7. เชอรา Penicillium roqueforti และ Aspergillus awamori : จากศนยจลนทรย สถาบนวจย
วทยาศาสตรและเทคโนโลยแหงประเทศไทย
8. อาหารเลยงเชอ Potato Dextrose Agar (Acumedia) สารละลายสปอร (Sodium bis (2-
ethylhexyl) Sulfosuccinate) C20H37NaO7S
9. ถาดพลาสตก Polye the lene (PE) ขนาด (22 x 15 .5 cm. ) ใชในการเตรยมแผนฟลม
10. ตทควบคมอณหภมและความชนสมพทธ (C o n th e rm P h y to t ro n c l ima te s i mu la to r )
11. กงแหงผลตเสรจใหมจากแหลงผลตบางแสนจ.ชลบร
12. บรรจภณฑ ถง KOP ขนาด 17X25 cm. ถาดรองผลตภณฑ PP ขนาด 13X18.5 cm.,แผนฟลม
พลาสตกสาหรบหออาหาร ( Glad wrap : First Brands Co-operation)
วธการทดลอง
1. ทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol 1% แผนฟลมไคโตซานผสมdextrin 0.5%
และการทดสอบคณสมบตของแผนฟลมทผลตได
1.1การทาแผนฟลมไคโตซาน (แผนภมท 1 ในภาคผนวกท 3)
เตรยมสารละลายไคโตซาน 0.5% ในกรดอะซตกเขมขน 1% จากนนปรบ pH ของสารละลายใหได
6.0 ดวย 10% NH 4 OH แลวชงสารละลายนมา 85 กรม แลวขนรปโดยเทสารละลายดงกลาวลงบนถาด
พลาสตก polyethylene ขนาด 22 x 15.5 cm แลวนาไปอบในตอบทตงอณหภมท 40 oC นาน 21 ชม. ท
ความชนสมพทธ 48 % จากนนลอกฟลมไคโตซานออกจากถาดพลาสตก
1.2การทาแผนฟลมไคโตซานผสมDextrin 0.5 % และ แผนฟลมไคโตซานผสมGlycerol 1 %
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
8
เตรยมสารละลายไคโตซาน 0.5 % ดงเชนในขอ 1.1 แลวชง Dextrin 0.5 กรม และGlycerol 1 กรมจากนน
ผสมสารแตละตวลงในสารละลายไคโตซานทเตรยมไว แลวนาไปขนรปเปนแผนฟลมตามขอ 1.1
1.3การทดสอบคณสมบตของแผนฟลมชนดตาง ๆ การทดสอบดาเนนการโดย ภาควชาเทคโนโลยการ
บรรจ คณะอตสาหกรรมเกษตร มหาวทยาลยเกษตรศาสตร
ก. วดความหนาของแผนฟลม โดยใชวธตามมาตรฐาน ASTMD-645 D -374
(Storer, et.. al.,1994)
ข.คณสมบตการซมผานของกาซออกซเจน ใชวธตามมาตรฐาน ASTMD 3985 – 8
(Storer, et.. al.,1994)โดย เครองIllinois instrument : 8500 oxygen permeation analyzer
ค.คณสมบตการตานแรงดงขาดและคาการยดตว ใชวธตามมาตรฐาน ASTMD 882-91
(Storer, et.. al.,1994)โดย เครองทดสอบแรงดง tesmometric universal tester
ง. การตานทานไอนา ใชวธตามมาตรฐาน ASTMD E96-93 (Storer, et.. al.,1994)โดย WVTR
(water vapor transmission) dish
2.การทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม และทดสอบการยบยงการเจรญ
เตบโตของ Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti
2.1 การทาแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดจากกระเทยม (ดดแปลงวธจาก Trung
(Personal contact) Asian Institute of Technology)
ทาแผนฟลมไคโตซานตามขอ 1.1 สาหรบการทาแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมทาการ
ทดลองเชนเดยวกบขอ 1.1 โดยผสมสารสกดกระเทยม 2.5% ลงในสารละลายไคโตซาน
2.2 การทดสอบการยบยงการเจรญเตบโตของ Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti
-การเตรยม A. awamoriและ P. roqueforti เพอใชในการทดสอบโดยนาเชอจากstock culture
มาเลยงบน slant ของอาหารเลยงเชอ Potato dextrose agar(PDA)บมท 30 oC นาน 7 วน แลวเขยเชอใสลงใน
สารละลายสปอร (Sod ium bis (2-e thy lhexy l) su lfosucc inate) 0 .05% 10 mlและนามาเจอจาง
(Serial dilution) ดวยสารละลาย peptone เพอใหไดเชอปรมาณ 103 CFU/ml. แลวดดสารละลายเชอทไดใส
ในจานอาหาร potato dextrose agar โดยวธ pour plate จากนนนาแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโต
ซานผสมสารสกดจากกระเทยมตดใหไดขนาด 5x5 ซม. วางบน จานอาหารเลยงเชอ (Plate) ทเตรยมไว ทา
Control เปรยบเทยบโดยใชกระดาษแกวปลอดเชอ ขนาดเดยวกน (โดยนงฆาเชอทอณหภม 121oC 15 นาท
ภายใตความดน 1.5 ปอนด แลวนาไปอบใหแหง) นาจานเลยงเชอทงหมดไปบมในตบมทอณหภม 30 o C
นาน 8-10 วน โดยระหวางทบมเชอใหสงเกตการเจรญของราทงสองชนด
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
9
3.การใชไคโตซาน ในการเกบรกษากงแหงโดยวธการฉดพนและแผนฟลม
เตรยมแผนฟลมไคโตซานทาเชนเดยวกบขอ 1.1 และเตรยมสารละลายไคโตซาน 0.5 % ในกรด
อะซตกเขมขน 1 % ปรบpH เปน 6 และสารละลายไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม 2.5% สาหรบฉดพน
เตรยมการบรรจกงแหงเพอทดลองการเกบรกษา ซอกงแหงทเพงผลตเสรจใหม ๆ จากแหลงผลตใน
บรเวณบางแสน จ.ชลบร แลวนามาแบงทดลองเกบรกษา(ตามแผนภมท 2 ในภาคผนวกท 3) โดยกาหนดให
A เปนชดควบคมคอ กงแหงไมฉดพนดวยสารละลายไคโตซาน สวน B C D เปนกงแหงทฉดพนดวย
สารละลายไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม สารละลายไคโตซาน และสารสกดกระเทยมตามลาดบ แลว
บรรจตวอยาง A B C D ในถง KOP ถงละ 70 กรมและปดผนกปากถง สาหรบการเกบรกษาโดยหอดวย
แผนฟลมไคโตซาน E และH เปนตวอยางกงแหงทหอดวยแผนฟลมไคโตซานและพลาสตกฟลม และ
แผนฟลมไคโตซานตามลาดบ สวนF เปนตวอยางทหอดวยพลาสตกฟลม
ตวอยางทงหมดเกบรกษาทอณหภมหอง (30-35 o C) ในระหวางเกบรกษาสมตวอยางมาวเคราะห
คณภาพทเวลา 0,1,3,5,7 และ 9 สปดาหโดยนาตวอยางทสมมาวเคราะหคณภาพทางเคม จลชววทยา และ
ประสาทสมผส ไดแก ปรมาณดางทระเหยทงหมด (Total Volatile Base, TVB) (Miwa and Low, 1992)
จานวนแบคทเรยทงหมด (Total plate count, TPC) และจานวนยสตและรา ดดแปลงจากวธของ BAM,1992
คณภาพทางประสาทสมผส วเคราะหคณภาพทางประสาทสมผสดานลกษณะปรากฏ ส กลน รสชาตและ
เนอสมผส โดยผทดสอบจะใหคะแนนในแบบทดสอบ ซงกาหนดคณภาพระดบดมากมคะแนน 4 ด = 3
พอใช = 2 และตองปรบปรง = 1(ดงรายละเอยดตามแบบประเมนการทดสอบในภาคผนวกท 2)ในการวจย
นกาหนดใหผลตภณฑทผานเกณฑการยอมรบตองไดคะแนนทดสอบไมนอยกวา 2
การวเคราะหความแปรปรวนของขอมลทวเคราะหไดโดยใชโปรแกรมสาเรจรป ANOVA two
factors without replication
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
10
ผลการทดลองและวจารณ
1. การทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol1% แผนฟลมไคโตซานผสมdextrin0.5%
และการทดสอบคณสมบตของแผนฟลม
ภาพท 1 ลกษณะแผนฟลมไคโตซานผสมdextrin0.5% แผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสม
glycerol1% ทได
ในการทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol 1% และแผนฟลมไคโตซานผสม
dextrin 0.5 % พบวาหลงการอบแหงแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสม dextrin 0.5%
สามารถลอกออกจากถาดพลาสตกไดเปนแผนสมบรณ ในขณะทแผนฟลมไคโตซานผสม glycerol 1%
ฟลมจะหดตว มวนตวไมแผเปนแผนทคงตว การทแผนฟลมไคโตซานผสม glycerol 1% มลกษณะดงกลาว
ขางตนอาจเนองมาจาก glycerol เปน alcoholทมหม OH 3 ตาแหนงในโมเลกลซงหม OH นอาจเปนตว
binding กบโมเลกลของไคโตซานซงทาใหฟลมทไดมความนม มวนตว ดงนน เมอพจารณาการนาแผนฟลม
ไปใชงาน จะเหนวาแผนฟลมไคโตซานและแผนฟลมไคโตซานผสม dextrin 0.5% มลกษณะเปนแผนฟลม
ทคงตว ไมหดหรอมวนตว จงนาฟลมทงสองนไปทดสอบคณสมบตขนตอไป
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
11
ตารางท 1 ผลการทดสอบคณสมบตดานตาง ๆ ของแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสม
dextrin 0.5%
คณสมบต
ชนดของแผนฟลม
แผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสม
dextrin 0.5%
1. ความหนา (mm.) 0.02 0.02
2. การซมผานของกาซออกซเจน(cc./m2/day) 2,797 3,136
3. การตานทานแรงดง (N) 4.24 12.4
4. การซมผานของไอนาบนแผนฟลม (g/m2/day) 62.96 84.10
จากตารางท 1 จะเหนไดวาแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสม dextrin 0.5% ทได วด
ความหนาไดเทากนคอ 0.02 มม. คาการซมผานของกาซออกซเจน พบวาแผนฟลมไคโตซานมคาการซมผาน
ของกาซออกซเจนนอยกวา แผนฟลมไคโตซานผสม dextrin 0.5% คาการตานทานแรงดง พบวาแผนฟลม
ไคโตซานมคาการตานทานแรงดงนอยกวาแผนฟลมไคโตซานผสม d e x t r i n 0 . 5 % อาจเปนไปไดวา
โมเลกล dextrin ชวยจบยดเปนโครงขายกบโมเลกลไคโซาน(http://www.lsbu.ac.uk/water/hypol.html)
สวนคาการซมผานของไอนาบนแผนฟลม พบวาแผนฟลมไคโตซาน มคาการซมผานของไอนานอยกวา
แผนฟลมไคโตซานผสม dextrin 0.5 % จากคณสมบตขางตนจงสรปไดวาแผนฟลมไคโตซานมคณสมบตท
ดกวาแผนฟลมไคโตซานผสมdextrin 0.5%ในการทจะนาไปประยกตใชในอตสาหกรรมอาหารคอปองกน
การซมผานของออกซเจนและไอนาไดดกวาแมวาความแขงแรงของแผนฟลมจะนอยกวา ดงนนจงเลอก
แผนฟลมไคโตซานไปใชในการทาการทดลองขนตอไป
2.การทาแผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม และทดสอบการยบยงการ
เจรญเตบโตของ Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti
การทดลองนเปนการศกษาผลของการเตมสารสกดกระเทยมในแผนฟลมไคโตซานเพอเปรยบเทยบ
ประสทธภาพในการยบย งการเจรญเตบโตของรา โดยเลอกทดสอบกบรา 2 ชนด คอ A. awamori และ P.
roqueforti ซงมรายงานวาเปนสาเหตการเสอมเสยของกงแหง (Wu and Salunkhe, 1978)
ผลการสงเกตการเจรญเตบโตของราทงสอง(ตารางท 2) พบวาในระยะเวลาเรมตนไมเหนความ
แตกตางของการเจรญของราทงสองชนด บนแผนฟลมชนดตาง ๆ แตเมอบมเชอนาน 6 วน พบวาในจานเลยง
เชอทมแผนฟลมไคโตซานและจานเลยงเชอทมแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมไมพบราเจรญบน
แผนฟลม ไมมโซนใส แตในชดควบคม พบราเจรญบนอาหารเลยงเชอและบนกระดาษแกว ในวนท 8
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
12
พบวามราเจรญเพมขนในชดควบคม ขณะทจานเลยงเชอทมแผนฟลมไคโตซานพบราขนเฉพาะรอบ
แผนฟลม ไมพบราเจรญบรเวณทวางแผนฟลม(ทงดานบนและลางของแผนฟลม) สวนจานเลยงเชอทวาง
แผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมสงเกตผลไดแบบเดยวกนแตพบวามโซนใสเกดขนรอบแผนฟลม
โดยวดความกวางได 0.5 ซม. และ 0.3 ซม. บนจานเชอ A. awamori และ P. roqueforti ตามลาดบ (ภาพท
2) แสดงวาสารสกดกระเทยมแพรจากแผนฟลมออกมารอบๆจงมผลยบย งการเจรญของราทงสองชนด โดย
มผลยบย งตอ A. awamoriไดดกวา P. roqueforti จากผลการทดลองนแสดงใหเหนวาแผนฟลมไคโตซาน
สามารถยบย งการเจรญของราทงสองชนดได ซงการยบย งการเจรญของราเกดจาก interaction ของไคโต
ซานกบ DNA โดยไปขดขวางการสงเคราะห mRNA นอกจากนยงพบวาเกดการ interaction ระหวาง
ประจบวกของไคโตซานทาใหเกด electronegative บรเวณพนผวของเซลล จงทาใหความสามารถในการ
ซมผานของสารตาง ๆ ทผนงเซลลลดลง (Hadwiger et.al, 1984) การผสมสารสกดกระเทยมชวยเพม
ความสามารถในการยบย งการเจรญของราทงสองโดยมรายงานวานากระเทยมในอตราสวน 1: 256 จะยบย ง
S ta p h y lo c o c cu s a ur e o us ไดและอตราสวน 1 : 1 2 8 สามารถยบย งการเจรญของ E . c o l i ได
(Davidson,1993) ในกระเทยมหรอหอมจะม allicin และสารประกอบซลเฟอรอน ๆ แตตวสาคญทสดคอ
a l l i c i n ทสามารถยบย งการเจรญของจลนทรยไดเนองจากการเขาไปจบกบกลม – S O - S - ในโมเลกล
จลนทรย สารตวนจะไปรบกวนกระบวนการเมตาบอลซมเรมแรกของจลนทรย โดยจะออกซไดซ –SH- ใน
โปรตนใหเปนสารไดซลไฟด (-S-S-) การยบย งแบบแขงขนตอสารประกอบซลเฟอร เชน Cysteine และ
Glutathione โดยการจบกบสารประกอบซลเฟอรเหลาน สวนการยบย งแบบไมมการแขงขน allicin จะจบ
กบหม –SH-ของเอนไซม (Barone and Tansey,1977)
จากขอมลทไดน จงนาไปทดลองทาแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยม ซงพบวาในขณะ
ขนรปเปนแผนฟลม สารสกดกระเทยมในสารละลายดงกลาวจะจบตวกนทาใหแผนฟลมทไดไมเรยบ
สมาเสมอกน มรอยแตกและเปนร และแผนฟลมจะดดความชนในอากาศ จงทาใหแผนฟลมมลกษณะชน
แฉะ ไมสามารถนามาทาเปนบรรจภณฑได ดงนนจงใชวธการฉดพนสารละลายไคโตซานผสมสารสกด
กระเทยมเพอเคลอบผลตภณฑโดยตรง แทนการขนรปเปนแผนฟลม
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
13
ตารางท 2 ผลการเจรญของ Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti บนอาหารเลยงเชอ
PDA ทเวลาตาง ๆ
วนท
กระดาษแกว(cellophane) ฟลมไคโตซาน (CTS.) ฟลมไคโตซานผสม allicin
(CTS. + Allicin)
Aspergillus a w a m o r i
Penicillium roqueforti
Aspergillus a w a m o r i
Penicillium roqueforti
Aspergil lus a w a m o r i
Penicillium roqueforti
3 เชอยงไม
เจรญ
เชอยงไม
เจรญ
เชอยงไม
เจรญ
เชอยงไม
เจรญ
เชอยงไมเจรญ เชอยงไม
เจรญ
6 เชอเรมเจรญ
บนอาหาร
และบน
กระดาษแกว
เชอเรมเจรญ
บนอาหาร
และบน
กระดาษแกว
เชอเรมเจรญ
บนอาหาร
เชอเรมเจรญ
บนอาหาร
เชอเรมเจรญ
บนอาหาร
เชอเรมเจรญ
บนอาหาร
8 -10 เชอเจรญรอบ
ๆ กระดาษ
แกวและเจรญ
บนกระดาษ
แกว
เชอเจรญรอบ
ๆ กระดาษ
แกวและเจรญ
บนกระดาษ
แกว
เชอเจรญเพม
มากขนรอบ ๆ
แผนฟลม
ในวนท 10
เชอเจรญเพม
มากขนรอบ ๆ
แผนฟลมใน
วนท 8
สงเกตเหนโซน
ใสรอบ ๆ
แผนฟลมวด
ความยาวได 0.5
ซม. ในวนท 10
สงเกตเหน
โซนใสรอบ
ๆ แผนฟลม
วดความยาว
ได 0.3 ซม.
ในวนท 8
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
14
Aspergillus awamori
Penicillium roqueforti
ภาพท2 โซนใสทเกดขนรอบแผนฟลมไคโตซานและแผนฟลมไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมในอาหาร
เลยงเชอ PDA ทม Penicillium roqueforti และ Aspergillus awamori เจรญอย
cellophane
Cts.+allicin
Cts.
cellophane
Cts.+allicin Cts.
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
15
3.การใชแผนฟลมไคโตซานและการฉดพน ในการเกบรกษากงแหง
ในการทดลองนใชกงแหงทผลตเสรจใหม ๆ โดยวเคราะหคาความชน และเกลอไดเทากบรอยละ
15.87 และ 6.11 ตามลาดบ และ pH เทากบ 8.01 จานวนแบคทเรย เทากบ 2.8x103 CFU/g ราและยสต
3x103 CFU/g จากผลวเคราะหพบวากงแหงททามาใชเปนตวอยางนนมคณภาพอยในเกณฑมาตรฐาน มผช.
3 0 9 / 2 5 4 7 (มาตรฐานผลตภณฑชมชน, 2547)ทกาหนดใหความชนตองไมเกนรอยละ 20
จานวนแบคทเรยทงหมดไมเกน 1x105 CFU/g ยกเวนปรมาณยสตและราในตวอยางทพบสงกวามาตรฐาน
ซงกาหนดใหไมเกน 500 โคโลน/ ตวอยาง 1 กรม
คะแนนการประเมนคณภาพทางประสาทสมผสของตวอยางกงแหงททดลองเกบรกษาในสภาวะการ
บรรจแบบตางๆ แสดงในภาพท 3 ซงมผลดงน
คณภาพดานลกษณะปรากฏ พบวาทกชดการทดลองไดคะแนนลดลงตามระยะเวลาการเกบรกษาท
เพมขน แตยงคงอยในเกณฑทยอมรบตลอดระยะเวลาการเกบรกษา 9 สปดาห ยกเวน A ซงเปนชดควบคม
และ D กงแหงทฉดพนดวยสารสกดกระเทยม มคะแนนไมเปนทยอมรบหลงการเกบรกษา 3 สปดาห เพราะม
ราขนทตวกงแหง ดงนนจงไมนาทงสองตวอยางมาประเมนคณภาพดานอนๆ ตอไป จากการวเคราะหทาง
สถตพบวา ระยะเวลาการเกบรกษาและวธการเกบรกษามอทธพลตอลกษณะปรากฏ (P<0.05) ตวอยางฉด
พนดวยไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมและไมผสมสารสกดกระเทยมไดรบการยอมรบดกวาชดทดลองท
หอดวยแผนฟลมไคโตซาน
คณภาพดานส พบวาสของกงแหงคอยคลาขนตามระยะเวลาการเกบรกษาทาใหคะแนนการยอมรบ
ดานสลดลง( P < 0 . 0 5 ) ทกชดการทดลองมคะแนนยงอยในเกณฑยอมรบตลอดระยะเวลาการเกบรกษา 9
สปดาห แตตวอยาง E F H ไดคะแนนนอยกวาตวอยาง B และC (P<0.05) เพราะมสคลาจนแตกตางจาก
ตวอยาง B และC ทงนอาจเปนผลจากการฉดพนสารไคโตซานเคลอบทกงแหงโดยตรงมสวนชวยรกษาส
ของกงแหง เพราะไคตนและไคโตซานมคณสมบตในการจบส (Dye binding property) ซงความสามารถใน
การจบสของไคโตซานเกดในชวงความเปนกรดดาง 5.5-7.0 (Knorr, 1984)
ผลการประเมนดานกลนพบวา คะแนนดานกลนของตวอยางกงแหงในทกชดการทดลองลดลงตาม
อายการเกบรกษา(P<0.05) แตทกชดการทดลองไดคะแนนอยในเกณฑยอมรบตลอดการทดลอง 9 สปดาห
โดยชดทดลอง B และC ไดรบการยอมรบแตกตางจากชดทดลองอนๆ (P<0.05)
การประเมนดานรสชาต พบวาการยอมรบดานรสชาตกใหผลในทานองเดยวกบกลน โดยทกชด
ทดลองไดคะแนนลดลงตามระยะเวลาการเกบรกษาทเพมขน (P<0.05) แตคงอยในเกณฑการยอมรบตลอด
ระยะเวลาการทดลอง 9 สปดาห และวธการเกบรกษากงแหงกมอทธพลตอคะแนนการยอมรบดานรสชาต
(P<0.05) โดยชดการทดลอง B และC ไดรบการยอมรบดานรสชาตสงกวาชดทดลองอนๆตลอดระยะเวลา
การเกบรกษา
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
16
คณภาพดานเนอสมผส พบวาเมอเรมตนการเกบรกษา ชดการทดลอง B C และD ไดคะแนนนอย
กวา E F และH ทงนอาจเนองจากการอบแหงกงแหงหลงการฉดพนไคโตซานทาใหความชนในกงแหง
ลดลง เนอสมผสจงแขง แตระหวางการทดลองเกบรกษานน พบวาผทดสอบใหการยอมรบเนอสมผสของ
B และC เพมขน จากการวเคราะหทางสถตพบวาวธการเกบรกษาและระยะเวลามผลตอการยอมรบดานเนอ
สมผส ( P < 0 . 0 5 ) โดยเมอระยะเวลการเกบเพมขนคะแนนการยอมรบของทกชดทดลองลดลงแตกยงอยใน
เกณฑการยอมรบตลอดการเกบรกษา 9 สปดาห
จากผลการประเมนคณภาพดานประสาทสมผสสรปไดวา การฉดพนไคโตซานทงผสมและไมผสม
สารสกดกระเทยมทาใหตวอยางกงแหงไดรบการยอมรบจากผทดสอบดกวาตวอยางชดทใชแผนฟลมในการ
หอกงแหงในดานลกษณะปรากฏ ส กลน รสชาตและเนอสมผส
ผลการวเคราะหดานจลชววทยาของกงแหงททดลองเกบรกษา (ตารางท 3 และ 4) พบวา จานวน
แบคทเรยทงหมด(TPC) ในทกชดทดลองเพมขนตามระยะเวลาการเกบรกษา (P<0.05) วธการเกบรกษาม
อทธพลตอการเพมจานวนแบคทเรย (P<0.05) โดยพบวา การฉดพนสารไคโตซาน ทงทไมผสมและผสมสาร
สกดกระเทยม บนกงแหงโดยตรง(ชดทดลองB และ C) ชวยชะลอการเจรญของแบคทเรยไดด โดยคา TPC
ทวเคราะหได ไมเกนเกณฑกาหนดของ มผช. ทกาหนดไวท 105 CFU/g Jongrittiporn (2001) รายงานวา
ไคโตซานยบย งการเจรญของจลนทรยโดยทาใหระยะ lag phase ของจลนทรยยดออกไป และการผสมสาร
สกดกระเทยมในไคโตซานทาใหคา T P C ในตวอยาง Bเพมชากวาตวอยาง C แตการฉดพนสารสกด
กระเทยม (allicin) เพยงอยางเดยว (ตวอยางD) ไมมผลในการยบย งการเจรญของแบคทเรย เพราะคา TPC
ของ Dไมแตกตางจากตวอยาง A ซงเปนชดควบคมแตอยางใด สาหรบคา TPC ของตวอยางกงแหงหอดวย
แผนฟลมไคโตซาน E และ H เพมขนรวดเรวใกลเคยงกบคาของตวอยาง F ทหอดวยแผนฟลมพลาสตกหอ
อาหารเพยงอยางเดยว แสดงวาแผนฟลมไคโตซานหอกงแหงไมมประสทธภาพในการชะลอการเจรญของ
แบคทเรย
สวนการเปลยนแปลงของจานวนราทงหมดของตวอยาง A- H ในระหวางการเกบรกษา(ตารางท 4)
พบวาวธการเกบรกษาและระยะเวลาเกบรกษามอทธพลตอการเพมของจานวนราในตวอยาง( P < 0 . 0 5 ) โดย
พบวาการเพมของจานวนราของแตละชดการทดลองเปนไปในทานองเดยวกบการเพมของคา TPC คอ การ
ฉดพนกงแหงดวยไคโตซาน ชวยชะลอการเพมจานวนรา และการเตมสารสกดกระเทยมลงในไคโตซาน ทา
ใหการเพมจานวนราชาลง แสดงวาสารสกดกระเทยมเปนสารเสรมฤทธในการยบย งการเจรญของราของ
ไคโตซานไดแตการใชสารสกดกระเทยมอยางเดยวไมมผลตอการยบย งการเจรญของราในผลตภณฑ
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
17
1.5
2.5
3.5
4.5
0 1 3 5 7 9 เวลา(สปดาห)
คะแ
นน
A
B
C
D
E
F
H
1.5
2.5
3.5
4.5
0 1 3 5 7 9 เวลา(สปดาห)
คะแ
นน
A
B
C
D
E
F
H
1.5
2.5
3.5
4.5
0 1 3 5 7 9 เวลา(สปดาห)
คะแ
นน
A
B
C
D
E
F
H
1.5
2.5
3.5
4.5
1 2 3 4 5 6เวลา(สปดาห)
คะแ
นน
A
B
C
D
E
F
H
1.5
2.5
3.5
4.5
0 1 3 5 7 9 เวลา(สปดาห)
คะแ
นน
A
B
C
D
E
F
H
ภาพท 3 คะแนนการประเมนคณภาพดานลกษณะปรากฏ ส กลน รสชาต และเนอสมผสของกงแหง
ระหวางเกบรกษา
หมายเหต : ชดทดลองท 1 (A) เปนชดควบคม (control)
ชดทดลองท 2 (B) กงแหงททาการฉดพนไคโตซานเขมขน 0.5 % ผสมสารสกดกระเทยม 2.5%
ชดทดลองท 3(C) กงแหงททาการฉดพนไคโตซานเขมขน 0.5%
ชดทดลองท 4 (D) กงแหงททาการฉดพนสารสกดกระเทยม 2.5 %
ชดทดลองท 5 (E) กงแหงท wrap ดวยแผนฟลมไคโตซานและ wrap อกชนดวยพลาสตกฟลม
ชดทดลองท 6 (F) กงแหงท wrap ดวยพลาสตกฟลม
ชดทดลองท 7 (H) กงแหงท wrap ดวยแผนฟลมไคโตซาน
ลกษณะปรากฏ
ส
กลน
รสชาต
เนอสมผส
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
18
0
7
14
wk0 wk1 wk3 wk5 wk7 wk9
เวลา (สปดาห)
จาน
วนเซ
ล (
log
num
ber)
ABCDEFH
ภาพท 4 จานวนแบคทเรยทงหมด ( T P C ) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
0
5
10
wk0 wk1 wk3 wk5 wk7 wk9
เวลา (สปดาห)
จาน
วนเซ
ล
ABCDEFH
ภาพท 5 จานวนราทงหมดในอาหารเลยงเชอ Potato dextrose agar (PDA) ทสปดาหตาง ๆ
ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
19
ผลการวเคราะหปรมาณดางระเหยไดทงหมด ( T VB ) ใชเปนคาแสดงการเสอมคณภาพของสตวนา จากผล
การวเคราะห T V B ในตวอยางกงแหงระหวางการเกบรกษา (ตารางท 5 ) พบวาคา T V B เพมขนตาม
ระยะเวลาเกบรกษาในทกชดการทดลอง( P < 0 . 0 5 ) และวธการเกบรกษากมอทธพลตอการเพมของ T V B
(P<0.05) พบวา คาTVB ในตวอยาง A B C และ D ซงบรรจถง KOP สงกวาตวอยาง E F และ H ซงหอดวย
แผนฟลมไคโตซานและแผนพลาสตกหออาหาร(PVC) ตลอดการเกบรกษานน อาจเนองจากA – D บรรจใน
ถง KOPทปดผนกปากถงและคณสมบตของถง KOP ปองกนการซมผานของกาซไดดกวาแผนฟลมไคโต
ซานและแผนพลาสตกจงทาใหปรมาณTVB ในตวอยางบรรจถง KOP คงเหลอในตวอยางสงกวาการหอดวย
แผนฟลมไคโตซานและแผนพลาสตกหออาหาร นอกจากนการเพมของ TVB (ซงเปนสารทเกดจากการยอย
สลายโปรตนโดยแบคทเรย) ไมสอดคลองกบจานวนแบคทเรยทวเคราะหไดในตวอยาง ดงนนคา TVB อาจ
ไมใชคาทเหมาะสมสาหรบการประเมนคณภาพของกงแหง
0
15
30
45
60
75
90
wk0 wk1 wk3 wk5 wk7 wk9
เวลา(สปดาห)
ปรม
าณ T
VB (m
g/10
0g)
ABCDEFH
ภาพท 6 ปรมาณ Total volatile base (TVB) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
20
สรปผลการทดลอง
1.สามารถทาแผนฟลมได 3 รปแบบคอ แผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสม dextrin 0.5% และ
แผนฟลมไคโตซานผสม glycerol 1% แผนฟลมไคโตซาน และแผนฟลมไคโตซานผสมdextrin 0.5%ม
ลกษณะทางกายภาพทเหมาะสมสาหรบการนามาใชหอหมอาหาร สวนแผนฟลมไคโตซานผสมglycerol1%
มลกษณะทางกายภาพทไมเหมาะสม จากการทดสอบคณสมบตของแผนฟลมพบวาแผนฟลมไคโตซานมคา
การซมผานของไอนา และคาการซมผานของออกซเจนดกวาแผนฟลมไคโตซานผสมdextrin0.5% 2.การเตมสารสกดกระเทยม (allicin) 2.5 % ในสารละลายไคโตซาน ชวยเสรมประสทธภาพในการยบย ง
การเจรญของเชอรา Aspergillus awamori และ Penicillium roqueforti ซงเปนเชอราทพบในกงแหงท
เสอมคณภาพ การเตม allicin ในสารละลายไคโตซานเพอทาเปนแผนฟลมไมสามารถทาไดเพราะ allicin จะ
จบตวกนในระหวางการขนรปและอบแหง
3.การทดลองใชแผนฟลมไคโตซานหอกงแหง และการฉดพนสารละลายไคโตซานเพอเคลอบกงแหงกอน
บรรจถง แลวเกบรกษาทอณหภมหอง (30 – 35 oC) พบวาการฉดพนสารละลายไคโตซานทไมผสม และ
ผสมสาร allicin ทาใหกงแหงคงคณภาพ เปนทยอมรบของผทดสอบได นาน 9 สปดาห เมอเทยบกบชด
ควบคม ซงเปนทยอมรบเพยง 3 สปดาห และการใชแผนฟลมไคโตซานในการหอกงแหง ไมมผล
ใหเกบรกษาไดนานขนแตอยางไร
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
22
เอกสารอางอง
สวล จนทรกระจาง. 2542. สารไคตนและไคโตซาน ผลตภณฑจากธรรมชาต และการประยกตใช
ประโยชน. รายงานสมมนาวชาการเรองความรวมมอของภาครฐและเอกชนในการพฒนาการผลตและ
การใชสารไคตน-ไคโตซานแบบครบวงจร. วนท 2-3 เมษายน 2542. ณ โรงแรมไอเฟล
จงหวดระนอง. 90 หนา.
มาตรฐานผลตภณฑชมชน. 2547. กงแหง (มผช. 309-2547). สานกมาตรฐานผลตภณฑอตสาหกรรม.
กระทรวงอตสาหกรรม. กรงเทพฯ.
Ahmede, E., G. Arul., J. Ponnampalam, and M. Boulet. 1991. Chitosan coating effect on Storability and
quality of fresh strawberries. J. Food Sci. 56(6). 1618-1620.
Barone, F. E., and M. R. Tansey. 1977. Isolation, purification, identification, synthesis, and kinetics of
activity of the anticandidal component of Allium sativum and a hypothesis for its mode of action.
Mycologia. 69:793.
Blaise, O., E. R. Simard., P. Gabriel, B. Andre and A. R. Holley. 2000.Inhibition of surface spoilage
bacteria in processed meats by application of antimicrobial films prepared with chitosan. Int. J.
Food Micro.62, 139-148.
Davidson, P. M. and L. B. Alfred.1993. Antimicrobials in Foods. University of Idaho Press,
USA. 441- 468.
Hadwiger, L. A., B. Fristensky and R. C. Riggleman. 1984. Chitin, chitosan and related enzymes.
Academic press, Inc.291-302.
Jongrittiporn, S. 2001. A study on the preservation of fishballs using chitosan. Asian Institute of
Technology. Bangkok. Thailand.
Knorr, D. 1984. Use of chitinous polymer in food. Food Tech. 38(1), 85-97.
Miwa, K. and S. J. Low 1992. Determination of Trimethylamine Oxide(TMAO-N),Trimethylamine
(TMA-N),Total Volatile Basic Nitrogen (VB-N) by Conway’s Microdiffusion Method.Laboratory
Manual on Analytical Methods and Procedures for Fish and Fish Product 2nd Edition. Marine
Fisheries Research Department Southeast Asian Fisheries Development Center, Singapore.
Peeler, J.T. and L. J. Maturin 1992. Aerobic Plate Count. Chapter 3. In : Bacteriological Analytical
Manual. Food and Drug Administration (ed). Arlington. USA. 17-26.
Shao, W. F., F. L. Chin and Y. C. Daniel. 1994. Antifungal activity of chitosan and its preservative effect
on low sugar candied Kumquat. J. Food Protect. 56(2), 136- 140.
Sibel, R. and N. Covill. 2000. The antimicrobial properties of chitosan in mayonnaise and mayonnaise-
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
23
based shrimp salads. J. Food Protect. 63(2), 202-209.
Storer, R. A. and et. al. 1994. Selected ASTM- Standard on Packaging. Philadelphia. USA. 450 p.
Zivanovic, S., S. Chi and A. F. Draughon 2005. Antimicrobial activity of chitosan films enriched
with essential oils. J. of Food Sci. 70(1), 45-51.
Wu, M.T. and D. K. Salunkhe 1978. Mycotoxin producing Potential of Fungi Associated with Dry
Shrimps. J. of Applied Bacteriology. 45, 231-238.
Http : // www. lsbu. ac. uk/ water/ hypol. html.
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
29
ภาคผนวกท 3
แผนภมท 1 การทาแผนฟลมไคโตซาน แผนฟลมไคโตซานผสมbinder และแผนฟลมไคโตซานผสมสาร
สกดกระเทยม
หมายเหต : 1 แผนฟลมไคโตซานผสมdextrin0.5%
2 แผนฟลมไคโตซาน
3 แผนฟลมไคโตซานผสมglycerol1%
ไคโตซาน
สารละลายไคโตซาน
ขนรปเปนแผนฟลม (casting)
อบแหง 40 º C นาน 21 ชม.
แผนฟลม
สารละลายไคโตซาน สารละลายไคโตซานผสม allicin,
สารละลายไคโตซานผสมdextrin0.5%
สารละลายไคโตซานผสมglycerol 1%
1 2 3
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
30
แผนภมท 2 การใชแผนฟลมไคโตซาน และการฉดพนไคโตซาน ไคโตซานผสมสารสกดกระเทยมในการเกบรกษากงแหง
กงแหง
ฉดพนสารละลายชนดตางๆ
อบใหแหงในตอบทอณหภม 40 0C 2.5 ชม.
บรรจ
ชดทดลองA-D ชดทดลองE F และ H
หอดวยแผนฟลมชนดตางๆ
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
28
ภาคผนวกท 2
แบบทดสอบทางประสาทสมผสกงแหง
ชอผลตภณฑ ……………………………………………………………………………………
ชอผทดสอบ…………………………………………………………………………………….
วนททดสอบ…………………………………………………………………………………….
โปรดใหคะแนนตามคณภาพดงน
ตวอยาง ลกษณะปรากฎ ส กลน รสชาต เนอสมผส การยอมรบรวม
ขอเสนอแนะ…………………………………………………………………………………………
………………………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………………….
หลกเกณฑการใหคะแนน
ลกษณะทตรวจสอบ เกณฑทกาหนด ระดบการตดสนใจ
ดมาก ด พอใช ตองปรบปรง
ลกษณะปรากฏ ตองมลกษณะทวไปดตามธรรมชาต เชน เปน
ตวกงแหงสมบรณไมแตกหก
4 3 2 1
ส ตองมสทดตามธรรมชาตของกงแหง 4 3 2 1
กลน ตองมกลนหอมตามธรรมชาตของกงแหง ไมมกลน
ฉนของแอมโมเนย กลนสาบหรอกลนอบ
4 3 2 1
รส ตองมรสเคมกลมกลอมเปนไปตามธรรมชาตของกง
แหง
4 3 2 1
เนอสมผส ตองเปนเนอเดยวกน และไมแหงหรอเปยกจนเกนไป 4 3 2 1
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
24
ภาคผนวกท 1
ตารางภาคผนวกท 1 การวเคราะหความแปรปรวนของคะแนนการยอมรบทางดานลกษณะปรากฏ ส กลน
รสชาต และเนอสมผสของกงแหงขณะเกบรกษา
Source of variance df SS MS F-value P-value Fcrit
ลกษณะปรากฏ
Treatment 6 5.134 8.557x10-1 3.378 0.011 2.421
Time 5 5.565 1.13 4.393 0.004 2.533
Error 30 7.600 2.533x10-1
ส
Treatment 6 4.686 7.809x10-1 3.365 0.0117 2.421
Time 5 7.600 1.520 6.551 0.0003 2.534
Error 30 6.962 2.321x10-1
กลน
Treatment 6 5.559 9.266x10-1 5.453 0.0006 2.421
Time 5 4.1286 8.257x10-1 4.860 0.0023 2.533
Error 30 5.0974 1.699x10-1
รสชาต
Treatment 6 6.591 1.098 5.359 0.0007 2.421
Time 5 4.286 8.571x10-1 4.182 0.005 2.534
Error 30 6.149 2.05 x10-1
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
25
ตารางภาคผนวกท 1 (ตอ)
Source of variance df SS MS F-value P-value Fcrit
เนอสมผส
Treatment 6 4.479 7.464x10-1 3.871 0.006 2.421
Time 5 4.064 8.128x10-1 4.215 0.005 2.534
Error 30 5.785 1.928x10-1
ตารางภาคผนวกท 2 การวเคราะหความแปรปรวนของแบคทเรยทงหมดของกงแหงขณะเกบรกษา
Source of variance df SS MS F-value P-value Fcrit
Treatment 6 49.290 8.215 6.792 0.0001 2.421
Time 5 60.724 12.145 10.041 0.00001 2.534
Error 30 36.284 1.21
ตารางภาคผนวกท 3 การวเคราะหความแปรปรวนของจานวนราของกงแหงขณะเกบรกษา
Source of variance df SS MS F-value P-value Fcrit
Treatment 6 72.227 12.038 12.006 7.57x10-7 2.421
Time 5 48.851 9.770 9.744 1.32x10-5 2.534
Error 30 30.079 1.003
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
26
ตารางภาคผนวกท 4 การวเคราะหความแปรปรวนของปรมาณดางทระเหยไดของกงแหงขณะเกบรกษา
Source of variance df SS MS F-value P-value Fcrit
Treatment 6 1977.767 329.6278 5.301 0.0008 2.421
Time 5 2953.009 590.6018 9.498 1.65x10-5 2.534
Error 30 1865.545 62.1849
ตารางภาคผนวกท 5 จานวนแบคทเรยทงหมด (TPC) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
sample
Total plate count (CFU/g.)
wk.0 wk.1 wk.3 wk.5 wk.7 wk.9
A(control) 4.4x10 3 8.8x10 3 1.87x107 3 x 1 0 7 2.8x108 1.95x107
B 3 x 1 0 3 2 x 1 0 3 9.2x10 3 3 x 1 0 3 4.4x103 5 . 8 x 1 0 3
C 1 . x 1 0 4 4.5x10 3 3 x 1 0 5 1 x 1 0 5 5.6x104 7 . 7 x 1 0 4
D 5 x 1 0 3 3 x 1 0 4 3 x 1 0 7 3.4x10 7 7 x 1 0 7 4 . 6 x 1 0 7
E 4.9x10 3 3 x 1 0 3 4.2x10 5 2.81x106 9 x 1 0 6 3 x 1 0 5
F 2.73x104 3 x 1 0 4 1.23x107 3.5x10 6 8.3x106 2 x 1 0 5
H 2.41x104 1 x 1 0 4 2.76x107 7 x 1 0 5 9.5x106 2 . 5 x 1 0 7
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
27
ตารางภาคผนวกท 6 จานวนราทงหมดในอาหารเลยงเชอ Potato dextrose agar (PDA) ทสปดาหตาง ๆ
ตลอดการเกบรกษากงแหง 9 สปดาห
ตวอยาง
จานวนเชอราทงหมด (CFU/g.)
wk.0 wk.1 wk.3 wk.5 wk.7 wk.9
A(control) 3.33x103 3 x 1 0 5 1.38x107 1.3x108 1.29x107 1.16x10 7
B 3 x 1 0 3 3 .4x10 3 5.9x10 3 1.0x103 2.0x10 3 3 . 0 x 1 0 3
C 3 x 1 0 3 5 x 1 0 3 3.2x10 4 4.0x104 5.9x10 6 1 . 0 x 1 0 6
D 3 x 1 0 3 3 .0x10 7 3.8x10 7 1.1x107 2.45x107 1 . 1 x 1 0 7
E 1.55x103 2.81x105 3.0x10 6 9.5x105 3.0x10 7 7 . 5 x 1 0 5
F 4.6x10 3 3 .0x10 5 3.0x10 6 4.5x106 3.5x10 7 3 . 0 x 1 0 5
H 1.07x103 2 .7x10 4 2.3x10 6 4.8x105 5.4x10 6 3 . 0 x 1 0 7
ตารางภาคผนวกท 7 ปรมาณ Total volatile base (TVB) ทสปดาหตาง ๆ ตลอดการเกบรกษากงแหง 9
สปดาห
sample
TVB-value (mg/100g)
wk.0 wk.1 wk.3 wk.5 wk.7 wk.9
A(control) 44.25 32.93 49.33 53.38 63.55 73.33
B 34.65 37.25 44.73 48.05 57.66 70.66
C 38.04 35.76 38.70 46.41 46.47 62.54
D 26.76 32.54 44.05 62.42 57.62 69.00
E 29.22 36.17 35.92 45.37 30.71 58.49
F 33.55 34.91 39.69 37.58 30.28 47.39
H 31.93 27.51 43.90 31.19 29.86 28.53
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา
21
คาขอบคณ
ผเขยนขอขอบคณเจาหนาทของกลมวจยเทคโนโลยชวภาพ กองพฒนาอตสาหกรรมสตวนา ทให
ความชวยเหลอในการทาการทดลองและโดยเฉพาะอยางยง ดร. พรรณทพย สวรรณสาครกล หวหนากลมฯ
ทใหความอนเคราะห แนะนาในดานการทดลองและในดานวชาการ
กองพฒน
าอตสาหกรรมสตวนา