1

НАО «ЗАПАДНО-КАЗАХСТАНСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ

УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ МАРАТА ОСПАНОВА»

Аннотация на диссертационную работу

на соискание ученой степени

доктора философии (PhD)

Исследование морфологических показателей

миокарда при воздействии факторов

окружающей среды в эксперименте

ЖАНАБАЕВОЙ АЙГУЛЬ БОЛАТБЕКОВНЫ

Специальность: 6D110100 – «Медицина»

Научные руководители:

д.м.н., профессор кафедры онкологии ЗКМУ имени Марата Оспанова

Е.Ж. Бекмухамбетов

к.м.н., доцент кафедры нормальной и топографической анатомии с

оперативной хирургией ЗКМУ имени Марата Оспанова С.Б. Рахманов

Зарубежный консультант: профессор MD, PhD руководитель

лаборатории MAGI-Group Милан (Италия) Matteo Bertelli

Срок выполнения: 2015-2018 гг.

Актобе, 2019 г.

2

АННОТАЦИЯ

диссертации Айгуль Болатбековны на тему

«Исследование морфологических показателей миокарда при

воздействии факторов окружающей среды в эксперименте»,

представленной на соискание степени доктора философии (PhD)

по специальности 6D110100 – «Медицина»

Научный руководитель: д.м.н., профессор Е.Ж. Бекмухамбетов

Научный консультант: к.м.н., доцент С.Б. Рахманов

Зарубежный консультант: профессор MD, PhD Matteo Bertelli руководитель

лаборатории MAGI-Group Милан (Италия).

Актуальность темы:

В зависимости от внутренней и внешней среды организм человека

подвержен изменениям по структуре и своим нормальным морфологическим

параметрам составляющих его органов и систем, обеспечивая существенные

константы и условия, необходимые для их выживания [Кулкыбаев Г.А. 2005,

Carlsen L., Bruggemann R.,2013].

На современном этапе медицинской науки многие направления

исследовательской работы сосредоточены на морфологическом строении

сердца. В частности, ангиогенез сердечно-сосудистого статуса в сердечно-

сосудистой системе обнаруживает наиболее значимые данные, основные

научные данные и монографии [Титов В.Н., 2010, Traupe T., 2010, Бокерия

Л.А.,2012].

Некоторые вопросы по изучению структуры миокарда, особенно его

ангиогенеза, его ультраструктурных проблем, все еще находятся в процессе

решения [Camici P.G., Crea F . 2007, Слободской В.А., 2012]. Поэтому

современное развитие научных проектов, направленных на изучение

миокарда, обновление методов научных исследований для их всестороннего

изучения является актуальной проблемой морфологии.

Ряд исследователей обнаружили, что нормальный функциональный уровень

основных систем организма, особенно в урбанизированных регионах,

относительно низок в их резервных возможностях. Согласно современному

миграционному процессу, в связи с переездом в другие климатические и

географические зоны, морфологические, физиологические и

психологические свойства организма человека, в зависимости от процесса

адаптации, зависят от воздействия внешних факторов. Негативное

долгосрочное воздействие окружающей среды на адаптивное изменение

организма может привести к преждевременному снижению функциональных

резервов жизненно важных систем, что может привести к интенсивному

процессу инвазии и снижению общей продолжительности жизни организма

[Газалиева М.А. 2014, Kaul S.2008, Ebi K.L. 2006].

3

Постановлением Верховного Совета Республики Казахстан от 30 июня

1992 года регион Аральского моря был отнесен к экологически

нестабильному району, характеризующемуся загрязнением окружающей

среды. В эту область были включены пять районов Актюбинской области, за

исключением собственно Приаралья. Опустынивание природной среды и

темпы необратимых процессов деградации привели к ухудшению социально-

экономических условий и ухудшению условий жизни населения [Izhitskiy A.

S., Zavialov P.O. 2016, Crosa G., Froebrich J. 2006].

Развитие научно-технической модернизации века, способствовало

изменениям в отрасли, по всем областям науки и техники, включая агро,

химию и т. д. В настоящее время острое отравление в производственной

среде происходит редко, а, наоборот, частота хронических

профессиональных отравлений (долговременное вредное воздействие на

окружающую среду, распространение профессиональных заболеваний среди

работающих на производстве длительное время) увеличилась за последние

два десятилетия и имеет несколько меньшее восстановление в организме.

Основной задачей современной науки является разработка организационных

и научно-методических подходов к решению проблемы охраны здоровья

населения от профессионально-производственной опасности. Появление этих

задач - бурное развитие нефтяной и химической промышленности, цветной

металлургии, широкое использование ксенобиотиков в быту и

промышленности - основные факторы, способствующие загрязнению

окружающей среды и возникновению различных заболеваний. В настоящее

время известно около 14 миллионов химикатов, загрязнящих окружающую

среду, из них около 40% имеют жизненно важный экотоксичный характер и

классифицируются как потенциально опасные вещества в производстве

[Засорин Б.В. 2008, Pathak R., Ahmed R.S. 2009]. Резкое загрязнение

окружающей среды этими опасными веществами образует различные

биогеохимические провинции во многих регионах Республики Казахстан

(хромовый завод в Актюбинской области). Это связано с тем, что

крупнейшее месторождение хрома и нефти, имеющее значительную роль в

мировой экономике, расположенно в Актюбинской области, Западный

Казахстан развивается на стыке добычи хрома и нефти агропромышленных

предприятий. Кроме того, использование цветной металлургии в развитии

сельскохозяйственной отрасли имеет широкий спектр применения и

увеличивает химическое воздействие на организм человека. Повышение

плодородия почвы, защита садовых культур от вредных насекомых,

профилактика некоторых инфекционных и других заболеваний, многие

широко используемые лекарства, такие как пестициды, инсектициды,

используются для устранения или предотвращения проблем [Francisco S.

2011, Кудяшева А. Г. 2008]. Учитывая тот факт, что онтогенез человека

напрямую связан с окружающей средой, экологические проблемы, их

4

влияние на организм человека остаются актуальными проблемами

современной медицины.

Цель исследования: Изучение особенностей ангиогенеза миокарда и

иммуногистохимических маркеров при хроническом воздействии бихромата

натрия и линдана в условиях эксперимента.

Задачи исследования:

1.Определить активность ангиогенеза и экспрессий его маркеров в условиях

хронического воздействия бихромата натрия и линдана на стенку левого

желудочка.

2.Изучить особенности ангиогенеза стенки миокарда у потомства

экспериментальных животных при хроническом воздействии бихромата

натрия и линдана.

3.Определить особенности степени ангиогенеза миокарда и

иммуногистохимических показателей тканевой экспрессии животных в

сравнении с особенностями у потомков в условиях хронического

воздействия бихроматом натрия и линдана.

Научная новизна исследования

1. В экспериментальных условиях произведено сравнительное

исследование хронического воздействия бихромата натрия и линдана. В

результате исследования выявлено, что хроническое воздействие бихромата

натрия вызывает преобладание на начальной стадии, а на последующих

стадиях - воздействие линдана. Возрастание активности ангиогенеза в

соответствии с периодом интоксикации предполагает возможную

сосудистую реакцию на действия химических соединении. При сравнении

между собой воздействия бихромата натрия и линдана выявлено

преобладание изменений (16,01±0,3/11,6±0,02) при действии бихромата

натрия в разной степени на ангиогенез, несмотря на схожесть влияния

химических веществ.

2. В результате исследования выявлена непосредственная зависимость

фактора экспрессии сосудистого эндотелиального роста с сосудистыми

реакциями, активизацией рецепторов, увеличением экспрессии VEGF

примерно на 10% и увеличение на 11% при воздействии бихромата натрия в

эндотелиальных клетках, активизация экспрессии маркеров CD117 тучных

клеток на показатели ангиогенеза, а также около 22% в группе при

воздействии линданом активизация процесса апоптоза на 2% в

кардиомиоцитах близлежащих сосудов, что свидетельствуют об активном

восстановлении клеток при воздействии бихромата натрия и линдана.

3. Выявленные изменения в течение экспериментального исследования

у потомков животных могут быть связаны с гетероморфными изменениями в

показателях ангиогенеза, изменениями кровеносных сосудов,

морфологическими изменениями в стенках сосудов. В сравнительном

аспекте показателей интоксикации линданом (15,1%) и бихроматом натрия

активность (22%) иммуногистохимических маркеров эндотелиального

5

фактора роста и тучных клеток имело слабое проявление, а активность

экспрессии маркера р53 примерно на 5%. Таким образом, экспрессии

сосудистого эндотелиального фактора роста в миокарде являлось

проявлением куммулятивного воздействия химических соединении в

организме.

Практическое значение

1. При воздействии бихромата натрия и линдана выявлено, что в

стенках левого желудочка количественная плотность изменена

соответственно плотности кровеносных сосудов, установлено что

воздействие отравляющих веществ на процессы ангиогенеза, а также

влияние различных химических веществ на активность ангиогенеза имеет

важное прикладное значение.

2. Важным морфологическим показателем миокарда, ценный маркер

определящий тканевую экспрессию состояния кровеносных сосудов,

изменения сосудистой реакции дает возможность предварительно

предсказать эти изменения группах в зависмости от возраста, дополняя

понятия о неоангиогенезных процессах.

Апробация работы

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены

на: V Ежегодной Международной научно - практической конференции

«Актуальные вопросы медицины» (Азербайджан, Баку, 2016);

Международная научно-практическая конференция по интеграции,

партнерству и инновациям в медицинском образовании и науке, посвященная

60-летию Западно-Казахстанского государственного медицинского

университета им. Марата Оспанова (Актобе, 2017); На Конгрессе «European

Biotechnology Congress» (Греция, Афины, 2018); XXVI Международный

научный симпозиум морфологов "International Symposium on Morphological

Science» ISMS (Прага, Чехия, 2018); III Международная научно-

образовательная конференция «Интернациализация непрерывного

медицинского образования. Взгляд в будущее» (Актобе, 2019).

Сведения о публикациях

По теме диссертационного исследования опубликовано 12 научных

работ, из них: 1 публикация в международном издании, имеющем ненулевой

импакт-фактор, входящим в международную базу данных Scopus «Applied

Ecology and Enviromental Research»; 1 - в научном издании входящем в базу

данных elibrary.ru. РИНЦ; 3 в научных изданиях, рекомендованных

Комитетом по контролю в сфере образования и науки МОН Республики

Казахстан; 7 - в материалах международных научных конференций, в том

числе 5 зарубежных.

Материал и методы исследования

Экспериментальное исследование: дизайн исследования контрольно-

сравнительное, экспериментальное исследования согласно протоколу

P.Houpert, S. Frelon и соавторов 2005 проводили в 2-х сериях.

6

Эксперимент проводили в научно-практическом центре ЗКМУ имени

Марата Оспанова на 120 беспородых белых мышах мужской и женской

особи, весом 20-30 грамм. Животные были разделены на 3 группы:

1 группа - контрольная

2 группа - воздействие бихромата натрия

3 группа - воздействие Линдана

До проведения эксперимента для проведения экспериментального

исследования на животных было получено положительное решение

Локальной этической комиссии ЗГМУ имени Марата Оспанова (протокол

№1, 30.11.15).

Экспериментальное исследование проводилось с соблюдением всех

этических норм Европейской конвенции. Перед проведением эксперимента

животные в течении 7 суток находились в условиях стандартного режима со

свободным доступом к воде и пище, с соблюдением режима (день-ночь)

12/12. Состояние животных контролировалось и оценивалось (осмотр,

состояние кожи, регистрация потребления воды и пищи, масса тела) на

протяжении всего эксперимента. Экспериментальное исследование на

животных проводилось в 2-х направлениях, в течении 2-х месяцев per os

вводились химические соединения, а контрольная группа содержалась в

стандартных условиях вивария. Для оценки динамики влияния химических

соединений по 1 серии, животные были выведены из эксперимента путём

декапитации в конце 1-го и 2-го месяца после хронической интоксикации, а

остальные были спарены. В период гестации и лактации введение

химических соединений было прекращено.

Исследование проводили в двух направлениях, которое включало

введение препарата бихромата натрия в дозе 5мг/кг и хлорорганического

пестицида Линдана C6H6Cl6 в дозе 100 мг/кг per os. На 25 день лактации

были отобраны только самцы-детеныши, которые были разделены на 3

группы:

1 группа - контрольная

2 группа - воздействие бихромата натрия

3 группа - воздействие Линдана

В течении 1 месяца экспериментального исследования потомки

подвергались воздействию химических соединений. В конце 1-го месяца

хронической затравки животные были выведены из эксперимента путём

декапитации. Из каждой группы исследования были взяты 15 животных.

Гистологический метод. Проведено обезвоживание в серии

возрастающей концентрации спиртов. По общепринятой гистологической

методике проведена заливка парафином. После декапитации были изъяты

сердца животных и фиксированы в 10 % буферном растворе формалина в

течении 24 часов и получены парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм с

помощью микротома. Полученные срезы окрашены гематоксилином-

эозином.

7

Иммуногистохимический метод.

Для иммуногистохимического исследования были использованы три

коммерческих моноклональных антитела: VEGF (SP28), CD 117 (RTU), и

р53 (Ab-5).

Для морфологического анализ были использованы бинокулярный

микроскоп Leica DM 1000 + камера цифр Leica DFC290, для анализа

полученных результатов подсчет клеток и измерение сосудов проводилось с

помощью программы "ImageJ soft".

Статистический анализ

Поученные данные были обработаны с использование STATISTICA 10.

(Stat.Soft, Ins. США). Все данные были внесены в электронную таблицу в

формате MS Excel. Различия во всех случаях оценивали как статистически

значимые при р<0,05. Для описательной статистики количественных

переменных использованы среднее значение (М), стандартное отклонение

(SD), и в случае распределения, отличного от нормального медиана (Ме) и 25

и 75 процентили (Ме (q25–q75)). Для описания качественных данных

использованы частоты (в %) с 95 % доверительными интервалами. В случае

неподчинения данных закону нормального распределения для оценки

различий применялся в двух группах - тест Manna Whitney (Манна-Уитни) U,

в трех и более – Н-критерий Kruskal-Walis (Краскелл - Уоллис).

Результаты исследования.

При сравнении контрольной группы с полученными

морфологическими показателями в первом месяце эксперментального

исследования с двумя экспериментальными группами явных изменений не

выявлено. Только количественная плотность кровеносных сосудов в

условиях интоксикации бихроматом увеличилось почти в 1,5 раза при

сравнении с контрольной группой. Изменения плотности расположения

кровеносных сосудов в первом месяце в обоих группах без явных

особенностей, в основном, в местах ближе к эпикарду плотные, а формы

кровеносных сосудов остаются без изменений.

Количественная плотность во втором месяце опыта по сравнению с

контрольной группой в обеих стенках увеличилась почти в два раза. При

сравнении этих показателей с условиями интоксикации линданом, с

плотностью стенок, то отмечается утолщение передней стенки

приблизительно как и при условиях интоксикации бихроматом натрия,

плотность задней стенки истончена по сравнению с контрольной группой

992,63±0,04 пкс и 154,3±0,5 пкс при интоксикации бихроматом натрия.

Однако, показатели количественной плотности кровеносных сосудов в обеих

стенках во втором месяце опыта при сравнении с контрольной группой

утолщена почти в 1,5 раза, а при сравнении с показателями при воздействии

бихроматом натрия передняя стенки истончена в 1,4 раза, а задняя стенка в

1,2 раза (р≤0,05).

8

А диаметр кровеносных сосудов задней стенки при воздействии

бихроматом натрия уменьшилось до 3,7 раза, а при воздействии линданом – в

2,9 раза (р≤0,05). При сравнении влияния двух соединений, во втором месяце

опыта размеры кровеносных сосудов характеризуется с одинаковыми

изменениями. Особености расположения кровеносных сосудов в

контрольной группе, в основном, в области близко расположенной к

эпикарду количественная плотность оказалась выше, в обеих группах во

втором месяце интоксикации отмечается тенденция к увеличению плотности

в миокарде, затем в сторону эндокарда.

В экспериментальной группе воздействии бихроматом натрия при

сравнении с контрольной группой позитивные клетки с отрицательным

значением VEGF снижены почти на 0,7% раза а при воздействии линданом,

наоборот, увеличены почти на 2,0% раза. Тем не менее, приблизительно

схожи с показателями в контрольной группе величина VEGF маркеров

экспрессирующих клеток – сильные экспрессирующие клетки с

положительным значением по сравнению с контрольной группой (р≤0,05). В

обеих эксперментальных группах составляет 10 -11%, значения приближены

друг к другу, а слабые экспрессирующие клетки с положительным значением

в группе воздействии бихроматом натрия увеличились на 1,1%, а в группе

воздействии линданом, наоборот, явно снизились (р≤0,05). Если сравнитть

две группы интоксикации, в группе воздействия линданом слабые VEGF

экспрессирующие клетки составляют 19,1±0,2%, а в группе воздействии

бихромата были выявлены низкие показатели 14,5±0,01%. Т.е. в группе

воздействия в условиях бихроматом натрия экспрессия сосудистого фактора

роста выше, также их позитивность равномерно не распределена в слое

эндотелия, отмечается очаговость накопления.

Наряду с этими изменениями выявлено, что экспрессия маркеров

тучных клеток CD 117 (RTU) изменяются в соответствии с сосудистыми

реакциями. В группе воздействия бихроматом в первом месяце опыта

неэкспрессирующие клетки CD 117 маркера составили 68,9±0,1%, а в группе

воздействия линданом составило 44,9±0,03%, соответственно, в контрольной

группе этот показатель составляет 53,7±0,1%. В группе воздействии

бихроматом натрия 24,3±1,2% клеток являются позитивно сильным

значением для CD 117 маркера, а 6,8±0,1% имеют слабое позитивное

значение. В группе воздействия линданом соответственно особенности

экспрессия этих маркеров преобладают. В этом маркере сильно позитивные

клетки составляют 17,8±0,07%, а слабо позитивные клетки при сравнении

контрольной в группы воздействии бихроматом натрия что показатель имеет

значение близкое контрольной группе явно преобладают (37,1±0,7%).

Признаки степени ангиогенеза влияют на восстановление клеток той ткани в

которой расположены. Поэтому, для выявления зависимости признаков

апоптоза кардиомиоцитов от сосудистых изменений провели определение

имуногистохимического маркера экспрессии р53.

9

В первом месяце эксперментального исследования в группе воздействия

бихроматом натрия маркеры р53 не обнаружены 83,6±0,4% . Этот показатель

в группе воздействия линданом составил 57,2±0,2%, что явно превышает

показатели контрольной группы (59,9±0,03%). А сильно позитивные клетки в

группе воздействия бихроматом натрия оказались ниже показателя в 3,9 раза,

при сравнении с контрольной группой, а в группе воздействии линданом

явных изменений не было, величины оказались схожими (р≤0,05). Слабо

позитивные клетки к маркеру р53 в группе воздействии бихроматом натрия

снижены в два раза, а в группе интоксикации линданом увеличилось всего

на 1% (22,5±0,4%).

Во-втором месяце эксперментального исследования сосудистый

эндотелиальный фактор роста VEGF экспрессирщих неопределенных клеток

в группе воздействия бихроматом натрия при сравнении с контрольной

группой выявлено снижение на 10,2%, а в группе воздействия линданом

снижено на 2,0% раза. Показатели сильно положительных позитивных

клеткок в двух группах схожи, а слобо положительные при сравнении с

контрольной группой увеличено на 2-3% раза при воздействии с бихромат

натрий составило 24,5±0,01%, а в группе воздействия линданом снизилось

примерно на 5,0%. Наряду с этим , в группе воздействия бихромата натрия

около кровеносных сосудов были выявлены VEGF позитивные клетки самого

миокарда. То есть, признаки миграции сосудистых эндотелиального фактора

роста, увеличивают проводимость стенки сосудов . Миграция наружу с

полости кровеносных сосудов VEGF экспрессирующих клеток или

выявления их в слое миокарда, обнаружены во втором месяце воздействия

линданом. Тем не менее, показатели в условиях воздействия бихромата

натрия низкие. Определяется только около мелких сосудов.

Экспрессия маркеров CD 117 позитивно сильно положительные клетки

в двух экперментальных группах в сравнении с контрольной имели высокие

показатели в группе воздействии бихроматом натрия на 2 раза, а в группе

воздействии линданмен в 5,0%. Слабо положительные клетки во втором

месяце эксперимента в группе воздейстии бихроматом натрия имели низкие

показатели и составило – 6,9±0,5%, а в группе воздействии линданом

составило 39,8±1,1%, в сравнении с контрольной группой больше в 1,3 раза, а

в группе воздействии бихроматом натрия в 5,7 раза.

В этом периоде интоксикации степени экспрессии маркера апоптоза

р53 при сравнении с контрольной группы и первом месяце воздействия, в

группе бихромата натрия составило 79,7±0,3% , несмотря на высокие

показатели в сравнении с контрольной группой, в сравнении с интоксикацией

первого месяца снизилось до 5%. Несмотря, что величины степени

экспрессии явно интенсивных и интенсивность малого количества клеток

схожи с первым месяцем интоксикации , отмечается тенденция их

увеличения. В группе воздействия бихромата натрия положительно

позитивные клетки составили 5,2± 0,01% слабо положительные клетки

10

составили 15,1±0,02%. В группе воздействии линдана при сравнении с

группой воздействия бихромата натрия экспрессия сильно положительных

клеток увеличена в 5 раз, а в сравнении с контрольной группой увеличена на

3%. Слабо положительные клетки составили около 23,5 ±0,8% , в сравнении с

контролем увеличена на 2%, а с группой бихромата натрия показатель выше

на 8%. Несмотря на эти изменения их интенсивность в миокарде не

одинаково, характеризуется очаговостью скопления. При общем сравнении

экспрессия маркеров р53 выявляется ближе к эпикарду в виде

отрицательного значения.

Таким образом, изменения морфометрических показателей в структура

микроогранизации стенок левого желудочка в результате хронического

воздействия бихромата натрия и линдана, на ряду с увеличением

количественной плотности кровеносных сосудов в первом месяце

интоксикации, проявилось значительным уменьшением диаметра. Данные

показатели этих изменений превалировали во 2 месяце интоксикации, в виде

увеличения количественной плотности, появлением мелких кровеносных

сосудов. Изменения иммуногистологических маркеров соответственно этим

сосудистым реакциям , маркеры сосудистого эндотелиального фактора роста

выше в условиях воздействия бихромата натрия, чем в период воздействия

линдана, а состояние тучных клеток CD117 экспрессии, способствует

процессу апоптоза в кардиомиоцитах. То есть, в период первого месяца

интоксикации экспрессия CD117 и р53 повышена в обоих группах

соответственно. Однако, р53 позитивные клетки превалирует во 2 месяце

хронической интоксикации линданом. Выявлена зависимость между

экспрессией клеток CD117 и маркерами апоптоза имуногистологических

показателей миокарда, наряду с этим, изменения этих показателей

свидетельствуют о ответной реакции миокарда на результат хронической

интоксикации.

Во второй серии количественная плотность кровеносных сосудов

передней стенки составилог 9,0±0,2, а в задней стенке 6,2±0,1,

соответственно, величины оказались схожи (8,2±0,1 / 6,1±0,04) с контрольной

группой. Только в передней стенке количественная плотность увеличилась

почти в 0,8. На поперечном срезе не выявлены явные признаки по размерам

кровеносных сосудов, только отмечается сдавление их форм, при сравнении

с контрольной группой отмечается их удлиненние - встречающиеся в виде

овальной формы.

Толщина кровеносных сосудов группы 1-серий близка к показателям

воздействия первого месяца, в группе воздействия бихроматом натрия

толщина передней стенки составило 10,1±0,3, а в группе воздействия

линданом - 9,7±0,2. При сравнениями с показателями второго месяца,

показатели сосудистой реакции снижены, однако, выше, чем в контрольной

группе. Если сравнить показалети диаметра кровеносных сосудов, то они

снижены, в обоих видах интоксикации первого месяца, наблюдаются

11

мелкотипные проявления. В группе 1-серий интоксикации при с сравнению

со вторым месяцем, диаметры кровеносных сосудов увеличены, даны

сформированные структуры величин поперечного среза. Однако, при

сравнении показатели диаметров обнаружены явные отклонения в

соотношении, в группе интоксикации бихроматом натрия на передней стенке

составляет 490,2×220,1 , а в группе интоксикации линданом составило

310,1×221,4. Из них, на задней стенке группы бихромата натрия составляет

710,0×91,2 , а в группе линдана 700,1×88,3 , отмечается сдавление щелей

овального типа. Эти изменения могут быть связаны с изменением структуры

сосудистой стенки.

Во группе 2-серий экспериментального исследования под влиянием

отравляющих веществ проявления в потомствах характеризуются

своеобразными особенностями. Анализ иммуногистохимических показателей

показывает, что по сравнению с группой 1-серий отмечаются значительные

отклонения между сосудистыми изменениями и интенсивностью окраски

кардиомиоцитов. При сравнении поученных без воздействии химических

соединений показателей группе 2-серий эксперимента, с контрольной

группой в 1-серий иммуногистохимические проявления миокарда имели

многовидовую интенсивность окраски. Отмечено схожесть величин

сосудистого эндотелиального фактора роста, однако рост сильно позитивных

клеток проявилось реорганизацией клеток. Определение степени экспрессии

CD117 тучных клеток и маркера апоптоза – р53 несмотря на схожесть

показателей отрицательно положительных клеток, слабо положительные

клетки были смещены в сторону позитивных клеток.

Экспрессия VEGF во 2-серий исследуемой группы в условиях

воздействия бихроматом натрия при сравнении с группой первого месяца в

первой исследуемой группе увеличено количество положительных

позитивных клеток, приблизительно показателям второго месяца. Сильные

позитивные клетки составили 15,0±0,6%, а слабо позитивные клетки

соответсвенно 22,0±0,1%. Соответственно при сравнении групп

интоксикации воздействия линданом, если сравнить показатели двух

периодов воздействии в 1- исследуемой группой, то клетки, где не

определяется VEGF экспрессия, составило 69,4±0,5%, что указывают на

высокие показатели. Этот показатель 1- исследовательской группе

аналогичен с показателем второго месяца интоксикации. Однако, число

положительных позитивных клеток выше показателей первого месяца и

аналогичен значениям второго месяца. По результатам экспериментального

исследования экспрессия CD117 маркеров тучных клеток в группе

воздействия бихроматом натрия сильно положительные клетки составили

10,5±0,6%, а слабо положительные клетки составило 16,8±0,1%, что по

сравнению с контрольной группой показывало снижение почти в два раза, в

том числе, значения клеток, где экспрессия не определяется, составило

72,4±0,2%, что при сравнении с контрольной группой показывает

12

превышение почти на 25%. Если сравнить эти показатели с 1-серией

исследуемой группы, значения сильно положительных клеток выше в два

раза, а слабо позитивных клеток – почти в три раза. Значения в группе

интоксикации линданом аналогичны с контрольной группой, только

увеличилось почти на 1-2%, а если сравнить экспрессии CD117 с

показателями группы 1-серий то диапозоны отклонений одинаковы, без

изменений. То есть, если сравнить между собой в группы воздействия

бихроматом натрия с потомством, в основном преобладают изменения явно

прослеживаются в группе бихромата натрия.

В группе воздействия бихроматом натрия экспрессия р53 маркеров в

кардиомиоцитах характеризуются распространенностью при сравнени с

контрольной группой возрости количество клеток, где экспрессия не

определяется, соответственно, уменьшило количество положительно

позитивных клеток. Если сравнить эти показатели со значениями группы 1-

серий, то можно обнаружить, что экспрессия апоптозных маркеров в обоих

периодах в этой группе возросли в два раза, т.е., процесс апоптоза в

потомсвте высок. Если определять степень экспрессии маркеров апоптоза во

2-серий исследуемой группы в условиях воздействия линдана, то можно

обнаружить, что при сравнении с контрольной группой изменений нет,

только изменения заметны в промежут 1 – 2 %. А если сравнить с

показателями 1-серий исследуемой группы, можно выявить, что проявления

апоптоза особо не изменились и физиологическое обновление

кардиомиоцитов не изменилось под их влиянием.

Таким образом, как показали результаты исследования, в условиях

воздействия бихроматом натрия и линдана, в процессе обсуждения

возможных изменений в потомстве экспериментальных животных, можно

обнаружить, что химические соединения имеют длительный период

воздействия. Выявлено, что напрямую способсвтуют процессам активации

процесса ангигенеза сердечной стенки, функциональной возможности

активации местных клеток и физиологическому возобновлению

кардиомиоцитов. Эти изменения преобладают в условиях воздействия

бихроматом натрия, при сравнении с проявлениями воздействия линдана.

Также, выявленные особенности в кровеностных сосудах, связаны с

морфолочискескими изменениями их стенок.

13

Выводы.

1. Выявлено, что при хроническом воздействии бихромата натрия повышена

количественная плотность кровеносных сосудов в 2 раза, а при воздействии

линдана в 1,4 раза; выраженность этих показателей во 2-м месяце

отравления способствует активной экспрессии сосудистого эндотеального

фактора роста в период поздней интоксикации - на активность экспрессии.

Кроме того, увеличение на 15,2% показателей маркеров тучных клеток, по

сравнению с интоксикацией линданом, при отравлении бихроматом натрия

напрямую связано с показателями апоптоза (снижение до 20%).

2.Выявлено, что при хроническом воздействии бихромата натрия и линдана

проявление активности ангиогенеза в потомстве животных характеризуется

гетероморфностью, VEGF экспрессия определяется не только в эндотелии

сосудов, но и в миокарде, отмечается волнообразное изменение

иммуногистохимических маркеров, т.е. обнаружено снижение показателей

при интоксикации бихроматом натрия, а при интоксикации линданом -

повышение.

3.Установлено, что при хроническом воздействии бихромата натрия и

линдана изменения у подопытных животных при сравнении с измениями у

их потомства, показатели активности сосудистого эндотеального фактора

роста и показатели маркеров тучных клеток увеличены на 1,6 раза, а

показатели маркеров апоптоза у потомков с интоксикацией бихроматом

натрия увеличены на 12,1%, а в группе с интоксикацией линданом увеличены

на 3,7%, что свидетельсвтует о продолжении изменении из первой серии

исследования.

Список опубликованных работ:

1.Ye.Bekmukhambetov, S.B.Rakhmanov,A.B.Zhanabayeva Immunohistochemical

evaluation of cardiac angiogenesis of mice exposed to sodium dichromate and

lindane Vol. 17 (2) Applied Ecology and Enviromental Research, International

Scientific Journal, 2019, P.4515-4525. Indexed by Scopus.

2. A.B.Zhanabayeva Modern view on the problem of the ultrastructure myocardial

(review) №3 (89) Астана медицина журналы 2016 г., с.26-34.

3. Yе. Bekmukhambetov, G. Zhurabekova, S.B. Rakhmanov, A.B.Zhanabayeva

Local and general influence of organochlorine and chrome compounds Том 15 (4)

Научно-практический журнал Украинский морфологический альманах имени

профессора В. Г. Ковешникова 2017, с.17-24.

4.А.Б.Жанабаева, Е.Ж.Бекмухамбетов, С.Б.Рахманов Миокард тініндегі

апоптоз маркері мен CD117 анықталатын жасушалардың

иммуногистохимиялық көрсеткіштерін тәжірибелік улану жағдайында

зерттеу №5 (191) Медицина журналы, Алматы, 2018., стр.60-64.

5.А.Б.Жанабаева, Е.Ж. Бекмухамбетов, С.Б. Рахманов, С.К. Саханова Линдан

мен бихромат натрий әсерінен болатын миокардтағы қан тамырлар

14

тығыздығының салыстырмалы ерекшеліктері №2 (200) Медицина журналы,

Алматы, 2019., стр.29-35.

6. Zhanabayeva A.B., Rakhmanov S.B., Zhumabay N.A. Morphofunctional ability

of myocardium depending on the degree of angiogenesis Vol.3, Medical review,

Сборник международных конференции "Актуальные вопросы медицины",

Баку, 2016г., с.91-92.

7. Жанабаева А.Б., РахмановС.Б., РаманкуловаА.Б. Базаева Г.Ж., Гимранов

Г.С. Морфологические особенности ангиогенеза миокарда при длительном

воздействии хлорорганических соединении. Vol.3, Medical review, Сборник

международной конференции "Актуальные вопросы медицины", Баку,

2018г., с.131.

8.Zhanabayeva A.B., Rakhmanov S.B. Dynamic observation of changes in

myocardial angiogenesis of mice chronically exposed to chromium Vol.208S,

Absrtract in Journal of Biotechnology, Международная научная конференция

Greece, 2018., Р.16.

9. S.B. Rakhmanov, A.B. Zhanabayeva Features of angiogenesis in myocardial

tissue during chronic exposure of pesticides ISMS 2018 XXVI International

Symposium on Morphological Science, Прага, 2018., Р.63.

10.А.Б. Жанабаева, С.Б.Рахманов Г.А.Журабекова Сол жақ қарынша

қабырғаларының морфометриялық көрсеткіштерін ерекшеліктері том 1,

БҚММУ 60 жылдығына арналған Медицина білімі мен ғылымындағы

интеграция, серіктестік және инновация атты халықаралық ғылыми-

практикалық конференция, Актобе, 2017ж., 222-225б.

11.С.Б.Рахманов, А.Б. Жанабаева, Г.А.Журабекова Особенности

иммуногистохимических показателей стенки сердца при воздействии

химических соединений №3 Научно-теоретический медицинский журнал

"Морфология" Том 153, 2018, стр.230.

12. S. Rakhmanov, Yе. Bekmukhambetov, A.Zhanabayeva, G.Gimranov Studying

of cardiomyocytes p53 and mast cells markers expression under prolonged effect

of Lindane Vol. 110, The III International scientific and educational conference

"The internationalization of continuing medical education. Prospection", Supple 1,

No.2, Aktobe, 2019, P80-81