антигени на грип А и грип Б u - bd · 2017. 5. 15. · грип А от...

B Directigen EZ Flu A+B За диференцирано пряко откриване на вирусни

антигени на грип А и грип Б80105892008/03

БългарскиПРЕДНАЗНАЧЕНИЕТестът Directigen EZ Flu A+B е бърз хроматографски имунен анализ за пряко и качествено откриване на вирусни антигени на грип А и грип В от назофарингеални смивове/аспирати, намазки от назофаринкс и гърло на симптоматични пациенти. Тестът Directigen EZ Flu A+B е диференциран тест, така че вирусните антигени на грип А могат да се разграничат от вирусните антигени на грип В от една обработена проба, използвайки едно устройство. Предназначението на теста е да служи като помощно средство при диагнозата на грип А и В вирусни инфекции. Всички отрицателни резултати от теста трябва да се потвърдят посредством клетъчна култура, тъй като отрицателните резултати не изключват инфекция с грипен вирус и не трябва да се използват като единствено основание за лечение или други лечебни решения.

Работните характеристики за грип B, използвайки назофарингеални намазки (NPS) са установени основно с ретроспективни, замразени образци. Потребителите могат да пожелаят да установят чувствителността на този тест

за грип B като използват свежи образци от назофарингеални намазки.

ОБЩО ОПИСАНИЕ И ОБЯСНЕНИЕГрипното заболяване класически се представя с внезапно начало на треска, втрисане, главоболие, миалгии и суха кашлица. Грипните епидемии настъпват типично през зимните месеци с изчислени приблизително 114 000 хоспитализации1 и 36 000 смъртни случая2 за година в САЩ. Грипните вируси могат също да причинят пандемии, по време на които честотата на заболяване и смъртните случаи от свързаните с грипа усложнения могат да се увеличат драматично.На пациентите, които се представят със съмнение за грип, може да се помогне с лечение с противовирусен препарат, особено ако е приложен през първите 48 часа от началото на заболяването. Важно е, бързо да се разграничи грип А от грип В с цел да се позволи на лекарите избор на селективна противовирусна интервенция. Нещо повече, важно е да се определи дали грип А или грип В е причинител на симптоматичното заболяване в отделно заведение (например, старчески дом) или общност, така че да може да се вземат подходящи превантивни мерки при податливите индивиди. Следователно, важно е не само бързо да се определи дали има грип, но също така и кой тип грипен вирус е налице.Наличните тестове за диагностика на грип включват бърз имунен анализ, имунофлуоресцентен анализ, полимеразна верижна реакция (PCR), серологичен анализ и вирусна култура.3-10 Имунофлуоресцентните анализи водят до оцветяване на образците, имобилизирани върху микроскопски предметни стъкла, използвайки маркирани с флуоресцеин антитела за наблюдение посредством флуоресцентна микроскопия.5,11,12 Културелните методи прилагат начално изолиране на вируса в клетъчна култура, последвана от анализите инхибираща хемадсорбция, имунофлуоресценция или неутрализация за потвърждаване наличието на грипен вирус.12-14 Тестът Directigen EZ Flu A+B е хроматографски имунен анализ за откриване на антигени на грип А или В от образци от дихателни пътища на симптоматични пациенти, с време за получаване на резултати от 15 мин.Скоростта и опростената поточността на Directigen EZ Flu A+B го правят приложим като „Тест за незабавно откриване на антиген (STAT)“ на грип A и B, осигуряващ релевантна информация за подпомагане на диагностиката на грипа. Прилагането на теста Directigen EZ Flu A+B за отграничаване на грип A от грип B инфекция може да предостави благоприятната възможност за по-голяма селективност на антивирусната намеса.

ПРИНЦИПИ НА ПРОЦЕДУРАТАТестът Directigen EZ Flu A+B е хроматографски анализ за качествено откриване на вирусни антигени на грип А и грип В в проби обработени от образци от дихателни пътища. Когато образците са обработени и добавени към тестващото устройство, вирусните антигени на грип А или В се свързват с антигрипните антитела, конюгирани с частици за визуализиране в съответните А и В тест ленти. Комплексът антиген-конюгат мигрира през тест лентата до зоната за реакция и се захваща от линията от антитела върху мембраната. Положителен резултат за грип А се визуализира като пурпурна червеникава линия в позиция на теста „T“ и в позицията на контролата „C“ на прозорчето за отчитане на Directigen EZ Flu A. Положителен резултат за грип В се визуализира като пурпурна червеникава линия в позиция на теста „T“ и в позицията на контролата „C“ на прозорчето за отчитане на Directigen EZ Flu В.

РЕАГЕНТИСледните компоненти са включени в комплекта на теста Directigen EZ Flu A+B:Устройства BD Flu A+B 30 устройства Обвито във фолио устройство, съдържащо две реактивни ленти.

Всяка лента притежава тестова линия от моноклонални антитела, специфични за вирусен антиген на грип А или грип В и контролна линия от анти видово антитяло.

Реагент Е 4,7 mL Детергент с 0,2% натриев азид (консервант).Контрола A+/B- 2,8 mL Грип A положителна и грип B отрицателна контрола, антиген грип

A (неактивен рекомбинантен нуклеопротеин) с 0,1% натриев азид (консервант).

U

2

Контрола B+/A- 2,8 mL Грип В положителна и грип А отрицателна контрола, антиген грип В (неактивен рекомбинантен нуклеопротеин) с 0,1% натриев азид (консервант).

Епруветки DispensTube 30 Епруветки за обработка на образеца и доставяне на пробата в устройствата.

Върхове за DispensTube 30 Върхове за филтриране на пробата, когато се доставя в устройствата.Необходими, но не предоставени материали: Пипета (с капацитет за поставяне на 300 µL), таймер, разклащащ миксер, транспортна среда (вж. Вземане и боравене с образци), физиологичен разтвор и тампони.

Предупреждения и предпазни мерки: За употреба при ин-витро диагностика. 1. Ако въз основа на текущите клинични и епидемиологични критерии за сортиране, препоръчани от властите

на общественото здравеопазване, се подозира инфекция с нов вирус грип А, образци трябва да се вземат с подходящи предпазни противоинфекциозни мерки за нови вирулентни грипни вируси и да се изпратят до държавен или местен здравен отдел за изследване. В тези случаи не трябва да се опитва вирусна култура, освен ако не е на разположение лаборатория с ниво на биологична сигурност 3+ (BSL 3+), за да получи и отгледа в култура пробите.

2. В клиничните образци може да присъстват патогенни микроорганизми, включително вируси на хепатит и вируса на човешката имунна недостатъчност (HIV) и нови грипни вируси. „Стандартни предпазни мерки“ 15 -18 и институционалните напътствия трябва да бъдат следвани при работа, съхранение и изхвърляне на всички образци и артикули, които са замърсени с кръв и други телесни течности.

3. Реагентите съдържат натриев азид, който е вреден, ако се вдиша, погълне или при контакт с кожата. В контакт с киселини се отделя много токсичен газ. Ако е налице контакт с кожата, незабавно измийте обилно с вода. Натриевият азид може да реагира с олово и мед от тръбите на канализацията и да образува силно експлозивни метални азиди. При изхвърляне отмийте обилно с много вода, за да предотвратите натрупването на азиди.

4. Не използвайте компонентите на комплекта след изтичане на срока на годност. 5. Не смесвайте реактиви от комплекти с различни партидни номера. 6. Не използвайте повторно устройството. 7. Не използвайте комплекта, ако Control A+/B- (контрола A+/B-) и Control B+/A- (контрола B+/A-) не дават

съответстващи резултати.Съхранение и манипулиране: Комплектите могат да се съхраняват при 2 – 25°C. ДА НЕ СЕ ЗАМРАЗЯВА. Реагентите и устройствата трябва да са темперирани до стайна температура (15 – 25°C), когато се използват за изследване.

ВЗЕМАНЕ И МАНИПУЛИРАНЕ НА ПРОБА

Транспорт и съхранение на проба: Прясно взетите проби трябва да се обработят незабавно. Ако е необходимо, пробите (различни от натривки от гърло) могат да се съхраняват в подходяща транспортна среда и да се съхраняват при 2 – 8°C до 72 часа или при -20°C до 7 дни.Най-важно е да се следват правилното събиране на пробите и методите на подготовка. Преди употреба пробите да не се центрофугират, тъй като отстраняването на клетъчния материал може да засегне неблагоприятно чувствителността на теста. Пробите, получени рано в хода на заболяването, ще съдържат най-високите вирусни титри.Транспортна среда: Следните транспортни среди са тествани и е установена съвместимост с теста Directigen EZ Flu A+B:

Среда Amies (течна) PBS (физиологичен разтвор с фосфатен буфер) плюс 0,5% BSA (говежд серумен албумин)

Среда Bartel ViraTrans PBS плюс 0,5% желатинМинимална основна среда на Earle (EMEM) Физиологичен разтвор с фосфатен буфер (PBS)

EMEM плюс 0,5% BSA Starplex MultitransEMEM плюс 1% BSA Захароза фосфат (2-SP)Основен солен разтвор на Hanks Соев бульон Trypticase Soy BrothСреда M4 Соев бульон Trypticase Soy Broth + 0,5% желатинСреда M4 RT Соев бульон Trypticase Soy Broth + 0,5% BSAСреда M5 Универсална вирусна транспортна среда BDМодифицирана среда на Stuart (течна) Говежди инфузионен бульон (VIB)

Физиологичен разтвор* VIB плюс 0,5% BSA*не се препоръчва съхранението в замразено състояние на пробите взети във физиологичен разтвор за изследване с теста Directigen EZ Flu A+B.Могат да се използват и други транспортни среди, ако е проведен подходящ качествен опит.ЗАБЕЛЕЖКА: Средата EMEM, съдържаща лакталбумин (напр. 0,5% или 1,0%), както и всяка друга транспортна среда, съдържаща лакталбумин, са несъвместими с теста Directigen EZ Flu A+B.Взимане и подготовка на проба: Приемливи за изследване с теста Directigen EZ Flu A+B са пробите от назофарингеални смивове/аспирати, назофарингеални натривки и натривки от гърло. Неадекватното събиране на

3

пробата, неправилното боравене с пробата и/или транспорт могат да произведат фалшиво отрицателен резултат; следователно обучението в събиране на проби е много препоръчително, поради значението на качеството на пробата за акуратни резултати от изследването.

Процедури за проби от назофарингеални смивове/аспирати и назофарингеални натривки: 1. За назофарингеалните смивове/аспирати се препоръчват обеми на пробата от 1 до 3 mL. Ако се използва

транспортна среда, за предпочитане е минимално разреждане на пробата. 2. Трябва да се избягват прекалено големите обеми на промиване, тъй като могат да доведат до намалена

чувствителност на теста. 3. При назофарингеалните натривки поставете тампоните в 1 до 3 mL транспортна среда след вземането им. 4. Обработете пробата, както е описано в „Тестова процедура“.Процедура за проби от намазки от гърло (полиуретанови [пяна] тампони се препоръчват – Виж раздела „Наличност“): 1. Пробите от намазки от гърло трябва да се обработят без транспортна среда, както е описано при „Тестова

процедура“.

ПРОЦЕДУРА

Тестова процедураЗАБЕЛЕЖКИ: • За изследване, реагентите, пробите и устройствата трябва да са темперирани на стайна температура (15 – 25°C).• Разбъркайте старателно всички проби преди да извадите една част за обработване. Не центрофугирайте

пробите.• Епруветките DispensTube и флаконите с реагенти трябва да се държат вертикални (приблизително един инч над

отделението за проби на устройството Directigen EZ Flu A+B или епруветката DispensTube), докато внимателно разпределяте една капка по едно време.

1. Непосредствено преди изследването извадете устройството Directigen EZ Flu A+B от плика му от фолио. 2. Обозначете с етикет едно устройство и една епруветка DispensTube за всяка контрола и проба, която трябва

да се изследва. 3. Поставете маркираната(ите) епруветка(и) DispensTube в определената зона на работното място или

поставката. 4. Разбъркайте внимателно Реагента E. Отмерете 4 капки в

епруветката DispensTube. Дръжте флакона с реагента вертикално (приблизително един инч над епруветката DispensTube), докато отмервате капките.

5. Разбъркайте старателно пробата или контролата и обработете както е посочено по – долу:

а. За проби от назофарингеален смив/аспират и назофарингеална натривка в транспортна среда:

1. Разклатете на смесител или смесете старателно пробата. Не центрофугирайте.

2. Поставете с пипета 300 µL от пробата в епруветка DispensTube (съдържаща Реагент Е).

4

b. За проби от натривка от гърло: 1. Добавете 300 µL физиологичен разтвор към епруветката

DispensTube (съдържаща Реагент Е). 2. Въведете тампона и го изцедете като го завъртате 6 – 8 пъти и го

притискате към епруветката. 3. Отстранете тампона (притиснете епруветката, за да отстраните

излишната течност от върха на тампона).

c. За комплекта контроли: 1. Разбъркайте внимателно флаконите с Контрола A+/B- и Контрола

B+/A-. 2. Добавете 6 капки от Контрола A+/B- към съответно маркираната с

етикет епруветка DispensTube (съдържаща Реагент Е). 3. Добавете 6 капки от Контрола B+/A- към съответно маркираната с

етикет епруветка DispensTube (съдържаща Реагент Е).

6. Поставете връх за DispensTube на DispensTube, съдържаща обработената проба или контрола.

Забележка: Не използвайте върхове от други продукти Directigen.

7. Разклатете на смесител или смесете старателно. 8. Обърнете епруветката DispensTube и държейки епруветката

за горната половина далеч от върха, внимателно отбройте с притискане три (3) капки от обработената проба в отделението за проба за грип А и три (3) капки в отделението за проба за грип В съответно обозначеното устройство Directigen EZ Flu A+B.

Забележка: Притискането на епруветката в близост до върха може да доведе до изтласкване на върха и изтичане на съдържанието от епруветката.

9. След добавянето на пробата отчетете резултата на 15 минута и запишете резултата от теста.

Качествен контрол:Изискванията за контрол на качеството трябва да се спазват съобразно местните държавни и/ или федерални разпоредби или официални стандарти и съобразно стандартните процедури за качествен контрол на Вашата лаборатория.Всяко устройство Directigen EZ Flu A+B носи и двете вътрешни положителни и отрицателни процедурни контроли: • Появата на пурпурно червеникава контролна линия в прозорчетата за отчитане на грип А и/или грип В

позиция Контрола „С“ осигурява вътрешна положителна контрола, която потвърждава правилното действие на реагента и удостоверява, че е следвана правилна тестова процедура.

• Мембранната зона, заобикаляща тест линиите за грип А и грип В и линиите на контролите е вътрешната отрицателна контрола за устройството. Зоната на фона, която е бяла до бледо розова сочи, че тестът е извършен правилно.

5

Всеки комплект Directigen EZ Flu A+B съдържа комплект течни контроли Контрола A+/B- и Контрола B+/A-:Тези контроли са тествани по същия начин като пробите на пациента и предоставят средство за външен качествен контрол. Като минимум, тези течни контроли трябва да се пускат като процедура за качествен контрол за всяка получена нова партида комплекти или пратка. При желание, съответното действие на реагента и правилната техника на тестване могат също да бъдат определени посредством употребата на проби, определени като позитивни или негативни за вируса на грип А или В.Образуването на пурпурна червеникава линия върху мембраната в прозореца за отчитане на грип А на позиция Тест (Т) и позиция Контрола (С), когато се тества Контрола A+/B- и в прозореца за отчитане на грип В на позиция Тест (Т) и позиция Контрола (С), когато се тества Контрола B+/A- показва, че антиген свързващите свойства на тест лентата са функциониращи.Образуването на пурпурна червеникава контролна линия на позиция Контрола (С) в прозореца за отчитане на грип В и отсъствието на пурпурна червеникава линия при позиция Тест (Т), когато се тества Контрола A+/B- сочи съответен отрицателен контролен резултат за грип В, който показва правилно действие на реагента и че е следвана правилна тестова процедура. По същия начин, образуването на пурпурно червеникава контролна линия на позиция Контрола (С) в прозореца за отчитане на грип А и отсъствието на пурпурно червеникава контролна линия при позиция Тест (Т), когато се тества Контрола B+/A- сочи съответен отрицателен контролен резултат за грип А.Ако комплектът с контроли не работи според очакваното, не съобщавайте резултатите на пациентите. Свържете се с вашия местен представител на BD или Техническите служби за съдействие.

ИНТЕРПРЕТИРАНЕ НА РЕЗУЛТАТИЗАБЕЛЕЖКА: Интензитетът на контролната линия може да варира между прозорците за отчитане на грип А и грип В. Вариабилността в интензитета на контролната линия е приемлива. Зоната на фона трябва да бъде бяла до бледо розова и може да варира по интензитет между прозорците за отчитане на грип А и грип В.

Положителен тест за грип А (наличие на антиген грип А) – Появява се пурпурна червеникава линия в позиция на теста „T“ и в позицията на контролата „C“ на прозорчето за отчитане на Directigen EZ Flu A. Този резултат не идентифицира някакъв специфичен подтип на грипен вирус А. Пурпурна червеникава линия трябва също да се появи в позиция Контрола „C“ на прозорчето за отчитане на Directigen EZ Flu B. Това показва, че в пробата е открит антиген на грип А. Фоновата зона трябва да бъде бяла до бледо розова.Положителен тест за грип В (наличие на антиген грип В) – Появява се пурпурна червеникава линия в позиция на теста „T“ и в позицията на контролата „C“ на прозорчето за отчитане на Directigen EZ Flu В. Пурпурна червеникава линия трябва също да се появи в позиция Контрола „C“ на прозорчето за отчитане на Directigen EZ Flu А. Това показва, че в пробата е открит антиген на грип В. Фоновата зона трябва да бъде бяла до бледо розова.

Отрицателен тест за грип A или грип B (не се открива антиген) – Отсъствие на видима пурпурно червеникава линия на позиция Тест „T“ на прозорчето за отчитане на грип A или грип B показва, че антиген на грип А или антиген на грип В, или и двете, не се откриват в пробата. Тези резултати не изключват грипна вирусна инфекция. Пурпурна червеникава линия на позиция Контрола „C“ на прозорчето за отчитане на грип А, прозорчето за отчитане на грип В или в двете показва правилна работа на процедурата на теста и реагентите. Фоновата зона трябва да бъде бяла до бледо розова.

Невалиден тест – Тестът е невалиден за грип А, или за грип В, или за двете, ако не се вижда пурпурна червеникава линия в съседство с позицията на Контрола „C“ в съответното прозорче (та) за отчитане. Тестът също така е невалиден, ако се появи пурпурна червеникава линия в позиция Тест „T“ в прозорчетата за отчитане на грип А и грип В на същата проба. Ако е невалиден, тестът трябва да се повтори.

ОТЧИТАНЕ НА РЕЗУЛТАТИПоложителен тест Положителен за наличието на антиген на грип А или грип В. Положителен резултат може да

се наблюдава при отсъствие на жизнен вирус.Отрицателен тест Отрицателен за наличието на антиген на грип А или грип В. Инфекция, причинена от грип не

може да се изключи, тъй като наличният антиген в пробата може да бъде в количества под границата на откриване на теста. Препоръчва се потвърждаване в култура на негативните резултати.

Невалиден тест Резултатът от теста е неопределен. Не отчитайте резултати.

ОГРАНИЧЕНИЯ НА ПРОЦЕДУРАТА• С този тест не може да се установи етиологията на респираторна инфекция, причинена от други микроорганизми,

освен грипен вирус А или В. Directigen EZ Flu A+B е в състояние да открие както жизнеспособни, така и нежизнеспособни частици на грипен вирус. Постижението на теста Directigen EZ Flu A+B зависи от антигенното натоварване и може да не корелира с клетъчната култура, направена от същата проба.

CT

Отрицателен

A B

6

• Ниски нива на разпространение на вируса могат да доведат до фалшиво отрицателен резултат; следователно отрицателен резултат от теста не изключва възможността за инфекция с грип А, или грип В, или смесена с грип А и В.

• Валидността на теста Directigen EZ Flu A+B не е доказана за идентификация или потвърждение на изолати от клетъчна култура.

• Работните характеристики за грип А са установени, когато грипните вируси A/H3 и A/H1 са преобладаващи грипни вируси А в циркулация. Когато изникнат други грипни вируси A, работните характеристики може да се променят.

• При децата съществува тенденция да носят вируса за по-дълги периоди от време, отколкото възрастните, което може да доведе до различия в чувствителността между възрастни и деца.

• Положителните и отрицателните прогностични стойности са силно зависими от разпространението. Фалшиво положителните резултати от теста са по-чести през периодите на ниска активност на грип, когато разпространението е умерено до ниско.

ОЧАКВАНИ СТОЙНОСТИЧестотата на наблюдаваната положителност при респираторно изследване ще варира в зависимост от метода на взимане на проба, боравене/използвани транспортни системи, използван метод на откриване, годишно време, възраст на пациента, географско местоположение и най-вече местното разпространение на заболяването. Общата честота наблюдавана с изследване в култура по време на клиничното проучване през 2003 – 2004 година е била 24,3% за грип А и 3,8% за грип В. По време на клиничното проучване през 2004 – 2005 година общата наблюдавана честота при изследване в култура е била 26,0% за грип А и 31,2% за грип В. При клиничното проучване през 2006 година общата наблюдавана честота при изследване в култура е била 33,9% за грип А и 0,2% за грип В.

РАБОТНИ ХАРАКТЕРИСТИКИРаботните характеристики на теста Directigen EZ Flu A+B са установени при многоцентрови проучвания, проведени в пет опитни места през респираторния сезон 2003 – 2004 година, 13 опитни места през респираторния сезон 2004 – 2005 година и 2 опитни места през респираторния сезон 2006 година. Клиничните центрове се намират в различни географски зони в Съединените щати, Япония, Хонконг и Нова Зеландия.Оценени са общо 1191 проспективни проби и 59 ретроспективни посредством теста Directigen EZ Flu A+B и в клетъчна култура. Тези проби се състоят от назофарингеални смивове, назофарингеални аспирати, назофарингеални натривки и натривки от гърло от пациенти, заподозрени, че имат грип.

Клинично действие:Работните характеристики на теста Directigen EZ Flu A+B сравнени с клетъчна култура за всеки тип проба са представени Таблица 1 до Таблица 6.

Таблица 1: Резюме за действието на теста Directigen EZ Flu A+B, сравнен с клетъчна култура за всички типове проби - грип А Комбинирани респираторни сезони 2003 – 2004, 2004 – 2005 и 2006 години

Клетъчна култура

Тип пробаТест Directigen EZ

Flu A+B П ОНазофарингеални смивове/аспирати

П 115 2О 19 330

Чувствителност: 86% (95% ДИ: 79% – 91%)Специфичност: 99% (95% ДИ: 98% – 100%)

Натривки от гърлоП 43 29О 13 184


Назофарингеални натривкиП 146 20О 15 275


7

Таблица 2: Резюме за действието на теста Directigen EZ Flu A+B, сравнен с клетъчна култура за всички типове проби - грип В Комбинирани респираторни сезони 2003 – 2004, 2004 – 2005 и 2006 години



Flu A+B П ОНазофарингеални смивове/аспирати

П 57 1О 14 394


Натривки от гърлоП 38 3О 17 211




Таблица 3: Резюме за действието на теста Directigen EZ Flu A+B, сравнен с клетъчна култура за ретроспективни назофарингеални натривки – грип В от респираторен сезон 2005 година



Flu A+B П О


Положително съответствие: 74% (95% ДИ: 59% - 87%)Отрицателно съответствие: 100% (95% ДИ: 79% - 100%)

Таблица 4: Резюме за действието на теста Directigen EZ Flu A+B, сравнен с клетъчна култура за всички типове проби от популацията - грип А Комбинирани респираторни сезони 2003 – 2004, 2004 – 2005 и 2006 години



Flu A+B

Педиатрични (≤ 21 години)

Възрастни (> 21 години)

П О П ОНазофарингеални смивове/аспирати

П 94 2 21 0О 11 294 8 36

Чувствителност: Педиатрични: 90% (95% ДИ: 82% – 95%); Възрастни: 72% (95% ДИ: 53% – 87%)Специфичност: Педиатрични: 99% (95% ДИ: 98% – 100%); Възрастни: 100% (95% ДИ: 90% – 100%)

Натривки от гърло

Тест Directigen EZ Flu A+B



П О П ОП 38 23 5 6О 10 151 3 33


Назофарингеални натривки



Възрастни (> 21 години

П О П ОП 62 11 84 9О 6 84 9 191


8

Таблица 5: Резюме за действието на теста Directigen EZ Flu A+B, сравнен с клетъчна култура за всички типове проби от популацията - грип В Комбинирани респираторни сезони 2003 – 2004, 2004 – 2005 и 2006 години



Flu A+B



П О П ОНазофарингеални смивове/аспирати

П 49 1 8 0О 13 338 1 56


Натривки от гърло




П О П ОП 19 1 19 2О 12 190 5 21


Назофарингеални натривки




П О П ОП 0 0 1 0О 0 163 0 292

Чувствителност: Педиатрични: Няма изчислена чувствителност; Възрастни: 100% (95% ДИ: 3% – 100%)Специфичност: Педиатрични: 100% (95% ДИ: 98% -100%); Възрастни: 100% (95% ДИ: 99% – 100%)

Таблица 6: Резюме за действието на теста Directigen EZ Flu A+B, сравнен с клетъчна култура за ретроспективни назофарингеални натривки – грип В от респираторен сезон 2005 година



Flu A+B



П О П О

Назофарингеални натривкиП 20 0 12 0О 6 10 5 6

Положително съответствие: Педиатрични: 77% (95% ДИ: 56% – 91%); Възрастни: 71% (95% ДИ: 44% – 90%)Отрицателно съответствие: Педиатрични: 100% (95% ДИ: 69% – 100%); Възрастни: 100% (95% ДИ: 54% – 100%)

Възпроизводимост: Възпроизводимостта на теста Directigen EZ Flu A+B е изследвана в 4 опитни места. Панелът за възпроизводимост е съставен от 20 симулирани проби на грип. Тези проби включват ниско позитивни проби грип А и грип В (непосредствено до границата на откриване на теста), умерено позитивни проби грип А и грип В и негативни проби. Общата възпроизводимост за теста Directigen EZ Flu A+B е 99,6%.

Аналитични проучвания

Аналитична чувствителност (Граница на откриване)Границата на откриване (LOD) за теста Directigen EZ Flu A+B е установена за общо 15 грипни щама; девет за грип А и шест за грип В.

Тип Грипен вирусен щам LOD (CEID50/mL*)A A/PR/8/34 (H1N1) 1,75 x 104

A A/FM/1/47 (H1N1) 1,98 x 103

A A/NWS/33 (H1N1) 1,00 x 104

A A1/Denver/1/57 (H1N1) 5,56 x 103

A A/New Jersey/8/76 (H1N1) 4,45 x 103

A A/Port Chalmers/1/73 (H3N2) 1,00 x 103

A A/Hong Kong/8/68 (H3N2) 2,78 x 102

A A2/Aichi2/68 (H3N2) 3,50 x 103

A A/Victoria/3/75 (H3N2) 2,78 x 104

Б B/Lee/40 6,95 x 105

Б B/Allen/45 2,00 x 103

Б B/GL/1739/54 5,56 x 103

Б B/Taiwan/2/62 3,50 x 102

Б B/Maryland/1/59 2,23 x 104

Б B/Hong Kong/5/72 2,23 x 104

* CEID50/mL = Инфекциозна доза за пилешки ембриони, при която загиват 50% от ембрионите

9

Аналитична специфичност (кръстосана реактивност)Тестът Directigen EZ Flu A+B е оценен с общо 98 микроорганизма. 51 бактерии и две гъби са тествани при концентрация от ~108 CFU/mL (CFU – Колония образуващи единици). Mycoplasma pneumoniae и Mycoplasma orale са тествани при концентрации от > 106 и >107 CCU/mL (CCU – Цвят променящи единици), съответно. Трите щама микобактерии са инокулирани при 107 CFU/mL, а Chlamydia trachomatis LGVII е тествана при 2,5 X 108 EB/mL (EB = елементарни тела). Изследваните 39 вируса са преценени при концентрации от 104 до 109 TCID50/mL (TCID50 – Инфектираща доза за тъканна култура, при която 50% от клетките са лизирани) или 104 до 108 CEID50/mL (CEID50 – инфектираща доза за птичи ембрион, при която 50% от птичите ембриони са инфектирани). Всички микроорганизми (различни от грипните вируси) дават негативни резултати при теста за грип А и грип В. Тестваните грипни вируси A (n = 2) дават позитивни резултати с теста за грип А и негативни за грип В. Тестваните грипни вируси В (n = 6) дават позитивни резултати с теста за грип В и негативни за грип А. Acinetobacter baumannii (calcoaceticus) Neisseria meningitidis Coxsackievirus тип A9 (Griggs) Actinobacillus suis Neisseria mucosa Coxsackievirus тип A9 (P.B. Bozek) Bacteroides fragilis Neisseria sicca Coxsackievirus тип B5 (Faulkner) Bordetellapertussis Neisseriasubflava Coxsackievirus тип B6 (Schmitt) Candida albicans Peptostreptococcus anaerobius Coxsackievirus тип A21 (Kuykendall) Candida glabrata Porphyromonas asaccharolyticus Cytomegalovirus (AD-169) Cardiobacteriumhominis Prevotellaoralis Еchovirus тип 2 (Cornelis) Chlamydia trachomatis LGVII Proteus mirabilis Еchovirus тип 3 (Morrisey) Corynebacteriumdiphtheriae Proteusvulgaris Еchovirus тип 6 (D’Amori) Eikenella corrodens Pseudomonas aeruginosa HSV тип 1 (HF) Enterococcus faecalis Salmonella choleraesuis HSV тип 2 (MS) Enterococcus gallinarum суб minnesota Influenza A/PR/8/34 (H1N1) Escherichia coli Serratia marcescens Influenza A/Victoria/3/75 (H3N2) Fusobacterium nucleatum Staphylococcus aureus Influenza B/Hong Kong/5/72 Gardnerellavaginalis Staphylococcusaureus-Cowan 1 Influenza B /Lee/40 Haemophilusaphrophilus StreptococcusbovisII Група D Influenza B/Allen/45 Haemophilusinfluenzae Staphylococcusepidermidis Influenza B/GL/1739/54 Haemophilusparainfluenzae Streptococcusmutans Influenza B/Maryland/1/59 Haemophilus paraphrophilus Streptococcus oralis Influenza B/Taiwan/2/62 Kingella kingae Streptococcus pneumoniae Вирус на морбили (Edmonston) Klebsiella pneumoniae Streptococcus pyogenes Група А Паротитен вирус (Enders) Lactobacillus casei Streptococcus sanguis Parainfluenza тип 1(Sendia/52) Lactobacillus fermentum Streptococcus sp. Група В Parainfluenza тип 2 (Greer) Lactobacillus plantarum Streptococcus sp. Група С Parainfluenza тип 3 (С243) Legionella pneumophila Streptococcus sp. Група F Риновирус тип 1A (2060) Listeria monocytogenes Streptococcus sp. Група G Rhinovirus тип 2 (HGP) Moraxellacatarrhalis Veillonellaparvula Rhinovirus тип 13 (353) Mycobacteriumavium Adenovirus, тип 3 (GB) Rhinovirus тип 15 (1734) Mycobacterium intracellulare Adenovirus, тип 5 (Adenoid 75) Риновирус тип 16 (11757) Mycobacterium tuberculosis Adenovirus, тип 7 (Gomen) Rhinovirus тип 37 (151-1) Mycoplasma orale Adenovirus, тип 10 (J.J.) RSV тип A (Long) Mycoplasma pneumoniae Adenovirus, тип 18 (D. C.) RSV тип B (Wash/18537/62) Neisseria gonorrhoeae Coronavirus (229E) VZV (Ellen)

10

Реактивност на щамовете с вируси на грип А и ВТестът Directigen EZ Flu A+B е изследван, като е използван панел от 37 грипни щама. В този панел са представени всички познати хемаглутинин (15) и невраминидазни (9) подтипове на грип А. Всички човешки и животински щамове на грип А показват позитивни резултати с теста за грип А и негативни резултати с теста за грип В. Обратно, всички щамове грип В показват позитивни резултати с теста за грип В и негативни с теста за грип А.

Грипен вирус (човешки щам) Вирусен тип Грипен вирус (животински щам) Вирусен тип A/NWS/33 A (H1N1) A/Turkey/Kansas/4880/80 A (H1N1) A/PR/8/34 A (H1N1) A/Mallard/New York/6750/78 A (H2N2) A1/FM/1/47 A (H1N1) A/Turkey/England/69 A (H3N2) A1/Denver/1/57 A (H1N1) A/Chicken/Alabama/75 A (H4N8) A/New Jersey/8/76 (Hsw N1) A (H1N1) A/Turkey/Wisconsin/68 A (H5N9) A/Port Chalmers/1/73 A (H3N2) A/Turkey/Canada/63 A (H6N8) A/Victoria/3/75 A (H3N2) A/Turkey/Oregon/71 A (H7N3) A/Vietnam/3028/04 A (H5N1) A/Turkey/Ontario/6118/67 A (H8N4) A/Thailand/MK2/04 A (H5N1) A/Turkey/Wisconsin/66 A (H9N2) A/Hong Kong/486/97 A (H5N1) A/Chicken/Germany/N/49 A (H10N7) A/California/07/2004 A (H3N2) A/Duck/Memphis/546/74 A (H11N9) B/Lee/40 B A/Duck/Alberta/60/76 A (H12N5) B/Allen/45 B A/Gull/MD/704/77 A (H13N6) B/GL/1739/54 B A/Mallard/Gurjev/263/82 A (H14N5) B/Maryland/1/59 B A/Shearwater/WA/2576/79 A (H15N6) B/Taiwan/2/62 B B/Mass/3/66 B B/Hong Kong/5/72 B B/Victoria/504/00 B B/Tokyo/53/99 B B/Quingdao/102/91 B B/Leningrad/86/93 B ЗАБЕЛЕЖКА: Работните характеристики за откриване на грипен вирус А от човешки образци, когато не-A/H3 и не-A/H1 подтипове грипни вируси А възникват като патогени при човек, не са установени.

Интерфериращи субстанцииРазлични субстанции са изследвани с теста Directigen EZ Flu A+B. Тези субстанции включват цялостна кръв (2%) и различни медикаменти. Не се отбелязва интерференция с този тест за никоя от тестваните субстанции.

Изследвани медикаментиТри дезинфектанта за уста от магазин при 25% Псевдоефедрин хидрохлорид (20 mg/mL)Три вида капки за гърло в свободна продажба при 25% Гваякол глицерил етер (20 mg/mL)Три вида носни спрея в свободна продажба при 10% Ибупрофен (10 mg/mL)4 - Ацетаминофенол (10 mg/mL) Оксиметазолин (0,05 mg/mL)Ацетилсалицилова киселина (20 mg/mL) Фенилефрин (1 mg/mL)Хлорфенирамин малеат (5 mg/mL) Лоратидин (100 ng/mL)Декстрометорафан (10 mg/mL) Дифенхидрамин хидрохлорид (5 mg/mL)Фексофенадин (500 ng/mL) Занамивир (1 mg/mL)Амантадин (500 ng/mL) Римантадин (500 ng/mL)Албутерол (0,083 mg/mL) Озелтамивир (500 ng/mL)Рибавирин (500 ng/mL) Synagis (0,1 mg/mL)

НАЛИЧНОСТ

Кат. No Описание256050 Directigen EZ Flu A+B Kit, Комплект с 30 теста220144 BBL CultureSwab EZ 100 (единичен тампон) за образци от намазка от гърло220115 BBL CultureSwab стерилен единичен тампон, оп. по 100220131 BBL CultureSwab Liquid Amies (течна среда Amies), тампон с алуминиева тел, оп. по 50220134 BBL CultureSwab Liquid Stuart (течна среда Amies), тампон с алуминиева тел, оп. по 50221819 Normal, saline (Физиологичен разтвор), 5 mL, оп. по 100220220 BD Universal Viral Transport (BD за универсален транспорт на вируси), Флакон 3 mL, оп. по 50220250 Regular Flocked Swab, стерилен единичен тампон, оп. по 100220251 Minitip Flocked Swab, стерилен единичен тампон, оп. по 100220252 Flexible Minitip Flocked Swab, стерилен единичен тампон, оп. по 100

11

СПРАВОЧНА ЛИТЕРАТУРА1. Simonsen L., Fukuda K, Schonberger LB, Cox NJ. Impact of influenza epidemics on hospitalizations. J. Infect. Dis. 2000;

181:831-72. Thompson WW, Shay DK, Weintraub E, et al. Mortality associated with influenza and respiratory syncytial virus in the

United States. JAMA 2003: 289: 179-863. Kaiser, L., Couch, R.B., Galasso, G.J., Glezen, W.P., Webster, R.G., Wright, P.F., and Hayden, F.G. 1999. First

international symposium on influenza and other respiratory viruses: summary and overview Kapalua, Maui, Hawaii, December 4-6, 1998. Antiviral Res., 42:149-176

4. Cox, N.J., and Bender, C.A. 1995. The molecular epidemiology of influenza viruses. Virology, 6:359-370.5. Todd, S.J., Minnich, L., and Waner, J.L. 1995. Comparison of rapid immunofluorescence procedure with TestPack RSV

and Directigen Flu A for diagnosis of respiratory syncytial virus and influenza A virus. J. Clin. Microbiol. 33:1650-1651.6. Harris, P.O. 1989. Clinical relevance and efficient detection of seven major respiratory viruses. ACL. p. 15-19.7. McElhaney, J.E., Gravenstein, S., Krause, P., Hooton, J.W., Upshaw, C.M., and Drinka, P. 1998. Assessment of markers

of the cell-mediated immune response after influenza virus infection in frail older adults. Clin. Diag. Lab. Immunol. 5:840-844.

8. Fan, J., Henrickson, K.J., and Savatski, L.L. 1998. Rapid simultaneous diagnosis of infections with respiratory syncytial viruses A and B, influenza viruses A and B, and human parainfluenza virus types 1,2, and 3 by multiplex quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction-hybridization assay (hexaplex). Clin. Infect. Disease 26:1397-1402.

9. Wright, K.E., Wilson, G.A.R., Novosad, D., Dimock, C., Tan, D., and Weber, J.M. 1995. Typing and subtyping of influenza viruses in clinical samples by PCR. J. Clin. Microbiol. 33:1180-1184.

10. Kendal, A.P. 1985. Influenza Viruses. p. 341-357. Laboratory Diagnosis of Viral Infections, In H. Lennette, (ed.) Marcel Dekker, Inc., New York.

11. McQuillen, J., Madeley, C.R., and Kendal, A.P. 1985. Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of influenza A and B virus infections by immunofluorescence. Lancet. ii: 911-914.

12. Guenthner, S.H., and Linnemann, C.C., Jr. 1988. Indirect immunofluorescence assay for rapid diagnosis of influenza virus. Laboratory Medicine. 19: 581-583

13. Minnick, L.L., and Ray, C.G. 1986. Early testing of cell cultures for detection of hemadsorbing viruses. J. Clin. Microbiol. 25: 421-422.

14. Schmidt, N.J., Ota, M., Gallo, D., and Fox, V.L. 1982. Monoclonal antibodies for rapid, strain specific identification of influenza virus isolates. J. Clin. Microbiol. 16: 763-765.

15. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2005. Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed. CLSI, Wayne, Pa.

16. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80.

17. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4th ed. U.S Government Printing Office, Washington, D.C.

18. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EECP). Office Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045.

m Becton, Dickinson and Company A BENEX Limited 7 Loveton Circle Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Sparks, Maryland 21152 USA Shannon, County Clare, Ireland 800-638-8663 Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46

Synagis is a trademark of MedImmune, Inc.ViraTrans is a trademark of Trinity Biotech, PLC.Multitrans is a trademark of Starplex Scientific, Inc.BD, BD Logo, CultureSwab, Directigen, DispensTube and Trypticase are trademarks of Becton, Dickinson and Company. © 2008 BDMade in China by BD.

B

антигени на грип А и грип Б u - bd · 2017. 5. 15. · грип А от...

Documents