1 aprilie 2013 - weeblyseria7.weebly.com/uploads/4/0/8/5/4085189/hemophilus_bordetella... ·...
TRANSCRIPT
1 aprilie 2013
”Sincer să fiu acest lucru cu
transmiterea mesajului, colegilor care au
lipsit, ar cam trebui să ne intre în reflex -
nu să o facem pentru că este o temă.”
-Aud mereu tineri dar și adolescenți
care, povestind o
întâmplare, concluzionează cu sintagma
"Ce vrei frate? Trăim în România!".
De parcă țara asta atât de dragă unora are
vreo vină că oamenii au ajuns lipsiți de
morală, de onoare, au ajuns să nu își mai
iubească pământul și neamul.-
”Profesorul cu adevărat înțelept nu te
invită să intri în casa înțelepciunii sale
ci, mai curând, te călăuzește către
pragul minții tale.”
Kahlil Gibran
”Dumnezeu în care spui că nu
crezi, crede EL în tine.”
Nicolae Steinhart
Sunt studenți care
... iar restul ...
0
1
2
3
4
5
6
80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90
seria a 8-a
0
1
2
3
4
5
6
68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79
seria a 7-a
There is hope !
Haemophilus influenzae
Încadrare taxonomică
Familia Pasteurellaceae
Genul Haemophilus
Specii de interes medical
H. influenzae H. haemolyticus
H. parainfluenzae H. parahaemolyticus
H. aphrophilus H. paraphrophilus
H. ducreyi H. paraphrohaemolyticus
H. segnis
Habitat
Omul – singura gazdă naturală
Tulpinile necapsulate colonizează frecvent
mucoasa oro- şi nazo-faringiană, rar mucoasa
intestinală, vaginală sau uretrală
Portajul tulpinilor Hib este scăzut (0,5-3%); redus
până la dispariţie sub efectul vaccinului conjugat
Importanţa medicală
Reprezintă a doua specie, ca frecvenţă, în infecţii
comunitare ale tractusului respirator
Tulpinile capsulate tip b (Hib) determină infecţii
sistemice severe la copii sub vârsta de 5 ani, în
special meningite, făcând parte din cei trei agenţi
etiologici majori ai acestui sindrom
Importanţa medicală
Introducerea în unele ţări a vaccinului conjugat
anti-Hib a redus incidenţa infecţiilor invazive
Emergenţa rezistenţei la aminopeniciline a
determinat modificarea protocoalelor terapeutice
de primă intenţie
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
1987 1991 1995 1999
Inc
ide
nc
e
Estimated Incidence* of Invasive Hib Disease, 1987-2000
*Rate per 100,000 children <5 years of age
Caractere morfo-tinctoriale şi mobilitate
Bacili scurţi, uneori pleomorfi (cocobacili –
forme filamentoase), gram-negativi
Capsula, prezentă la tulpini invazive (reacţia de
umflare a capsulei sau IF)
Imobili
Exigenţe de creştere
Dependent de prezenţa în mediul de cultură a doi
factori de creştere
- factorul X (hemina), termostabil, prezent în
medii cu sânge
- factorul V (NAD), termolabil, eliberat din
hematii sub efectul temperaturii (geloză şocolat)
sau prin acţiune enzimatică (extract
Fildes), inactivat de NAD-ază
Caractere de cultivare
Cultivă pe geloză şocolat, atmosferă umedă, CO2
(5-10%), 35-37 0C;
După 18-24 ore dezvoltă colonii de 1-2 mm Ø, plate, opace sau transparente, nepigmentate, la tulpinile capsulate colonii mai mari, tip M
Cultivă pe geloză sânge de berbec numai în vecinătatea coloniilor de S. aureus - factor V (fenomen de satelitism)
Satelitism
Caractere metabolice
Aerob – facultativ anaerob
Catalază şi oxidază pozitiv
Descompune fermentativ glucoza (dar nu sucroza
şi manoza)
Trei caractere biochimice (producerea de
indol, urează şi ornitin – decarboxilază)
diferenţiază specia în 8 biotipuri (I-VIII)
Acţiunea agenţilor externi
Defavorabil influenţat de- desicaţie- temperaturi scăzute
Distrus de- antiseptice şi dezinfectante uzuale (alcool
700, hipoclorit de Na 1%)
- 550C timp de 30 min
Factori de virulenţă (I)
• Capsula
- natură polizaharidică
- diferenţiază Ag specia în 6 serotipuri (a-f)
- serotipul b (poliribosil-ribitolfosfat) …
- conferă proprietăţi antifagocitare şi
rezistenţă la efectul litic al C`
- stimulează un răspuns imun T-independent
- Ac anti-capsulari, cu specificitate de tip, au
efect protector
Factori de virulenţă (II)
• Fimbrii sau pili - structuri fine filiforme pe suprafaţa tulpinilornecapsulate sau capsulate
- lipsesc la izolatele din sânge sau l.c.r. (variaţie de fază)
- favorizează ataşarea bacteriilor la receptori celulari
Factori de virulenţă (III)
• Proteine din membrana externă
* Proteine majore (P1, P2, P5, P6)
- permit subtiparea tulpinilor în scop epidemiologic
- funcţionează ca adezine- stimulează Ac cu efect protector (P1, P2)
* Proteine de legare a transferinei
- intervin în obţinerea Fe
Factori de virulenţă (IV)
• LOS- structură asemănătoare LPS- permite diferenţierea Ag între tulpini
- stimulează procesul inflamator- efect ciliostatic şi ciliolitic la nivelul mucoasei
căilor respiratorii
• IgA1-proteaza
- interferă cu răspunsul imun local
- facilitează colonizarea
Infecţii determinate de H. influenzae (I)
• infecţii oportuniste
- de origine endogenă
- evoluează la nivelul TRS: otite medii, sinuzite, sau TRI: bronşite cronice acutizate, pneumonii
- favorizate de viroze respiratorii sau BPCO
- determinate în special de tulpini necapsulate
- la imunodepresaţi, cu deficienţe C` sau cu asplenie - pneumonii grave + bacteriemie
Infecţii determinate de H. influenzae (II)
• Alte infecţii localizate
- conjunctivite
- infecţii urinare (foarte rar)
• Infecţii invazive
- meningite purulente (cele mai frecvente), artrite septice, epiglotite, celulite, pericardite
- determinate în special de Hib
- evoluează la copii < 5 ani, în absenţa Ac specifici
Diagnostic bacteriologic (I)
• Recoltarea şi transportul produselor patologice
* Produse monobacteriene
- LCR, lichid articular, lichid pleural, sânge,
puroi otic sau sinusal recoltat prin puncţie
- riguroasă asepsie şi antisepsie în timpul
prelevărilor
- transport la laborator cât mai rapid
- evitarea refrigerării p.p.
Diagnostic bacteriologic (II)
* Produse cu floră microbiană de asociaţie
- spută, aspirat bronho-alveolar
neprotejat, aspirat hipofaringian, puroi
conjunctival, puroi otic prelevat prin conductul
auditiv (otită supurată), secreţii nazo-faringiene
- exigenţe în recoltarea produsului patologic real
(produs reprezentativ)
- utilizarea mediului de transport (Amies, Stuart)
pentru prelevate pe tampon
Diagnostic bacteriologic (III)
• Metode rapide de diagnostic
* Examen microscopic direct
- frotiu din produsul patologic ca atare
(spută, puroi) sau după centrifugare (LCR)
- permite recunoaşterea H. influenzae după
criterii morfo-tinctoriale (diagnostic prezumtiv)
- în cazul produselor contaminate cu flora oro-
sau nazo-faringiană, asigură triajul prealabil al
probelor pe criterii citologice, cu evaluarea
bacterioscopică semicantitativă
Diagnostic bacteriologic (IV)
* Decelarea Ag capsular în LCR
- cel mai frecvent prin reacţie de latex-aglutinare
- util mai ales în meningite “decapitate” prin antibiotice
Diagnostic bacteriologic (V)
Izolarea pe medii de cultură
- geloză şocolat, de preferat suplimentată cu IsoVitalex sau Vitox 1%
- alternativă: geloză sânge cu striu de stafilococ
- pentru hemoculturi: medii comercializate, de preferat cu bază bulion tripticază soia
- pentru produse contaminate (tampon nazo-faringian) – medii selective cu bacitracină (300µg/mL)
Diagnostic bacteriologic (VI)
• Identificarea preliminară
- cultivare numai pe geloză şocolat (nu pe geloză
sânge de berbec)
- aspectul macroscopic şi microscopic al
coloniilor
Diagnostic bacteriologic (VII)
• Identificarea definitivă
- dependenţa de factorii de creştere X şi V
- testul porfirinei (creşte specificitatea
dependenţei pentru factorul X)
- caracterul α- sau nehemolitic al coloniilor pe
geloză sânge de cal sau iepure
- kituri multitest identifică specia şi permit
biotiparea
Diagnostic bacteriologic (VIII)
• Tiparea serologică
- folosită numai pentru tulpinile capsulate
- reacţie de aglutinare cu ser polivalent şi ser
anti- Hib; după caz, cu seruri monovalente a, c-f
Diagnostic bacteriologic (IX)
• Subtiparea în scop epidemiologic
- biochimică (indol, urează, ornitin -
decarboxilază)
- pe baza proteinelor majore din membrana
externă
- moleculară (endonucleaze de restricţie, sonde
de acizi nucleici, PCR)
- valoare limitată (teste insuficient de
discriminatorii)
Sensibilitatea in vitro la antibiotice (I)
• Rezistenţă naturală
- rezistenţă de nivel înalt: peniciline de biosinteză,
cefalosporine din generaţia
1, bacitracină, lincosamide, streptogramine, glicopeptide
- rezistenţă intermediară: macrolide (claritromicina şi
azitromicina sunt mai active)
Sensibilitatea in vitro la antibiotice (II)
• Sensibilitate naturală
- antibiotice active: aminopeniciline, cefalosporine
din generaţia 2-4, carbapeneme, fluorochinolone,
cloramfenicol, tetracicline, cotrimoxazol, rifampicină
Măsuri profilactice
• Profilaxie specifică cu vaccin conjugat anti-Hib
- se administrează la copii între 2 luni -5 ani
- a redus până la 2% frecvenţa infecţiilor invazive
- nu influenţează infecţiile determinate de alte
serotipuri capsulare sau cu tulpini netipabile
Măsuri profilactice
• Chimioprofilaxie cu rifampicină
- realizată la contacţii de casă sau din colectivităţi
cu un caz de infecţie invazivă, când există copii
nevaccinaţi, vaccinaţi incomplet sau cu stări de
imunodepresie
Haemophilus ducreyi
Habitat
strict patogen pentru specia umană
se dezvoltă intra- şi extracelular
Boli produse
şancrul moale
-
-
Caractere morfologice şi de cultură
bacil G- scurt, dispus în perechi / lanţuri
geloză chocolat plus vancomicină
Necesită factorul X
33-35ºC
10% CO2
Diagnostic de laborator
bacteriologic
-
-
-
O cutie și un filmuleț ...
• Ionela și Florina ...
• Copiii (HIV+) cu copii (HIV-) ...
• Copil cu copil ...
• Chiar si printre noi ...
Bărbat de 53 ani, veterinar.
Se simte excelent până cu 8 săptămâni în urmă, când
începe să prezinte un sindrom pseudo-gripal
• febră,
• tuse,
• greaţă,
• anorexie,
• vărsături.
Ce credeţi că a făcut ?
Ce mai recomandaţi ?
Hemocultură luată de 3 ori în primele 48 ore
Se pozitivează tardiv
Avem un pacient cu FUO.
Listaţi 5 posibile cauze.
FUO = mai mult de 1w. 30-40% la adulţi, cu infecţie;
neo (limfoame, leucemii); autoimune
(LES, PAR, sarcoidoză)
Hemocultură luată de 3 ori în primele 48 ore
Se pozitivează tardiv
Sursa ? de multe ori greu de identificat;
abces, osteomielită, endo bacteriană, inf.
biliară, ITU, de multe ori … cu flora normală.
Adeseori m.o. “fastidioase”
Mycobacterium tuberculosis, M. avium,
Salmonella typhi,
Francisella spp, Borrelia spp,
Rickettsia spp, Coxiella burnetii,
Chlamydia spp,
Leptospira spp, Treponema pallidum,
Brucella spp,
fungi, virusuri
Mulţi „dau” cultură negativă
Clinica ? ar merge cu TB (dar nu RX, nu PPD)
Cum ne ajută informaţia privind ocupaţia lui la
presupunerea / stabilirea diagnosticului ?
Zoonoze produse de:
•Brucella,
•Salmonella,
•Mycobacterium,
•Campylobacter,
•Listeria,
•Coxiella burnetii,
•Chlamydia (păsări),
•Histoplasma
Găsim cocobacili gram negativi, urează + după 20
minute, oxidază +, glucoză -; alegeţi 1
Brucella suis
De ce e bine să faci puncţii (inclusiv medulară) în FUO ?
Brucella, Salmonella, Mycobacterium
Bordetella pertussis
Încadrare taxonomică
Genul Bordetella cuprinde cocobacili G-Bordetella pertussis
Bordetella parapertussis
Bordetella bronchiseptica
Habitat
strict patogen pentru specia umană
la nivelul cililor epiteliului respirator
nu au capacitatea de a invada.
Caractere morfologice şi de cultură
ccb G- (pili, capsulă)
medii de cultură îmbogăţite
necesară folosirea mediilor complexeColonii după 3-6 zile
se descrie fenomenul de variaţie genetică
Structură antigenică
foarte complexă– hemaglutinină fimbrială (FHA),
– aglutinogene de suprafaţă (K),
– lipopolizaharidul (endotoxina),
– substanţe active cu rol important în patogenie:
• toxina pertussis (TP)
• adenilatciclaza
• toxina letală (dermonecrotică)
• citotoxina traheală.
Răspuns imun
Caractere de patogenitate; patogenie
foarte complexă– hemaglutinină fimbrială (FHA),
– aglutinogene de suprafaţă (K),
– lipopolizaharidul (endotoxina),
– substanţe active cu rol important în patogenie:
• toxina pertussis (TP)
• adenilatciclaza
• toxina letală (dermonecrotică)
• citotoxina traheală.
Diagnostic de laborator
Bacteriologic
Serologic
Prevenire
Vaccinul DTP ... DT ... dT ... Dt ...
acum DTPa