1. ábra a sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf ·...

33
1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlata. vándorlási felület sejtnyúlvány aktinkéreg kifeszülŒ aktinkéreg aktin polimerizáció a vándorlási irányban, növekedŒ sejtnyúlvány visszahúzódás aktin monomerek mozgása fokális kapcsolat

Upload: others

Post on 21-Jan-2020

3 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlata.

vándorlásifelület

sejtnyúlványaktinkéreg

kifeszülŒ aktinkéreg aktin polimerizáció avándorlási irányban,növekedŒ sejtnyúlvány

visszahúzódás

aktin monomerek mozgása

fokális kapcsolat

Page 2: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

2. ábra A Drosophila melanogaster peteképzése.

A B

C

g

cfD

p

df

f

d

cf

ny

ps

cf

ps

Page 3: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

3. ábra Az EP elem fölépítése.

promóterenhanszer

GAL4 kötŒhelyekGAGA helyek

plazmidmenekítŒ szakasz

Page 4: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

4. ábra A FLP-FRT rendszer mıködési elve.

FLP

M

homozigóta mutáns klón vad típusú ikerfolt

G2

Page 5: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

5. ábra Az EP elemre alapozott funkciónyeréses genetikai szırés vázlata.

Gal4vonal

EP vonalak

EPg elem

X gén

Gal4 helyekGal4 meghajtó

Page 6: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

6. ábra A slbo-szuppresszor mutánsok azonosításának elve.

A

G

A’EPg elem

X gén

B’

Page 7: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

7. ábra A Cortactin fehérjeszerkezete.

NTA

Page 8: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

8. ábra A Cortactin kimutatható a petekamrákban.

DAPI együtt

falloidin cortactin

B

cortactin

falloidinA

cortactin

Page 9: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

9. ábra A Cortactin túltermeltetésének hatásai a follikuláris sejtekben.

C

C’

GFP

A

A’

cortactin

falloidin

B

B’

cortactin

falloidin falloidin

Page 10: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

10. ábra A cortactin lókusz vázlatos térképe.

93B8-B9 1 kb

EPg35301 cortactinAnnexinIX.

K8A4D4

M7

F11 F5 F1 F6 F7 F9

R8 R2 R4 R10

Page 11: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

11. ábra Konfokális mikroszkópos felvétel a Cortactin immunofestérŒl vad típusú, cortactin mutáns és mozaikos

petekamrákban.

C

cortactinfalloidin GFP

FRT-cort-

B

falloidin

cortactin

cort-A

falloidin

vad típus

cortactin

Page 12: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

12. ábra A cortactin mutáns petekamrákban észlelhetŒfollikuláris sejt-szakadások.

A B

DAPIfalloidin

Page 13: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

13. ábra A dajkasejtek és a petesejt közötti anyagszállítás lelassul a cortactin mutáns petekamrákban.

cort-

vad típusB

cort-

vad típusADAPI

falloidin

DAPIfalloidin

Page 14: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

15. ábra Határsejtvándorlás 9. fejlŒdési stádiumúpetekamrákban.

DAPIfalloidin

DAPIfalloidin

A

B cort-

vad típus

Page 15: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

18. ábra A PVR tirozinkináz receptor túltermeltetésének hatásai follikuláris sejtekben.

A A’ A’’

B B’ B’’

együttfalloidin

falloidin együtt

Page 16: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

19. ábra A λ-PVR aktivált receptor túltermeltetésének hatásai follikuláris sejtekben.

falloidin

A B C

együtt

Page 17: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

20. ábra A λ-PVR aktivált receptor által kiváltott fenotípusok kategóriái a centripetális follikuláris sejtekben.

A B C

Page 18: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

21. ábra A DOCK-A fehérjecsalád szerkezete.

200 aminósav

SH3 Crk

Page 19: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

22. ábra A DOCK180 fehérje nagycsalád rokonsági viszonyai.

Page 20: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

23. ábra A Myoblast city fehérje kimutatható a petekamrákban.

A

B

Page 21: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

24. ábra Az mbc mutáns határsejtek vándorlása.

GFPfalloidin

Page 22: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

26. ábra Az EPg37532 homozigóta legyeken megfigyelhetŒszŒrtorzulások.

Page 23: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

27. ábra A mal-d genetikai lókusz vázlatos térképe.

EPg 37532

∆7

mal-dCG1240

∆6F5

R5

Page 24: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

28. ábra A MAL-D fehérje doménszerkezete.

Page 25: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

29. ábra A mal-d gén mutációja csökkenti a határsejtek F-aktin szintjét és késlelteti vándorlásukat.

A B

DAPIfalloidin

mal-d-vad típus

Page 26: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

30. ábra A mal-d∆7 mutáns petefészekben Western blot elemzéssel nem mutatható ki a MAL-D fehérje.

212

97

vadtípus

mal-d∆7

UAS-mal-d

anti-mal-d

Page 27: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

31. ábra A petefészkek mal-d mutáns follikuláris sejtklónjaiban erŒsen lecsökkent F-aktinszintet találunk.

GFP falloidin

Page 28: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

32. ábra A mal-d mutáns határsejtek a vándorló sejtcsoport hátsó részén találhatók.

merge

GFP falloidin együtt

Page 29: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

33. ábra A mal-d gén EMS mutagenezisének vázlata.

FRT80 / FRT80 mal-dEP / TM3

mal-dEP / FRT80*

X

szŒrfenotípus?

igen

A

B

C

D Emal-d* / TM3

mal-dEP / TM3

mal-dEP / mal-d*

szŒrfenotípus? törzs

X

EMS

Page 30: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

33. ábra Az új mal-d pontmutációk.

SAPMHD

Q675st

Q736st A1364fsL659st

Page 31: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

35. ábra A MAL-D túltermeltetése a follikuláris sejtekben.

DAPI falloidinmal-d együtt

Page 32: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

Er.35. ábra mal-d-DeltaN

DAPI falloidinmal-d

falloidinmal-d

Page 33: 1. ábra A sejtvándorlás folyamatának vázlatadoktori.bibl.u-szeged.hu/336/4/me_2987.pdf · 93B8-B9 1 kb AnnexinIX. EPg35301 cortactin K8 A4 D4 M7 F11 F5 F1 F6 F7 F9 R8 R2 R4 R10

38. ábra A mal-d∆7 mutáció nem okoz változást a follikuláris sejtek G-aktin szintjében.

GFP

anti-aktin együtt

ps ps

ps ps

fs fs

fsfs

falloidin