1 universidad peruana cayetano heredia · microflora oral residente, tanto en el nivel de género y...
TRANSCRIPT
1
UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA
Facultad de Estomatología
Roberto Beltrán Neira
“BIOFILM Y MICROORGANISMOS ORALES
BACTERIANOS”
INVESTIGACION BIBLIOGRAFICA DEL PROCESO DE SUFICIENCIA
PROFESIONAL PARA OBTENER EL TÍTULO DE CIRUJANO DENTISTA
ANGÉLICA ELIZABETH OLIVA HUAMANÍ
LIMA – PERÚ
2006
2
MIEMBROS DEL JURADO:
PRESIDENTE : Dr. Carlos Matta Morales.
SECRETARIO : Dr. Lola Sueng Navarrete.
ASESOR : Dr. Guido Perona Miguel de Priego.
FECHA DE SUSTENTACIÓN : 17 DE FEBRERO DEL 2006
CALIFICATIVO : APROBADO
3
A mis padres José Oliva Paredes y Alejandrina Huamaní Morales por ser ejemplo de
sacrificio y constancia.
4
AGRADECIMIENTO
A mi asesor, el Dr. Guido Perona Miguel de Priego por su apoyo y enseñanzas, también a
todas las personas que estuvieron conmigo en el transcurso de este tiempo e hicieron
posible la realización de este trabajo.
5
RESUMEN
La biopelícula (los biofilms) son organizaciones microbianas compuestas por microorga-
nismos que se adhieren a las superficies gracias a la secreción de un exopolímero.
Estas conformaciones microbianas presentan características como heterogeneidad, di-
versidad de microambientes, resistencia a antimicrobianos y capacidad de comunicación
intercelular que las convierten en complejos difíciles de erradicar de los ambientes donde
se establecen.
Las biopelículas que colonizan la cavidad oral son unos de los más complejos
biopelículas que existen en la naturaleza.
La formación de la biopelícula involucra interacción entre las bacterias colonizadoras
primarias y la película adquirida del esmalte. Los colonizadores secundarios se unen a las
bacterias inicialmente a través de interacciones moleculares específicas (7).
A medida que la biopelícula se forma, se van desarrollando gradualmente factores
biológicos importantes, permitiendo la coexistencia de especies que serian incompatibles
si fuera un medio homogéneo (2).
La biopelícula dental se desarrolla naturalmente, pero también está asociada con dos de
las enfermedades más prevalentes: la enfermedad periodontal y la caries dental (2).
Palabras claves: BIOPELÍCULA/ PLACA DENTAL/CARIES DENTAL/
ENFERMEDAD PERIODONTAL.
1
ÍNDICE DE CONTENIDOS
Página
I.-Introducción……………………………………………………………………………1
II.- Marco teórico…………………………………………………………………………2
II.1.-Introducción a la biopelícula…………………………………………………2
II.2.- Formación de la biopelícula……..……………………………………..……7
II.2.1.- La Cavidad Oral como hábitat de Microorganismo........................7
II.2.2.- Variación de la biopelícula según las etapas de vida.....................15
II.3.- Características de la biopelícula……….……………………………….…20
II.4.- Productos de la biopelícula……..…………………………………….…..21
II.5.- Estructura de la placa dental…………………………………………….….21
II.5.1.- Placa supragingival.........................................................................21
II.5.2.- Placa subgingival............................................................................24
II.6.- La biopelícula y la caries dental………………………………………........26
II.7.-Bacterias de la boca………………………………………………………....27
III.- Conclusiones………………………………………………………………………..30
IV.- Referencias bibliográficas………………………………………………………….32
2
ÍNDICE DE TABLAS
Página
Tabla 1
Bacterias predominantes presentes en la placa dental de tres sitios……………………….8
Tabla 2
Características generales de la biopelícula y de comunidades microbianas………...…..19
3
ÍNDICE DE FIGURAS
Página
Figura 1
Evolución de las teorías acerca de la composición de la placa……………………………4
Figura 2
Placa dental en microscopio electrónico de barrido…………………………………........6
Figura 3
Partes de la biopelícula …………………………………………………………………....6
Figura 4
Fases de la biopelícula……………………………………………………….……………9
Figura 5
Colonización primaria…………………………………………………………………...10
Figura 6
Cocos y bacilos grampositivos facultativos…………………………………………….11
Figura 7
Receptores de superficies……………………………………………………………… 12
Figura 8
La heterogeneidad y la maduración de la placa………………………………………….13
4
Figura 9
Formación de la placa dental sobre un diente limpio……………………………………17
Figura 10
La biopelícula, se aprecia canales de fluído…………………………………………….18
Figura 11
Hipótesis de la placa ecológica de Marsh………………………………………………26
1
I.- INTRODUCCIÓN
El estudio de las biopelículas es un área excitante en continua evolución; tienen
repercusiones importantes para la humanidad las implicaciones que presentan estas
asociaciones en los diversos ámbitos de la medicina y la industria.
Las biopelículas son ubicuas; se forman virtualmente en todas las superficies inmersas en
medios acuosos naturales. Costerton introdujo el término biopelícula.
La biopelícula, es una formación de agregados bacterianos, usualmente existentes como
comunidades cercanamente asociadas, que se adhieren a una variedad de superficies
naturales o artificiales, en un medio acuoso que contiene una concentración suficiente de
nutrientes para sostener las necesidades metabólicas de la microbiota.
Las biopelículas que colonizan la cavidad oral son unos de los más complejos
biopelículas que existen en la naturaleza. Esta complejidad se debe en gran medida a la
composición de las distintas superficies, que determinan la existencia de cuatro nichos
orales diferentes: mucosa masticatoria, dorso lingual, saliva y superficies duras, en donde
se incluyen las superficies dentarias y las de materiales de restauración.
La formación de la biopelícula involucra interacción entre las bacterias colonizadoras
primarias y la película adquirida del esmalte. Los colonizadores secundarios se unen a las
bacterias inicialmente a través de interacciones moleculares específicas.
Las biopelículas en la cavidad bucal están relacionadas con dos enfermedades
importantes la enfermedad periodontal y la caries dental.
Estudios actuales sobre la composición de la microflora a nivel de placa dental, han
demostrado que los aerobios son los microorganismos que en mayor porcentaje se
encuentran en la placa dental supragingival; mientras que los anaerobios se encuentran en
la flora dental subgingival.
2
II.-MARCO TEÓRICO
La biopelícula se define como una comunidad microbiana que se encuentra sobre la
superficie dental, formando una biopelícula embebido en una matriz de polímeros de
origen bacteriano y salival. Se presenta en la boca de individuos sanos y enfermos, y es el
agente etiológico de dos de las enfermedades orales más prevalentes: la caries dental y la
enfermedad periodontal (6).
II.1. INTRODUCCIÓN AL BIOFILM
En 1978, Costerton (7) introdujo el término biopelícula. La biopelícula, es una formación
de agregados bacterianos, usualmente existentes como comunidades cercanamente
asociadas, que se adhieren a una variedad de superficies naturales o artificiales, en un
medio acuoso que contiene una concentración suficiente de nutrientes para sostener las
necesidades metabólicas de la microbiota.
Se ha determinado que las células bacterianas de las biopelículas exhiben características
biológicas que difieren marcadamente de las bacterias que están aisladas, o en suspensión
(9,10). Las biopelícula constituyen una comunidad microbiana protegida de una amplia
variedad de factores antibacterianos y que predominan en cualquier ecosistema que posea
un nivel suficiente de nutrientes.
Todos las biopelículas poseen una estructura y una fisiología compleja, que les permite
crear y mantener un ecosistema abierto de canales de agua (5). Un estudio reciente sobre
la estructura de la placa dental, demostró que ésta presenta una configuración más abierta
de lo que antes se pensaba. Se ha descubierto la presencia de canales que pueden
atravesar la profundidad de las biopelícula (11).
Según Costerton y cols., la resistencia que poseen las bacterias que forman parte de un
biofilm con respecto a la que poseen las bacterias planktónicas se estima entre 1000 y
1500 veces superior. Esto hace que queden invalidados los estudios sobre susceptibilidad
antimicrobiana que se llevan a cabo sobre bacterias aisladas, y abre, por tanto, una nueva
línea de investigación (7).
3
Los mecanismos por los que las bacterias sésiles son más resistentes a los antimicrobi-
anos que las planctónicas son muy numerosos (4). Además, estos mecanismos difieren no
sólo entre distintas especies, sino ante distintos antimicrobianos y entre los distintos
hábitat en los que se desarrolla la biopelícula (13).
Uno de los más importantes mecanismos de resistencia parece ser la baja tasa de crecimi-
ento que tienen las bacterias dentro de las biopelículas , que las hace menos susceptibles a
muchos, aunque no a todos los antibióticos (9). Además, la resistencia de las bacterias a
los antibióticos está afectada por su estado nutricional, la tasa de crecimiento, la tempe-
ratura, el pH y la exposición previa a dosis subletales del agente antibiótico. Cualquier
variación de estos parámetros puede modificar la respuesta a los antibióticos de las
bacterias de las biopelículas.
Además, las bacterias de las biopelícula están embebidas en una matriz que, aunque no
actúa de barrera propiamente dicha, retarda la difusión del agente antimicrobiano. A todos
estos mecanismos, hay que sumar el potencial de las enzimas que segregan las bacterias
al espacio extracelular, como las b-lactamasas, formaldehído deshidrogenasa, etc., que
suponen la ineficacia de determinados antibióticos (13).
Todos estos procesos no explican totalmente la resistencia de las bacterias de las
biopelículas a los antimicrobianos. Las últimas investigaciones al respecto proponen la
idea de que existan subpoblaciones de bacterias "súper-resistentes", que poseerían
elevados niveles de resistencia antibiótica (13).
Puesto que la eliminación completa de la biopelícula sólo puede hacerse con terapia
mecánica (control mecánico de placa supragingival, raspado y alisado radicular y cirugía
periodontal) y la duración en el tiempo de esta "ausencia de la biopelícula " es muy
limitada (apenas unas horas), se han estudiado diferentes combinaciones terapéuticas con
el fin de mejorar su potencial y mantener en el tiempo la condición de salud gingival.
El Instituto Nacional de Investigación Craneofacial y Dental (INICD) encontró un
nuevo panorama de la placa dental como biofilm, la búsqueda de los microorganismos
causantes de las enfermedades periodontales ha sido motivo de estudio durante los
4
últimos 100 años. A principios del siglo XX, al tiempo que comenzaban a encontrarse los
agentes etiológicos de otras enfermedades, empezó a investigarse cual podría ser la causa
de que una parte de la población desarrollara un cuadro clínico tras el cual acababan
perdiéndose los dientes (7)
En el período de 1880 a 1930 fue llamado el año de oro de la microbiología (Fig. 1).
Durante este período los patógenos causantes de varias enfermedades infecciosas
sistémicas fueron identificados.
Fig.1. Evolución de las teorías acerca de la composición de la placa (Tomado de Biofilm:
a new plaque. http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf)
Las investigaciones también vieron las especies causantes de la enfermedad oral,
asumiendo que la placa dental contiene microorganismos que causan la enfermedad
periodontal, científicos estudiaron la placa dental en busca del agente causal usando las
técnicas disponibles en aquel tiempo e identificaron cuatro grupos diferentes: Amebas,
Espiroquetas, Fusiformes, Estreptococos.
En el periodo de 1930 científicos dentales creyeron que la enfermedad periodontal estaba
vinculada con algún defecto constitucional del individuo como algunos mecanismos
irritantes tales como el cálculo o restauraciones desbordantes.
La creencia de que un único agente microbial microbial causaba la enfermedad
periodontal fue cambiado por la teoría de la placa no especifica, se considero a la placa
como nociva por lo tanto fue importante el estricto control de la placa y no la
identificación de microorganismos específicos.
En el periodo de 1960, se marca el retorno de la hipótesis de la placa específica. Las
investigaciones fueron un éxito demostraron que la enfermedad periodontal se podía
5
transmitir (fue probado en hamsters). Los científicos retornaron la búsqueda de patógenos
específicos en la enfermedad periodontal y el tratamiento del agente causal.
En el 2000 la placa dental es vista como una biopelícula. La investigación a través de
varias décadas ha proporcionado una fundación sólida para los estudios actuales sobre las
biopelículas orales. Los numerosos estudios culturales han divulgado la diversidad de
microflora oral residente, tanto en el nivel de género y especie en salud y enfermedad
(15,16). El desarrollo de la placa dental ha sido descrito detalladamente en:
(a) en una superficie limpia en cierto plazo de tiempo
(b) en las personas de diversas edades, de diversos países y dietas, y con
deficiencias precisas en las defensas de su anfitrión (adquiridas e innatas).
(c) siguiendo varias terapias (3,5,7).
La composición de la placa dental también varía en superficies anatómicas distintas por
ejemplo: surcos oclusales, superficies proximales, prótesis dentales debido a las
características físicas y biológicas de cada sitio (5,11,14). El reconocimiento de estas
influencias ambientales en la composición de la placa ha conducido hacia conceptos en la
prevención de enfermedades que han incluido principios ecológicos (16).
Según Costerton y cols. (2003),hacen referencia a la heterogeneidad fisiológica, a los
distintos fenotipos encontrados entre bacterias sésiles y planktónicas, a las señales
emitidas dentro del biofilm, donde destaca el concepto de quorum sensing, y a la
capacidad adaptativa de las bacterias que se organizan de forma altamente específica para
lograr un equilibrio entre la necesidad de maximizar el área de superficie para el
intercambio de nutrientes y la cohesión que le permita permanecer unido a la superficie
(14).
6
Fig.2. Placa dental en microscopio electrónico de barrido (Tomado de Biofilm: a new
plaque. http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf)
En los últimos años, se han dado importantes avances en cuanto al conocimiento de la
organización de las biopelícula y de los modos en los que se establece la comunicación
interbacteriana que hace que sean estructuras organizativamente muy complejas.
Las biopelículas que colonizan la cavidad oral son unas de los más complejas de
biopelícula que existen en la naturaleza. Esta complejidad se debe en gran medida a la
composición de las distintas superficies, que determinan la existencia de cuatro nichos
orales diferentes (15): mucosa masticatoria, dorso lingual, saliva y superficies duras, en
donde se incluyen las superficies dentarias y las de materiales de restauración.
Fig.3. Partes de la biopelícula (Tomado de Biofilm: a new plaque.
http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf)
7
II.2.-FORMACIÓN DE LA BIOPELÍCULA
Inmediatamente después de la inmersión de un sustrato sólido en el medio líquido de la
cavidad bucal, o después de la limpieza de una superficie sólida en la boca,
macromoléculas hidrófobas comienzan a adsorberse en la superficie para formar una
película condicionante denominada película adquirida. Esta película esta compuesta de
diversas glucoproteínas salivales (mucinas) y anticuerpos.
La película condicionante altera la carga y la energía libre de la superficie, que a su vez
aumentan la eficiencia de la adhesión bacteriana.
II.2.1 La cavidad oral como hábitat de microorganismos: Con el fin de identificar los
determinantes ecológicos claves que influyen en los patrones de colonización, es
necesario comprender las propiedades de la cavidad oral. En primer lugar, la boca está
continuamente bañada por la saliva, manteniendo una temperatura de 35- 36°C a un pH
de 6,7 condiciones óptimas para el crecimiento de muchos microorganismos. En segundo
lugar, la saliva influye profundamente en la ecología de la boca (17); por ejemplo, su
composición iónica promueve sus propiedades de amortiguación y su capacidad para
remineralizar el esmalte. Por otro lado, los componentes orgánicos (glicoproteínas y
proteínas) pueden: a) influír en el establecimiento y selección de la microflora oral, al
favorecer la adhesión de ciertos organismos a través de la formación de una película
selectiva acondicionadora sobre la superficie del esmalte, o la eliminación de bacterias a
través del aclaramiento salival; b) actuar como nutriente endógeno. Así mismo, la saliva
contiene componentes de la inmunidad innata y adquirida lo que le da la capacidad de
inhibir directamente algunos microorganismos exógenos (17). La microflora de la placa
dental, proveniente de diferentes sitios de la superficie dental, muestra diferencias en su
composición. Estas variaciones resultan de las diferencias locales con respecto al
suministro de nutrientes, el pH y el potencial redox (26).
8
Bacterias Fisuras Superficie proximal Surco gingival
(%) (%) (%)
Streptococcus 8-86 <1-70 2-73
Actinomyces 0-46 4-81 10-63
AnG+R* 0-21 0-6 0-37
Neisseria +** 0-44 0-2
Veillonella 0-44 0-59 0-5
AnG-R *++ 0-66 8-20
Medio ambiente
Fuente de nutrientes saliva y dieta saliva y FCG+ʎ FCG
pH neutro-bajo neutro-bajo neutro-alto
EhC¡¡ positivo lig. Negativo negativo
*AnG+R, AnG-R: Bacterias anaerobias obligadas Gram positivas y bacterias anaerobias
Gram negativas, respectivamente.
+ʎ FCG: Fluído crevicular gingival.
++: Ocasionalmente detectadas.
C¡¡ Eh: Potencial Redox.
Tabla 1. Bacterias predominantes presentes en la placa de tres sitios distintos y factores
ecológicos determinantes (Tomado de Pérez A. La biopelícula una nueva visión de la
placa dental. Rev Estomatol Herediana 2005; 15 (1): 82-85)
9
La placa dental se acumula preferentemente en los sitios estancados que tienen protección
contra fuerzas vigorosas de retiro (cepillado) que se aplican en la boca. Fases distintas del
desarrollo pueden ser reconocidas, incluyendo:
Fig.4. Fases de la biopelícula (Tomado de Lindhe. Periodontología Clínica e
implantología odontológica. Cuarta edición. Buenos Aires. Médica Panamericana
2005. p 85-97)
(a) Absorción de las moléculas anfitrionas y bacterianas a la superficie del diente. Esta
película adquirida se forma inmediatamente después de una erupción o una limpieza
(11,15) e influye directamente el patrón de la colonización microbiana inicial.
Los cambios conformacionales que pueden ocurrir después de la adsorción de las
moléculas, y del impacto de estas en sus propiedades, son ahora favorables para su
estudio: la estructura molecular de los cambios de los glucanos cuando la
glucosiltransferasas son absorbidas a la superficie (33).
10
Fig.5. Colonización primaria por bacterias facultativas predominantemente
grampositivas. Ss: Streptococos Sanguis, el mas dominante. Av: especies de
Actinomyces tambien encontradas en la placa de 24 horas (Tomado de Lindhe.
Periodontología Clínica e implantología odontológica. Cuarta edición. Buenos Aires.
Médica Panamericana 2005. p 85-97)
(b) Transporte pasivo de bacterias orales a la superficie del diente. Interacciones débiles,
de largo alcance, fisicoquímicas entre la superficie microbiana de la célula y el diente
revestido de la película adquirida crea un área débil de atracción neta que facilita la
adhesión reversible (32).
Por consiguiente, interacciones fuertes, de corto alcance entre moléculas específicas en la
superficie celular bacteriana (adhesinas) y receptores complementarios en la película
adquirida pueden dar lugar a la adhesión irreversible (31) y pueden explicar tropismos
microbianos para las superficies. Las bacterias orales poseen generalmente más de un tipo
de adhesina en su superficie celular y pueden participar en múltiples interacciones con las
moléculas del huésped y receptores similares en otras bacterias (coadhesión).
11
Fig.6. Cocos y bacilos grampositivos facultativos, que se congregan y se multiplican
(Tomado de Lindhe. Periodontología Clínica e implantología odontológica. Cuarta
edición. Buenos Aires. Medica Panamericana 2005. p 85-97)
(c) Co-adherencia de los últimos colonizadores a los anteriores ya adheridos. Esta etapa
también implica interacciones interbacteriales adhesinas-receptoras específicas (a menudo
incluyendo lectinas) y conduce a un aumento en la diversidad del biofilm y a la formación
de estructuras morfológicamente inusuales, tales como mazorcas de maíz y rosetones (8).
La co-adherencia puede también facilitar la organización funcional de la placa dental. Las
bacterias se introducen en una gama de interacciones bioquímicas antagónicas y
sinérgicas (8). La eficiencia de las interacciones metabólicas entre bacterias en cadenas
alimenticias puede ser mejorada si se ponen en contacto físico. Asimismo, la co-
adherencia de bacterias anaeróbicas estrictas a las especies anaerobias facultativas puede
asegurar la supervivencia en ambientes orales abiertamente aerobios.
12
Fig.7. Receptores de superficies sobre los cocos y bacilos grampositivos, facultativos
q permiten la adherencia posterior de los microorganismos gramnegativos, los cuales
poseen capacidad insuficiente para adherirse directamente a la película. Fn:
Fusubacterium nucleatum. Bi: Prevotella intermedia. (Tomado de Lindhe.
Periodontología Clínica e implantología odontológica. Cuarta edición. Buenos Aires.
Médica Panamericana 2005. p 85-97)
(d) La Multiplicación de los microorganismos adheridos. La división celular conduce a
crecimiento confluente y, eventualmente, a un espacio tridimensional y organizada
funcionalmente, llamada cultura de la biopelícula mixta. Los resultados de la producción
de polímeros en la formación de una matriz extracelular compleja compuesta de glucanos,
fructanos y heteropolímeros solubles e insolubles. Esta matriz es un característica común
de biofilms y hace una contribución significativa a la conocida integridad estructural y a
la resistencia general de la biopelícula; la matriz puede ser biológicamente activa y
retener nutrientes, agua y enzimas que son importantes dentro las biopelículas (25).
Más estudios se requieren para entender completamente la influencia de la matriz en la
arquitectura y características de la placa dental. Cuando es vista por la luz convencional o
microscopia electrónica, la placa dental madura aparece como una densa estructura
empaquetada (21,29); sin embargo, el reciente uso de técnicas microscópicas nuevas ha
13
demostrado una arquitectura más abierta. Substratos endógenos (derivados de la saliva o
el líquido crevicular gingival) son la fuente principal de nutrientes para las bacterias
orales, pero su catabolismo requiere de concertadas y secuénciales acciones de grupos de
microbios con enzimas complementarias (8,9,10) esto quiere decir que la placa funciona
como una verdadera comunidad microbiana.
Fig.8. La heterogeneidad y la maduración de la placa aumentan con el tiempo. Como
resultado de los cambios ecológicos mas bacterias gramnegativas estrictamente
anaerobias colonizan secundariamente y contribuyen a una mayor patogenia del
biofilm. (Tomado de Lindhe. Periodontología Clínica e implantología odontológica.
Cuarta edición. Buenos Aires. Medica Panamericana 2005. p 85-97)
(e) Separación activa. Las bacterias pueden responder a las señales ambientales y
separarse de superficies, permitiendo a las células colonizar otras partes. Por ejemplo, las
enzimas producidas por las bacterias sésiles pueden hidrolizar los adhesinas específicas
que anclan en la superficie (8).
14
Una vez que esté establecido, la microflora residente de placa sigue siendo en un
cierto plazo relativamente estable y es ventajosa para el anfitrión (16,15). La microflora
residente de todos los sitios desempeña un papel crítico dentro del desarrollo normal de la
fisiología del anfitrión y también reduce las probabilidades de infección actuando como
barrera a la colonización por especies exógenas a menudo patógenas resistencia a la
colonización (23).
Los mecanismos que contribuyen a la resistencia de la colonización incluyen una eficaz
competición por los nutrientes y los sitios de adhesión, la producción de factores
inhibidores y la creación de condiciones desfavorables para el crecimiento de la
microflora residente. Así, el tratamiento debe controlar más que eliminar la microflora de
la placa dental.
Las bacterias se adhieren en forma variable a estas superficies recubiertas. Algunas
poseen estructuras para la adhesión específicas, como sustancias polimétricas
extracelulares y fimbrias, que les permiten una adhesión rápida al contacto. Otras
bacterias requieren una exposición prolongada para unirse firmemente. Su
comportamiento cambia una vez adheridas a las superficies. Esto implica el crecimiento
celular activo de bacterias antes inactivas y la síntesis de nuevos componentes de la
membrana exterior (27).
La masa bacteriana aumenta debido al crecimiento continuo de los microorganismos
adheridos, a la adhesión de nuevas bacterias y la síntesis de polímeros extracelulares. Con
el aumento del espesor, la difusión hacia adentro y afuera de la biopelícula se hace cada
vez más difícil. Se genera un gradiente de oxígeno como resultado de la rápida utilización
por parte de las capas bacterianas superficiales y una difusión deficiente del oxigeno a
través de la matriz de la biopelícula (22).
Las condiciones completas de anaerobiosis se producen por lo general en las capas mas
profundas de los depósitos. El oxígeno es un determinante ecológico importante debido a
que las bacterias varían en su capacidad para crecer y multiplicarse con los diferentes
niveles de oxígeno. Se produce la disminución de gradientes de los nutrientes provistos
15
por una fase acuosa, es decir, la saliva. Como resultado del metabolismo bacteriano se
desarrolla gradientes inversos de productos de fermentación.
En las regiones más profundas existen gradientes de difusión importantes, sobre todo para
el oxígeno.
Ubicuidad con que se detectan las especies anaerobias en estas áreas de las biopelículas
demuestra la evidencia de esos gradientes (15).
Las biopelículas son ubicuas; se forman virtualmente en todas las superficies inmersas en
medios acuosos naturales.
II.2.2 Variación de la biopelícula según las etapas de vida: Durante el primer año de vida
(cuando no hay dientes) en la boca predomina las bacterias anaerobias aerotolerantes así
como los estreptococos y lactobacilos, si bien otras bacterias, incluyendo algunas
aerobias, aparecen en un pequeño número.
Cuando aparecen los dientes hay un cambio marcado en el equilibrio de la microflora
(microbiota) hacia los aerobios, desarrollándose un tipo de bacterias adaptadas
específicamente al crecimiento sobre superficies y sobre las hendiduras de los dientes.
La colonización bacteriana de las superficies lisas de los dientes se produce como
consecuencia de un anclaje firme de células bacterianas individuales, seguido de un
crecimiento en forma de microcolonias. A partir de una superficie dentinaria recién
limpia, el primer evento es la formación de una fina película orgánica de varias micras de
espesor como resultado de la fijación de glucoproteínas ácidas de la saliva. Esta película
proporciona un sitio de anclaje mas firme para la colonización de microcolonias
bacterianas (32).
La colonización de esta película glicoproteica es muy específica y sólo implica a unas
cuantas especies de Streptococcus (primariamente S. Sanguis, S. Sobrinus, S. mutans y S.
mitis).
16
Como consecuencia del intenso crecimiento de estos organismos se forma una zona
bacteriana espesa denominada Placa dental. Si la placa sigue formándose, comienzan a
desarrollarse bacterias filamentosas, generalmente de Fusobacterium (31).
Las bacterias filamentosas se hallan embebidas en la matriz formada por estreptococos
que se extiende perpendicular a la superficie dentaria, constituyendo una capa bacteriana
más gruesa. Además de los estreptococos y en asociación con las bacterias filamentosas,
están las espiroquetas como las especies de Borrelia, bacilos gram positivos y cocos gram
negativos. En una placa gruesa pueden predominar los organismos filamentosos, así como
las especies anaerobias de actinomyces.
Podría sorprender la naturaleza anaeróbica de la microbiota teniendo en cuenta que la
boca posee una buena accesibilidad para el oxígeno. Es probable que la anoxia sea el
resultado de la acción de bacterias facultativas que se desarrollan en condiciones aerobias
sobre los materiales orgánicos de los dientes, puesto que la defensa matriz de la placa
disminuye la difusión del oxigeno en la superficie del diente.
Las poblaciones microbianas de la placa dental viven en un microambiente que ellas
mismas fabrican en parte y también luchando contra las grandes variaciones en el
microambiente de la cavidad oral.
17
Fig.9. Formación de la placa dental sobre un diente limpio (Tomado de Prescott,
Harley. Microbiología. Cuarta edición. Editorial Médica Panamericana .Barcelona
.2002. p 837)
En relación al suministro de nutrientes, éstos comprenden dos categorías: 1) los
endógenos, dado por las proteínas y glicoproteínas provenientes de la saliva y del fluído
crevicular y 2) los exógenos, dado por los carbohidratos provenientes de la dieta. Los
carbohidratos fermentables son los nutrientes que principalmente afectan la ecología
microbiana de la cavidad oral. El metabolismo intracelular de los carbohidratos, por parte
18
de las bacterias, lleva a la producción de ácidos que van a acidificar la biopelícula dental
(11).
En cuanto al pH, muchas de las especies bacterianas orales crecen en un rango de pH
relativamente limitado. Un pH neutro no tiene impacto sobre los niveles de las especies
del grupo mutans, mientras que un pH bajo lleva a un incremento de estas bacterias.
Los organismos anaerobios pueden enfrentarse a los efectos tóxicos del oxígeno
interactuando con especies que consumen oxígeno, reduciéndolo a niveles que permiten
el crecimiento de los primeros (12)
Fig.10. Biofilm, se aprecia los canales de fluído (Biofilm: a new plaque.
http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf).
La matriz esta penetrada por canales que conducen nutrientes, productos de desecho,
enzimas, metabolitos y oxigeno (27).La matriz circundante de las microcolonias sirve
como barrera de protección y esto explica porque los antimicrobianos no tienen siempre
éxito (27).
Las bacterias asociadas a la periodontitis residen tanto en la biopelícula que se encuentran
por encima como por debajo del margen gingival. La biopelícula supragingival está unido
a la superficie dentaria y está formado predominantemente por Actinomyces. Sin
embargo, la naturaleza de la biopelícula subgingival es más complicada, ya que existen
dos biopelículas diferentes, uno asociado a la superficie radicular y otro en íntima
relación con la superficie epitelial de la pared blanda de la bolsa. Este último contiene,
predominantemente, espiroquetas y especies gram negativas (P.gingivalis, Treponema
denticola, etc). Entre estos dos biopelículas existen una zona de baja densidad celular
compuesta por bacterias débilmente unidas que parecen estar en estado planctónico
19
(4,13).La microscopía ha confirmado que la placa tiene una arquitectura abierta similar a
otras biopelículas, con los canales y los vacíos. Los gradientes se desarrollan en áreas de
biomasa densa sobre distancias cortas en los parámetros claves que influencian
crecimiento microbiano y su distribución.
Característica general Placa dental
Arquitectura abierta Presencia de canales y de vacíos
Protección contra la defensa del huésped Producción de polímeros extracelulares
para formar la matriz funcional
Resistencia a los antimicrobianos
Aumenta la resistencia a la clorhexidina y
antibióticos
Neutralización de inhibidores Producción de B-lactamasa por las células
vecinas para proteger los organismos
sensibles
Gen de expresión Síntesis de proteínas; para la regulación de
gtfBC
Coordinación del gen respuesta
Producción celula-celula que señala las
moléculas
Espacial y heterogeneidad ambiental Gradientes de pH y O2; coadherencia
Un hábitat más amplio
El ambiente obliga a los anaerobios a
comportarse también como aerobio
Metabolismo eficiente Catabolismo completo macromoléculas
complejas del huésped (mucinas) cerca
consorcios
20
Tabla 2. Características generales de la placa dental y de comunidades microbianas
(Tomado de Marsh P.D. Dental plaque as a microbial biofilm. Caries Res 2004; 38:204-
211)
II.3.CARACTERÍSTICAS DE LAS BIOPELÍCULAS (1,4)
Definición de cada una de las características de la biopelícula.
II.3.1.- Adherencia: Es la capacidad que tiene cada microorganismo para adherirse a
una superficie
II.3.2.- Heterogeneidad de microorganismos y microambientes
II.3.3.- Quórum sensing: Hace referencia a la regulación de la expresión de
determinados genes a través de la acumulación de compuestos señalizadores que
miden la comunicación intercelular. El quorum sensing depende de la densidad
celular. Cuando la densidad celular de un biofilm es baja, los compuestos
señalizadores se producen en pequeñas cantidades, si bien, la autoinducción hace que
se incrementen estos niveles a medida que la densidad celular también aumenta. Una
vez que estos compuestos alcanzan un nivel umbral (densidad celular de quorum)
comienza la activación de la expresión genética.
El fenómeno de quorum sensing da a la biopelícula propiedades distintivas, además
de influir en la estructura de la comunidad bacteriana favoreciendo el crecimiento de
bacterias beneficiosas para el biofilm e impidiendo el desarrollo de especies
competidoras (13).
II.3.4.- Homeostasis microbiana: Es el mantenimiento de una microflora estable en un
medio variable.
II.3.5.-Los microorganismos tienen un sistema de comunicación primitivo.
II.3.6.-Los microorganismos en la biopelícula son resistentes a antibióticos,
antimicrobianos y a la respuesta del huésped.
II.3.7.-Los microorganismos se agrupan en microcolonias
II.3.8.-Las microcolonias son rodeadas por la matriz protectora.
II.3.9.- Cooperación entre los diferentes tipos de comunidades.
21
.
II.4. PRODUCTOS BACTERIANOS DENTRO DEL LAS BIOPELÍCULAS (1).
1. Enzimas como colagenasas, fibrinolisinas que degradan epitelios.
2. Liberación del lipopolisacárido por gérmenes Gram negativos
3. Producción de leucotoxinas que lisan los leucocitos PNM.
4. Proteasas que desdoblan Ig G e Ig A
5. Secreción de desechos metabolicos citotóxicos como ácido butírico y
propiónico
II.5.ESTRUCTURA DE LA PLACA DENTAL
II.5.1.PLACA SUPRAGINGIVAL
Esta placa en cantidades pequeñas no es visible clínicamente salvo que sea teñida con
soluciones reveladoras. La placa se desarrolla principalmente sobre el tercio gingival de
los dientes, prefiriendo zonas de fisuras superficiales, defectos áreas ásperas y márgenes
de restauraciones desbordantes (31).
Las superficies dentales, el esmalte y el cemento expuesto, están cubiertos normalmente
por una fina película de glucoproteínas. Si se la elimina, por ejemplo, mediante
instrumentación mecánica, se vuelve a formar en minutos. Se cree que la película el
primer material celular que se adhiere a la película sobre la superficie dentaria u otras
superficies sólidas, son bacteria cocoides con una serie de células epiteliales y leucocitos
polimorfonucleares. Se encuentran bacteria ya sea en la película o dentro de ella como
microorganismos aislados o como microorganismos agregados. Cantidades mayores de
microorganismos pueden ser transportadas a la superficie dentaria por células epiteliales.
La cantidad de bacteria hallada en la superficie algunas horas después de la limpieza
depende de los procedimientos aplicados a la muestra antes del examen; la razón es que la
adhesión a la superficie sólida es inicialmente muy débil. Si no se desempeña un papel
22
activo en la adhesión selectiva de las bacterias a la superficie dentaria. Al parecer la
adhesión de los microorganismos a la superficie sólida sucede en dos etapas:
1. Un estado reversible en que la bacteria se adhiere débilmente, y luego
2. Un estado irreversible durante el cual la adherencia se consolida (25)
Otro factor que puede modificar la cantidad de bacterias en los primeros depósitos de
placa es la presencia de gingivitis, que aumenta la velocidad de formación de placa de
modo que la composición bacteriana más compleja sucede inicialmente (29). El
crecimiento de la placa también puede iniciarse por microorganismos albergados en las
diminutas irregularidades en las que están protegidos contra la limpieza natural de la
superficie dentaria.
Durante estas primeras horas, las bacterias que resisten al despegamiento de la película
pueden comenzar a proliferar y a formar colonias pequeñas de microorganismos
morfológicamente similares. Sin embargo, dado que otros tipos de microorganismos
también pueden comenzar a proliferar en una región adyacente, la película se puebla
fácilmente con una mezcla de diferentes microorganismos (29). Además, algunos de
ellos son capaces de crecer entre las colonias ya establecidas. Por último, es probable que
racimos de microorganismos de diferentes especies se adhieran a la superficie dentaria o a
otros microorganismos ya adheridos y contribuyan a la complejidad de la composición de
la placa después de algunos días. En este momento, los diferentes tipos de
microorganismos pueden beneficiarse mutuamente. Un ejemplo es la configuración en
forma de mazorca, producto del crecimiento de cocos sobre la superficie de un
microorganismo filamentoso (33).
Una característica de la placa mas antigua es la presencia de bacterias muertas y lisadas,
que pueden proveer nutrientes adicionales a las bacterias aun viables dentro del mismo
entorno (16).
El material presente entre las bacterias de la placa dental es llamado matriz
intermicrobiana y constituye aproximadamente el 25% del volumen de la placa. Tres
fuentes pueden contribuir a la matriz intermicrobiana: los microorganismos de la placa, la
saliva y el exudado gingival.
Las bacterias pueden liberar varios productos metabólicos. Algunas pueden liberar va-
rios productos metabólicos. Algunas pueden producir diversos polímeros de carbohi-
23
dratos extracelulares, que sirven como almacenamiento de energía o como material de
anclaje para asegurar su retención en la placa (8,27).
Las bacterias en degeneración o muertas también pueden contribuir a la matriz
intermicrobiana.
Las diferentes especies bacterianas a menudo poseen distintas vías metabólicas y
capacidad para sintetizar material extracelular. Por lo tanto, la matriz intermicrobiana de
la placa varía considerablemente de una región a otra. Suele observarse un componente
fibrilar en la matriz entre los cocos grampositivos y concuerda con el hecho de que varios
estreptococos bucales sintetizan lévanos y glucanos de la sacarosa de la dieta. En otras
regiones, la matriz tiene un aspecto granular u homogéneo. En partes de la placa con
presencia de microorganismos gramnegativos, la matriz intermicrobiana se caracteriza
por la presencia de vesículas pequeñas rodeadas de una membrana trilaminar, que es
similar en estructura a la envoltura externa de la pared celular de los microorganismos
gramnegativos. Estas vesículas probablemente contengan endotoxinas y enzimas
proteolitícas y también pueden participar en la adhesión entre las bacterias (27).
Los carbohidratos de la matriz han recibido mucha atención y al menos algunos de los
polisacáridos de la matriz de la placa están bien identificados: fructanos (levanos) y
glucanos. Los fructanos son sintetizados en la placa a través de la sacarosa de la dieta y
constituye un almacenamiento de energía que pueden utilizar los microorganismos en los
momentos de aporte escaso de azúcar. Los glucanos también se sintetizan a partir de la
sacarosa. Un tipo de glucano es el dextrano, que también sirve de almacenamiento de
energía. Otro glucano es el mutano, que no se degrada con facilidad, pero actúa
primordialmente como esqueleto de la matriz, de la misma manera que el colágeno
estabiliza la sustancia intercelular del tejido conectivo. Se ha sugerido que estos
polímeros de carbohidratos pueden ser los causantes del cambio de la placa reversible a
irreversible (29).
La pequeña cantidad de lípidos de la matriz de la placa no esta aun caracterizada. Parte
del contenido lipídico se encuentra en pequeñas vesículas extracelulares, que pueden
contener endotoxinas formadas por lipopolisacaridos de bacterias gramnegativas.
La maduración de la placa produce inflamación de la encía marginal y aumento del
fluído gingival.
24
II.5.2.PLACA SUBGINGIVAL
La placa subgingival se asemeja a la supragingival, aunque los tipos predominantes de
microorganismos varían considerablemente de los que residen hacia la zona contraria del
margen gingival (24).
Entre la placa subgingival y el diente se interpone un material orgánico electrodenso,
denominado cutícula. Esta cutícula probablemente contiene los restos de la lámina de la
adhesión epitelial que originalmente conectaba el epitelio de unión al diente con el
agregado de material depositado proveniente del exudado gingival (13). Se ha sugerido
que la cutícula representa un producto secretor de las células epiteliales adyacentes (7).
Falta información acerca de su composición química, pero su localización en el área
subgingival hace probable que los componentes de la saliva contribuyan a su formación.
La placa subgingival se asemeja estructuralmente a la placa supragingival, sobretodo con
respecto a la placa asociada con gingivitis sin formación de bolsas profundas. Se observa
una acumulación densa de microorganismos adyacentes al material cuticular que recubre
la superficie dentaria. Las bacterias comprenden cocos, bacilos y microorganismos
filamentosos gramnegativos y grampositivos. También se pueden hallar espiroquetas y
varias bacterias flageladas, en especial en la extensión apical de la placa. La capa
superficial a menudo es menos densa y los leucocitos están interpuestos de manera
regular entre la placa y el recubrimiento epitelial del surco gingival (24).
Cuando se forma una bolsa periodontal, el aspecto de los depósitos bacterianos
subgingivales se torna más complejo. En este caso la superficie dentaria puede estar
representada por esmalte o por segmento del cual se desprendieron las fibras
periodontales. La acumulación de placa en la porción del diente previamente cubierta por
los tejidos periodontales no difiere demasiado de la observada en la gingivitis. En esta
capa predominan los microorganismos filamentosos, pero también aparecen cocos y
bacilos. Sin embargo, en las zonas mas profundas de la bolsa periodontal, los
microorganismos filamentosos disminuyen en número y en la porción apical parecen estar
casi ausentes. En su lugar, los depósitos bacterianos densos y que contactan con el diente
están denominados por microorganismos más pequeños sin orientación particular (27).
25
Las principales bacterias encargadas de la destrucción periodontal en las profundidades
de la bolsa son: Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus,
Actinobacillus actinomycetemcomitans y treponema denticola.
Existe un predominio de bacterias asociadas a periodontitis cronica: asi tenemos a la
Porphyromonas gingivales gramnegativas que son altamente virulentas, tienen una gran
capacidad de inducir la reabsorción osea, destruir el tejido conectivo, inducir a las
citoquinas e inhibir los mecanismos de protección del huésped. Las Fusobacterium
nucleatum producen altas concentraciones de acido butirico, capaz de producir cambios
inflamatorios, por lo general asociadas a infecciones periimplantares(25).
Las capas superficiales de microorganismos en las bolsas periodontales en el lado del
tejido blando son claramente diferentes de la capa adherente a lo largo de la superficie
dentaria, y no se aprecia una matriz intermicrobiana definida. Estos microorganismos son
una gran cantidad de espiroquetas y bacterias flageladas. También hay cocos y bacilos
gramnegativos. La gran cantidad de espiroquetas y microorganismos flagelados son
materias móviles y no existe matriz intermicrobiana entre ellos. La parte mas externa de
la acumulación microbiana en las bolsas periodontales se adhiere débilmente a la pared
blanda de la bolsa (28).
Los Actinomyces están fuertemente asociados a la periodonitis juvenil y a la periodontitis
de progresión rápida, estas bacterias son capaces de evadir la respuesta del huésped y
producir la destrucción del tejido conectivo y hueso, Bacteroides forshytus gramnegativos
anaerobios se encuentran en las bolsas profundas (27).
Los depósitos bacterianos en las bolsas profundas son mucho más delgados que los
hallados en las formas adultas de enfermedad periodontal. Algunas veces las áreas de las
superficies dentarias pueden estar desprovistas de depósitos microbianos adheridos. El
material cuticular posee un espesor irregular. La capa adherente de microorganismos
varía considerablemente de espesor y disposición. Puede exhibir una organización
bacteriana en empalizada. Los microorganismos en esta capa son principalmente cocos,
bacilos y bacterias filamentosas, sobre todo del tipo gramnegativo. También se puede
hallar una capa superficial con algunos cocos grampositivos, asociados con
microorganismos filamentosos en la configuración típica de mazorca (34).
26
Las bacterias localizadas subgingivalmente parecen tener capacidad para invadir los
túbulos dentarios que están abiertos como consecuencia de reabsorciones inflamatorias
presentes en el cemento (28). Este hábitat puede servir como fuente de recolonización del
espacio subgingival después del tratamiento de la enfermedad periodontal. Los
mecanismos involucrados en esta invasión inversa del espacio subgingival se desconoce.
II.6. LA BIOPELÍCULA Y CARIES DENTAL
La caries dental vendría a ser el resultado de los cambios ocurridos en el balance de la
microflora que reside en la placa, como consecuencia de la modificación de las
condiciones medioambientales locales. Por ejemplo, las condiciones repetidas de un pH
bajo en la placa luego del consumo frecuente de azúcares que favorecen el predominio de
las especies cariógenas, y la disminución del flujo salival (2).
Según la hipótesis de la placa ecológica de Marsh; señala que en un microambiente con
pH neutro las bacterias predominantes son las S. oralis y las S. sanguis cuando este
microambiente cambia por el exceso de azúcares a un pH ácido ocurre el fenómeno de la
desmineralización además de que aumentan los lactobacilos luego el medio retorna a un
ambiente neutro sucediendo el fenómeno de la remineralización (18).
Fig.11. Hipótesis de la placa ecológica de Marsh (Pérez A. La biopelícula una nueva
visión de la placa dental. Rev Estomatol Herediana 2005; 15 (1): 82-85)
27
II.7.BACTERIAS DE LA BOCA:
Aproximadamente 400 a 500 especies bacterianas son encontradas en muestras de placas
subgingivales de humanos, es posible que 10 a 20 especies cumplan un rol patogénico y
destructivo en la enfermedad periodontal (29).
Las bacterias anaerobias comprenden un importante grupo de la microbiota normal de los
humanos. Bacterias gram negativas son consideradas como residentes de la flora oral,
intestinal y vaginal.
Las bacterias anaerobias se encuentran diseminadas en la naturaleza. Estan presentes en
casi todas las infecciones. Las infecciones que envuelven anaerobios son frecuentemente
polimicribiales, encontrandos mezclados con aerobios facultativos y otros anaerobios,
estas infecciones son comunes y se encuentran asociadas con altas tasas de morbilidad y
mortalidad.
La mayor parte de las bacterias salivales provienen del dorso de la lengua, de donde se
desprenden por acción mecánica; cantidades menores provienen de las mucosa bucales
(30)
El surco gingival es el lugar predilecto para el crecimiento microbiano pero estos tienen
que evadir una serie de obstáculos como el mecanismo de defensa no especifico como es
el flujo de la saliva y fluído gingival.
De entre todas las bacterias que forman el biofilm bacteriano existen tres que tienen una
relevancia especial en el inicio y la progresión de la enfermedad periodontal, son
Actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalisy Tannerella forsythesis (19). El
origen de estas especies es exógeno; no forman parte de la flora habitual y el tratamiento
debe tener como objetivo su eliminación total.
Microflora bacteriana oral
• Estreptococo( es el grupo más numeroso)
-Aerobios facultativos
-Representa la mitad de las formas viables en saliva y dorso lingual
28
-Representan un cuarto de las cuentas en placa y surco gingival
-El más abundante de los estreptococos es el grupo de viridans: Impide otras
colonizaciones al producir bacteriocinas, causa infección seria cuando hay ulcera y
compromiso del sistema inmúne, produce exotoxinas, enzimas liticas, activa el
complemento e induce generación de citoquinas.
-Estreptococos orales estan asociados a abscesos y endocarditis bacteriana
-Otros estreptococos aislados S. mitis, S. oralis, S.gordonii,S. Anginosus, S. constelltus y
S. .intermedius.
• Otros cocos gran positivos importantes:
-Peptoestreptococus:
Anaerobio obligado grampositivas
Significante en flora subgingival y enfermedad periodontal avanzada
Abscesos odontogenicos.
Enterococos en pequeño porcentajes
Estafilococos aureos en pequeñas cantidades.
• Bacilos grampositivas y filamentos
-Actinomyces (anaerobios y aerobios facultativos)
A.israeli, A.viscosus, A. naeslundi, A.odonlolycus
-Especies de eubacterias
-Difieroides.
-Corynebacterium
29
• Cocos gramnegativos
Especies de Veillonella (anaerobio)
Especies de Neisseria (facultativo)
• Bacilos anaerobio gramnegativos y filamentos
Prevotella (anaeróbicas y microaerofilos)
Porphyromonas gingivalis (bacilo anaerobio gram negativo), Selenomonas.
Bacteroides.
Fusobacterium, Campilobacter, Actinobacillus y Capnocytofa
30
III. CONCLUSIONES
1. La placa dental muestra características que son típicas de las biopelículas y
comunidades microbianas generales.
2. Las biopelículas son ubicuas es decir se forman en todas las superficies inmersas en
medios acuosos.
3. La biopelícula dental en las primeras 24 horas esta constituída básicamente por
cocos gram positivos (Streptococcus y Actinomyces) y cocos facultativos que
representan a los gram negativos.
4. La colonización de esta película glicoproteíca es muy específica y sólo implica a
unas cuantas especies de Streptococcus (primariamente S. Sanguis, S. Sobrinus, S.
mutans y S. mitis).
5. La biopelícula supragingival y subgingival tiene similar estructura y
características.
6. La biopelícula supragingival y subgingival tienen diferente composición bacteriana.
7. La biopelícula supragingival esta unido a la superficie dentaria y está formado
predominantemente por Actinomyces.
8. La biopelícula subgingival predominan espiroquetas y especies gram negativas
(Treponema denticola, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia,
Bacteroides forythus, Actinobacillus actinomycetemcomitans)
9. La placa subgingival está compuesta por bacilos gram positivos y cocos
streptococcus mitis, S. sanguis, Eubacterium, Actinomyces viscosus, Actinomyces
naeslundi, Bacteroides melaninogénicus, Fusobacterium y Capnocytophaga sin
organizarse, mas apicalmente se encuentran filamentos gramnegativos,
espiroquetas, células epiteliales y leucocitos.
10. Las principales bacterias encargadas de la destrucción periodontal en las
profundidades de la bolsa son: Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia,
31
Bacteroides forythus, Actinobacillus actinomycetemcomitans y treponema
denticola.
11. Las bacterias que se relacionan con la enfermedad periodontal son los bacilos
anaeróbicos gramnegativos, con algunos cocos anaerobios y una gran cantidad de
espiroquetas anaeróbicas.
12. De entre todas las bacterias que forman la biopelícula bacteriana existen tres que
tienen una relevancia especial en el inicio y la progresión de la enfermedad
periodontal, son Actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalisy Tannerella
forsythesis.
13. Es importante que continúen las investigaciones sobre la resistencia bacteriana
dentro de los biofilms, la patogenicidad propia de las bacterias conocidas y las que
todavía quedan por conocer, la susceptibilidad propia del paciente para producir una
respuesta inflamatoria efectiva contra los patógenos periodontales.
32
IV. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Betancourth, Botero. Biopelículas: una comunidad microscópica en desarrollo.
Colombia Médica 2004; 35 (Supl 1): 34-39.
2. Pérez A. La biopelícula una nueva visión de la placa dental. Rev Estomatol
Herediana 2005; 15 (1): 82-85.
3. Socransky SS, Haffajee AD. Dental biofilms: difficult therapeutic targets.
Periodontol 2000, 2002; 28: 12-55.
4. Costerton W et al. The application of biofilm science to the study and control of
chronic bacterial infections. J Clin Invest 2003; 15; 112 (10): 1466-77.
5. Archives of Oral Biology Spatial distribution of vital and dead microorganisms in
dental biofilms. http://www.blackwell-synergy.com/doi/abs10. (15/01/06).
6. Rüdiger SG, Carlen A. Dental biofilms at healthy and inflamed gingival margins. J
Clin Periodontol 2002, 29: 524-530.
7. Costerton JW. Introduction to biofilms. Int J Antimicrob Agents 1999; 11: 217-221.
8. Marsh P.D. Dental plaque as a microbial biofilm. Caries Res 2004; 38 :204-211.
9. Auschill T M, Hein N, Hellwig E. Effect of two antimicrobial agents on early in situ
biofilm formation. J Clin Periodontol 2005; 32:147-152.
10. Arweiler N.B. Hellwig E, Sculean A. Individual vitality pattern of in situ dental
biofilms at different locations in the oral cavity. Caries Res 2004; 38: 442-447.
11. Shapiro S. Giertsen E. Guggenheim B. An invitro oral biofilm model for comparing
the efficacy of antimicrobial mothrinses. Caries Res 2002; 36: 93-100.
12. Auschill TM, Arweiler NB, Brecx M. The effects of dental restorative materials on
dental biofilm. Eur J Oral Sci 2002; 110: 48-53.
13. Watnick P, Kolter R. Biofilm city of microbes. Journal of bacteriology, May 2000, p.
2675-2679.
14. Ramberg P, Lindhe J, Dahlen G and Volpe AR: The influence of gingival
inflammation on the novo plaque formation. J Clin Periodontol 1994; 21: 51-56.
33
15. Newman HN, Wilson M, eds. Dental plaque revisited. Oral biofilms in heath and
disease. UK: BioLine; 1999: 240.
16. Marsh PD. Dental plaque: biological significance of biofilm and community life style.
J Clin Periodontol 2005; 32 (Suppl.6): 7 – 15.
17. Marsh PD. Sugar, fluoride, pH and microbial homeostasis in dental plaque. Proc Finn
Dent Soc 1991; 87: 515-25.
18. Marquis RE. Oxygen metabolism, oxidative stress and acid-base physiology of dental
plaque biofilms. J Int Microbiol 1995; 15: 198-207.
19. Pasado, presente y futuro de la microbiología de la periodontitis http://
scielo.isciii.es/scielo.php ?script=scri_arttex&pid=S1130-14572000. (15/01/06)
20. Robinson C, Kirkham J, Percival R. A method for the quantitative site-specific study
of yhe biochemistry within dental plaque biofilms formes in vivo. Caries Res 1997;
31:194-200.
21. Sculeman A, Auschill T M. Effect of enamel matrix protein derivative on ex vivo
dental plaque vitality. J Clin Periodontol 2001; 28:1074-1078.
22. Listgarten MA, Slots J, Rosenberg J, Nitkin L, Sullivan P, Oler J. Clinical and
microbiological characteristics of treated periodontitis patients on maintenance care. J
Periodontol. 1989 Aug; 60 (8):452-9.
23. Haffajee AD, Bogren A, Hasturk H, Feres M, Lopez NJ, Socransky SS. Subgingival
microbiota of chronic periodontitis subjects from different geographic locations. J
Clin Periodontol 2004; 31: 996–1002.
24. Kinane D. Causation and pathogenesis Periodontal Diaseases. J Clin Periodontol
2001; 25:8-20.
25. Socransky SS, Haffajje AD. Evidence of bacteriology: a historical perspective.
Periodontology 2000; 5: 134-44.
26. Dowsett S.A, Kowolik MJ. Subgingival microbiota of indigenous indians of central
America. J Clin Periodontol 2002; 29: 159-167.
27. Haffajee AD, Bogren A, Hasturk H. Subgingival microbiota of chronic periodontitis
subjects from different geographic locations. J Clin Periodontol 2004; 31:996-1002.
34
28. Ximénez-Fyvie LA, Haffajee AD, Socransky SS: Microbial composition of supra and
subgingival plaque in subjects with adult periodontitis. J Clin Periodontol 2000; 27:
722–732.
29. Ximénez – Fyvie LA, Haffajee AD, Socransky SS: Comparison of the microbiota of
supra and subgingival plaque in health and periodontitis. J Clin Periodontol 2000;
27:648-657.
30. Lindhe. Periodontologia Clínica e implantologia odontológica. Cuarta edición.
Buenos Aires. Medica Panamericana 2005. p 85-97.
31. Brock, Biología de los microorganismos. Octava edición revisada Madrid. Mc Graw
Hill. Interamericana 2000 p.789.
32. Prescott, Harley. Microbiología. Cuarta edición. Editorial Médica Panamericana
.Barcelona .2002. p 837.
33. Socransky SS, Haffajje AD, Cugini MA. Microbial complexes in sub gingival
plaque. J Clin Periodontol 1998; 25: 134-144.
34. Biofilm: a new plaque. http//www.thejcdb.com/issue003/overman/overman.pdf
(15/01/06)