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NITROFURANOS EN EL APIARIO: ESTUDIO DE LA DINÁMICA Y SU PERMANENCIA EN MIEL. Domínguez, Mario César ; García, Elsa Noemí; Pastre, Maira Nerina; Videla, María Paula; Barrandeguy, Julieta Domínguez Laboratorios, Martín de Moussy 41 (Thompson), Paraná, CP: 3100, Entre Ríos, Argentina. Telefax: 00 54 343 4313027. Email: [email protected] Página Web: www.dominguezlab.com.ar Resumen La utilización de nitrofuranos está prohibida en casi todos los países del mundo. En Argentina, la resolución SENASA N° 248 de 1995 (1) prohíbe su utilización en las formulaciones de alimentos y medicamentos destinados a animales cuyos productos y subproductos sean utilizados en el consumo alimentario humano. Por lo tanto se asume Tolerancia CERO para metabolitos de nitrofuranos, considerándose violatoria la aparición de residuos en cualquier matriz biológica. En el presente trabajo se analizó la dinámica y la permanencia de metabolitos de nitrofuranos en miel. Se estudiaron catorce apiarios que presentaron residuo AOZ en miel de cámara de cría y se establecieron un conjunto de medidas sencillas y de bajo costo para el productor, con el fin de eliminar la presencia del residuo en la cosecha siguiente. El 78,6 % de estos apiarios no presentaron residuo AOZ como resultado de la implementación de dichas medidas preventivas. Abstract Nitrofurans are antimicrobial drugs which are banned in Argentine, as well as in many other countries of the world. The resolution SENASA N° 248 – 1995 (1) prohibites its use in our country. This resolution establishes zero tolerance for the metabolites of nitrofurans in any biological matrix. In this work, we have analized the dynamics and permanence of nitrofurans in honey. We have studied fourteen apiaries with contamination AOZ in cage-nursery honey. We have established several norms of low cost for the producer, with the purpose of eliminate the residue AOZ in the future honey harvest. As a result, the 78,6 % of these apiaries have not presented the residue AOZ after the application of the norms suggested. Introducción Los nitrofuranos corresponden a un grupo de sustancias antimicrobianas utilizadas contra algunos agentes patógenos en la producción animal. El grupo se compone por Nitrofurazona, Furazolidona, Furaltadona, Nitrofurantoína, Nifuraldezona, Nifupirazina (1) . Debido a que estudios hechos a largo plazo con animales experimentales han demostrado que los nitrofuranos y sus metabolitos tienen efecto carcinogénico y mutagénico, hoy estas sustancias se encuentran prohibidas en cualquier especie animal de la que derivan alimentos. Las sustancias antimicrobianas de partida (nitrofuranos) se metabolizan rápidamente en el organismo animal, mientras que sus metabolitos (3-amino-2-oxazolidinona, AOZ; 3-amino-5-morpholinometil-2- oxazolidinona, AMOZ; 1-aminohydantoina, ADH; semicarbazida, SEM) son 1

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NITROFURANOS EN EL APIARIO: ESTUDIO DE LA DINÁMICA Y SUPERMANENCIA EN MIEL.

Domínguez, Mario César; García, Elsa Noemí; Pastre, Maira Nerina;Videla, María Paula; Barrandeguy, Julieta

Domínguez Laboratorios, Martín de Moussy 41 (Thompson), Paraná, CP: 3100, Entre Ríos, Argentina.Telefax: 00 54 343 4313027. Email: [email protected]

Página Web: www.dominguezlab.com.ar

Resumen

La utilización de nitrofuranos está prohibida en casi todos los países del mundo.En Argentina, la resolución SENASA N° 248 de 1995 (1) prohíbe su utilización en lasformulaciones de alimentos y medicamentos destinados a animales cuyos productos ysubproductos sean utilizados en el consumo alimentario humano. Por lo tanto se asumeTolerancia CERO para metabolitos de nitrofuranos, considerándose violatoria laaparición de residuos en cualquier matriz biológica.

En el presente trabajo se analizó la dinámica y la permanencia de metabolitos denitrofuranos en miel. Se estudiaron catorce apiarios que presentaron residuo AOZ enmiel de cámara de cría y se establecieron un conjunto de medidas sencillas y de bajocosto para el productor, con el fin de eliminar la presencia del residuo en la cosechasiguiente. El 78,6 % de estos apiarios no presentaron residuo AOZ como resultado de laimplementación de dichas medidas preventivas.

Abstract

Nitrofurans are antimicrobial drugs which are banned in Argentine, as well as inmany other countries of the world. The resolution SENASA N° 248 – 1995 (1) prohibitesits use in our country. This resolution establishes zero tolerance for the metabolites ofnitrofurans in any biological matrix.

In this work, we have analized the dynamics and permanence of nitrofurans inhoney. We have studied fourteen apiaries with contamination AOZ in cage-nurseryhoney. We have established several norms of low cost for the producer, with thepurpose of eliminate the residue AOZ in the future honey harvest. As a result, the 78,6% of these apiaries have not presented the residue AOZ after the application of thenorms suggested.

Introducción

Los nitrofuranos corresponden a un grupo de sustancias antimicrobianasutilizadas contra algunos agentes patógenos en la producción animal. El grupo secompone por Nitrofurazona, Furazolidona, Furaltadona, Nitrofurantoína, Nifuraldezona,Nifupirazina (1). Debido a que estudios hechos a largo plazo con animalesexperimentales han demostrado que los nitrofuranos y sus metabolitos tienen efectocarcinogénico y mutagénico, hoy estas sustancias se encuentran prohibidas en cualquierespecie animal de la que derivan alimentos. Las sustancias antimicrobianas de partida(nitrofuranos) se metabolizan rápidamente en el organismo animal, mientras que susmetabolitos (3-amino-2-oxazolidinona, AOZ; 3-amino-5-morpholinometil-2-oxazolidinona, AMOZ; 1-aminohydantoina, ADH; semicarbazida, SEM) son

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detectables durante mucho tiempo después de la administración y por consiguiente sonestas sustancias las utilizadas para el control de nitrofuranos.

Por esta razón, la presencia de estos residuos en miel la inhabilitan para elconsumo humano. La aparición de los mismos en una producción, requiere undiagnóstico del problema para evaluar las medidas correctivas a aplicar con el objetivode erradicar estos residuos de las colmenas debido a que presentan gran estabilidad enfunción del tiempo. Esto se ve agravado por el fenómeno que indica la posibilidad deque la cera y quizás otros componentes de las colmenas actúen como reservorios de lassustancias contaminantes, transfiriéndolas a la miel.

En el presente trabajo se detectó la aparición de AOZ en catorce apiarios y seestudió su evolución temporal, aplicando sólo medidas preventivas sencillas, sin recurrira medidas que requieran una inversión económica importante.

Objetivos

Establecer un conjunto de medidas preventivas sencillas, de bajo costo y fácilesde implementar por el productor, con el fin de lograr que los residuos de nitrofuranospresentes en una cosecha tiendan a disminuir en forma significativa en la miel de lacosecha siguiente.

Verificar si con la sola implementación de estas medidas se pueden lograrvalores no detectables de residuos de nitrofuranos (AOZ) en apiarios cuya cosechaanterior presentó contaminación.

Hallar un valor de AOZ en miel de cámara de cría que permita predecir si lacosecha siguiente presentará contaminación con este residuo luego de aplicar lasmedidas correctivas sugeridas.

Materiales y métodos

Se evaluaron distintos grupos de apicultores pertenecientes a una misma regióndel país que trabajaban bajo condiciones similares. Este grupo presentó contaminacióncon residuos de nitrofuranos en la cosecha 2003-2004. Los mismos no registrabantrazabilidad del producto debido a que se trabajó con un sistema de extraccióncomunitaria por lo cual era imposible determinar qué productor aportaba lacontaminación en cuestión. Por ello, al comienzo del presente estudio se determinaronlos residuos de nitrofuranos (AOZ y AMOZ) en cámara de cría de 125 apiarios. En estescreening, se encontró que un 49 % de los casos contenía residuo AOZ y un 20 %,residuo AMOZ. Se continuó este estudio con catorce apiarios contaminados con residuoAOZ (julio de 2004) que arrojaron valores positivos en cámara de cría.

Se diseñó un conjunto de medidas preventivas sencillas, de bajo costo y fácilesde implementar por el productor que fueron las siguientes:

1) Dejar de utilizar la medicación con la sustancia antimicrobiana contaminante2) Reemplazar la miel contaminada de cámara de cría3) No trasladar cuadros de cámara de cría a alza melaria4) Evitar el contacto de la miel con la cera (separarlas lo más rápido posible

para disminuir el tiempo de contacto)5) Evitar altas temperaturas en los procesos de extracción

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Finalmente, luego de implementar estas medidas, se volvió a determinar elresiduo AOZ, esta vez en miel de alza melaria de la nueva producción (noviembre de2004).

Ambos tipos de muestras fueron tomadas y remitidas por los productores segúnestrictas indicaciones del laboratorio y bajo la supervisión de un Médico Veterinario acampo.

Las determinaciones de AOZ tanto en cámara de cría como en miel de alzamelaria se llevaron a cabo por ensayo inmunoenzimático para análisis cuantitativo(Ridascreen Nitrofuran (AOZ) de Laboratorio R-Biopharm AG, Alemania) y se utilizóun lector de placas Metrolab 980 con microcomputador y con lectura a 450 nm, consoftware de cálculo Ridawin.

Resultados

Los resultados obtenidos en este estudio se muestran en la Tabla 1 donde seespecifica el número de apiario con su correspondiente nivel de AOZ en ppb (µg/kg demiel) detectado en cámara de cría y los valores en miel de alza melaria luego de laimplementación de las medidas preventivas sugeridas al productor.

Tabla 1. Valores en ppb de AOZ obtenidos en apiarios contaminados.

Número de Apiario ppb de AOZ en mielde cámara de cría

ppb de AOZ en mielde alza melaria(nueva cosecha)

1 2,2 0,912 11,32 ND*3 5,51 ND*4 0,51 ND*5 2,92 ND*6 0,81 ND*7 0,4 ND*8 1,3 ND*9 1,86 0,5910 9,52 2,1411 0,36 ND*12 0,51 ND*13 0,62 ND*14 2,23 ND*

* ND: No detectable.

En la Tabla 2 se puede observar el porcentaje de apiarios que presentabancontaminación en miel de alza melaria en la nueva cosecha luego de la aplicación de lasmedidas sugeridas, junto a los que negativizaron la presencia del residuo AOZ.

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Tabla 2. Resultados obtenidos de apiarios en los que se determinó residuo AOZ en miel de alza melaria.

Residuos de AOZ enmiel de alza melaria

Cantidad deapiarios

Porcentaje (%)

Presentes 3 21,4Ausentes 11 78,6

Total 14 100

Sobre el total de apiarios contaminados con AOZ en cámara de cría quepresentaron valores entre 0,36 y 11,32 ppb, se pudo verificar que en un 21,4 % de losmismos, el residuo AOZ permaneció en niveles entre 0,58 a 2,14ppb; mientras que en el78,6 % restante no se detectó dicho residuo. Estos valores junto a la marcada tendenciaa disminuir se pueden ver en el Gráfico 1.

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Miel de cámara de cría Miel de alza melaria(nueva cosecha)

ppb

AO

Z

1234567891011121314

Gráfico 1. Efecto en los niveles hallados de AOZ en miel de cámara de cría de unaproducción contaminada y miel de alza melaria de la cosecha siguiente, luego de

aplicar medidas preventivas.

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Conclusiones

Al analizar los resultados obtenidos en este estudio se puede concluir que lasmedidas preventivas sugeridas y adoptadas por el productor, resultaron efectivas para ladisminución de la presencia de AOZ en apiarios contaminados (ver Gráfico 1).

En el 78,6% de los apiarios contaminados se obtuvieron valores no detectablesde AOZ, luego de la aplicación de dichas medidas, mientras que sólo el 21,4% de losapiarios continuaron con valores entre 0,58 y 2,14 ppb (ver Tabla 1 y Tabla 2).

Si bien en el total de los apiarios analizados los niveles de residuo AOZ en mielde cámara de cría disminuyeron notablemente respecto a los niveles en miel de alzamelaria, se puede observar que todos los apiarios que presentaron valores inferiores a1,3 ppb en miel de cámara de cría, no presentaron dicho residuo en miel de alza melarialuego de implementar las medidas sugeridas al productor (ver Gráfico 1). Para losapiarios que presentaron niveles que superaron este valor en cámara de cría, la aparicióndel residuo en miel de alza melaria fue variable.

Para lograr la erradicación total de la contaminación se deberían implementaralgunas medidas correctivas extras que requieren inversiones económicas mayores,como por ejemplo, una renovación de la cera de las colmenas contaminadas. Esto sedebe a que la cera es el principal reservorio del residuo en el apiario, ya que los valoresmedidos son mucho más altos que los hallados en la miel con la que estuvo en contacto(2). Este efecto es similar al encontrado por Bogdanov et al. para otros residuos químicos(3). La utilización de procesos de extracción industrializados podría aumentar el riesgo depersistencia del residuo contaminante, debido a los procesos de calentamientorequeridos y al mayor tiempo de contacto que experimenta la miel con la cera, por loque las proyecciones de este estudio podrían verse afectadas.

Entre las medidas de mayor costo que permitirían evitar la recurrencia de lacontaminación se incluyen la división, el nucleamiento y el aumento del número decolmenas. Estas medidas, si bien no son parte del presente estudio, en la práctica evitanla recurrencia de contaminación pero con mayor costo económico.

Este estudio nos permite predecir que la contaminación generalizada que seencontró en el 2003-2004 en mieles argentinas (4) tenderá a desaparecer en la futuracosecha 2006 ya que sólo aplicando medidas de prevención sencillas como las sugeridasen este trabajo, la cantidad de apiarios que se negativizaron fue significativa. Si a esto sele suman los procesos habituales de reciclado de cera de abeja que depura el residuo enla etapa industrial de estampado, el efecto de dilución que conlleva la nueva cera virgensin residuo más otras medidas correctivas integrales, harán que la contaminación conresiduos de nitrofuranos para la cosecha 2006 no se encuentre presente.

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Bibliografía

(1) SENASA, “Nitrofuranos en miel”, Informe de la Comisión de Emergencia SanitariaApícola. www.senasa.gov.ar/sanidad/abejas/informe

(2) “Nitrofuranos en cera. Avances diagnósticos”. Domínguez, M. C. XII Expo Apícola,Doblas, La Pampa, Argentina, 13 al 15 agosto, 2004.

(3) “Determination of acaricide residue in beeswax: collaborative study”. Bogdanov, S.;Kilchenmann, V.;Butikofer, U. APIACTA, 38, 235-245, 2003.

(4) “Resultados de residuos de antibióticos, antiparasitarios y repelentes en mieles delLitoral argentino”. Domínguez, M. C. Expo Apícola del Mercosur, Maciá, EntreRíos, Argentina, 2 al 4 abril, 2004.

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