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Varíola
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Múmia de Ramsés V com marcas sugestivas de varíola
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Varíola: a primeira arma biológica ?
Hernan Cortez(1485-1547)
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Londres, 1844
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POXVIRIDAE
- os maiores vírus conhecidos (~ 300 nm)- simetria complexa- DNA duplo (codifica > 100 prots)- multiplicação intracitoplásmica
VaríolaMolusco contagiosoEctima dos ovinosVários outros poxvírus
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HISTÓRICO-Edward Jenner (1749-1823)
pai da vacinação
PRIMEIRA VACINAÇÃO:1798
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VARÍOLA
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VARÍOLA x VARICELA
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-OMS (1980): Declara erradicada a varíola
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O que é uma vacina?
-Visa induzir resposta imune (imunógeno)- capaz de proteger o indivíduo frente a uma agressão
- Nem todos antígenos são bons imunógenos;
- Para uma boa vacina, muitas vezes sãonecessários adjuvantes (ex. adj. Freund).
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Resposta IMUNE
Resposta imune ativa:
- Naturalmente adquirida (infecção)- Artificialmente adquirida (vacina)
Resposta imune passiva
Naturalmente adquirida:- placenta - colostro
Artificialmente adquirida- soros (preparados contendo anticorpos policlonais)- anticorpos monoclonais
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Imunidade humoral adquirida
B
Vírus neutralizado
Célula infectadacom vírus
Anticorpo reconhecidopor LT com receptor Fc
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Imunidade celular
CD8
CD4
perforinas
Gatilho daApoptose
citocinas
Vírus eliminado
necrose
apoptose
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PROPRIEDADES DA VACINA IDEAL:
1- IMUNOGÊNICA
2- INÓCUA
3- ESTÁVEL
4- ECONÔMICA
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Tipos de Vacinas:Inativadas:
Vacinas “mortas” ou inativadas (microrganismos inativ ados).
Vacinas c/ microrganismos Vacinas de subunidades
inteiros (convencionais ou
recombinantes)
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INATIVANTES
Proteotrópicos: ex: formalina
Nucleotrópicos: ex: beta-propiolactona, AEI , BEI
Universais: ex: raios X, gama, UV.
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Tipos de Vacinas:
Vivas:
Atenuadas: - microrganismos atenuados por passagens em cultivo ou animais de laboratório. -- capacidade de causar doença eliminada ou reduzida
-capazes de multiplicarem-se no organismo
- não necessitam grandes quantidades de antígeno
Vacinas produzidas por Engenharia Genética :
1- Vacinas geneticamente modificadas:
- Genes excluidos (ou incluidos) com vistas à atenuaç ão ou aumento da resposta imune
- podem ser atenuadas ou inativadas. ex: vacina diferencial gE-negativa
2- Vacinas com Vetores vacinais:
- microrganismos manipulados para produzir antígenos que desencadeiam a produção de anticorpos protetores.
3- Vacinas de DNA: DNA de interesse administrado ao hospedeiro. (ainda experimental)
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Vacinas produzidas por Engenharia Genética :
4- Vacinas em plantas/alimentos: plantas com genes de interesse introduzidos no genoma
capazes de sintetizar a proteína e produzir anticorpos em animais que ingerem a planta.
5- Vacinas sintéticas: antígenos sintetizados artifi cialmente. Geralmente baixo poder imunogenico
em função da conformação do antígeno
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Uma amostra vacinal recombinante Uma amostra vacinal recombinante
brasileira: brasileira:
Vacina diferencial gEVacina diferencial gE--
A. C. Franco et al.
Infectadosvacinados
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gI gE US9
UL US
PstI PstI
P1 P3P2 P4
Co-transfecção com o DNA viralem células Ebtr
Detecção do vírus recombinante por imunoperoxidase sobre células infectadas
pCR2.1
a)
b)
c)
d)
EstratEstratéégiagia de de deledeleççãoãoda gE da gE
1100 1100 bpbp 750 750 bpbp
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ELISA DIFERENCIAL BHV-1
gE - (Vacinado)
gE + (Infectado)
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Em andamento: Em andamento:
VVíírus vacinal gErus vacinal gE-- contendo o contendo o
gene imunodominantegene imunodominante
do vdo víírus rrus ráábico (gene bico (gene ““ GG”” ) )
Infectadosvacinados
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Vacinas inativadas x atenuadas:
Inativadas:
- não se multiplicam no organismo- maior massa antigênica- mais caras - adjuvantes- imunizações freqüentes
Atenuadas / vírus vivo modificado
- vírus se multiplica no organismo- melhor imunidade- menor massa antigênica- mais baratas
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Vacinas Atenuadas x inativadas
Vacina Vantagens Desvantagens
Atenuada(viva/modificada)
Inativadamorta,subunidade
Mimetiza infecçãonatural Imunidade duradouraMelhor imun. celularAltas taxas de soro-
conversãoTítulos mais altos
LábilPode causar doençaou efeitos adversos
Estável, seguraImunidade curtaPode requerer reforçosfreqüentesMassa antigênica grande
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Nível deanticorpos
1a
2a 3a 4a
Efeito da vacinação e doses de reforço nos níveis de anticorpos
Efeito da vacinaEfeito da vacinaçção e doses de reforão e doses de reforçço o nos nnos nííveis de anticorposveis de anticorpos
tempo
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POLIOMIELITE Três tipos de vírus: 1, 2, 3Paralisia progressiva ascendenteMuitas degenerações neurológicas permanentesMembro mais movimentado mais afetadoMorte por paralisia respiratória
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Vacina inativada intramuscular ( vacina tipo Salk)
- vírus inativado com formalina (3 sorotipos). - induz anticorpos séricos, não induz imunidade local e assim não- previne infecção local no intestino. - previne a poliomielite paralisante pois a viremia não ocorre.- casos de síndrome de Guillain-Barré
Vacina Oral ( vacina Sabin)
- amostras de vírus dos 3 sorotipos, atenuadas. - induz imunidade local no intestino com produção de IgA,
assim como boa imunidade sistêmica. - raramente pode causar poliomielite paralítica
(~ 1 caso em 3 milhões de doses).
Vacinas contra a poliomielite
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Albumina
CascCascaa
Gema
Inoculação na membrana corioalantóica
Membrana da cascaSaco aéreo
Inoculação amniótica
Inoculação na gema
Inoculação alantóica
Membrana corioalantóicaCavidade alantóica
Cavidade amniótica
Produção de vacina para Influenza:
Inoculação em ovos embrionados
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Influenza - HA
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Toxóides:
- São toxinas cuja toxicidade é eliminada
- Retém a capacidade antigênica
Ex: toxóide tetânico
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Adjuvantes
São substâncias adicionadas à vacina com o objetivo de aumentar a resposta imune.
Ex:
Hidróxido de alumínio (alúmem)SaponinasAdjuvante de Freund (completo / incompleto)Adjuvantes oleosos sintéticos ( Marcol
Adjuvantes do futuro:Seqüências de nucleotídeosInterleucinas, Interferon gamaGenes de estimuladores de IL e outras citocinasLipossomos
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D.O. % - Ig G 1
0
50
100
150
200
250
300
350
400
0 15 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180
DIAS
D.O
. %
CONTROLE
BHV-1
EXT. AQ. CASCAS
EXT. AQ. FOLHAS
EXT. AQ. RAMOS
QB-90
ALUMÍNIO
QUIL-A
ÓLEO
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O que é um “soro”?
Soro sangüineo contendo uma grande variedade de anticorpos policlonais, usualmente obtido de animais hiperimunizados com o(s) antígeno (s)de interesse.
- homólogo - heterólogo.
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Soro Heterólogo:
- Produzido em indivíduos de espécies diferentes da espécie -alvo
Ex.: cavalos contra o tétano: soro anti-tetânico
- Não transmite infecções aos humanos
- Pode causar reações de hipersensibilidade. Podem ser submetidos à
digestão péptica para separar a região Fc da região Fab do anticorpo.
- Mais baratos.
- Pode levar a um excesso de formação de imunocomplexos
depósitos nas paredes internas dos vasos => reações inflamatórias sistêmicas.
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Tipos de Soros Hiperimunes:
Soro Homólogo:
Produzido na mesma espécie-alvo.
- Risco de transmissão de doenças (AIDS, Hepatites)
- Menor chance de reações de hipersensibilidade.
- Mais caros.
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Anticorpos monoclonais:
- Anticorpos derivados de um único linfócito produzidos em
camundongos.
- Produzidos usualmente em camundongos em linhagens singenéicas
ex. BALB-C
- podem ser “humanizados” pela introdução de células humanas em
camundongos irradiados
- Já utilizados para hepatite B e Vírus Resp. Sincicial Humano (HRSV)
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Ana Cláudia Franco
Eber A S Oliveira
Fernando Spilki
Helena B. R. Batista
Paulo A Esteves
Alessandra D’Ávila
Rejane Schaefer
Tamahine Schmidt
Silvia Hübner
Eduardo Caldas
Marcelo Maronna Dias
Equipe de
virologia
EVI
LABVIR
DM/ICBS
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Detecção do vírus recombinante emcélulas infectadas por imunoperoxidase
gI gE US9
UL US
PstI PstI
P1 P3P2 P4
Co-transfecção com DNA do vírus originalem células de bovino
Construção do vírus vacinal recombinante
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Efeito citopático
HerpesvHerpesvíírus (colorarus (coloraçção por imunoperoxidase)ão por imunoperoxidase)
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TTíípica resposta sorolpica resposta sorolóógicagica
0 30 60 90 Dias
AnticorposAnticorpos IgG
Nível deAnticorpos
IgM IgGDoença
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Interferência por anticorposmaternos
2 4 6 8 10 12
**
**
*
*
antic
orpo
s pa
ssiv
os
semanas após o nascimento
Nível mínimo para proteção
interfere comvacinação
“janela” desuscetibilidade
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EFEITO CITOPÁTICO