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7/25/2019 38102277 Mamual y Timciom

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Tincin de Romanowsky

Imagen de un linfocito marcado en prpura con la tincin de Romanowsky.

La tincin de Romanowsky es una mezcla que contiene azul de metileno y eosina y que seutiliza para preparar frotis para anlisis sanguneos como base de diersos colorantes! comolos de "rig#t! $iemsa o Leis#man.

La tincin de la muestra permite distinguir la forma! tama%o y contorno de los #emates!leucocitos y plaquetas y el ncleo! citoplasma y granulaciones de las distintas c&lulas yaque adquieren diferentes colores' azul! prpura! rosa o salmn.

(sta separacin por colores es el llamado efecto Romanowsky! que ti%e de prpura a los

ncleos y grnulos neutroflicos y de color rosa a los eritrocitos. Los cidos nucleicos! lasprotenas y el citoplasma se ti%en de azul! delatando a los posibles parsitos.)incin deRomanowsky

*. )I+,I-+ $I(/0.

Las tinciones #ematolgicas tipo Romanowsky utilizan azul de metileno y sus productos deo1idacin 2azur 0! azur 3 y azur ,4 como colorantes bsicos! combinndolos con la eosinacomo colorante cido.

5e este modo! obtenemos una tincin diferencial! es decir! una tincin que es capaz dediscriminar entre las distintas estructuras celulares segn se ti%an &stas con el colorantecido! con el bsico o con la mezcla de ambos.

/egn la proporcin de azul de metileno y de eosina que compongan el colorante tendremosdistintos m&to dos de tincin. (ntre ellos! los ms conocidos son el m&todo de $iemsa! elde "rig#t! el de Leis#man y el pan ptico de 6appen#eim.

etdica

(s un e1tracto de las t&cnicas de tincin #ematolgicas de la casa 6anreac.


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7undamento

8tilizamos como colorante la mezcla de azul de metileno y eosina propuesta por $iemsa.

aterial necesario

icroscopio ptico.

6ortas bien limpios.

,ristalizador.

6uentes de tincin.

6ipetas 6asteur con c#upete.

7rascos laadores.

)ubos de ensayo.

Reactios

,olorante en solucin segn $iemsa de 6anreac.

/olucin tampn p9 :!; de 6anreac.

etanol.

0ceite de inmersin.


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uestra

/angre capilar fresca o enosa anticoagulada. (l anticoagulante de eleccin es la #eparina oel (5)0! ya que el citrato sdico y el o1alato potsico pueden dar preparacionesdefectuosas.

)&cnica

6reparamos un frotis sanguneo segn la t&cnica descrita con anterioridad.

,olocamos el frotis sobre el puente de tincin! en el cristalizador y en posicin #orizontal.

,ubrimos el frotis con metanol durante < minutos. (scurrimos y lo de=amos secar al aire.,on esto procedemos a fi=ar el frotis.

5iluimos en un tubo de ensayo >!; ml de azur?eosina?azul de metileno segn $iemsa con ;ml de solucin tampn p9 :!;. (s importante realizar esta dilucin en el momento de latincin! ya que el colorante precipita y no es lido para otro da.

ezclamos suaemente en el tubo y con una pipeta 6asteur cubrimos el frotis con ladilucin de colorante! de=ndolo actuar durante ;* minutos.

(scurrimos y laamos con agua del grifo. 6osteriormente laamos con tampn p9 :!; #astaeliminar los restos del colorante. 5e=amos escurrir y secamos en posicin ertical.

Lectura de resultados

8na ez seca la tincin! ec#amos una gota de aceite de inmersin y e1aminamos almicroscopio ptico con el ob=etio de @>> 1.

Los eritrocitos se ti%en de color rosa asalmonado y las plaquetas de color ioleta.


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Los neutrfilos presentan el ncleo de color azul ioleta! el citoplasma rosa y la granulacinde un color ioleta ro=izo.

MANUAL DE HEMATOLOGIA


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INDICE

Objetio!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!"

#iomet$%a &em'tica!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!(

)*ncin ca+i,a$!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!-

)*ncin enosa!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!.Anticoa/*,antes!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!0

1Tab,a!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!2

Dete$minacin de &emo/,obina 3Hb4!!!!!!!!!!56

Dete$minacin de &ematoc$ito!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!57

C*enta e$it$ocita$ia!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!5"

8ndices e$it$ocita$ios!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!5.C*enta ,e*cocita$ia!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!59

C*enta di:e$encia, ,e*cocita$ia!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!52

Tincin de ;$i/&t!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!75

C*enta +,a


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MANUAL DE HEMATOLOGA

Objetivo:Re+asa$ y conoce$ mejo$ ,as t=cnicas m's im+o$tantes de,,abo$ato$io de &emato,o/%a> as% como s*s bene?cios y ,a im+o$tancia de

=stas a ,a &o$a de detecta$ en:e$medades


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A #IOMETR8A HEMATICA

Inc,*ye@

Hemograma1 c*enta +,a $es+*esta a, t$atamiento y $ec*+e$acin!

Consta de *na se$ie de +$*ebas a$iedad>

+o$centaje> concent$acin y ca,idad de ,as c=,*,as san/*%neas!

)$e+a$acin de, +aciente@

5!1 Eita$ ,a tensin todo ,o +osib,e debido a


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)UNCIN CA)ILAR

*ndamento te$ico@)a$a toma$ *na m*est$a en :o$ma adec*ada se necesita ,a t=cnicaco$$ecta y e, momento +$eciso en caso necesa$io!

C*ando se necesita *n :$otis de san/$e +e$i:=$ica> se +$e?e$e ,a san/$eca+i,a$!

Metodo,o/%a@

5!1 Tome ,a m*est$a de ,as yemas de ,os dedos o ,b*,o de ,a o$eja3ad*,tos4 de, dedo +*,/a$ de, +ie o de, tobi,,o 3en ,actantes4!

7!1 Desin:ecte e, sitio de ,a +*ncin> s=


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antecedentes de, +aciente si &a sido sometido a *n t$atamiento conanticoa/*,antes 3as+i$ina4!

)UNCION ENOJA

*ndamento te$ico@

La +*ncin enosa +e$mite et$ae$ *na mayo$ cantidad de san/$e +a$a,as +$*ebas necesa$ias! Las enas de e,eccin s*e,en se$ ,as de ,a ca$aante$io$ de, anteb$aFo +o$


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Im+o$tante@

)a$a ,a mayo$%a de ,as +$*ebas &emato,/icos se *ti,iFa comoanticoa/*,ante e, 'cido eti,endiaminotet$ac=tico 3EDTA4 o ed=tico! Esnecesa$io co,oca$ ,a cantidad adec*ada de, anticoa/*,ante> ya o $et$aso en ,acicat$iFacin!

E, to$ni


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ANTICOAGULANTEJ

*ndamento te$ico@

Los anticoa/*,antes son medios +e$o,os dos se +*eden *sas endoenosas! La &e+a$ina se *ti,iFa c*ando es+$eciso! La accin de anticoa/*,antes es $'+ida y de +oco tiem+o! En e,manejo de ,a accin anticoa/*,ante +$o,on/ada se *ti,iFa acec*mo$o,!

Je &an *ti,iFado die$sas medicaciones como anticoa/*,antes+,a ,a as+i$ina y medicamentos asodi,atado$es> como e,di+$idamo,> ambos tienen *n mecanismo di:e$ente de accin y +*edenasocia$se +a$a obtene$ *na sine$/ia de accin!


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Tab,a de anticoa/*,antes@

TI)OJ o$ma de *sa$se entajas Desentajas

)$eci+itantes@Oa,atos deamonio y +otasio!

" +a$tes deamonio y 7+a$tes de+otasio! Usa$ 7

m/Km, de san/$e!

#a$ato> :'ci, de+$e+a$a$! Noa:ecta e,o,*men $e/*,a$

medio!

De/ene$acin de,os /$an*,ocitos!Uti,idad ,imitada a,os +$ime$os

min*tos enetensiones!

IoniFantes@ Jec*est$eno

EDTA a, 56

Cit$ato desodio a, "!0

517 m/Km, desan/$e!

2 +a$tes desan/$e +o$ 5 deanticoa/*,ante

No a,te$a ,amo$:o,o/%a aBndes+*=s de "&$s!

Eitaa/,*tinaciones

de +,a+$ese$a m'stiem+o ,asan/$e!

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111111111111111111111111111

Antit$ombinicos@He+a$inaCa$bo&id$ato 'cido

6!5 6!7 m/Km,de san/$e

Jeco eita ,as ,a&em,isis! ti,+a$a est*dios deanemias&emo,%ticas!

Ca$o! $otisteidos con ;$i/&ttoman co,o$acinaF*, di:*sa!

Mec'nico@des?b$iniFacin

Con +e$,as deid$io y a/itacinmec'nica!

ti, +a$a c=,*,asL!E!

111111111111111111111111111


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DETERMINACIN DE HEMOGLO#INA 3H#4

*ndamento@

Es *na +$ote%na conj*/ada de co,o$ $ojo inte/$antes de ,os e$it$ocitosent$e *n "51"(!

Eisten a$ios m=todos +a$a dete$minacin como &ematina 'cida>&ematina a,ca,ina> oi&emo/,obina> ca$boi&emo/,obina ycianometa&emo/,obina =ste B,timo es e, de e,eccin +o$ +o$


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Reactio DE D$abkin@1:e$$ocian*$o de +otasio1cian*$o de +otasio1bica$bonato de +otasio

Jo,*cin est'nda$ de cianometa&emo/,obina!

)$ocedimiento@

5!1 Co,oca$ en *n t*bo de ensayo - m, de $eactio de D$abkin7!1 Homo/eneiFa$ bien ,a san/$e"!1 L,ena$ en san/$e &asta ,a ma$ca de ,a +i+eta de Ja&,i(!1MeFc,a$ ,a san/$e con e, diso,ente-!1 Deja$ Re+osa$ 56 min! )a$a ,a :o$macin de cianometa&emo/,obina

.!1 ,ee$ a -(6 nanmet$os en e, es+ect$o:otmet$o cont$a *n b,anco de$eactio!9!1 com+a$a$ con ,a c*$a ca,ib$ada de est'nda$es!

a,o$es de $e:e$encia@

M*je$es@ 57 15( /$Kd,M*je$es emba$aFadas@ 5515( /$Kd,Homb$es@ 5"152/$Kd,Reci=n nacidos@ 5"!52/$Kd,


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DETERMINACIN DEL HEMATOCRITO

Es senci,,o y eacto y es im+o$tante +a$a dete$mina$ ,os %ndicese$it$ocita$ios

*ndamento@

E, &ematoc$ito mide e, +o$centaje de, o,*men de san/$e tota, +e$ooc*+ado so,amente +o$ ,os e$it$ocitos

Mate$ia, 3mac$o&ematoc$ito4

T*bo de ;int$obe


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H (9 P1 7!-M (7P1 7!-

CUENTA ERITROCITARIA

Int$od*ccin@

C*ando ,a e$it$o+oy=sis tiene ,*/a$ no$ma,mente> s* $es*,tado ?na, es ,a

+$od*ccin de *na c=,*,a1e$it$ocito +e$:ectamente di:e$enciada y a+ta+a$a s* :*ncin +$inci+a, contando e, nBme$o dee,ementos


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La +a$a

:ao$ece$ ,a meFc,a de ,a san/$e con e, ,% &asta ,a ma$ca6!-!7!1 se ,im+ia c*idadosamente con /asa ,a +a$te ete$na de ,a +i+eta!"!1 com+,eta$ con ,%


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C',c*,os@Ji se conside$a 66606

N nBme$o de e$it$ocitos contados766 :acto$ de di,*cin56 co$$eccin a,t*$a de ,a c'ma$a


Homb$es (!- 56. 1 -!- 56. mm"

M*je$es (!" 56.

1 -!6 56.

mm"


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8NDICEJ ERITROCITARIOJ

Ji$en +a$a c,asi?ca$ a ,os e$it$ocitos de ac*e$do a s* tamao y

contenido de &emo/,obinaJe *ti,iFa e, &ematoc$ito y ,a c*enta de e$it$ocitos +a$a ca,c*,a$ ,os%ndices@

1CM 3o,*men Co$+*sc*,a$ Medio4

1CMHC 3Concent$acin Media de ,a Hemo/,obina Co$+*sc*,a$4

1HCM 3Hemo/,obina Co$+*sc*,a$ Media4

Es +osib,e medi$ de mane$a di$ecta ,os %ndices e$it$ocita$ios encontado$es ce,*,a$es a*tom'ticos! )o$ ejem+,o@ e, co*,te$ a, +asa$ ,ose$it$ocitos a t$a=s de *n o$i?cio en e, c*a, Q*ye *na co$$iente e,=ct$ica!


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CUENTA LEUCOCITARIA

Int$od*ccin@La ,e*co+oy=sis es *n +$oceso ya en cambio se estima de ,as c*a,es so,o +asan 56 &$s!en ,a san/$e ci$c*,ante!

*ndamento@

La san/$e se di,*ye 5@7 con *na so,*cin &i+otnica de 'cido ac=tico


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Reactios@

EDTA 3sa, disdica4 a, 56

Li se c*entan ,os ,e*cocitos+$esentes en ,os c*at$o c*ad$os /$andes de ,os et$emos0!1 M*,ti+,ica$ +o$ -6 e, +$omedio de ,os ,e*cocitos con ,a si/*iente:$m*,a

C=,*,as contadas 76 3di,*cin4 56 3co$$eccin de a,t*$a4 K( 3nBm! De c*ad$o de 5mm contados4

Este :acto$ a$%a si se cambia ,a di,*cin y o e, nBme$o de c*ad$os

contados

En caso de eisti$ no$mob,astos 3e$it$ocitos n*c,eados4 debe$' &ace$ ,ac*enta di:e$encia, ,e*cocita$ia



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Le*cocitos@

1Ad*,tos@ -666 56 666 K mm"

1 Reci=n nacidos@ 56 666 7- 666 K mm"

1Nios@ 0666 5- 666

CUENTA DIERENCIAL LEUCOCITARIA

*ndamento@

Je $ea,iFa$' este +$oceso en caso de eisti$ no$mob,astos 3e$it$ocitosn*c,eados4 en ,a c*enta ,e*cocita$ia

)o$ este +$oceso se +od$' deci$ c*antos no$mob,astos &ay +o$ cada 566,e*cocitos! Ejem+,o@

Ji &ay 70 no$mob,astos +o$ cada 566 ,e*cocitos se a+,ica ,a si/*iente

$e,acin@570 56657666 11

2"9- ,e*cocitos

La c*enta ,e*cocita$ia di:e$encia, es e, conteo de, nBme$o de ,osdistintos ti+os de ,e*cocitos! Identi?ca a ,os indiid*os con *na mayo$s*sce+tibi,idad a ,a in:eccin

T=cnica@

La c*enta ,e*cocita$ia tota, ci$c*,ante se diide en - ti+os de ,e*cocitos@

1ne*t$?,os 3en banda y se/mentados4! J* cito+,asma es inco,o$o y tienemB,ti+,es /$anos co,o$ /$is o +*ede se$ m*,ti,ob*,ado>


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1eosin?,os@ es $edondo * oa,ado> e, nBc,eo +osee no m's de t$es,b*,os y en e, cito+,asma se obse$a no mas de 76 /$anos co,o$na$anja!

1bas?,os@ se ca$acte$iFan +o$ s*s /$andes /$an*,aciones aF*, osc*$o!Estos /$'n*,os son &id$oso,*b,es!

1,in:ocitos@ J* cito+,asma es aF*, +',ido y ,a c$omatina n*c,ea$ co,o$+B$+*$a aF*,ado osc*$o casi no +osee cito+,asma!

1monocitos@ s* nBc,eo s*e,e se$ a$$ionado! Contiene *na $ed dec$omatina! E, cito+,asma se tie de *n co,o$ aF*, /$is'ceo y contiene?nas /$an*,aciones co,o$ $osa!

a,o$es de $e:e$encia@Ne*t$?,os@1en banda 61551se/mentados 7-1.7Eosin?,os@ 617#as?,os@ 615Lin:ocitos@ 7-1(6Monocitos@ "157

TINCIN DE ;RIGHT

*ndamento@

La tincin de ;$i/&t es *na tincin de ti+o Romanowsky!

Es et$emadamente im+o$tante en e, ,abo$ato$io de &emato,o/%a esteti+o de tincin> ya as% como eosina S o eosina #


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La accin combinada de estos co,o$antes +$od*ce e, e:ecto Romanowskyy da *na co,o$acin +B$+*$a a ,os nBc,eos de ,os ,e*cocitos y a ,os/$'n*,os ne*t$o:%,icos y de co,o$ $osado a ,os e$it$ocitos! Loscom+onentes de este e:ecto son e, aF*, # y ,a eosina S

Las +$o+iedades de tincin de Romanowsky de+enden de, en,ace de ,osco,o$antes a ,as est$*ct*$as co,o$ante 'cido> se ?ja a ,os a/$*+amientos b'sicos de ,asmo,=c*,as de &emo/,obina y a ,as +$ote%nas b'sicas!

Mate$ia,@

$otis san/*%neo A/*a desti,ada Eosina # Eosina S AF*, de meti,eno A,co&o, met%,ico

)$ocedimiento@

5!1 Hace$ *n :$otis san/*%neo> ni demasiado de,/ado> ni


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.!1 Laa$ con b*e$ 9!7 y deja$ seca$

9!1 Obse$a$ a, mic$osco+io

CUENTA )LAUETARIA

*ndamento@

Las +,a seenc*ent$an *nas 7-6 mi, mm" > s* ida media es de 2!- d%as> s*s:*nciones +$inci+a,es son@ coa/*,acin y mantene$ ,a inte/$idad de ,as

+a$edes de ,os asos!Miden de "1( mic$as de di'met$o> son $edondeadas> se +*eden obse$a$con *na tincin aF*, de c$isi, b$i,,ante> no tienen nBc,eo e, nBme$o de+,a


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Co,o$ante de aF*, de c$esi, b$i,,ante EDTA a, 56

)$ocedimiento@

5!1 Ase+sia y obtencin de ,a m*est$aAd*,tos o nios@La san/$e se et$ae de *na ena 3+*ncin enosa4> *s*a,mente de ,a+a$te inte$io$ de, codo o de, do$so de ,a mano! E, sitio de +*ncin se,im+ia con *n antis=+tico y ,*e/o se co,oca *n to$ni en *na caja +et$i con *n +a+e, ?,t$o &Bmedo

0!1 Deja$ $e+osa$ ,a c'ma$a

2!1 obse$a$ +o$ ,e objetio 56

56!1 ,as +,a


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5-6 mi,1 (-6 mi, Kmm"

C*idados d*$ante e, eamen@C*ando se inse$ta ,a a/*ja +a$a et$ae$ ,a san/$e> a,/*nas +e$sonassienten *n do,o$ mode$ado> mient$as +*ede &abe$ *na sensacin +*,s'ti,!

E, conteo +,a se +*ede medi$ +a$a ea,*a$ ,a ca*sa de *nsan/$ado ecesio!

Ent$e ,os medicamentos ,o c*a, es ,a ?na,idad de ,a ca+acitacin de


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,abo$ato$ista c,%nico1&emato,o/%a> :o$ma$ %nte/$amente a,*mnos ca+acesde $ea,iFa$ este ti+o de an',isis!

#I#LIOGRA8A

Hemato,o/%a> Ja,at> ;i,,iams1He*te$1E$ste1H*nd,es> Tomo I y II &tt+@KKwww!*mm!ed*Kes+VencyKa$tic,eK66".(9!&tm Ce,,*,es d* san/ no$ma, et +at&o,o/i M! #essis!
http://www.umm.edu/esp_ency/article/003647.htmhttp://www.umm.edu/esp_ency/article/003647.htm


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