SINCE 1994

3M™ Molecular Detection System (분자생물학적 방법을 이용한 신속 검출법)

-사료 공정 중 살모넬라 검사를 위한 신속검사법-

서울시 서초구 서초동 1355-8 중앙빌딩 1602호 TEL.02-3473-5421 FAX.02-3474-7601

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Isothermal DNA Amplification (등온의 DNA 증폭과정)

Bioluminescence Detection (ATP 검출 원리)

특정 병원성 미생물의 DNA 증폭 과정에 의한 신속, 실시간 검출가능 장비

3MTM MDS(Molecular Detection System)란?

=

신속,실시간 확인

3MTM MDS(Molecular Detection System)원리

LAMP 시험법 장점

1) 높은 DNA 증폭효율 →(1시간 증폭 시 기존PCR의 10³배 더 많음) 2) 검출한계(기존PCR의 10~100배 더 낮음) 3) 경제적인 장비사용

●

Salmonella

Inclusivity 100%

Exclusivity 100%

Sensitivity & Specificity

Sensitivity & Specificity

●저해물질에 대한 영향을 적게 받는다 - 등온 증폭 기술방법에 의해 민감도 및 저해제에 영향을 적게받음

* 사료검사 살모넬라 미생물 검출한계 -사료관리법에서는 살모넬라 D그룹을 관리하고 있고 (사료공정서 중 사료 중 특정성분의 함량제한기준,사료검

사요령 제10조 2항 6호 참조)D그룹에는S.sendai,S.typhi,S.enteritis,S.gallinarum , S.pullorum 등이 있다

*3M MDS 살모넬라 검출한계

3MTM MDS 살모넬라 검출한계

전통배양방법(분말배지)

4일소요 신속검출방법(3M MDS) 2일소요

3MTM MDS 실험방법

3MTM MDS vs PCR

MDS

vs

PCR

원리와특징 등온증폭과정(LAMP법) Bst DNA Polymerase Cyclling법 Taq DNA Polymerase

준비과정

1. 전배양 샘플 2. 3M Molecuar Detection Assay

3. 3M MDS

4. 노트북+Software

Simple

1.전배양 샘플 2.시약 3.원심분리기 4.PCR장비 5.컴퓨터

Complex

시간 총 20~26시간 소요 시료 전처리 시간 절약 및 노동력감소

총 28~32시간 소요 원심분리기 를 이용한 시료 전처리 과정이 반복적이며 복잡하고, Lysis후 변성,접합,신장과정을 모두 다른 온도에서 시행해야 하므로 소요시간이 길게 걸립니다.

감지방법 생체 발광(Bioluminescence detection) 형광물질로 인한 간섭이 없음 Fluorescence(형광) 저해물질로 인한 간섭을 받음

정확도 알고리즘에 의한 양성 음성을 구별하므로 최소의 역과의 관계가 없이 정확한 결론 도출가능

민감도가 높다 저해물질의 간섭영향이 적다

양성 음성을 판단하는 오차가 생길 수 있다

사료관리법 현황

사료 등의 기준 및 규격 고시현황

사료표준분석법에 등재된 살모넬라 분석법

-증균배양에 의한 검사법

-키트(kit)에 의한 간이 검사법

-효소면역기법(ELA Kit)에 의한 검출방법

최근 몇 년 사이 중합효소연쇄반응을 필두로 하는 분자생물학적 방법이 전통적인 분석법을 대체할 수 있는 분석법으로 사용되고 있음

3MTM MDS 국내사용기준

▶공전기재사항 및 식약처 질의 답변

3M MDS 사용관련 식약처 질의 문답

3MTM MDS 국제공인인증현황

3MTM MDS AOAC인증현황

3MTM MDS 국제공인현황(ISO)

3MTM MDS 사용현황

1. 국내 사료업체 사용현황

2. 해외 사료업체 사용현황

3MTM Molecular Detection System

3MTM Molecular Detection Assays

Summury

1. 정확성

-LAMP (Loop-mediated isothermal amplication) 기술을 적용, 높은 민감도와 검출한계가 높음.(PCR대비 10~100배 /Real –time PCR과 동일)

2. 편의성,신속성

-Bst Polymerase 적용 Matrix 간섭을 덜받으며, 반복적인 실험과정을 줄여 빠른 의사결정 -DNA Replication이 10~100배 빠른 신속성

3. 경제성

-일반 분말배지법 대비 유사 소모비용(Negative시) -API kit 사용시 비용 절감효과

4. 고시적용 및 인증관련

-AOAC 및 ISO인증확보 -유사기업 사용 현황 -국내고시법 적용가능