488.влияние антропогенного загрязнения на микрофлору...
TRANSCRIPT
На правах рукописи
ДОВЛЕТЯРОВА Эльвира Анварбековна
ВЛИЯНИЕ АНТРОПОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА МИКРОФЛОРУ ДЕРНОВО-ПОДЗОЛИСТЫХ ПОЧВ
ЛЕСНЫХ ЭКОСИСТЕМ (на примере Лесной опытной дачи Московской
сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева)
Специальность 03.00.16 - Экология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Москва 2005
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Работа выполнена на кафедре экологии Московской сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева.
Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Мосина Людмила Владимировна
Официальные оппоненты: доктор биологических наук Миненко Анатолий Клементьевич
доктор биологических наук, профессор Карпачевский Лев Оскарович
Ведущая организация: Российский университет дружбы народов
Защита диссертации состоится 2005 г. в часов на заседании диссертационного совета Д 220.043.03 при Московской сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева по адресу: 127550, г. Москва, ул. Тимирязевская, д. 49.
С диссертацией можно ознакомиться в Центральной Научной библиотеке Московской сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева по адресу: 127550, Москва, Тимирязевская, 49.
Автореферат разослан « » 2005 г.
Ученый секретарь / / л у 4 / / ^ диссертационного совета р^*^ B.A. Калинин
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследований. В настоящее время проблема антропогенного загрязнения окружающей природной среды стоит очень остро. Интенсивное промышленное и сельскохозяйственное использование природных ресурсов вызвало существенные изменения биохимических циклов и содержания большинства химических элементов в почве, в том числе тяжелых металлов (Карпухин А.И., Яшин И.М., Черников В.А., 1993; Черных Н.А., 2001).
Высокие концентрации тяжелых металлов вызывают существенные изменения функционирования экосистем и их компонентов (Соколов О.А., Черников В.А., 1999). Актуальность проблемы загрязнения окружающей среды значительно возрастает в крупных городах, где оно приводит к различным нарушениям в составе городских экосистем, ухудшая условия проживания городского населения и как следствие, вызывая заболевания людей.
Фитоценозы в городах выполняют огромную санитарно-гигиеническую функцию, повышая устойчивость экосистем в условиях высокого антропогенного загрязнения. Между тем состояние зеленых насаждений в городах вызывает серьезное опасение и тревогу («Состояние зеленых насаждений...», 2001).
В этой связи представляет, несомненно, теоретическую и практическую значимость изучение факторов, влияющих на функционирование лесных экосистем в условиях повышенного антропогенного воздействия.
Микробные сообщества, являясь редуцентами экосистем, выполняют огромную роль в деструкции органического вещества почв, переводя его в доступные для продуцентов элементы питания, тем самым, замыкая круговорот веществ. Высокие концентрации тяжелых металлов и других токсикантов вызывают различные изменения микробиологических и биохимических показателей почв. Так, в результате антропогенного загрязнения наблюдается уменьшение общей численности, сужение видового разнообразия микроорганизмов, падение интенсивности основных микробиологических процессов и активности почвенных ферментов, появление фитотоксичных форм и т.д. (Колесников СИ. и соавт., 2000; Гузев B.C., Левин СВ., 2001).
Признавая особую значимость микроорганизмов в устойчивом функционировании городских экосистем, следует отметить слабую изученность данного вопроса для лесных ландшафтов в условиях повышенного антропогенного воздействия.
Целью работы явилось изучение влияния повышенного антропогенного загрязнения на функционирование микрофлоры дерново-подзолистой почвы лесных экосистем (на примере Лесной опытной дачи МСХА).
В задачи исследований входило: 1. Изучить динамику численности основных групп микробно
го населения под насаждениями дубравы и сосны с березой в условиях различного антропогенного загрязнения;
2. Установить видовой состав ch участках леса с различной антропогенно \
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
2
сивность минерализационных процессов по соотношению северных и южных видов бацилл;
3. Выявить изменения биохимической активности доминирующих видов бацилл под влиянием свинцового загрязнения почвы;
4. Изучить активность микробиологических процессов (на примере целлюлозоразрушающих бактерий) в почвах с различной антропогенной нагрузкой;
5. Определить основные изменения структуры микробного ценоза в дерново-подзолистых почвах под влиянием свинцового загрязнения;
6. Установить влияние свинцового загрязнения на фитоток-сичность микроскопических грибов;
7. Разработать критерии для микробиологической диагностики функционирования лесных экосистем в условиях повышенной антропогенной нагрузки. Научная новизна результатов исследований. В результате проведенных комплексных микробиологических исследо
ваний на территории Лесной опытной дачи Московской сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева (ПОД МСХА) впервые выявлены изменения структуры микробного ценоза в зависимости от степени антропогенного загрязнения, а также состава и возраста древостоя. Изучен видовой состав бацилл при группировке их на северные и южные, позволяющий определить степень минерализационных процессов в условиях различного антропогенного воздействия. Проведена сравнительная оценка биохимической активности наиболее распространенных в дерново-подзолистой почве популяций спорообразующих бактерий Bacillus idosus и Bacillus mycoides. Исследована сравнительная характеристика целлюлозоразрушающей способности почв на участках леса с различным составом, возрастом древостоя и разной антропогенной нагрузкой.
Практическая ценность работы. Проведенный в работе сравнительный анализ функционирования мик
робной компоненты почвы под лесными фитоценозами в условиях различного антропогенного воздействия является необходимым элементом комплексной процедуры разработки биоиндикационной системы тестовых микробиологических показателей для оценки состояния лесных экосистем, для проведения микробиологического мониторинга лесных и лесопарковых ландшафтов. А так же формирует необходимую фактологическую базу для разработки микробиологических показателей экологического нормирования антропогенной нагрузки (в системе почва-растение).
Предложенная система группировки бацилл на северные и южные виды позволяет использовать их для оценки интенсивности минерализационных процессов, как показателя состояния лесных экосистем в условиях различного антропогенного загрязнения.
Апробация работы.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3
Основные положения работы докладывались на студенческих научных конференциях (1998-2001гг.), конференции молодых ученых и специалистов Московской сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева в 2002г., декабрьской научной конференции МСХА в 2003-2004гг. Результаты диссертации докладывались на Всероссийской выставке «Научно-технического творчества молодежи» (Москва, ВВЦ, 2004г.) и были удостоены почетным знаком «Участник ВВЦ».
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ. Объем работы. Диссертация имеет объем 148 страниц, содержит 15
таблиц, 19 рисунков, включает введение, 4 главы, выводы и список литературы из 224 работ, в том числе 22 на иностранном языке.
ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объектом исследования служили натурные и модельные эксперимен
ты. В качестве натурного эксперимента проводилось изучение территории Лесной опытной дачи Московской сельскохозяйственной академии (ЛОД МСХА).
Лесная опытная дача Московской сельскохозяйственной академии занимает площадь 232,3 га в северо-западной части г. Москвы и представляет собой вытянутый прямоугольник длиной 2,8 км и шириной 1,6 км. В настоящее время количество пробных площадей составляет 156. Все они расположены в 14 кварталах Лесной опытной дачи (Наумов В.Д. и соавт., 2001).
По природным условиям Лесная опытная дача входит в южную подзону смешанных хвойно-широколиственных лесов таежно-лесной зоны. Ее территория расположена в самой южной части склона Клинско-Дмитровской гряды и по рельефу представляет собой моренную (холмистую) равнину.
Почвенный покров лесной опытной дачи представлен дерново-подзолистыми почвами, различающимися по проявлению дернового, подзолистого и глеевого процессов. Особенностью почв ЛОД является наличие в профиле мощного гумусового горизонта (до 51 см), который морфологически подразделяется на 2 или 3 подгоризонта.
Для изучения влияния антропогенной нагрузки на почвенные микроорганизмы нами были проведены микробиологические исследования на территории пробных площадей ЛОД, заложенных Мосиной Л.В. и Паракиным В.В. Так, нами были изучены пробные площади (№ 6,8,9) находящиеся на участках с естественной антропогенной нагрузкой в кварталах 3, 6 и пробные площади (№ 7,10,11) - с повышенной антропогенной нагрузкой в кварталах 1,2,5. В таблицах 1 и 2 приведены почвенно - экологическая и лесоводствен-но-таксационная характеристика пробных площадей, на которых произрастают дубовые насаждения различного возраста и насаждения сосны с березой.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
4
Таблица 1
Почвенно - экологическая характеристика под лесными древостоями в условиях различного антропогенного воздействия на ЛОД МСХА
(для верхнего 10-см гумусового слоя) (Мосина Л.В.,2003)
№ проб ной площади
6 11 8 7 9 10
*-"Орг* г*
3,8б±0,20 5,33±0,97 4,74±0,07 8,85±1,27 4,45±1,04 6,78±2,20
Азот по Кьельдалю
0,14±0,02 0,21±0,07 0,16±0,00 0,19±0,01 0,15±0,05 0,25*0,10
рН сол.
4,15±0,05 4,25±0,10 4,20±0,05 4,20±0,00 4,00±0,10 4,15±0,05
Р2О5 | к2о мг/ЮОгпочвы
по Кирсанову
1,20±0,00 1,65±0,35 2,45±0,05 1,20±0,00 1,94±0,08 2,00±0,00
По Масло-вой
14,5±0,50 12,5±1,80 13,1±0,40 8,4±1,00 13,4±2,00 16,5±2,60
А1, м-экв/100 г почвы
0,86±0,11 0,70±0,34 0,42±0,03 0,74±0,20 1,35±0,43 1,05*0,40
Таблица 2 Лесоводственно-таксационная характеристика пробных площадей на ЛОД
МСХА с различной антропогенной нагрузкой
№ пробных
площадей
Квартал, выдел,
расстояние до жилой
застройки, м
Главная порода
Класс возраста насажде
ний
Состав насаждений
Средние
Высота, м Диаметр, см Полнота
I группа. Участки с естественной антропогенной нагрузкой. Плотность почвы 0,6 - 0,8 T/CMJ
6
8
9
кв. 3, в. 23, 500 м
кв. 3, в. 13,500 м
кв. 6, в. 1, 500 м
Дуб
Дуб
Сосна с березой
XII
XII
XI
6 Д З Б 1С
8Д2Б СЛп
5 С 5 Б ЗД4КЛ
ЗЛп
18,0±0,21
23,1±0,34
24,5±0,16
32,0±0,17
35,0*0,24
32,3±0,19
0,5
0,8
0,6
II группа. Участки с повышенной антропогенной нагрузкой. Плотность почвы 1,4 - 1,8 г/см3
11
7
10
кв. 1, в. 6, 100-150 м кв. 2, в. 7, 100-150 м кв. 5, в. 1, 50-100 м
Дуб
Дуб
Сосна с березой
X
VIII
IX
9Д1Б ед.С
7 Д 2 Б 1СЛп 5 С 5 Б 7Д2
Кл.Лп
19,0±0,18
17,8±0,22
18,5±0,20
29,0*0,22
39,8±0,79
26,9±0,16
0,7
0,6
0,5
Несмотря на сравнительно небольшую территорию Лесной опытной дачи (232,3 га), в ней отчетливо проявляется общий тренд нарастания содержания тяжелых металлов в направлении от центра к периферии. Содержание тяжелых металлов (свинца, цинка, меди) на участках леса, прилегающих к
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
5 городским магистралям (удаленность 100 м), значительно выше по сравнению с лесными массивами в центре ЛОД (удаленность от автомагистралей 500 м) (Таблица 3)
Таблица 3 Содержание тяжелых металлов в верхнем 10-см слое почв ЛОД МСХА
в зависимости от удаленности от городских магистралей и состояния насаждений (мг/кг) (Мосина Л.В.,2003)
№ проб ной площади
6,11
8,7
9,10
Главная порода, класс
возраста
Дуб,х-XII
Дуб, vii-vm
Сосна с березой IX-X1
Содержание тяжелых металлов, мг/кг РЬ | Zn | Си
удаленность от автомагистралей, м 500 | 100 | 500 | 100 | 500 | 100
состояние насаждении +
62,20±4,12
8б,12±8,15
77,04± 7,85
-120,01±
10,40
114,0± 8,04
139,0± 10,41
+
73,06±5,51
86,4± 7,10
96,08±7,13
— 114,0± 9,82
100,0± 8,68
211,0± 16,44
+
10,0*0,90
10,02± 0,84
36,03± 2,92
— 77,09±
5,65
108,02± 9,14
92,00± 7,64
Примечание. + насаждения в условиях естественного для ЛОД антропогенного воздействия; - насаждения в условиях повышенного для ЛОД антропогенного воздействия.
Важно отметить, что участки леса, произрастающего на пограничных с городом территории (пробная площадь №7,10,11), отличаются повышенной суховершинностью, более подвержены различным заболеваниям, здесь страдают не только основные лесообразователи - насаждения I и II ярусов, но также подрост и подлесок. Чаще они полностью отсутствуют. У насаждений, расположенных в центре лесного массива, вдали от посещаемых населением мест (пробные площади №6,8,9), подрост и подлесок находятся в удовлетворительном состоянии. На этих пробных площадях также не отмечается явных признаков угнетения основных лесообразователей.
Почвенные образцы отбирались с пробных площадей с одинаковыми породным и возрастным составом древостоя, произрастающего на различном удалении от городской среды и разной рекреационной нагрузкой, что обеспечивало различный уровень загрязнения тяжелыми металлами и различную степень уплотнения почв.
Образцы для микробиологического анализа отбирали в динамике по сезонам года из верхнего 10-см слоя, где расположена основная масса всасывающих корней.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
6 Для этого на пробных площадях выделялись модельные деревья (10 де
ревьев), под которыми по периметру проекции крон отбирали почвенные образцы 7-10 - кратной повторности (Карпачевский Л.О., 1980).
Образцы тщательно перемешивались и составляли смешанный, в котором определяли микробиологические показатели.
Учитывая значимость гидротермического режима в развитии микроорганизмов, одновременно с определением микробной компоненты в каждом почвенном образце определяли температуру и влажность почвы (в трехкратной повторности)
Данные, полученные в условиях натурных экспериментов, проверялись в модельных опытах.
Микробиологические исследования проводили в свежих образцах почвы по общепринятой методике (Методы почвенной микробиологии и биохимии, 1991).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Динамика численности основных групп микробного населения под насаждениями дубравы и сосны с березой в условиях различного
антропогенного загрязнения Проведенные исследования показали, что динамика численности ам
монифицирующих микроорганизмов под изучаемыми насаждениями определяется следующими факторами: породным составом древостоя, возрастом насаждений, периодом вегетации и условиями произрастания (т.е. степенью антропогенного воздействия).
При этом наиболее мощным фактором выступают условия произрастания в отношении антропогенной нагрузки (рис. 1).
45
40 •-Дуб\Л1-УШ(*)
t -Дуб Х-ХИ (+)
. - Сосна с березой IX-XI (+)
*-Ду6\Л1-У111<-)
К-ДубХ.Х1(.)
•—Сосна с березой IX-XII (•)
сентябрь октябрь В верхнем 10-см ело* (млн/1 г почвы)
+ Естественная для ЛОД МСХА антропогенная нагрузка •Повышенная для ЛОЛ МСХА антропогенная нагрузка
Рис. 1. Динамика численности аммонифицирующих микроорганизмов в почвах под лесными насаждениями ЛОД МСХА в условиях различного антропогенного
воздействии
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
7
Во все сроки исследования активность аммонифицирующих процессов выше на участках леса с минимальной антропогенной нагрузкой. Так, весной (май) численность микроорганизмов на МПА увеличивается более, чем в 2 раза: с 9,2 ± 0,8 млн. клеток на участках 70-80- летней дубравы, произрастающей на пограничных с городом территории ЛОД до 23,5 млн. клеток под однопородными одновозрастными древостоями в центре лесного массива.
В летний период (июль) также отмечается почти двукратное снижение численности микроорганизмов на МПА (с 10,5 млн. до 3,9 млн.) под однопородными дубовыми древостоями.
Аналогичная зависимость проявляется в почвах и под другими изученными древостоями.
Снижение численности микроорганизмов в летний период связано с истощением доступных азотсодержащих органических веществ в почве, накоплением токсичных веществ, иссушением почвы и рядом других факторов, что согласуется с имеющимися литературными данными (Комаревцева Л.Г., 1972).
Антропогенный фактор также вносит существенные изменения в характер микробиологических процессов в почве, связанных с периодом вегетации.
В условиях минимального антропогенного воздействия под насаждениями, произрастающими в центре лесного массива, максимальная численность аммонифицирующих микроорганизмов установлена для осеннего периода, что связанно с поступлением в почву свежего органического вещества в период массового листопада.
Подобная динамика характерна для микробиологических процессов в почве, что согласуется с рядом исследований (Мишустин Е.Н., 1966; Кузьмина И.В., 1973; Мкртумян Н.Н., 1973; Мосина Л.В., 2003).
Иной характер носит динамика микроорганизмов, используюидих органические формы азота, под насаждениями в условиях повышенного антропогенного воздействия.
Осенью в период массового листопада отмечается значительно меньшая по сравнению с весенним максимумом численность данной группы микроорганизмов, что, вероятно, объясняется увеличением загрязнения почвы тяжелыми металлами с опадающей листвой. То есть для процесса аммонификации в данной почве более значим, не пищевой режим, а загрязнение данными токсикантами.
Так, в почвах 70-80-летней дубравы, произрастающей на пограничных с городом участках леса, осенний максимум в 1,5 раза ниже (6,8 млн. клеток в 1 г почвы) по сравнению с весенним (9,8 млн.).
Среди древесных пород во все сроки исследования более высокая численность аммонификаторов отмечается под дубовыми древостоями. Так, в весенний период численность аммонифицирующих микроорганизмов составляла 20,5-23,5 млн. в 1г почвы, а под двухъярусными сосново-березовыми - лишь15,8 млн. клеток в 1 г почвы.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
s Минимальное содержание микроорганизмов на МПА под сосново-
березовыми древостоями объясняется, на наш взгляд, двумя причинами: с одной стороны, береза, обладая большей фолиарной способностью к поглощению ТМ, привносит более значительное загрязнение, что негативно сказывается на функционировании данного сообщества.
Другая причина ослабления процесса аммонификации органического вещества в почве объясняется наличием в составе данного фитоценоза сосны - древесной породы, исключительно неустойчивой к действию ТМ.
Эти два фактора, снижая устойчивость данного фитоценоза, ослабляют ассимиляционные процессы, и таким образом уменьшают интенсивность синтеза органических веществ в фотосинтезирующем аппарате растений и их поступление по корневым системам. В конечном итоге это снижает биологическую активность почвы, и, в частности, ее аммонифицирующую способность.
Под однопородными дубовыми древостоями разного возраста наибольшая биологическая активность установлена под более молодыми - 70-80-летними фитоценозами по сравнению с приспевающими 100-120-летними, что обусловлено более активными возрастными физиолого-биохимическими процессами и связанной с этим большей ассимиляционной способностью и устойчивостью к действию антропогенного загрязнения.
Аналогичная зависимость проявляется и у микроорганизмов, развивающихся на КАА (усваивающих минеральные формы азота) (рис.2).
Рис. 2. Динамика численности микроорганизмов, использующих минеральные формы азота, под насаждениями ЛОД МСХА в условиях различной ан
тропогенной нагрузки Включение в биологический круговорот свинца также негативно влия
ет на микробиологические процессы, следствием чего является снижение
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
9
численности микроорганизмов, использующих минеральные формы азота, особенно осенью в период массового листопада.
Так, на участках леса с минимальной антропогенной нагрузкой в осенний период под 70 и 120-летними дубовыми древостоями и двухярусными насаждениями сосны с березой содержание микроорганизмов на КАА соответственно 36,4; 38,0; 21,0 млн. клеток в 1 г почвы. При увеличении антропогенной нагрузки (под насаждениями вблизи автомагистралей) численность микроорганизмов, использующих минеральные формы азота, снижается в этот срок исследования в несколько раз: 8,2; 6,4; 4,4 млн. клеток в 1 г почвы под соответствующими древесными породами.
Анализ климатических факторов (температуры и влажности почвы) показал благоприятствование условий для функционирования микроорганизмов, поэтому имеющиеся различия в численности и динамике микробиологических процессов следует отнести за счет влияния антропогенного загрязнения.
Видовой состав сиорообразующих бактерий на участках леса с различной антропогенной нагрузкой
Использование видового состава бацилл для целей диагностики базируется на специфике их распространения, обусловленной биохимическими особенностями различных видов.
Хотя микроорганизмы имеют широкий ареал распространения, у них имеются зоны оптимального развития.
Такие виды как Bacillus virgulus, Bacillus agglomeratus, Bacillus cereus, развивающиеся на более ранних этапах деструкции органического вещества, приурочены больше к почвам подзолистого типа по сравнению с видами Bacillus mesentericus, Bacillus megaterium, Bacillus idosus, Bacillus subtilus, которые активнее представлены в серых лесных, черноземных почвах (Мишу-стин, 1956 и др.).
Это дало основание академику Е.Н. Мишустину для выделения северных и южных видов бацилл.
Принимая во внимание высокую индикаторную способность бактерий и практически слабую изученность их видового состава для лесных экосистем в условиях повышенного антропогенного воздействия, нами был изучен видовой состав данной группы организмов.
При идентификации видов они были сгруппированы на северные и южные.
Проведенные нами исследования показали различные соотношения северных и южных видов на участках леса с разной антропогенной нагрузкой.
В почвах с более низким уровнем свинца преобладают южные виды Bacillus idosus, Bacillus mesentericus, Bacillus subtilus, состаатяющие 41 % против 32 % северных видов. Здесь же появляются зародыши Bacillus megaterium, диагностирующие хороший азотный режим почв
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
10
При повышенном загрязнении преобладают северные виды: Bacillus virgulus, Bacillus agglomeratus, Bacillus cereus, в сумме составляющие около и более 50 % бациллярного населения (таблица 4).
Таблица 4 Видовой состав бацилл на участках ЛОД МСХА с различной
антропогенной нагрузкой (% от общего количества спорообразующих бактерий)
№ пробных
площадей
Главная порода, класс
возраста
Соотношение чис
ленности се-верных видов
бацилл к южным
Видовой состав бацилл, %
Северные
Bacillus virgulus
Bacillus agglom eratus
Bacillus cereus
Е
Южные
Bacillus mesente-
ricus, Bacillus subtilus
Bacillus idosus
Bacillus mega-terium
I Bacillus mycoi-
dos Прочие
Участки леса с минимальной для ЛОД антропогенной нагрузкой
6
8
9
ДубХ-XII Дуб
V1I-VII1 Сосна с березой IX-XI
0,70
0,75
0,70
10±0,б
11 ±0,7
12±0,8
7±0,4
б±0,5
7±0,4
14±1,1
15±1,1
14±1,0
31
32
33
19±1,6
17±1,5
21±1,6
23±1,7
24±1,8
24±1,8
3±0,3 45
2±0,3
3±0,3
43
48
9±0,7
8±0,6
9*0,7
15±1,4
17±1,4
10±0,9
Участки леса с повышенной для ЛОД антропогенной нагрузкой
11
7
10
ДубХ-XII Дуб
VH-VIII Сосна с березой IX-XI
2,10
2,70
2,75
1б±1,0
18±1,1
19±1,4
14±1,0
15±1,1
16±1,2
19±1,5
21±1,7
20±1,7
49
54
55
7±0,4
6±0,5
8±0,7
16±1,0
14±1,0
12±0,8
23
20
20
9±0,7
8±0,6
8±0,5
19±1,5
18±1,5
17±1,4
Примечание: «Северные» - слабо минерализующие органические вещества; «Южные» — активно минерализующие органические вещества.
Если Е.Н. Мишустиным деление на северные и южные виды было выполнено для почв с разными географическими факторами, то в данной работе показано существенное изменение соотношения северных и южных видов в условиях одного почвенного типа и в одной климатической зоне, но с различным уровнем антропогенного загрязнения.
То есть, антропогенное загрязнение оказывает значительное влияние на деструкционные процессы в системе почва-растение, в частности, ослабляет процесс минерализации органических веществ и, таким образом, ухудшает условия питания растений и их санитарную защиту.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
11 Изменение биохимической активности доминирующих видов бацилл под
насаждениями ЛОД МСХА в условиях различного свинцового загрязнения почв
Нами была изучена биохимическая активность некоторых видов бацилл в условиях модельного эксперимента с различными дозами свинца -одного из опаснейших ТМ.
В качестве объекта исследования были изучены наиболее распространенные для дерново-подзолистых почв виды спорообразующих бактерий -Bacillus idosus и Bacillus mycoides.
Эти виды были выделены из почв с различным уровнем загрязнения свинцом- 80, 800, 8000, 80000 мг/кг, далее проводили исследования биохимической активности со штаммами данных видов.
При изучении биохимической активности исследовалась активность ферментов протеаз по разложению желатины (скорость и характер разложения при уколе столбика желатины), свертыванию и пептонизации молока. Аммонифицирующую способность определяли по интенсивности разложения мясо-пептонного бульона (МПБ) с помощью реактива Несслера. Активность амилазы определяли по величине зоны гидролиза крахмала. Активность нитрат-редуктазы - по восстановлению нитратов при росте на среде Гильтая (рН 7,0-7,2).
Вышеуказанные среды заражались трехсуточными культурами бактерий (определенной концентрации) (в четырехкратной повторности) и ставились в термостат при 28 °С. Среда с желатиной оставлялась при комнатной температуре. На 2-е - 3-й сутки проводилась визуальная оценка активности фермента (в условных единицах) по четырехбальной системе: очень высокая активность (сильная муть, пленка, либо обильный осадок, газообразование) отмечалась четырьмя крестами; хорошая - тремя; средняя - двумя; слабая -одним и отсутствие роста — знаком ноль. Знак «минус» показывал, что на дашюй среде культура не испытывалась. Одновременно отмечался характер роста культуры и тип разложения желатины при посеве уколом в мясо-пептонную желатину (МГГЖ)
Результаты определения биохимической активности выделенных штаммов Bacillus idosus и Bacillus mycoides представлены в таблице 5 и 6.
Как общая закономерность отмечается снижение биохимической активности при увеличении свинцового загрязнения, что свидетельствует о существенном нарушении ферментных систем.
Причем, невысокие дозы (80 мг/ кг) несколько стимулируют активность энзиматического аппарата, что возможно, связано с активацией защитных механизмов до определенного уровня загрязнения, после которого происходят более глубокие нарушения функционирования микробной клетки, приводящие к резкому снижению и даже полному подавлению клеточных ферментов.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
12 Таблица 5
Биохимическая активность штаммов Bacillus idosus, выделенных из дерново-подзолистой почвы с разным уровнем свинцового загрязнения
Доза РЬ,
мг/кг
Контроль
80
800
8000
80000
штамма
1
2 3
4 1 2 3 4
1
2 3
4
1 2 3 4
1 2 3 4
Активность ферментов протеаз
Разжижение
желатины
-и-
++ ++
+-Н-++
++ +++ +++
+
+ +
++
0
0 +(0)
+ 0 0 0 0
Изменение молока (обрата) свертывание ++
+++ +++
++ ++
+++ +++ ++ -н-
-н--н-
+
+
+(0) +(0)
0 0 0 + 0
пеп-тони-зация +++
+++ ++
+++ +++
+++ +++ •н-++
+ +
+
40)
0 0 0 0 0 + 0
Рост на
МПБ
Слабая муть в первые
дни роста,
нет осадка
муть, осадок, пленка
сильная
муть, осадок, пленка
It
Муть, осадок
Слабая муть
Слабая муть
0 0 0 0
Активность амилаз
Гидролиз крахмала
+
++ +
+ ++
++ + + +
+ +(0)
•КО)
+(0)
0 0 0 0 0 0 0
Активность нит-ратредуктазы
Восстановление N03"floN02"
+
++ +
+ ++
++ + + +
4-
+(0)
+(0)
+(0)
+(0) 0 0
•КО) 0 0 0
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
13 Таблица 6
Биохимическая активность штаммов Bacillus mycoides, выделенных из дерново-подзолистой почвы с разным уровнем свинцового загрязнения
Доза РЬ, мг/кг
Конт -роль
80
800
8000
8000 0
№ штам
ма
1
2 3
4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Активность ферментов протеаз
Разжижение
желатины
+++
+++ +++
+++ +++
-н-н-++ ++ ++ +
+(0) +(0)
0 0 0 0
Изменение молока (обра
та) свертывание
+(++
+(++ +
+ ++ ++ + +
-КО) -КО) -КО)
0 0 0 0 + 0 0
пеп-тони-зация
++
++ ++
++ ++ ++
+++ +++
+ + +
+(0) +(0)
0 0
+(0) 0
Рост на МПБ
Раствор прозрачный, мощная пленка
слабая муть, пленка
II
Слабая муть
-
-
Активность амилаз
Гидролиз крахмала
+
++ +(0)
+ ++ ++ + +
+(0) +(0)
0 0 0 + 0 +
Активность нитратре-дуктазы
Восстановление NCh"
до N02"
++
++ ++
++ ++ ++ ++ ++
+(0) +(0)
0 0 0 0 0 0
Так, на фоне свинцового загрязнения, равного 80 мг/кг почвы, несколько возрастает активность протеолитических ферментов (штамм №3 активнее (+++), по сравнению с контролем (++)), разжижает желатину.
Примерно в 2 раза возрастает интенсивность гидролиза крахмала, т.е. в 2 раза активизируется деятельность амилолитических ферментов (штаммы 2, 3).
Также отмечается активизация аммонифицирующей способности под воздействием небольших доз свинца (80 мг/кг). Заражение штаммами данной популяции мясопептонного бульона вызывает активную реакцию: образуется сильная муть, осадок, поверхность среды покрывается значительной пленкой.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
14
Активнее протекает и восстановление нитратов до нитритов (штаммы №1 и 3 усиливают в 2 раза интенсивность восстановления NO3* до NO2").
Увеличение дозы свинца на порядок (800 мг/кг почвы) вызывает резкое снижение биохимической активности популяций Bacillus idosus, причем, это снижение распространяется на активность всех изученных ферментов.
Доза свинца, равная 8000 мг/кг, практически полностью подавляет деятельность клеточных ферментов.
Bacillus mycoides проявляет большую биохимическую активность по сравнению с Bacillus idosus как в контрольной почве, так и на фоне высоких доз свинца, что характеризует меньшее негативное влияние загрязнения на данную популяцию.
Последующее увеличение дозы тяжелых металлов вызывает резкое снижение и даже полное подавление ферментативной активности спорообра-зующих бактерий Bacillus mycoides.
Полученные результаты показали, что под действием тяжелых металлов депрессируется функционирование одной из наиболее активных групп микробного населения, причем, это угнетение распространяется на доминирующие виды бацилл. Снижение активности бацилл, т.е. организмов с мощным ферментативным аппаратом, изменяет функционирование системы почва-растение в результате изменения деструкционного процесса, что в конечном итоге ухудшает пищевой режим и фитосанитарное состояние и может стать источником токсичных веществ в окружающей природной среде.
Изменение целлюлозоразрушающей способности почвы под насаждениями ЛОД МСХА в условиях различного
антропогенного воздействия
Исследования проводились в условиях нативного эксперимента. Для этих целей в почве по периметру проекции крон модельных де
ревьев делалась узкая щель глубиной 15 см, в которую аккуратно вставлялось льняное полотно размером 10x15 (см2) в десятикратной повторности. Для избежания деформации ткани она обрамлялась по периметру узкой (1 см) полоской картона. С целью усиления взаимодействия с почвой щель тщательно закрывалась путем прижатия краев почвы и в таком состоянии оставлялась на период исследования (1,5 месяца).
Анализ динамики биологических процессов проводили каждые 2 недели, по истечении которых полотно аккуратно извлекалось из почвы, и проводилась оценка степени его разложения (в 3-х кратной повторности).
Об интенсивности целлюлозоразрушающей способности судили по степени разложения полотна, используя шкалу Д.Г. Звягинцева (1978):
Очень слабая — до 10% Слабая-10-30% Средняя-30-50% Сильная - 50-80% Очень сильная - более 80%
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
15 Принимая во внимание значение гидротермического режима в биоло
гических процессах, определяли температуру и влажность исследуемого слоя почвы (верхнего 10 см). Результаты эксперимента представлены в таблицах 7,8.
Таблица 7 Динамика целлюлозоразлагающей активности в дерново-подзолистой почве под насаждениями ЛОД МСХА в условиях минимального антропогенного
загрязнения (масса льняного полотна 14,5 г) (средние данные за 2001-2002 гг.)
Главная порода, класс,
возраста
ДубХ-XII
Дуб VII-VIII
Соска с березой IX-XI
Срок экспозиции
15V-30V 31V-14VI 15VI-30V1 15V-30V 31V-14V1 15VI-30VI 15V-30V 3IV-14VI 15VI-30VI
Температура поч
вы, °С
(средняя)
10,0 12,8 15,7 10,0 13,0 16,0 11,0 j 13,8 16,5
Влажность
почвы, %
(средняя) 34,5 28,3 30,5 28,6 25,4 27,4 24,2 22,8 24,0
Масса льняного полотна
после опыта, г
2,2±0,15 5,4±0,38 9,9±0,75 2,6±0,18 5,9±0,39 10,9±0,98 1.7±0,08 4,1±0,35 7,5±0,54
Масса разложения
г
12,3±1,12 9,1±0,78 4,6±0,39 11,9±1,01 8,6±0,69 3,6±0,29 12,8±1,01 10,4±0,91
7±0,64
% к исходному об-разцу
15,5 37,0 68,0 18,0 40,4 75,0 12,0 28,5 52,0
Степень разложе
ния
Слабая Средняя Сильная Слабая
Средняя Сильная Слабая
Средняя Сильная
Таблица 8 Динамика целлюлозоразлагающей активности в дерново-подзолистой почве под насаждениями ЛОД МСХА в условиях максимального антропогенного
загрязнения (масса льняного полотна 14,5 г) (средние данные за 2001-2002 гг.)
Главная порода, класс,
возраст
ДубХ-XII
Дуб VII-VIII
Сосна с березой ГХ-Х1
Срок экспозиции
15V-30V 31V-14VI 15VI-30VI 15V-30V 31V-14VI 15VI-30VI 15V-30V 31V-I4VI 15VI-30VI
Температура почвы,
°С
19,5 12,7 15,2 19,5 12,8 15,4 10,5 13,3 16,0
Влаж ность поч
вы, %
36,1 27,3 26.8 29,4 26,7 24,2 23,4 22,2 18,0
Масса льняного полотна
после опыта, г 0,9±0,75 1,9±0,10 4,0±0,32 1,1 ±0,09 2,7±0,19 4,1 ±0,31 0,8±0,06 1,9±0,10 3,4±0,21
Масса разложения г
13,6±1,05 12,6*1,04 10,5±0,92 13,4±108 11,8±0,94 10,4*0,89 13,7*1,18 12,6*1,04 11,1*0,98
% к исходному об-разцу
6,5 13,0 27,8 7,8 18,5 28,6 6,2 12,8 23,4
Степень разложения
Очень слабая Слабая Слабая Слабая Слабая Слабая
Очень слабая Слабая Слабая
Анализ полученных результатов показал, что активность целлюлозо-разлагающих процессов значительно различается в зависимости от различ-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
16 ных экологических факторов. При этом наиболее значимым в деструкции клетчатки выступает степень антропогенного загрязнения.
На участках леса с повышенным уровнем загрязнения степень разложения целлюлозы во все сроки исследования в 2-3 раза ниже по сравнению с участками леса, произрастающими в условиях минимальной для ЛОД МСХА антропогенной нагрузки.
Значительную роль в процессе деструкции клетчатки играет породный состав древостоя. Под дубовыми древостоями разложение целлюлозы более интенсивно по сравнению с сосново-березовыми: соответственно 68-75% и 52% за период исследования.
Различная скорость деструкции под изученными насаждениями обусловлена разным химическим и биохимическим составом опада. Дубовый спад по сравнению с сосновым более богат зольными элементами и азотом, что ускоряет процессы разложения (Базилевич, Соколов О.А., 1962; Федорова, 1977; Захарова О.А. и др., 2004).
Кроме того, присутствие в хвойных породах веществ типа таннинов, смол делает их трудно доступными для разложения и таким образом снижает интенсивность минерализации клетчатки.
На интенсивность разложения клетчатки влияет и возраст насаждений. В почвах под дубовыми древостоями X — XII класса возраста целлюлозораз-рушающая активность выражена слабее (68% разложения) по сравнению с более молодым 70-80 - летними дубравами (75%). Причем, эта зависимость в большей степени выражена в условиях минимального антропогенного воздействия.
Проведенные исследования показали существенное изменение целлю-лозоразлагаюшей способности под различными древостоями ЛОД МСХА, произрастающими в условиях разных почвенно-экологических условий. При этом наиболее значимым выступает фактор загрязнения, который снижает целлюлозоразлагающую активность примерно в 2 раза.
В результате проведенных исследований дерново-подзолистых почв Лесной опытной дачи под насаждениями дубравы и сосны с березой было выявлено снижение минерализационных процессов, которое негативно влияяет на устойчивость и продуктивность фитоценозов.
Изменения процессов минерализации органического вещества подтверждаются данными морфологического анализа почвенного профиля под изученными насаждениями.
На участках леса с повышенной антропогенной нагрузкой (пробные площади № 7, 11,10) в верхней части почвенного профиля отмечается большее количество свежего растительного материала, чем на участках с естественной антропогенной нагрузкой. Причем, в наибольшей степени это выражено на пробной площади №7, где на поверхности почвы отмечается наличие подстилки из опавших листьев, веточек мощностью 1 см, что подтверждает ослабление процессов деструкции органического вещества вследствие снижения биологической активности.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
17
Наравне с ослаблением минерализационных процессов в почве происходят еще более глубокие изменения метаболических процессов в микробном ценозе, что приводит к токсикации продуцентов и в конечном итоге - к снижению устойчивости экосистем.
Структура микробного ценоза под лесными насаждениями Л ОД МСХА в условиях различного свинцового загрязнения
Исследования проводили в динамике с 2-х недельным интервалом в условиях модельного эксперимента с дерново-подзолистыми почвами, кон-таминированными разными дозами свинца (контроль, 800 мг/кг, 8000 мг/кг, 80000 мг/кг) в виде солей уксусной кислоты.
Результаты эксперимента представлены в таблице 9. Таблица 9
Структура микробного ценоза в условиях различного свинцового загрязнения дерново-подзолистых почв
Сроки исследований (после внесения
свинца)
2 день
15 день
30 день
Вариант опыта, доза
свинца, мг/кг
К 800
8000 80000
К 800 8000
80000 К
800 8000
80000
КОЕ, млнЛг
МПА млн/1 г почвы
75±6,08 44±3,6 32±2,9 14±1,0 92±8,4 64±5,6 39±3,2 12±0,9 86±7,4 60±5,6 24±1,9 4±0,3
КАА млн/1г почвы
68±5,9 39±3,1 28±2,4 12±0,9 84±7,6 56±4,9 29±2,5 9,8±0,7 79±6,9 58±5,1 21±1,7 3,8±0,4
Спорообразующие бактерии, КОЕ
Активное состояние,
млн/1 г почвы
10,2±0,9 6,4±0,5 4,8±0,5 0,9±0,08 14,2±1,3 9,4±0,8 6,8±0,55 2,4±0,2 12,0±1,1 9.2±0,8 5,0±0,45 0,8±0,07
В состоянии спор (тыс/1 г почвы)
9,75±0,8 5,8±0,4 3,2±0,3
0,6±0,05 10,5±0,9 8,1 ±0,07 7,0±0,05 2,5±0,2 11,5±0,9 8,5±0,7 4,4±0,3 0,4±0,04
Грибы на СА, %
0,6 0,8 3,1 5.0 0,8 1,2 5,0 8,0 0,8 1,6 6,4 8,0
Во все сроки исследований численность различных групп микробного населения снижалась с увеличением свинцового загрязнения.
При этом наиболее толерантными выступали микроскопические грибы, которые увеличивали свою относительную численность по мере увеличения контаминации свинцом.
Так, в первый срок исследования (на 2 день после внесения уксуснокислого свинца) численность микроорганизмов, усваивающих органические (на МПА) и минеральные (на КАА) формы азота, снижалась в зависимости от доз токсиканта примерно в 5 раз от 75x106 и 68><106 КОЕ/ 1 г почвы на контроле до 14 и 12хЮ6 КОЕ на варианте с максимальной контаминацией свинца. Относительная же доля грибного населения увеличивалась по мере воз-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
18
растания уровня загрязнения и составила почти десятикратное значение на варианте с максимальной дозой свинца (с 0,6% на контроле до 5,0% на варианте с 80000 мг/кг РЬ).
Еще большее увеличение доли грибов отмечалось в последующие 2 недели.
Таким образом, с возрастанием свинцового загрязнения значительно снижается содержание микроорганизмов, использующих органические и минеральные формы азота. При этом в структуре микробного ценоза повышается доля микроскопических грибов.
Влияние тяжелых металлов на фитотоксичность почвенных микроскопических грибов
Нами был проведен микробиологический посев, после чего на чашках Петри выявляли группы грибов, которые увеличивали свою численность в условиях возрастающего свинцового загрязнения. Родовую принадлежность грибов диагностировали по морфолого-культуральным признакам. При микрокопировании исследовали строение мицелия, плодовых тел и органов размножения. Наиболее представительные роды выделяли в чистую культуру и выявляли их фитотоксический эффект. Присутствие токсинов определяли по скорости прорастания семян растения-биотеста, помещенного в экссудаты грибов. В качестве биотеста использовали семена гороха Pisum sativum L.
За фитотоксический эффект принималось снижение длины корней проростков и снижение энергии прорастания семян гороха Pisum sativum L. по сравнению с контролем и выраженное в процентах.
Фитотоксичность грибного населения определяли при загрязнении почв свинцом в дозах от 80-80000 мг/кг. При воздействии различных доз токсиканта на родовой состав микроскопических грибов нами были выявлены следующие изменения (рис. 3).
35 а о Ч а. 1 $ о.
60i 50 40 30 20 10 0
Дозы РЬ, мг/кг
Рис. 3. Родовой состав грибного населения дерново-подзолистой почвы в зависимости от уровня свинцового загрязнения
При рассмотрении качественного состава грибного населения в контроле было установлено доминирование грибов рода Penicillium. По мере
В Fusarium • Penicillium D Altemaria DПрочие
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
19 увеличения концентрации свинца до 80000 мг/кг происходило значительное снижение доли грибов рода Penicillium с 55% в контроле до 26% на самой высокой дозе загрязнителя. Напротив, грибы рода Altemaria под воздействием данного токсиканта увеличивали свою численность с 10% в контроле до 26% при дозе свинца 80000 мг/кг.
Грибы рода Fusarium, которые в контроле и дозе свинца 80 мг/кг не были диагностированы, при загрязнении почв свинцом в концентрации 80000 мг/кг составляли 38% от общей численности грибов.
Увеличение численности грибов рода Fusarium, как свидетельствуют литературные источники, ведет к ухудшению жизнедеятельности растений. При этом грибы данного рода отличаются наибольшей фитотоксичностью среди грибного населения почв (Львова Л.С., 1992; Монастырский О.А., 1993).
Увеличение доли грибов рода Altemaria под воздействием возрастающих доз свинца могло происходить вследствие изменения метаболических процессов этого организма. В этой связи нами была изучена фитотокичность грибов p. Altemaria. С этой целью было выделено по 3 штаммам гриба с каждого варианта и определена их фитотоксическая способность.
Таблица 10 Фитотоксичность микроскопических грибов рода Altemaria в условиях
различного свинцового загрязнения дерново-подзолистых почв
Доза РЬ,мг/кг
Контроль
80 800 8000
80000
Вариант
Вода Гриб Гриб Гриб Гриб Гриб
Средняя длина корня, мм
24±2,0 25±1,5 24±0,8
18,5±1,5 8,5±1,0 3,5±0,5
% к контролю
100 104 96 78 34 14
Токсичность, %
--4
22 66 86
Так, было установлено, что в контроле и при дозе свинца 80 мг/кг энергия прорастания гороха Pisum sativum L. не изменяется и аналогична водной среде.
Экссудаты грибов, выделенные при максимальном уровне свинцового загрязнения, уменьшают энергию прорастания гороха Pisum sativum L. и длина корней проростков снижается с 24 мм в контроле до 3,5 в дозе сзинца 80000 мг/кг.
Снижение длины корней фитотеста гороха Pisum sativum L. в результате действия высоких доз свинца по отношению к контролю свидетельствует о фитотоксическом эффекте грибов рода Altemaria. Фитотоксический эффект грибов проявляется уже в дозе свинца более 80 мг/кг почвы и составляет 22% на фоне 800 мг/кг. В дозе 800 мг/кг длина корней гороха Pisum sativum L. составила 18,5, что в 1,4 раз меньше, чем в контроле.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
20
В данном исследовании максимальная фитотоксичность грибов рода Altemaria была зафиксирована на уровне свинцового загрязнения 80000 мг/кг и составила 86%.
Подводя итоги, нужно отметить, что выполненные исследования позволили установить существенные изменения в грибном сообществе уже в дозе выше 80 мг/кг почвы. Так, нами было установлено, что под воздействием высоких доз свинцового загрязнения происходит уменьшение численности грибов рода Penicillimn, а фитотоксичные грибы родов Fusarium и Alter-naria, напротив увеличивают, свою численность, вызывая ухудшение жизнедеятельности растений.
ВЫВОДЫ
1. На территории ЛОД МСХА установлено, что под воздействием антропогенной нагрузки происходит снижение численности микроорганизмов, усваивающих органические и минеральные формы азота, как одного из показателей биологической активности почвы в ряду: Дубрава VII-VIII класса возраста —» Дубрава IX-XI класса возраста —» Сосна с березой IX-XI класса возраста соответственно с 40,2 млн., 34 млн. и 22 млн. (в осенний период) до 6,2 млн., 3,6 млн. и 2,2 млн. При этом антропогенный фактор выступает как более значимый по сравнению с породным и возрастным составом древостоя.
2. Было выявлено существенное изменение характера динамики микробиологических процессов по сезонам года на участках леса с различной антропогенной нагрузкой. Под насаждениями в центре лесного массива, в осенний период численность аммонифицирующих микроорганизмов примерно в 1,5 раза больше по сравнению с весенним периодом, соответственно в ряду: Дубрава VII-VIII —» Дубрава IX-XI —• Сосна с березой IX-XI, 40,2 млн. и 23,5 млн., 34 млн. и 20,5 млн., 22 млн. и 15,8 млн. На пограничных с городом участках леса максимальное число аммонифицирующих микроорганизмов отмечается весной (соответственно КОЕ (млн. на 1г почвы) 9,8; 6,7; 5,0). Осенний максимум значительно ниже весеннего (КОЕ (млн. на 1г почвы)) составляет 6,2; 3,6; 2,5, что связано с депресирующим влиянием загрязнения тяжелыми металлами, поступающими в почву с опадающей листвой. Аналогичная зависимость наблюдается и у микроорганизмов, использующих минеральные формы азота.
3. Было установлено, что повышение антропогенной нагрузки увеличивает долю северных видов бацилл с 31-33 % под насаждениями в центре лесного массива до 49-55 % под насаждениями на пограничных с мегаполисом участках леса, и соответственно снижает содержание наиболее активных южных популяций спорообразующих бактерий с 43-48 % до 20-23 %, что характеризует замедление минерализационных процессов и ухудшение пищевого режима почвы. Состав древостоя и возраст насаждений влияют на эти процессы менее интенсивно.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
21 4. Снижение интенсивной минерализационных процессов обусловлено
снижением биохимической активности наиболее распространенных в дерново-подзолистой почве видов бацилл — Bacillus idosus и Bacillus mycoides.
5. Было выявлено, что с повышением антропогенной нагрузки целлюло-зоразлагающая способность снижается с 52-75 % до 23,4-28,6 % в зависимости от породного состава древостоя, причем более интенсивно процесс деструкции клетчатки идет под дубовыми древостоями по сравнению с сосново-березовыми: соответственно 68-75% и 52% на участках леса с минимальной нагрузкой и 27,8-28,6 % и 23,4% с повышенным антропогенным загрязнением.
6. Установлено достоверное изменение структуры микробного ценоза в сторону увеличения одного из наиболее активных продуцентов мико-токсинов - микроскопических грибов с увеличением свинцового загрязнения. Так, доля микроскопических грибов увеличивается с 0,6-0,8 % на контроле до 5-8 % на максимальной дозе свинца, что значительно ухудшает фитосанитарное состояние почв.
7. Увеличение свинцового загрязнения выше 800 мг/кг почвы в модельном эксперименте вызывает изменение метаболических процессов в грибном населении почвы и делает их фитотоксичными.
8. Выявлены следующие микробиологические критерии для диагностики функционирования лесных экосистем при антропогенном загрязнении в условиях урбанизации: видовой состав бацилл при группировке их на северные и южные, целлюлозоразлагающая активность, доля микроскопических грибов в структуре микробного ценоза, суммарная численность грибов родов Fusarium и Alternaria. Для оценки степени загрязнения лесных экосистем нами был предложен коэффициент, отражающий отношение численности северных видов бацилл к южным (К(с/Ю)). Так, для лесных экосистем при минимальной антропогенной нагрузке, Кдо,) равен 0,8, при средней К(С.Ю) равен 1,3, при повышенном загрязнении дерново-подзолистых почв К(с/Ю) равен 2,5 и выше. Было установлено, что для минимального загрязнения почв лесных экосистем целлюлозоразлагающая активность соответствует 38%, среднего -27%, сильного - 16%. Низкий уровень антропогенного загрязнения диагностирует доля грибного населения равная 0,7%, повышенный -4,8%, а так же суммарная численность грибов родов Fusarium и Alternaria, соответственно 10% и 56%.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
22
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Довлетярова Э.А. Структура микробного ценоза, как показатель мико-токсинового загрязнения // Сборник студенческих докладов. Эколого-аналитический контроль за средой обитания. Переславль-Залеский. 1998.
2. Довлетярова Э.А. Эволюция дерново-подзолистых почв под лесными древостоями за столетний период в условиях крупных городов (на примере Лесной опытной дачи // Тезисы докладов Докучаевских молодежных чтений «Почва. Экология. Сообщество». Санкт-Петербург. 1999.С.107-108.
3. Мосина Л.В., Довлетярова Э.А. Структура микробного ценоза как возможный показатель микотоксинового загрязнения // Сборник студенческих научных работ. Выпуск 4. М.: Изд-во МСХА, 1999. С. 162-165.
4. Мосина Л.В., Довлетярова Э.А. К вопросу определения микотоксинов в системе почва - растение // Сборник студенческих научных работ. Выпуск 5. М.: Изд. МСХА. 2000. С. 190-192.
5. Довлетярова Э.А. Биоиндикация свинцового зафязнения в системе почва-растение // Труды научной конференции молодых ученых и специалистов МСХА. 2002. С. 271-273.
6. Мосина Л.В., Довлетярова Э.А. Состояние лесных ландшафтов в условиях мегаполиса Москва // Материалы IV съезда Докучаевского общества почвоведов. Новосибирск «Наука-Центр». 2004. С. 196.
7. Довлетярова Э.А. Изменение биохимической активности бацилл под влиянием свинцового загрязнения дерново-подзолистой почвы // Доклады ТСХА. Вып. 276. М.: Изд-во МСХА, 2004. С. 342-346.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Объем 1,5 п. л. Зак. 255. Тираж 100 экз.
Издательство МСХА 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»