CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE 26 EXTRACTOS DE ESPECIAS Y CARACTERIZACION DE SU CONTENIDO FENOLICO

12 familias botánicas se investigaron. Análisis cualitativos y cuantitativos de los principales compuestos fenólicos en los extractos de especias fueron sistemáticamente llevada a cabo por fase inversa y de líquidos de alto rendimiento cromatografía (HPLC-RP). Muchas especias altas concentraciones de compuestos fenólicos y demostró alta capacidad antioxidante. Amplia variación en los valores TEAC (0,55 168,7 mmol/100 g) y el total de compuestos fenólicos contenido (0,04 14,38 g de ácido gálico equivalen /100 g), se observó. Una muy positiva lineal relación (R 2 ) 0,95) obtenidos entre los valores TEAC y contenido total de fenólicos mostró que compuestos fenólicos en la prueba especias contribuido de manera significativa a su capacidad antioxidante. Mayor tipos de componentes fenólicos identificados en los extractos de especias eran ácidos fenólicos, fenólicos diterpenes, flavonoides, y aceites volátiles (por ejemplo,compuestos aromáticos). Rosmarinic ácidos fenólicos dominante fue la compuestos en las seis especies de la familia Labiatae. Fenólicos aceites volátiles son los principales activos ingredientes en la mayoría de las especias. Las especias y las familias con la más alta capacidad antioxidante se controlados, por ejemplo, en el Myrtaceae clavo, canela en el Lauraceae, orégano en el Labiatae, etc, en representación de las posibles fuentes de potentes antioxidantes naturales para su explotación comercial. Este estudio directamente datos comparativos sobre la capacidad antioxidante total y fenólicos y los contenidos de los 26 extractos de especias.

INTRODUCCIÓN Especias son comunes complementos alimentarios, que se han utilizado como sazonar, condimentar, y agentes colorantes y, a veces, como preservativos en todo el mundo por miles de años, especialmente en la India, China y muchos otros sudeste de Asia países (1). Spice plantas pertenecen a varios botánicos familias, como Labiatae (también llamado Lamiaceae) (por ejemplo, romero, orégano y salvia), Lauraceae (por ejemplo, canela), Peperaceae (por ejemplo, pimienta negro), Myrtaceae (por ejemplo, clavo), Um belliferae (por ejemplo, comino), etc principales plantas de especias son normalmente distribuidos en las zonas templadas y tropicales (2). No sólo son las especias utilizadas como saborizantes de alimentos y condimentos para mejorar el sabor, pero también pueden ser utilizados como tradicionales medicamentos (1, 3). Muchas especies han sido reconocidos a tener poseen propiedades medicinales y muchos efectos beneficiosos en salud, como la actividad antioxidante, estimulante digestivo acción, anti-inflamatorios, antibióticos, hypolipidemic, antimutagénico, potencial anticancerígeno, etc (1, 4 8). Por ejemplo, el clavo, canela, y las cenizas chino espinoso común especias en China y también se utilizan como medicinas tradicionales chinas. Especias, como verduras, frutas y hierbas medicinales, son conocidos poseer una variedad de efectos antioxidantes y propiedades (9 13). Compuestos fenólicos en estas materias vegetales están estrechamente relacionados con su actividad antioxidante. El efecto antioxidante de compuestos fenólicos se debe principalmente a sus propiedades redox y es el resultado de diversos mecanismos posibles: los radicales libres basureros actividad, la transición-actividad quelante de metales, y / o singlete oxígeno-la capacidad de enfriamiento (14 17). También son se sabe que desempeñan un papel importante en la estabilización de la peroxidación lipídica y para inhibir diversos tipos de enzimas oxidantes (18, 19). Estos múltiples mecanismos potenciales de acción antioxidante de la grupo diverso de compuestos fenólicos en un interesante objetivo la búsqueda de la salud y fitoquímicos beneficiosos también ofrecenla posibilidad de utilizar compuestos fenólicos o extractos ricos en ellos en alimentos ricos en lípidos para extender la vida útil (20). La presencia de antioxidantes y antimicrobianos en muchos componentes fenólicos especias da la preservación de las propiedades de alimentos (1, 21). Especias han sido investigados por sus propiedades antioxidantes por lo menos 50 años. Ya en 1952, muchas fueron las especias examinados y se encontraron 32 especies para retardar la oxidación de manteca de cerdo (1). Muchos estudios indican que el romero, salvia, orégano, y el tomillo, hojas de especias en la familia Labiatae, demostrado alta actividad antioxidante (4, 9, 22). Varios estudios también mostraron que negro pimienta, clavo, canela, cilantro y exhibidos propiedades antioxidantes (9, 23, 24). En las últimas décadas, un número de sustancias fenólicas fueron aislados de una variedad de especias fuentes, incluidos los ácidos fenólicos (por ejemplo, ácido gálico, ácido cafeico, etc), flavonoides (por ejemplo, la quercetina, rutina, myricetin, luteolina, naringenin, y silybin), diterpenes fenólicos y aceites volátiles (7, 22, 23, 25 29). Hasta la fecha, numerosos estudios sobre las propiedades antioxidantes de muchas las especias se han realizado utilizando diferentes métodos de análisis (9, 30 34). Sin embargo, la amplia variedad de sistemas de oxidación y formas de medir la actividad antioxidante utilizado en la evaluación que es difícil comparar directamente los resultados de diferentes estudios. A pesar de estudios intensivos sobre los componentes bioactivos y su contenido total en muchas especies se han llevado a cabo, la fenólicos los datos de identificación son insuficientes e incompletas. En particular, los datos cuantitativos sobre los compuestos fenólicos en el especias son actualmente carecen. Además, hay pocas comparaciones de constituyentes fenólicos identificados en diversas especias de especias diferentes familias. La estructura actividad de relaciones compuestos fenólicos en las especies no han sido objeto de una profunda discutido y puesto de manifiesto. Además, la relación entre el total de actividad antioxidante y contenido fenólico de un gran número de las especias no se investiguen sistemáticamente antes. Muchas re los usuarios alegaron que en los

compuestos fenólicos se especias responsables de su actividad antioxidante, pero pocos podrían establecer correlativo relaciones reales y convincentes estadística datos que revelan la relación entre la actividad y fenólicos sobre la base de un gran número de muestras de especias. Los objetivos de este estudio fueron (1) para evaluar y comparar total de la capacidad antioxidante y contenido fenólico, de 26 de común extractos de especias, (2) para identificar y cuantificar los principales compuestos fenólicos presentes en la prueba especias por RP-HPLC, y (3) para establecer la relación entre la actividad antioxidante y compuestos fenólicos, de 26 de extractos de especias para confirmar que el componentes fenólicos son responsables de sus antioxidantes actividad. MATERIAL Y MÉTODOS Materiales vegetales. Un total de 10 nuevas plantas, es decir, cilantro, perejil, menta, albahaca, eneldo, romero, tomillo, salvia, orégano, y hierba de limón, y 16 de materias vegetales secas, como la nuez moscada, verde grano de pimienta, pimienta blanca, pimienta negro, chino y espinoso cenizas, originalmente de siete países de Asia y regiones occidental y cuatro países, se han recogido y comprado de los supermercados locales y farmacias. Estas plantas se distribuyeron en 12 familias, principalmente Labiatae, Lauraceae, Piperaceae, y umbelíferas. Partes comestibles de la 26 especias de plantas, tales como hojas, ramas, tallos / cortezas, flores / capullos, frutas y semillas, o plantas enteras, se han utilizado para la extracción y análisis en el presente estudio. Los nombres científicos, las fuentes y las partes están a prueba detallada en el Cuadro1. Reactivos y productos químicos. 2,2 (3-ethylbenzothiazoline-6 - sulfónico) diamónico sal (ABTS), potasio persulfate, y carbonato de sodio fueron adquiridos de Sigma / Aldrich (St. Louis, MO). Folin Ciocalteu reactivos de grado CLAR y reactivos orgánicos eran de BDH (Dorset, Reino Unido). Trolox (6-hidroxi-2 ,5,7,8-tetramethylchromane 2-carboxílico) fue de Fluka Chemie AG (Buchs, Suiza). Auténtico normas, tales como ácidos fenólicos (por ejemplo, ácido gálico, proto - catechuic ácido, el ácido cafeico y el ácido rosmarinic), flavonoides (por ejemplo, catequina, quercetina, apigenin, kaempferol, naringenin, hesperetin, y quercitrin), aceites volátiles (por ejemplo, el eugenol, el carvacrol, timol y mentol), y diterpenes fenólicos (por ejemplo, ácido carnosic y carnosol), fueron adquiridos de Sigma / Aldrich. Preparación de la muestra. Frescas muestras de plantas fueron limpiados, por congelación secos, y en tierra en un polvo fino (710 μ m) por un Kenwood multi - Mill (Kenwood Ltd., Reino Unido) y pasa a través de un tamiz (24 mallas). Desecado muestras de plantas fueron secadas al aire ventilado en un horno a 40 C durante 24 h, y también en tierra en un polvo fino y pasa a través de un tamiz de antes mencionados. La muestra en polvo (2 g) se extrajeron con 50 ml de metanol al 80% a temperatura ambiente (~ 23 C) durante 24 h en un agitando las aguas de baño (Bañera Sacudir 5B-16) (Techne, Ltd., Reino Unido). El extracto fue filtrado por un filtro Millipore con un 0,45-μ m de membrana de nylon en vacío a 23 C. El filtrado se almacenan a 4 C hasta su uso en 24 h. Estimación de la capacidad antioxidante total por el ABTS Método. Capacidad antioxidante total del ensayo se llevó a cabo por el ABTS método modificado por Re et al. (35) y Cai et al. (36). El ABTS ción radical generado por la reacción de 7 mm y 2,45 mM ABTS potasio persulfate después de incubación a temperatura ambiente en la oscuridad durante 16 h. El ABTS + se diluye con solución de etanol al 80% a un absorbancia de 0,700 ( 0,005 a 734 nm. La muestra fue filtrado diluido con el 80% de etanol a 20 80% de inhibición de la absorbancia en blanco con 0,1 mL de la muestra. El ABTS + solución (3,9 mL; absorbancia de 0,700 ( 0,005) fue añadido a 0,1 mL de las muestras y mezclado a fondo. La mezcla de reacción se le permitió permanecer en la sala temperatura durante 6 minutos, y la absorbancia se inscribirá inmediatamente a 734 nm utilizando un espectrofotómetro Spectronic Genesys 5 (Milton Roy, NY). Trolox la solución de calibración (concentración final de 0 15 μ m) en etanol al 80% se preparó y se estudian en las mismas condiciones. La absorbancia de la solución oxidada resultante se comparó con que el calibrado de trolox estándar. Los resultados se expresaron en términos de la capacidad antioxidante equivalente trolox [TEAC, mmol de trolox equivalents/100 g de peso seco (DW) de la especia en polvo]. Análisis HPLC. HPLC análisis se realizó con un equipo Hewlett Packard sistema HPLC (HP 1100 series, Waldbronn, Alemania), consistente en una bomba y un binario de red de diodos detectores (DAD) y equipado con un 100-C18 Nucleosil columna (5 μ m, 250 × 4 mm) con 5 C18 Nucleosil un guardia de la columna (5 μ m, 4 × 4 mm) (Agilent Tecnologías, Loveland, CO). Compuestos fenólicos en los extractos de especias fueron analizados mediante el método HPLC anterior (36) con un ligero modificación. La mejora del método de HPLC con las siguientes gradiente de elución programa (solución A, el 2,5% de ácido fórmico, y la solución B, el 100% de metanol): 0 min, 5% B, 15 min, 30% B, 40 min, 40% B; 60 min, 50% B, 65 min, 55% B; y 90 95 min, 100% B. El flujo de tasa fue de 0,8 ml / min, y el volumen de inyección fue de 20 μ L. Detección fue de 280 nm para flavanones, flavanols, hidroxibenzoico ácidos, taninos, diterpenes fenólicos, compuestos volátiles y, a 320 nm para hidroxi - Flavonas cinnamic ácidos y, a 370 nm y de flavonoles. Cuantificación de compuestos fenólicos. Fenólicos individuales identificados en el extracto de especias, por ejemplo, ácidos fenólicos (hidroxibenzoico hydroxycinnamic ácidos y ácidos), diterpenes fenólicos, flavonoides(flavonoles, Flavonas, flavanols, y flavanones), aceites volátiles (aromáticos y algunos compuestos monoterpenoids), se cuantificaron mediante HPLC en comparación con un patrón externo de las correspondientes conocido fenólicos y expresado en mg/100 g de DW (37). Norma curvas se hicieron desde cada uno de los niveles de la conocida fenólicos.

Los taninos hydrolyzable clavo brote detectado en extractos pertenecen realmente a derivados del ácido gálico. El importe de los taninos se hydrolyzable calculado como ácido gálico equivalente (mg/100 g de DW). Debido a que el estructuras de varios diterpenes fenólicos (ácido carnosic, epirosmanol, carnosol, y rosmadial) identificadas en este estudio son bastante similares, el concentraciones de los compuestos fenólicos se determinaron con diterpenes un patrón externo de carnosic expresado como ácido y ácido carnosic equivalente (mg/100 g de DW). Debido a la limitada comercial normas, pero no hemos podido utilizar HPLC para identificar y cuantificar todos los picos de los 26 extractos de especias. Sin embargo, su química podría categorías identificados a partir de su comportamiento cromatográfico y espectros de los rayos UV. El mismas categorías de fenólicos generalmente similares cromatográfica comportamiento y las características espectrales de UV (37). Por lo tanto, el total de los importes de origen desconocido / sin ácidos fenólicos, flavonoides, y sus gluco - lados se han cuantificado y expresado como ácido cafeico y quercetina equivalentes (mg/100 g de DW), respectivamente. Determinación del contenido fenólico total. Contenido fenólico total se calculó utilizando el Folin Ciocalteu método colorimétrico descrito anteriormente (9, 36) con una ligera modificación. En resumen, la diluciones de los extractos filtrados se oxida con 0,5 N de Folin Ciocalteu reactivos y, a continuación, la reacción fue neutralizada con saturada Tabla 1. Capacidad antioxidante, contenido fenólico total, y los grandes compuestos fenólicos de metanólica extractos a partir del 26 de Especias carbonato de sodio (75 g / L). La absorbancia de la resultante de color azul se midió a 760 nm con un espectrofotómetro después de la incubación durante 2 horas a temperatura ambiente. La cuantificación se realizó sobre la base de la curva estándar de ácido gálico. Los resultados se expresaron como g de gálico ácido equivalente (JUEGO) / 100 g de DW. Análisis estadístico. Todas las determinaciones se realizaron por triplicado, y todos los resultados se han calculado como media ( desviación estándar (DE) en este estudio. Las diferencias entre los medios de los datos fueron comparados por menos diferencia significativa (LSD), calculada utilizando el Análisis Estadístico System (SAS Institute, Inc., Cary, NC). Todos los valores son la media de tres mediciones y se expresan como media b TEAC, equivalente trolox capacidad antioxidante. Datos expresados como mmol de trolox equivalent/100 g de peso seco (DW). c Fenólicos total expresada en g de GAE/100 g de peso seco (DW). dLSD ( p <0,05), menos diferencia significativa, se utilizó para diferencia de la comparación entre distintos medios de especias. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Comparación de la capacidad antioxidante total y Total Contenido fenólico. Basureros de los diferentes tipos de reactivos especies de oxígeno, la mayoría de los radicales libres, se piensa que es uno de los principales mecanismos de acción antioxidante exhibidos por fenólicos fitoquímicos. El nitrógeno sintético centrado ABTS + radicales no es biológicamente relevante pero a menudo se utiliza como un "indicador compuestos "en los ensayos de hidrógeno-y, por tanto, la capacidad de donación actividad antioxidante (35). La capacidad antioxidante total de ensayo se llevó a cabo para evaluar sistemáticamente la capacidad de 26 especias extractos a recoger los radicales libres en V itro por la mejora de ABTS + método en este estudio. Capacidad antioxidante total (TEAC) y el contenido de compuestos fenólicos 26 extractos de especias (Cuadro 1) indica muy amplia variación. Sus TEAC valor medio fue de 31,7 g mmol/100, exhibiendo con clavo la más fuerte actividad radical barrido (168,7 g de mmol/100 DW), mientras que la adormidera de manifiesto la actividad más baja (0,55 mmol / 100 g de DW). Palo de canela y el orégano también muy fuerte actividad (107,7 y 100,7 g de mmol/100 DW). Otras especias con relativamente alta actividad canela (61,8 g mmol/100 de DW), salvia (51,9 g de mmol/100 DW), el tomillo (38,1 mmol / 100 g de DW), romero (37,8 g de mmol/100 DW), chino espinoso de ceniza (36,9 g de mmol/100 DW), Bahía (34,3 g mmol/100 de DW), y la menta (33,8 g de mmol/100 DW). Con las especias ligeramente menor que la media actividad se albahaca dulce (29,6 mmol/100 g de DW), anís estrellado (20,3 g de mmol/100 DW), y nuez moscada (20,0 g de mmol/100 DW). Sin embargo, cilantro, perejil, eneldo, hierba de limón, cardamomo verde, chile, alcaravea, comino, verde grano de pimienta, negro pimienta, pimienta blanca y mostró bastante bajo capacidad antioxidante (entre 4 y 11 g de mmol/100 DW). Contenido fenólico total de los 26 también mostró a prueba especias variaciones significativas, que van desde 0,04 a 14,38 g de GAE/100 g de DW, con una media general de 3,26 g de GAE/100 g (Tabla 1). Clavo había el nivel más alto de compuestos fenólicos, y tuvo la adormidera más bajo. Palo de canela y el orégano también muy alta niveles de compuestos fenólicos (11,90 y 10,17 g de GAE/100 g de DW, respectivamente). Otras especias con altos niveles de compuestos fenólicos se canela (6,34 g de GAE/100 g), salvia (5,32 g de GAE/100 g) menta (5,15 g de GAE/100 g), romero (5,07 g de GAE/100 g) tomillo (4,52 g de GAE/100 g), bahía (4,17 g de GAE/100 g), y albahaca (3,64 g de GAE/100 g). El anís estrellado y nuez moscada fenólicos contenidos relativamente bajos (2,02 y 1,61 g de JUEGO / 100 g), mientras que en la hierba de limón, la amapola, pimienta verde, negro pimienta, pimienta blanca, chile, eneldo, alcaravea, cilantro, comino, perejil, y extractos de cardamomo verde era bastante bajo (0,04 0,98 g de GAE/100 g de DW). Este resultado coincide básicamente con los de la capacidad antioxidante total. En otras palabras, la sal extraer muestras de que había una alta actividad antioxidante mostró un tendencia a fenólicos tienen un alto contenido. De las 12 familias a prueba en este estudio, Myrtaceae (con sólo una prueba de especies, es decir, clavo), Lauraceae (probado tres especies), y Labiatae (seis especies de prueba, respectivamente), mostraron alta media capacidad antioxidante (168,7, 67,9, y 48,6 g mmol/100, respectivamente) y altas concentraciones de compuestos fenólicos (14,38, 7,47, y 5,65 g de GAE/100 g, respectivamente). Antioxidante

total capacidad y el contenido de fenólicos Rutaceae (sólo una prueba especies) fue similar a los valores medios de 26 especias (31,7 mmol / 100 y 3,26 g de GAE/100 g). Sin embargo, el total de antioxidantes capacidad y el contenido fenólico valores medios de los otros ocho familias fueron significativamente inferiores (Tabla 1). Umbelíferas y Piperaceae la especia común incluyen muchas plantas, por ejemplo, eneldo, cilantro, comino, perejil, y diversos tipos de pimientos. Unos anterior, los investigadores informaron de que las especias en la umbelíferas Piperaceae y poseía un fuerte efecto antioxidante (23, 38, 39). Sin embargo, no se comparan con otros de especias familias. En el presente estudio, se constató que todas las especias a prueba en el umbelíferas (cinco especies) y Piperaceae (tres especies) demostrado más débil capacidad antioxidante (media ) 6,4 y 8,2 mmol/100 g) y menores niveles decompuestos fenólicos (media ) 0,73 y 0,49 g de GAE/100 g) que las especias de Myrtaceae, Lauraceae, y Labiatae. Se han realizado amplios estudios sobre la actividad antioxidante de muchas especias en la Labiatae (4, 9, 22, 27, 30, 40). La mayoría de especias común en esta familia son los seis (es decir, romero, orégano, salvia, albahaca, menta, tomillo y) a prueba en este estudio. Y nuestros dos anteriores estudios demostraron que las especias en general Labiatae muy fuerte capacidad antioxidante. Algunos investigadores encontraron romero de poseer el mayor efecto antioxidante, pero otros encontrado salvia o el orégano y albahaca. Nuestros resultados comparativos de las seis especies en el Labiatae indicó que su antioxidante capacidad y contenido de fenólicos disminuyeron en los siguientes orden: orégano > salvia > tomillo > romero > menta > dulce albahaca. Orégano expuesto la capacidad antioxidante más potente entre los cinco Labiatae especias, más de 3 veces mayor que dulce albahaca. Las diferencias significativas entre los diferentes estudios se probablemente debido a (1) genotípica y ambiental dentro de las diferencias especies, (2) elección de las partes la prueba, (3) tiempo de la toma de muestras, y (4) métodos de determinación. Estudios anteriores demostraron que también clavo (en el Myrtaceae) había una fuerte actividad antioxidante y un alto nivel de fenólicos (24, 41). Los diversos mecanismos antioxidantes de clavo yema extractos fueron atribuidos a una fuerte donación de hidrógeno capacidad, una capacidad quelante de metales, y su eficacia como buena los basureros de peróxido de hidrógeno, superóxido, y los radicales libres. Nuestros resultados mostraron que el extracto de clavo brote fue el más poderosos antioxidantes fenólicos y exhiben el más fuerte radicales basureros actividad entre las 26 especias. Además, dos canela especies en la familia Lauraceae fueron probados en el presente estudio, es decir, Cinnamomum casia era de China y Cinna - momum zeylanium de Indonesia. Estas dos especies de canela también había muy alta capacidad antioxidante. Sin embargo, su contenido de compuestos fenólicos y capacidad antioxidante existido un importante diferencia (Tabla 1), que fue posiblemente afectados por genética medio ambiente y las diferencias. Relación entre la capacidad antioxidante total y El contenido fenólico total. De la Tabla 1, el análisis estadístico de 26 de extractos de especias mostró 307-tapa (168.66/0.55) y 360 -- veces (14.38/0.04) diferencias en la capacidad antioxidante total (mmol TEAC/100 g de DW) y el contenido fenólico (g de GAE/100 g de DW), respectivamente. Correlación entre la capacidad antioxidante total dad (S) y contenido fenólico (X), se estableció como una ecuación (Y ) 10,131 X 1,3357) (Figura 1), y una muy significativa correlación lineal (R 2 ) 0,9613) se obtuvo. Tan altos R 2 Figura 1. Relación entre el total y la capacidad antioxidante total contenido de fenólicos metanólica extractos a partir del 26 de especias. Capacidad antioxidante y contenido fenólico, de 26 de Spice Extractos sugirió que el valor ABTS + actividad radical basureros podría ser creíble previsto sobre la base de la Folin Ciocalteu ensayo para el contenido total de fenólicos y directamente confirmó que la compuestos fenólicos en las 26 especies son responsables de sus capacidad antioxidante. Los resultados destacaron la importancia de compuestos fenólicos antioxidantes en el comportamiento de los extractos de especias y también indicó que los compuestos fenólicos contribuido significativamente a la capacidad antioxidante total. Los siguientes identificación y análisis de compuestos fenólicos más explica las relaciones entre estructura y actividad. Las relaciones entre el contenido total de fenólicos y antioxidante propiedades de muchas plantas (por ejemplo, hortalizas común, frutas y hierbas medicinales) se investigó en estudios anteriores (9, 10, 30, 31, 36). Algunos estudios obtenido buenos lineal positiva correlación, pero otros pobres tiene una correlación lineal, o incluso podría no explicar la relación entre el total de la actividad antioxidante y contenido fenólico. Nuestra experiencia y estudios (36) indicó que la relación era correlativo estrechamente asociado a la número de muestras de la prueba y los rangos de los valores de contenido total de fenólicos y actividad antioxidante y también influen - experimentado por los diferentes métodos de análisis. Varias muestras y muy pequeñas diferencias entre los valores máximo y mínimo obtenidos no fueron fáciles de obtener buenas correlaciones entre actividad antioxidante y contenido de compuestos fenólicos. Esto puede en parte explicar la razón por la que los pobres correlaciones entre antioxidante fenólicos y la actividad total se han obtenido en algunos anteriores estudios. Determinación cualitativa y cuantitativa y Análisis fenólica de los mandantes. Los diferentes compuestos fenólicos normalmente poseen comportamiento específico de cromatografía y UV con la característica espectral. Principales compuestos fenólicos en el especias de plantas a prueba en este estudio fueron preliminarmente y el sistema sistemáticamente identificados mediante RP-HPLC en comparación con DAD con auténtico fenólicos y normas en relación los datos de la literatura (36, 37, 42). Principales clases químicas y representante con stituents de compuestos fenólicos identificados en este estudio son resumen en la Tabla 1 y principalmente los ácidos fenólicos, flavonoides, compuestos fenólicos diterpenes, aceites aromáticos

volátiles, y taninos. Figura 2 muestra las estructuras químicas de los principales fenómenos - nolics identificados en la especia plantas. El cuadro 2 muestra cuantitativa los resultados de los análisis individuales de los principales fenólicos identificados en extractos de especias diferentes. Plantas de la especia en el Labiatae contienen muchas secundari metabolitos, tales como flavonoides, compuestos fenólicos terpenoides, hidroxi - Ácidos benzoico y hydroxyinnamic ácidos (22, 23, 25, 30, 43, 44). Figura 3 muestra los perfiles de HPLC de extractos metanólica de seis plantas de especias en el Labiatae. Según la UV espectros, el tiempo de retención (R No ), Auténtico y normas, los picos 15 en la Figura 3 se identificaron como ácido gálico (1), catequina (2), ácido cafeico (3), ácido p-cumarina (4), caffeoyl derivados (5 y 6), rosmarinic ácido (7), eugenol (8), epirosmanol (9), carnosol (10), timol (11), el carvacrol (12), rosmadial (13), carnosic ácido (14), y kaempferol (15). Aunque un gran pico (orégano) y otros picos de menor importancia (después de la I No ) 53 min) no se todavía completamente identificados por las normas relativas auténtico, que podría ser otro diterpenes fenólicos, flavonoides (flavonones y flavonoles), y compuestos aromáticos volátiles, que se confirmado por nuestro obtenidos cromatográfica y UV espectral datos y características analíticas fenólicos informó por Cuvelier et al. (44), Cai et al. (36), Sakakibara et al. (42), y Santos-Buelga y Williamson (37). La Figura 3 muestra que los seis extractos de especias en el Labiatae había un gran pico (7, rosmarinic ácido). El cuadro 2 muestra que todas las probado en el Labiatae especias contienen altas concentraciones rosmarinic de ácido, en su mayoría que van desde 1086 a 2563 mg/100 g de DW. Esto indicó que era el ácido rosmarinic dominante compuestos fenólicos en el Labiatae especias. Rosmarinic de ácido dos grupos de orto-dihidroxi (catecol estructuras) (Figura 2), que es la característica estructural más importante para un fuerte actividad antioxidante de compuestos fenólicos. Nuestros resultados de acuerdo con las de los Cuvelier et al. (44), Exarchou et al. (32), y Zheng y Wang (9), que informó de que el ácido se rosmarinic las más abundantes compuestos fenólicos identificados en la acetona extracto de salvia, orégano y tomillo. El rico en extractos de especias rosmarinic ácido había mayor actividad radical basureros. En este estudio, se identificaron ácidos fenólicos de la mayoría de las especias Labiatae extractos, como el ácido gálico, ácido cafeico y el ácido p-coumaric. También se identificaron los altos niveles de caffeoyl derivados (picos de 5 y 6) en orégano (1324 mg/100 g de DW), albahaca (380 mg/100 g de DW), y el romero (278 mg/100 g de DW). Debido a las estructuras de caffeoyl derivados son cerca de rosmarinic ácido, que tienen potentes radicales basureros actividad. Un nivel muy alto de caffeoyl derivados (1324 mg / 100 g de DW) y rosmarinic ácido (2563 mg/100 g de DW) orégano hizo la exposición más potente actividad entre los cinco prueba Labiatae especias. Ácido cafeico y el ácido gálico también han Figura 2. Estructuras de los principales compuestos fenólicos identificados en las especias. catecol estructura y exposición de a la actividad, pero su contenido eran bajos, que van desde 27 a 122 mg/100 g de DW (Tabla 2). Además, el total de la capacidad antioxidante de Labiatae extractos de especias debe ser en parte debido a la presencia de otros compuestos fenólicos, como compuestos fenólicos y aromáticos diterpenes compuestos volátiles. Según nuestra cromatografía / UV espectros de los datos y en comparación con el auténtico nivel y literatura (44), una serie de compuestos fenólicos diterpenes fueron identificados en el Labiatae especias, es decir, ácido carnosic, rosmanol, carnosol, y epirosmanol. Especialmente, romero y salvia figura de alto niveles de compuestos fenólicos diterpenes. Importes totales de los compuestos fenólicos diterpenes en los extractos de salvia y romero fueron 2.847 y 736 mg/100 g de DW, respectivamente (Tabla 2). La presencia de un estructura catecol (orto-dihidroxi grupos) en el anillo aromático del esqueleto diterpeno fenólicos (por ejemplo, ácido y carnósico Epiros-Manol) (Figura 2) es también un elemento estructural importante para la actividad antioxidante de los extractos de especias Labiatae. También, hemos detectado fenólicos aceites volátiles, como algunos compuestos aromáticos (por ejemplo, el timol, eugenol y carvacrol) en los extractos, en especial un alto nivel de timol (591 mg/100 g de DW) identificó en el extracto de tomillo (pico de 11 en Figura 3). El aromático compuestos con un solo grupo hidroxilo (Figura 2) había algunos actividad de captación de radicales, pero su contribución al total de capacidad antioxidante fue limitada. Los flavonoides identificados se También los componentes de menor importancia en las especias Labiatae, por ejemplo, flavonas (luteolina, apigenina, y sus glucósidos), flavonoles (naringenina Cuadro 2. de las Naciones UnidasPrincipales compuestos fenólicos individuales se cuantificaron por HPLC, en comparación con los estándares externos de las correspondientes fenólicos conocidos. bDatos de los derivados del ácido gálico (taninos hidrolizables) se expresaron como un juego. c Las pequeñas cantidades de conocidos / identificados los ácidos fenólicos (por ejemplo, el ácido clorogénico, ácido ferúlico y ácido vanílico), flavonoles (por ejemplo, la hesperetina y naringenin), flavonas (por ejemplo, apigenina y luteolina), flavonoides (por ejemplo, la quercetina y quercitrin), y la gran cantidad de desconocidos y no confirmados fenólicos ácidos y flavonoides fueron calculados en importes totales de los "otros ácidos fenólicos" y "otros flavonoides", y expresada en ácido cafeico y equivalentes de quercetina, respectivamente. El contenido de conocidos / identificados aceites volátiles (por ejemplo, anetol, estragol, y cinamil aldehídos) se calcularon como equivalente eugenol. Los importes totales de otros desconocidos / aceites volátiles identificados no fueron calculados. Capacidad antioxidante y contenido fenólico, de 26 de extractos de especias y sus glucósidos), y los flavonoides (catequinas). Las concentraciones de los flavonoides en la mayoría de las especias fueron relativamente bajos (Tabla 2).Aunque algunos flavonoides (por ejemplo, los flavonoides) son antioxidantes potentes dantes, los flavonoides identificados tenían una contribución relativamente pequeña a la capacidad antioxidante total de los extractos de especias, porque de sus bajas concentraciones. Clavo de olor pertenece a la familia Papaveraceae. El HPLC (análisis de la figura 4) mostró que un gran número de aceites volátiles (compuestos aromáticos) y los flavonoides

presentes en el clavo extracto de raíz. Picos mayores (3 y 4) y picos menores (6 y 8) a 370 nm fueron identificados como los glucósidos de flavonoles (3 y 4), quercetina (6), y kaempferol (8). Picos mayores (5 y 7) a 280 nm fueron identificados como eugenol (5) y acetil eugenol (7). En Además, el pico 1 fue fácilmente identificado como ácido gálico (1) usando su nivel auténtico. Yemas de clavo de olor también contiene tanino componentes. De acuerdo con nuestra experiencia y estudio anterior (36), muchos picos densa entre 14 y 25 minutos (máximo 2) nm obtenidos en nuestras condiciones de cromatografía (en 280 en Figura 4) fueron los rasgos típicos de derivados del ácido gálico, es decir, componentes taninos hidrolizables. El cuadro 2 muestra que el brote de clavo extractos tenían altos niveles de ácido gálico (784 mg/100 g de DW) y sus derivados (taninos, 2376 mg/100 g de DW) y algunos de flavonoides (419 mg/100 g de DW). Las moléculas de ácido gálico, flavonoides y taninos hidrolizables poseen hidroxilo muchos los grupos, especialmente los grupos de orto-dihidroxi (estructura catecol) con potente actividad de captación de radicales. Por lo tanto, con - contribuido significativamente a la mayor actividad antioxidante de clavo de olor brotes en este estudio. Eugenol y sus derivados contienen normalmente un grupo hidroxilo (Figura 2) y tienen relativamente más bajos radical actividad del barrido de otros compuestos fenólicos, con más de hidroxilo grupos. Sin embargo, existen niveles muy altos de aceites volátiles (eugenol, 9382 mg/100 g de DW, y eugenol de acetilo, 2075 mg / 100 g de DW) en los extractos de diente de yema (Tabla 2). Por lo tanto, eugenol, y sus derivados también hizo una contribución positiva importante a la actividad antioxidante de las yemas de clavo. Para las especias de la familia Lauraceae, principales constituyentes fenólicos en tres especies evaluadas fueron identificados como compuestos fenólicos aceites volátiles (cinnamaldeido y sus derivados), flavan-3-OLS (catequina derivados) y ácidos fenólicos, de acuerdo a la literatura (3) y la en comparación con las características relacionadas con UV espectral y comportamiento cromatográfico. Tabla 2 y los perfiles de HPLC (principales los picos) de dos extractos de canela (no mostrado) reveló que 2-hydroxycinnamaldehyde y derivados cinnamaldeido se dominante de los componentes aromáticos y ácidos fenólicos fueron menores los componentes de estas dos especies. Dos canela, especias figura mucho más altos niveles de aceites volátiles (componentes aromáticos) y de derivados de la catequina (media de ) 756 mg/100 g de DW) (Tabla 2) en comparación con el extracto de hoja de laurel. La catequina identificados y Figura 3. Perfiles de HPLC (280 nm) de los extractos de metanol de seis plantas de especias en la familia Labiatae. 1, ácido gálico, 2, catequina, 3, ácido cafeico, 4, p-cumárico; 5, me derivados caffeoyl, 6, II derivados caffeoyl; 7, ácido rosmarínico, 8, eugenol, 9, epirosmanol; 10, carnosol, 11, timol, 12, el carvacrol; 13, rosmadial, 14, ácido carnósico, y 15, kaempferol. Shan et al. componentes aromáticos que figuran los grupos hidroxilo, por lo que desempeñó el papel más importante en la mejora de captación de radicales la actividad de las especies de Lauraceae. Por otra parte, algunos flavonoides componentes (736 mg/100 g de peso seco) identificados en la hoja de laurel extracto, pero sus estructuras no estaban todavía dilucidado. Canela ladra (Cinnamomum cassia) por lo general contiene componentes taninos nentes (3), pero no hemos podido aislar e identificar bajo nuestro condiciones cromatográficas. Debido a que los extractos de canela había muy altos niveles de compuestos fenólicos y la fuerte actividad, los taninos (el carroñero radical más fuerte entre todos los com fenólicos naturales libras), posiblemente se produjo en las cortezas de canela. Por varias especias tradicional china, el anís estrella, el chino fresno espinoso, y extractos de nuez moscada, se identificaron también a tener de niveles muy elevados de fenólicos aceites volátiles como principal activo ingredientes, tales como anetol (5408 mg/100 g de DW) en estrella anís y estragol (5288 mg/100 g de DW) y otros volátiles aceites en fresno espinoso chino. Los flavonoides se detecta claramente en chino extracto de fresno espinoso (541 mg/100 g de DW), pero no de anís estrellado y los extractos de nuez moscada. Por otra parte, el chino espinoso cenizas que figura más ácidos fenólicos (190 mg/100 g de DW) que anís estrellado y nuez moscada. Por lo tanto, el chino extracto de fresno espinoso tenía una capacidad antioxidante mucho más alto (36,9 g de mmol/100 DW) de anís estrellado (20,3 g de mmol/100 DW) y la nuez moscada (20,0 g de mmol/100 DW). Negro, blanco, y pimientos verdes en el Piperaceae tres las diferentes formas de los productos de la pimienta. Pimienta verde se obtiene de bayas inmaduras que han madurado completamente. Pimienta Negro se produce por el sol convencionales de secado de los frutos maduros de pimiento verde. Análisis por HPLC mostró que estos tres extractos de especias tenían similares perfiles de pico. En comparación con el espectro UV relacionados con características y comportamiento cromatográfico, los picos principales fueron identificados como los compuestos volátiles (componentes principales) y picos menores fueron identificados como una pequeña cantidad de ácidos fenólicos, ácidos, por ejemplo, protocatéquico, vanílico, cafeico y ferúlico. Mesa 2 muestra que algunas amidas fenólicos también fueron identificados en tres extractos de pimienta (media de ) 427 mg/100 g de DW). De la tabla 1, el contenido fenólico total de tres extractos de pimienta fueron relativamente inferiores y su capacidad antioxidante total eran más débiles. Esto sugiere que los principales componentes en los tres extractos pertenecían a nonphenolic compuestos volátiles, que había débil actividad de captación de radicales, no como los volátiles fenólicos compuestos en el clavo de olor, canela, anís estrella, nuez moscada, y Fresno espinoso chino. De acuerdo con el LSD 0,05 los valores, las diferencias en la capacidad antioxidante total de los tres extractos de la pimienta se no significativo, pero las diferencias en su contenido total de fenólicos existía. También se informó de que los glucósidos fenólicos y ácido glucósidos flavonoides fueron aisladas e identificadas en los pimientos (45, 46). Sin embargo, los componentes de menor importancia no fueron identificados de crudo de extractos de pimiento y metanol en nuestra cromatografía de condiciones. Además, los aceites volátiles de los extractos de pimienta no

estaban bien aisladas e identificadas por RP-HPLC. De cinco extractos de especias de la familia de las umbelíferas se identificaron por cochromatography con las normas auténticos y por com - comparación con los datos de la literatura (36, 41, 42). Se encontró que contenidas, principalmente ácidos fenólicos, flavonoides y volátiles compuestos. Estas categorías fenólicos identificados fueron similares a los de las especias Labiatae. Las cinco especias Umbelliferae extractos contenía más flavonoides (media ) 183 mg/100 g de DW) que las especias seis Labiatae (media ) 49 mg/100 g de DW) (Tabla 2). Sin embargo, su capacidad antioxidante total y el total fenólicos fueron significativamente más bajos que los de la Labiatae. Se debe al hecho de que (1) los extractos de cinco especias en las umbelíferas se constató que no tienen ácido rosmarínico, con actividad antioxidante muy poderoso, que estaba presente en cantidades significativas en las especias Labiatae, (2) Diter fenólicos penes no se detectaron en las especias Umbelliferae, y (3) la aceites volátiles identificados en las especias Umbelliferae podría ser nonphenolic compuestos volátiles, que no tienen SCAV radical - enging actividad o actividad muy baja. Además, una cantidad mínima de cumarina, se detectaron en la alcaravea y el comino, pero su la contribución al total de la capacidad antioxidante fue insignificante. Jengibre y chiles son las especias popular. Los bajos niveles de fenólicos Los ácidos se detectaron tanto en sus extractos. Picos principales de HPLC perfiles de los aceites volátiles se fenólicos (componentes picante). Gingerol y shogaol (análogos gingerol) fueron los principales componentes de picante en el extracto de jengibre (36), mientras que la capsaicina y la capsaicinol (capsaicinoides) fueron las principales sustancias picantes en el extracto de chile (46). Sin embargo, los picos más importantes de extracto de chile no estaban bien separados en nuestras condiciones cromatográficas. En comparación con las normas auténtica y literatura relacionada, hemos utilizado RP-HPLC a la vez identificar y cuantificar un número limitado de compuestos fenólicos conocidos y los principales categorías fenólicos del 26 de extractos de especias de crudo. Sin embargo, la extractos de especias contienen compuestos fenólicos complejos, incluidos altos niveles de aceites volátiles. Aunque RP-HPLC puede ser utilizado para el aislamiento, identificación y cuantificación de fenólicos compuestos volátiles (por ejemplo, compuestos fenólicos y terpenoides aromáticos mandantes), GC y GC -- De MS son las mejores herramientas de análisis para la identificación y cuantificación de compuestos volátiles. Así, la identificación y cuantificación de los otros no identificada, desconocido componentes fenólicos (especialmente aceites volátiles) en el extractos de especias y su elucidación estructural se justifica a través de una multitud de enfoques, incluyendo la caracterización de junto con los métodos cromatográficos y espectroscópicos técnicas estructurales (GC, GC-- MS, LC -- MS, y RMN). Nuestros resultados muestran que muchas especies son ricos en fenólicos mandantes ydemostrado una buena capacidad antioxidante. Qualitivos y el análisis cuantitativo de los principales compuestos fenólicos individuales en los condimentos que pueden ser útiles para revelar la estructura de -- Actividad las relaciones de compuestos fenólicos antioxidantes en las especias y también Figura 4. De HPLC - DAD perfiles de extracto metanólico de clavo (Eugenia caryophylata Thunb.) a 280 y 370 nm. 1, ácido gálico, 2, tanino mandantes, 3 y 4, glucósidos de flavonoles, 5, eugenol, 6, quercetina, 7, acetil eugenol, y 8, kaempferol. Capacidad antioxidante y contenido fenólico, de 26 de extractos de especias útil para explicar las relaciones entre antioxidante total la capacidad y el contenido total de fenólicos en las especias. A través de nuestra sistemáticamente estudio comparativo de 26 especies, algunas especias, con de alto nivel de compuestos fenólicos, como el clavo de olor, canela, orégano, salvia, el tomillo y el romero, se proyectaron al uso como excelente libre eliminadores de radicales y potentes antioxidantes naturales fenólicas la exploración comercial.