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Aminoácidos, péptidos y proteínas Dra. Francis Rodríguez Departamento de Ciencias Fisiológicas Facultad de Ciencias Médicas UNAH [email protected] www.bioquimicaunahteg.blogspot.com

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Page 1: 5 aa y proteínas

Aminoácidos, péptidos y proteínas

Dra. Francis Rodríguez Departamento de Ciencias Fisiológicas Facultad de Ciencias Médicas UNAHfrancis.rodriguez@unah.edu.hnwww.bioquimicaunahteg.blogspot.com

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Funciones de los AA

• Sirven como bloque de construcción de proteínas.– Algunos se encuentran libres en plasma.

• Biosíntesis de porfirinas, purinas, pirimidinas y urea.• Neurotransmisión

• Intermediarios de ciertas rutas metabólicas: citrulina, ornitina

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Naturaleza química de los AA• Son ácidos carboxílicos que contienen un grupo

amino.– Carbono alfa: C al cual están unidos el grupo COOH y

el NH2

– Grupo R: cadena lateral, representa una variedad de estructuras.

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Clasificación de los AA1. AA alifáticos cuyo grupo R es no polar.2. Alifáticos cuyo grupo R es polar pero no tiene

carga.3. AA alifáticos cuyo grupo R es polar y se encuentra

en estado de ión positivo.4. AA alifáticos cuyo grupo R es polar y se encuentra

en estado de ión negativo.5. AA aromáticos.

Nelson y Cox. Lehninger principles of Biochemistry, 5th ed. 2009.

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Clasificación de los AA

Aromáticos(Phe, Tyr, Trp)

Alifáticos

No polares(Gly, Ala, Val, Leu, Met, Ile)

Polares

Sin carga(Ser, Thr, Cys, Pro, Asn,

Gln)

Con carga +(Lys, Arg, His)

Con carga –(Asp, Glu)

Nelson y Cox. Lehninger principles of Biochemistry, 5th ed. 2009.

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AA con cadenas laterales aromáticasüRelativamente no polares.üTodos participan en interacciones hidrofóbicas.üEl grupo hidroxilo de la tirosina es importante en reacciones enzimáticasüEl Trp, Tyr y en menos extensión la Phe absorben luz UV. (útil en la caracterización de proteínas en investigación)

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AA con cadenas laterales alifáticas(No polares)

Tienden a agruparse en las proteínas estabilizando las es t ruc tu ras med ian te interacciones hidrofóbicas

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• Son más hidrofílicos por sus grupos polares: -OH, -SH, amida que establecen enlaces con el agua.

AA con cadenas laterales alifáticas(Polares, sin carga)

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• Cadena lateral ionizable cerca del pH 7.– Carga neta es positiva.

• La His facilita muchas reacciones enzimáticas actuando como aceptor/donador de protones.

AA con cadenas laterales alifáticas(Polares, con carga positiva)

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AA con cadenas laterales alifáticas(Polares, con carga negativa)

• Cadena lateral ionizable cerca del pH 7.

• Carga neta es negativa.• Tienen un segundo grupo carboxilo.

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Nomenclatura de los AA• Nombres triviales o comunes, por ejemplo:

– Asparagina: 1° AA descubierto en 1806 (“Asparagus”)

– Glutamato: “wheat” gluten

– Tirosina: queso (del griego tyrus)

– Glicina: dulce (del griego glykos)

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Nomenclatura de los AA

Nelson y Cox. Lehninger principles of Biochemistry, 5th ed. 2009.

Sistema de 1 letra

Sistema de 3 letras

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Aminoácidos esenciales

• Esenciales sólo en la niñez:– His– Arg

• Esenciales durante toda la vida:– Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Thr, Trp, Val

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Estructura de los AA• En la naturaleza existen más de 300 AA.

• Sin embargo, las proteínas que sintetiza el cuerpo humano están conformadas por sólo 20 AA.

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Estructura de los AA:El aminoácido # 21

• Selenocisteína: – Encontrado en proteínas muy importantes como algunas

reductasas y peroxidasas que participan en reacciones de transferencia de electrones.

– Un átomo de selenio reemplaza el sulfuro en un residuo de cisteína.

– Es introducido en las proteínas durante la traducción.– Se le conoce como el “AA # 21”– No es codificado por un codón de 3 letras como sucede

con los otros 20 AA.

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Estructura de los AA• Estereoisomería:– El carbono alfa es un centro quiral.– Los 4 grupos unidos al C-α pueden tomar únicamente

dos rearreglos espaciales.– Los AA tienen dos posibles estereoisómeros: L-AA y D-

AA.• Enantiómeros

– Excepto la glicina

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Estructura de los AA• Los AA que forman las proteínas sólo pertenecen a las

formas del enantiómero L, aun se desconoce el motivo por el que se ha elegido esta forma durante la evolución.

• Como excepción existen formas D en algunos péptidos que forman las paredes bacterianas y ciertos antibióticos peptídicos.– La serie D se forma a partir de la serie L por acción de la

enzima racemasa.

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AA poco comunes pero con funciones importantes

• Se forman por modificación de los residuos que ya están incorporados en un polipéptido.

• 4-hidroxiprolina• 5-hidroxilisina: proteínas de la pared celular (plantas), y

en colágeno (animales)• 6-N-metil-lisina: constituyente de la miosina• γ-carboxiglutamato: proteína de la coagulación

(protrombina) y otras proteínas de unión a Ca++.• Desmosina: derivado de 4 residuos de Lys, se

encuentra en la elastina.

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Los AA pueden actuar como bases o como ácidos

• Zwitterion: ión dipolar que actúa como base o como ácido.

• Punto isoeléctrico (pI): pH al cual la carga neta es cero.

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Funciones de los péptidos • En el sistema neuroendocrino: como hormonas,

neurotransmisores, neuromoduladores, y factores liberadores de hormonas.

• En reacciones de detoxificación del organismo. • En ciclo celular y apoptosis.• Agentes antimicrobianos: son parte de la inmunidad

innata• Inhibidores de enzimas: ECA• Péptidos sintéticos son usados como sustratos de

enzimas, antibióticos y agentes antitumorales

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Funciones de las proteínas

• Componentes estructurales.• Transportadores de sustancias.• Hormonas.• Catalizadores de reacciones biológicas. • Favorecedores de procesos de luminiscencia.• Componentes del esqueleto intracelular o citoesqueleto.• Elementos fundamentales en la contracción muscular

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Funciones de las proteínas

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Péptidos y proteínas • Polímeros de aminoácidos.• 2, 3 hasta miles de residuos de AA.– Oligopéptidos: pocos AA– Polipéptidos: muchos AA

• Unidos por un enlace peptídico

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Enlace peptídico• Es la unidad primaria estructural de las

cadenas polipeptídicas.

• Reacción de condensación entre el grupo carboxilo de un AA y el grupo amino de otro que produce un enlace amida (enlace covalente).

• Extremo amino terminal• Extremo carboxilo terminal

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Proteínas • Aprox el 20% del peso húmedo de la célula lo constituyen los

AA y proteínas.

• Un pequeño cambio, como la sustitución de un AA por otro, puede ocasionar la aparición de funciones no compatibles con el metabolismo y desarrollo celular.

• La secuencia de una proteína está determinada genéticamente.

CARRETERA CARRETIRA E por I

CORREO CORREA O por A

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Clasificación de las proteínas Por el número de subunidades o cadenas polipeptídicas:1. Una sola cadena polipeptídica: proteína monomérica.2. Dos o más cadenas asociadas de manera no covalente:

proteínas multiméricas o multisubunidades.– Oligoméricas: con pocas subunidades y éstas son llamadas

protómeros.– Por ejemplo: la hemoglobina es un tetrámero (2α 2β) o un dímero

de protómeros αβ

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Clasificación de las proteínas Por sus constituyentes:• Proteínas simples: sólo AA– Ejemplo: Ribonucleasa A y quimotripsina

• Proteínas conjugadas: asociadas de manera permanente a componentes químicos además de los AA.– Grupo prostético: parte que no es AA. Tiene un rol importante en

la función biológica.– En base a la naturaleza química de los g. prostéticos:

lipoproteínas, glicoproteínas, metaloproteínas, etc.– Algunas proteínas contiene más de un g. prostético

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Proteínas conjugadas

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Clasificación de las proteínas Por su función:• Proteína globular: su función principal es la

regulación celular.– Ejemplo : enz imas y pro te ínas regu ladoras .

(hemoglobina, albumina, etc)

• Proteína fibrosa: forman parte de estructuras celulares o tejidos. – Ejemplo: colágeno, elastina, queratina, proteínas del

citoesqueleto, etc.

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Sección transversal del cabelloalfa-queratina

Estructura del colágeno

Estructura de la sedaTelaraña (fibroína)

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Estructura proteica • Conformación: rearreglo espacial de átomos en

una proteína.

– Las conformaciones existen bajo las condiciones termodinámicamente más estables (menor energía libre de Gibbs)

• Proteínas nativas: proteínas en cualquiera de sus conformaciones plegada y funcional.

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Niveles de organización de las proteínas

Estructura 1°Secuencia de AA

Estructura 2°Rearreglos de los AA

Estructura 3°Plegamiento 3D del polipéptido

Estructura 4°Proteína con 2 o más subunidades

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Estructura primaria • Se refiere a la secuencia de AA.• Estabilizada principalmente por enlaces peptídicos y

puentes disulfuro (Cys).• Cada proteína tiene un número y secuencia de AA

distintiva.• Determina cómo se pliega en su estrutura 3D y esto

determina la función de la proteína.• Ejemplo de proteínas únicamente con estructura 1°:

insulina, vasopresina (ADH), colecistoquinina, gastrina y secretina.

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Estructura primaria

• Brinda información:– Estructura 3D y la función de la proteína.– Ubicación celular: citoplasma, núcleo o membrana.– Evolución de la vida en el planeta.– Similitud en la secuencia de AA sirve para ubicar una

proteína en una familia. • Dominio: corta secuencia de AA que define una proteína.

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Estructura tridimensional de las proteínas

• La estructura 3D de una proteína es determinada por la secuencia de AA.

• La función de la proteína depende de la estructura.• Usualmente la estructura es estable.• Las fuerzas más importantes que estabilizan

estructuras específicas son interacciones no covalentes.

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Estructura secundaria• Rearreglo espacial de los principales átomos de un

segmento de la cadena polipeptídica, sin obviar la conformación de sus cadenas laterales o su relación con otros segmentos.– Alfa hélice – Hoja plegada beta – Giro beta – “Random coil” o no definida*

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Estructura 2°: alfa-hélice• Es muy común, es el rearreglo más simple

que una cadena polipeptídica puede asumir.

• Los g. R tienden o orientarse hacia el exterior de la hélice.

• Cada vuelta incluye 4 AA.• En todas las proteínas el giro de la hélice

es hacia la derecha.• Estabilizada por puentes de H.• Colágeno y alfa-queratina.

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Estructura 2°: α-hélice

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Estructura 2°: hoja plegada β

• Estructura más extendida que la anterior.

• Estabilizada por puentes de H.

• Los AA no están cercanos.

• El esqueleto de la proteína se ordena en zig-zag.

• Fibroína (fam de β-queratinas) y en la seda.

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Estructura 2°: hoja plegada β

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Estructura 2°: giros β• Común en proteínas globulares. Permiten un cambio de

180° en el sentido de la cadena polipeptídica.• Puente de H entre el AA 1 y AA 4• Generalmente se encuentran en la superficie de la proteína.• Menos comunes son los giros γ: entre 3 AA.

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Estructura terciaria • Estructura tridimensional de todos los átomos en una

proteína.• Interacción entre residuos más alejados en la secuencia de

AA (PLEGAMIENTO).

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Plegamiento de proteínas• Permite aproximación de cadenas laterales de

residuos distantes.

• Estructuras 3D adecuadas para la interacción con otras moléculas.

• En la célula, este proceso ocurre durante y después que las proteínas son sintetizadas en los ribosomas.– Facilitado por proteínas chaperonas.

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Degradación de proteínas • No específica: lisosoma• Específica: vía de la ubiquitina.– Es una proteína pequeña, de 76 AA,

a l t a m e n t e c o n s e r v a d a e n eucariotas.

– Secuencia PEST (Pro, Glu, Ser, C y s ) e s l a s e ñ a l p a r a l a degradación por esta vía.

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Estructura cuaternaria• Proteínas con varias subunidades.• Tienen un papel regulatorio.• La unión de pequeños componentes

puede producir cambios en la actividad.• Multímero • Oligómero • Protómero

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Estructura 4°• Homotípicas: asociación de cadenas polipeptídicas

idénticas o casi idénticas• Heterotipicas: interacciones entre subunidades con

estructuras muy distintas.

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Estabilidad de la estructura 3° y 4°Esta conformación se mantiene estable gracias a la

existencia de enlaces entre las cadenas laterales (g. R) de los AA. Aparecen varios tipos de enlaces:

• Los puentes de hidrógeno• Interacciones de Van der Waals• Los puentes eléctricos entre AA de carga diferente

llamados también “atracciones electrostáticas”• Las interacciones hidrófobas formación de un núcleo

o interface hidrofobico • Puentes disulfuro

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Desnaturalización de las proteínas• Es una modificación estructural que conduce a la pérdida de la función

proteica. • Pérdida de las estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y

cuaternaria), quedando la cadena polipeptídica reducida a un polímero estático sin ninguna estructura tridimensional fija.

• La desnaturalización provoca diversos efectos en la proteína:

1. Cambios en las propiedades hidrodinámicas de la proteína: aumenta la viscosidad y disminuye el coeficiente de difusión

2. Una drástica disminución de su solubilidad, ya que los residuos hidrofóbicos del interior aparecen en la superficie

3. Pérdida de las propiedades biológicas

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Desnaturalización • Los agentes que provocan la desnaturalización de una proteína se

llaman agentes desnaturalizantes. Se distinguen agentes físicos (T°) y químicos (detergentes, disolventes orgánicos, pH, fuerza iónica).

• Como en algunos casos el fenómeno de la desnaturalización es reversible, es posible precipitar proteínas de manera selectiva mediante cambios en:a. Polaridad del disolvente b. Fuerza iónicac. pHd. Tº

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Referencias bibliográficas1. Lehninger Principles of Biochemistry. 5th edition.

2009. Chapter 1: The Foundations of Biochemistry.2. Harper´s Illustrated Biochemistry. 28th edition.

2009. Capítulo 1: Bioquímica y Medicina.3. Bioquímica: Conceptos esenciales. 2010. Capítulo

4 y 5: Aminoácidos y proteínas.4. Bioquímica: la ciencia de la vida. 2° ed. 2007.