5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)
TRANSCRIPT
![Page 1: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/1.jpg)
PROCEDIMIENTO LABORATORIAL PARA
AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE HONGOS
M. Sc. Roberto Ventura FloresBiólogo – Microbiólogo
![Page 2: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/2.jpg)
DIAGNÓSTICO MICOLÓGICO Examen directo por microscopía, pruebas inmunológicas o
técnicas genéticas. Aislamiento del agente de diversos sitios anatómicos o fluidos
corporales. Respuesta de anticuerpos específicos contra el patógeno.
![Page 3: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/3.jpg)
MUESTRAS MICOLOGICASMICOSIS SUPERFICIALES: Dermatofitos: Trichophyton
Microsporum y Epidermophyton Pitiriasis versicolor: Malassezia 1 Piedras: Trichosporom ovoides,
T. inkin y T. cutaneum. Piedraia hortae. Tiña negra: Hortaea werneckii. 1
MICOSIS OPORTUNISTAS:*Candidiasis: C. albicans, 1,3,4,5,7,8,11
*Criptococosis: C. neoformans. 4,5,6,7,8,10
*Neumosistosis: P. jirovecii*Zigomicosis: Rhizopus oryzae,
Mucur circinelloides*Aspergillus: A. fumigatus, A. niger, A. flavus, a terreus, etc.
MICOSIS SISTEMICAS O PROFUNDAS Coccidioidomicosis: Coccidioides
immitis y C. posadasii Histoplasmosis: H. capsulatum Paracoccidioidomicosis: P. brasiliensis Blastomicosis: Blastomysis dermatitidis
MICOSIS SUBCUTÁNEAS: Micetoma: Nocardia, Streptomyces, 4, 10
Esporotricosis: S. schenckii. 1, 4, 10 Cromoblastomicosis: Fonsecaea
pedrosoi y Cladophialophora carrionii
1. Piel (escamas)2. Pelo3. Uña4. Exudado5. Esputo6. Lavado bronquiales7. LCR8. Orina9. Medula ósea10. Frag. de biopsia11.Sangre12. Heces
1, 2, 3
2
1*
1. 4, 5, 6
4, 5, 7, 10
4,5,6,7,9,10
4,5,6,7,8,10
4,5,6,10
5,6
4,5,6, 12
![Page 4: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/4.jpg)
DIAGÓSTICO DIRECTO DE RASPADO DE PIEL
ARTROCONIDIASKOH
Se observa BLASTOCONIDIASCompatibles con Malassezia
Azul de Lactofenol
![Page 5: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/5.jpg)
CULTIVO DE RASPADO DE PIEL
Sabouraud
Diagnostico:Dermatofito
30°CT°Ambiente
![Page 6: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/6.jpg)
CULTIVO DE MUESTRAS DE PELO
Diagnostico:Dermatofito TrichosporumPiedraia ¿?
30°CT°Ambiente
Sabouraud
![Page 7: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/7.jpg)
DIAGNOSTICO DIRECTO DE ONICOMICOSIS
ARTROCONIDIAS
KOH
![Page 8: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/8.jpg)
CULTIVO DE MUESTRAS DE UÑA
Diagnostico: Dermatofito candidiasis
30°CT°Ambiente
Sabouraud
![Page 9: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/9.jpg)
EXUDADO
MICOSIS SUPERFICIALES: Dermatofitos: Trichophyton
Microsporum y Epidermophyton Pitiriasis versicolor: Malassezia Piedras: Trichosporom ovoides,
T. inkin y T. cutaneum. Piedraia hortae. Tiña negra: Hortaea werneckii
MICOSIS OPORTUNISTAS:*Candidiasis: C. albicans, etc.*Criptococosis: C. neoformans*Neumosistosis: P. jirovecii*Zigomicosis: Rhizopus oryzae,
Mucur circinelloides*Aspergillus: A. fumigatus, A. niger, A. flavus, a terreus, etc.
MICOSIS SISTEMICAS O PROFUNDAS Coccidioidomicosis: Coccidioides
immitis y C. posadasii Histoplasmosis: H. capsulatum Paracoccidioidomicosis: P. brasiliensis Blastomicosis: Blastomysis dermatitidis
MICOSIS SUBCUTÁNEAS: Micetoma: Nocardia, Streptomyces, etc. Esporotricosis: S.schenckii Cromoblastomicosis: Fonsecaea
pedrosoi y Cladophialophora carrionii
![Page 10: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/10.jpg)
CULTIVO DE EXUDADOS
30°CT°Ambiente
Sabouraud
![Page 11: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/11.jpg)
EXAMEN DIRECTO Y CULTIVO DE ORINA
30°CT°Ambiente
Sabouraud
CENTRIFUGADO
![Page 12: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/12.jpg)
30°CT°Ambiente
Sabouraud
CULTIVO DE LCR
Detección de antígenos capsulares: Técnica: aglutinación de partículas de látex sensibilidad con anticuerpos monoclonales Específicos anti C. neoformans. Sensibilidad en LCR: > 95%
Sensibilidad cercana al 100%
OTROS: Histoplasmosis: H. capsulatum Paracoccidioidomicosis: P. brasiliensis Blastomicosis: Blastomysis dermatitidis
![Page 13: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/13.jpg)
CULTIVO DE BIOPSIAS
30°CT°Ambiente
Sabouraud
![Page 14: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/14.jpg)
TECNICA DE MICROCULTIVO
30°/ Tiempo variable
Cultivo positivo:DERMATOFITO
Cultivo positivo:Sporothix sp.
Cultivo positivo:Aspergillus sp.
![Page 15: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/15.jpg)
MICROCULTIVO: IDENTIFICACION DERMATOFITOS
Microsporum
Diferenciar microconidios de macroconidios
Trichophyton
Epidermophyton
![Page 16: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/16.jpg)
MICROCULTIVO: IDENTIFICACION Sporotrix schennkii
simpoduloconidios
![Page 17: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/17.jpg)
MICROCULTIVO: IDENTIFICACION Aspergillus
Aspergillus flavus Aspergillus fumigatus
vesicula
Aspergillus niger Aspergillus terreus
fiálides
conidióforo
Microconidios
![Page 18: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/18.jpg)
SEROLOGIA
MICOSIS SUPERFICIALES: Dermatofitos: Trichophyton
Microsporum y Epidermophyton Pitiriasis versicolor: Malassezia Piedras: Trichosporom ovoides,
T. inkin y T. cutaneum. Piedraia hortae. Tiña negra: Hortaea werneckii
MICOSIS OPORTUNISTAS:*Candidiasis: C. albicans, etc.*Criptococosis: C. neoformans*Neumosistosis: P. jirovecii*Zigomicosis: Rhizopus oryzae,
Mucur circinelloides*Aspergillus: A. fumigatus, A. niger, A. flavus, a terreus, etc.
MICOSIS SISTEMICAS O PROFUNDAS Coccidioidomicosis: Coccidioides
immitis y C. posadasii Histoplasmosis: H. capsulatum Paracoccidioidomicosis: P. brasiliensis Blastomicosis: Blastomysis dermatitidis
MICOSIS SUBCUTÁNEAS: Micetoma: Nocardia, Streptomyces, etc. Esporotricosis: S.schenckii Cromoblastomicosis: Fonsecaea
pedrosoi y Cladophialophora carrionii
(β -1,3 D-GLUCANOS
![Page 19: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/19.jpg)
DETERMINACION DE β -1,3 D-GLUCANOS
PRODUCTOS LIBERADOS EN ALGUNAS INFECCIONES FUNGICAS:
CANDIDIASIS
NEUMOCISTOSIS
ASPERGILOSIS
SE REALIZA EN SUERO SANGUINEO POR METODO DE ELISA Y SU
POSITIVIDAD SÓLO ES SUGESTIVO DE INFECIÓN FUNGICA.
![Page 20: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/20.jpg)
PRINCIPIO Y APLICACION
AGAR CROMOGENICO CANDIDA es un medio selectivo y de
diferenciación para el aislamiento de hongos. Con la inclusión de sustratos
cromógenos en el medio, las colonias de C. albicans, C. tropicalis y C. krusei
producen colores diferentes, lo que permite la detección directa de estas
especies de levaduras en la placa de aislamiento.
En el medio la glucosa es el carbohidrato fermentable aporta carbono y
energía. La Peptona aporta nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos
esenciales para el crecimiento. El Cloranfenicol es un antibiótico que ayuda
en el aislamiento de hongos patógenos de muestras clínicas altamente
contaminadas. La Mezcla de cromogenicos permite la identificación y la
diferenciación de las 3 especies de candidas.
Cultivo en medios cromogénicos
![Page 21: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/21.jpg)
![Page 22: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/22.jpg)
La región genómica más frecuentemente utilizada para detectar ADN
fúngico e identificar especies, es la que incluye el complejo ribosomal
(genes 18S, 5.8S y 28S). Estos genes contienen secuencias conservadas
comunes a todos los hongos y también, dominios variables y regiones
espaciadoras internas (ITS), altamente variables.
BIOLOGIA MOLECULAR:
PCR
PCR: Es una síntesis in
vitro, exponencialmente
progresiva, de una
secuencia (target) de ADN
![Page 23: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/24.jpg)
![Page 25: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/26.jpg)
Componentes: Oligonucleótidos (cebadores) Tampón (buffer) ADN polimerasa termoestable Desoxinucleótidos (dNTPs) Cloruro de Magnesio (Mgcl2) ADN molde
![Page 27: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/27.jpg)
![Page 28: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/28.jpg)
![Page 29: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/29.jpg)
![Page 30: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/30.jpg)
![Page 31: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/31.jpg)
![Page 32: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/32.jpg)
![Page 33: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/33.jpg)
![Page 34: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/34.jpg)
10
![Page 35: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/35.jpg)
Segunda especialidad en Microbiología Clínica
![Page 36: 5. proce-laboratorio-aislamientos-hongos (2)](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021422/58a911471a28ab6d2d8b578b/html5/thumbnails/36.jpg)
GRACIAS