实验技术—在体脑组织推挽灌流与微透析
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在体脑组织推挽灌流与微透析
生理实验技术介绍( 2)
前 言 在研究神经系统的功能时必须了解神经细胞之间信
息传递的过程。因此,常常需要对中枢神经系统内神经细胞外环境中的化学物质的含量进行在体采样或测量。这类实验中常用的技术方法有:
推挽灌流
在体脑组织微透析技术
脑组织推挽灌流 是一种采集特定脑区或核团的神经细胞外液中所含
有的神经化学物质的方法。
实验装置
灌流液泵和进液系统 灌流探头 灌流液收集系统
灌流液泵和进液系统恒速泵 进液管
灌流液为人工脑脊液, 36-37摄氏度。
灌 流 探 头 并列式推挽灌流探头 同心式推挽灌流探头
灌流液收集系统出液管 收集器
收 集 样 品 检 测脑内灌流时收集的样品
小分子的神经递质
分子较大的化学物质(蛋白质、多肽)
通过高效液相层析进行测定
应用放射免疫测定的方法进行测定
脑 内 微 透 析
微透析原理
微透析探头
注意事项
微 透 析 原 理在立体定位仪三维电极移动架的引导下将微透析探头插入特定脑区或核团,在微透析泵的推动下透析液通过进液管到达特定脑区或核团的脑组织,持续对该部位的脑组织进行微透析,然后微透析液通过出液管流入收集器。
选用通透性不同的透析膜,选择性地允许分子量在某一范围内(小于透析膜孔径)的化学物质通过透析膜顺浓度梯度进入灌流液中
微 透 析 探 头水平式垂直式
注 意 事 项
透析液:人工脑脊液
透析速度: 0.1-10微升 /分钟
测定对象:脑内分子较小、含量极低的神经化学物质(去甲肾上腺素、多巴胺、脑啡肽等)。
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