第十六章
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第十六章. 抗生素类药物的分析. 第一节 概述. 一、抗生素药物的定义和特点. 定义:抗生素 是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。. 抗生素的来源:. 1. 生物合成(发酵). 2. 化学合成或半合成. 特点:. 同系物多异构体多降解物多. 1. 化学纯度较低. 2. 活性组分易发生变异. 3. 稳定性差. 二、抗生素的分类. 分类 (按结构与性质): β – 内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、多烯大环类、多肽类、苯烃胺类、蒽环类、其他抗生素类. 三、抗生素药物的细菌耐药性. 耐药性的种类;耐药的机制. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
(二)检查:
(一)鉴别:官能团的呈色反应
光谱法、色谱法、生物学法
1. 影响产品稳定性的指标:水分
2. 控制有机和无机杂质的指标3. 与临床安全性密切相关的指标 : 异常毒性、细菌内毒素、热原、降压物质、无菌
4. 其他检查项目
( 三 ) 含量或效价测定(一)微生物检定法 : 管碟法和浊度法
测定抗生素抑菌或杀菌的能力,结果以效价表示
优点 1 、与临床效果一致2 、灵敏度高3 、干扰物质少
缺点 1 、操作繁琐2 、培养时间长2 、测定误差大
2 、 UV 法
A,Emin,max,, %cm
光谱图
样品、分解产物
头孢氨苄 λmax = 262nm
青霉素 V 钠 A280nm/A264nm = 1.30~1.50
苯唑青霉烯酸苯唑青霉素 H
Cu2
+ nmA
α- 氨基、伯胺某些羟基胺类 酮式
烯醇式
茚三酮
茚三酮
缩合
蓝紫色
+
H2O
C NCH2R
C OH2
R
CHH2N COOH2
OHC
CO
CO
C
OH
NH2C
CO
CO
CO
C
OH
CNC
CO
CO
CO
C
OH
CHRNC
CO
CO
CO
3. 与重氮苯磺酸反应 : 酚羟基
S
N
OH
CONHCHCONHH5C2
O O
NN
OCOOH
CH2S N
NN
N
CH3
NClNNaO3SOH
(偶合)
N
NN
N
CH3
S
N
OH
CONHCHCONHH5C2
O O
NN
OCOOH
CH2S
NNNaO3S
如:头孢他啶聚合物的测定
固定相:葡聚糖凝胶 G-10( 40120µm ) 流动相 A : 3.5%硫酸铵的 0.1mol/L磷酸盐缓冲液 流动相 B :水 检测波长: 254nm
对照品溶液:头孢他啶对照品 100µg/ml
系统适用性试验:理论塔板数和拖尾因子用 1mg/ml
蓝色葡聚糖 2000、流动相 A 测定;重复性用对照品溶液、流动相 B 测定。 N 不低于 900,拖尾因子 <2,峰面积的 RSD应小于 5.0%。测定方法:进样供试液,用流动相 A ;进样对照液,用流动相 B 。以外标法计算,含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得超过 0.3%。
2 、有关物质和异构体 头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查反相 HPLC
法 固定相: ODS;流动相: 0.2mol/L磷酸二氢铵 -
甲醇( 62:38 ) 3 、吸光度 杂质吸光度、药物吸光度4 、有机溶剂 气相色谱法测定溶剂残留量5 、结晶性 偏光显微镜法和 X射线粉末衍射法
庆大霉素 C 复合物 庆大霉素 C1 R=H R1 、 R2=CH3
庆大霉素 C2 R=R2=H R1=CH3
庆大霉素 C1a R 、 R1 、 R2=H
庆大霉素 C2a R=CH3 R1= R2=H
性质:1. 碱性 多与硫酸成盐
2. 溶解性
3. 旋光性
4. 苷的水解和稳定性:酸性、碱性均易水解
链霉素 pH5~ 7.5 ;庆大霉素 pH2~ 12 稳定
5. UV :链霉素 :230nm 、庆大霉素等无
NH
CH3NH
NH
NH C NH2HO
OHOHNHCH2N
O
O
CH3
OHCHO
O OCH2OH
OH
OH
NCH3
COCH3
H
HOCH2 CHOH 3
( 缩合 )323 COCHCOCHCH OH
乙酰丙酮
吡咯衍生物
H
HH3C
H3CCHN
N
COCH3CH3
COCH3
CH3N
对二甲氨基苯甲醛
H+
樱桃红色
NH C NH2HO
OHOHNHCH2N
O
O
CH3
OHCHO
O OCH2OH
OH
OH
NH
NHNH
CH3
H2O NaOH
O
O
OH
CH3 O
O
CH3
Fe3+
H+
O
Fe 33+/
紫红麦芽酚
ChP( 2010)采用蒸发光散射检测器测定庆大霉素C 组分,以 C18作固定相; 0.2mol/L三氟乙酸-甲醇作流动相,小诺霉素作内标,考察系统适用性
USP荧光衍生化后紫外测定
(三)硫酸盐测定:剩余 EDTA络合滴定法或 HPLC法ChP( 2010)中硫酸依替米星中硫酸根离子的测定采用 HPLC法 - 蒸发光散射检测器
2CH3NHOH
CONH2O
OHOHOOH
CH3HO
pH 2 6~
pH 2 6~
TC
OH
CONH2O
OHOHOOH
CH3 HCH3 2N
HO
ETC
N CH3 2HOH
CONH2O
OHOOH
CH3
OH
ATC
N2CH3
OH
CONH2O
OHO
H
OH O
CH3
H
EATC
pH 2< pH 2<
5 、显色法,与 H2SO4 反应显色
黄色朱红色
绿蓝深紫色
盐酸多西环素盐酸土霉素盐酸金霉素盐酸四环素
SOH
6 、 FeCl3 反应:酚羟基的特征反应
褐色橙褐色深褐色红棕色
盐酸多西环素盐酸土霉素盐酸金霉素盐酸四环素
FeCl