日常分析的注意点

维护流程图

吸滤头

单向阀

柱塞密封圈

线路过滤器

手动进样器

检测器

日常维护

材料：不锈钢烧结，孔径 10um

故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成措施：用 5 ％～ 20 ％的稀硝酸，超声波清洗， 再用蒸馏水清洗注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断

吸滤头

日常维护

单向阀LC-10ATvp 泵：串联 式往复泵

LC-10ADvp 泵：并联式 往复泵

日常维护单向阀结构

抛光面

透明塑料垫片

宝石球

吸液冲程 排液冲程出口单向阀

进口单向阀

泵头

流动相

单向阀原理吸液冲程 排液冲程出口单向阀

进口单向阀

泵头

日常维护

故障 1 ：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施： 1 ）用针筒抽出口单向阀以产生负压， 使宝石球与垫片分开 2 ）拆下单向阀，放入异丙醇或水中， 用超声波清洗

单向阀

日常维护

故障 2 ：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超 声波清洗

单向阀

日常维护 故障：密封圈磨损而导致 密封不良现象：系统压力波动大或 漏夜措施：更换密封圈注意点： 更换密封圈 拆卸泵头前，柱塞杆 复位 （ P － SET ）

柱塞密封圈

流动相泵头清洗管路

柱塞杆

密封圈

日常维护 故障：堵塞现象：系统压力波动大或压 力偏高措施： 5 ％稀硝酸，超声波

清 洗判断依据：关闭排液阀，断

开出口管路，设定流速1mL/min ，如压力 >3kgf/

cm2 ，则可能堵塞。

线路过滤器

排液阀

压力传感器

线路过滤器

流动相

日常维护紫外检测器

参比池

样品池

光线

光电倍增管

日常维护

故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定 250nm 波长，通甲醇或水，查看SMPL EN 和 REF EN ，如两者相差较大，则样品池受污。

措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。

紫外检测器

日常维护更换氘灯（紫外检测器）

• 判断氘灯能量：

设定 220nm 波长，检查参比池能量，如 能量低于 800 ，需更换氘灯。• 操作注意点：

不要用手直接接触氘灯表面

3. 关于样品的注入

日常维护 操作注意点：

1 ）插针应插到底

2 ）进样应使用液相色谱专用平头

进样针

3 ）清洗应使用专用针口清洗器

手动进样器

定子转子

塑料箍

弹簧 不锈钢套

7. 有机溶剂的优与劣

什么时候需要“ HPLC” 级有机溶剂

1. 等浓度洗脱法的微量分析 用光谱进行判断 2. 梯度洗脱法分析

1. 等浓度洗脱法的微量分析

优级

噪声

噪声

目的成分

目的成分

HP

LC

级

优级

HPLC 级

测试波长上的噪声水平与流动相的吸光度成正比

乙腈

2. 梯度洗脱法分析 需要“ HPLC” 级有机溶剂

理由：即使没有注入被测样品，因流动相的不纯物质，造成出峰。

梯度洗脱法的注意点• 1. 流动相使用 HPLC 级有机溶剂。

• 2. 查看空白实验的数据。

• 3. 遵守分析周期。 （最初的分析数据不采用）

8. 谈谈缓冲液

8. 谈谈缓冲液• 选择缓冲液的步骤 1 . 确定最佳分离状态时的流动相 pH

2 . 选择具有与流动相的 pH 相近的 pKa 的缓冲液 （即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液） 3 . 确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收 （在波长 210nm 附近进行检测时，不能用醋酸和 柠檬酸的缓冲液）

代表性弱酸的 pKa

pK1 pK2 pK3

醋酸 4.8

柠檬酸 3.1 4.7 5.4

磷酸 2.1 7.2 12.3

10. 关于脱气

脱气的目的 1. 防止由气泡的产生引起的故障 2. 防止由溶解（在液体中的）气体量 的变动引起的检测不稳定程度 1 ）示差折射率检测器 * 使折射率变化 2 ） UV 检测器（ 200nm 以下） * 溶解氧气有吸收 3 ）荧光检测器 * 溶解氧气有消光作用

脱气的方法

1. 吸气器法 * 可以抑制制做流动相时产生的气泡 * 只是暂时的脱气法 * 不能解决因溶解气体造成的问题2. He 清除法3. 使用氟树脂膜的减压脱气法

He 清除法

调压阀

排气阀

往送液泵

流动相

过滤器

使用氟树脂膜的减压脱气法氟树脂膜 真空室

往送液泵

真空泵控制器流动相

13. 予处理柱和防护柱

予处理柱和防护柱的位置

予处理柱防护柱泵

进样器

分析柱

防护柱的作用

• 代替分析柱捕集样品中的杂质，容易更换，降低成本。

予处理柱的作用• 用于免除流动相的影响 例如 1. 在离子色谱分析中，免除多价离子的

不 良影响。 2. 在梯度洗脱分析中，使鬼峰后移，不

影 响目的成分的分析。 3. 防止硅胶载体的溶解。

（使用碱性或含有胺的流动相时）

15. 关于 ODS 柱补修

峰的变形

根部变宽 有肩或分叉

峰产生有肩或分叉的原因

1. 柱子劣化 （进口处产生不均匀的空隙）2. 样品劣化 （生成氧化物、分解物等）判断标准 所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化

柱的补修

用分析时的两倍流量定量送液

填料的取出

容器

甲醇送液

未污染的部分

恢复例

柱修补后