8. 細菌ゲノムの特徴 vzk vz...dna mrna タンパク質 転写 翻訳 発現...
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8. 細菌ゲノムの特徴
8. 細菌ゲノムの特徴
DNA RNA %
%
%
%
%
糖 塩基 リン酸 A アデニン
T チミン C シトシン
G グアニン
デオキシリボヌクレオチド
デオキシリボース (5炭糖)
DNA
DNA RNA %
A
C
C O
OCH2
OH
O O-
P
O-
OCH2
OH
O O O-
P
O-
A
3’, 5’-ホスホジエステル結合
O O
CH2 O O-
P
O-
OCH2
OH
O O O
P
O-
1’
5’
2’ 3’ 4’
1’
5’
2’ 3’ 4’
リン酸
糖
5’ A
A
T
C
3’ OH
C
DNA
DNA RNA %
O O
O
N
N N
N
NH2
A
N
N N
NH
O
G
NH2
H3C
O N
NH
O
T
O N
N
NH2
C
N
N
ピリミジン
H
N
N N
N
プリン
プリン塩基 ピリミジン塩基
A T CG
N
N N
N
N
A T H H
水素結合
N
N N
N
O
G
N
C
CH3 N
N
H
N
N N H H
H
H H
5’
5’
3’ OH
A T
C
A T
A T
G
C G
3’ OH
C
DNA DNA RNA %
糖 塩基 リン酸 A アデニン
T チミン C シトシン
G グアニン
リボヌクレオチド
リボース (5炭糖)
RNA
DNA RNA %
U ウラシル
遺伝情報の伝達
DNA mRNA タンパク質
転写 翻訳
発現 [セントラルドグマ]
複製
DNA DNA
tRNA
DNA 構成要素: RNA アミノ酸
(伝令RNA)
(運搬RNA)
転写:鋳型DNAからmRNAに情報を伝える
開始
プロモーター (転写開始の目印)
5’ 3’ 5’
3’
5’ 3’ 5’
3’
ターミネーター (転写終了の目印)
5’ 3’ 5’
3’
mRNA
RNAポリメラーゼ
5’ 3’ 5’
3’
mRNA
伸長
終結
DNA
転写単位
5’ 3’
mRNA
3’ 5’
RNAポリメラーゼ 5’
DNA
&10%↓
&35%↓
転写開始点周辺の配列の特徴
&10%↓
&35%↓
転写開始点周辺の配列の特徴
RNA&35%↓
転写開始点周辺の配列の特徴
翻訳:遺伝子単位
U U A C G A U C G U C G C U A C G A U C U C G C A U A C A U C
5’ 3’
開始コドン
G
終止コドン
遺伝子(gene)
タンパク質の合成開始を 指定するコドン
(Met:メチオニンをコード) [AUG]
↓真正細菌では
[GUG] [AUA] [UUG]
タンパク質の合成停止を 指定するコドン
(対応するアミノ酸なし) [UAA] [UAG] [UGA]
mRNA
翻訳:リボソームでタンパク質を合成 5’ 3’ 5’
3’
mRNA
tRNA リボソーム
U U A C G A U G U C G C U A C G A U C U C G C G A U A C A U C
Pro
U G G
Cys
A C A
C U A
Met Cys
Gln Met
5’ 3’
アミノ酸
リボソーム上でmRNAからアミノ酸配列に換えられている(翻訳)
アミノ酸
転写
tRNA
H2N
mRNA A
開始コドン
*真核生物では翻訳の前に、イントロンと呼ばれる 配列の除去(スプライシング)が行われる
1 2 3
CAGTGTATT +5’ 3’ GTCACATAA &5’ 3’
%mRNA
CAGUGUAUU
DNA
mRNA 5’ 3’
Gln&Cys&Ile
CAGTGTATT +5’ 3’ GTCACATAA &5’ 3’
%mRNA
CAGUGUAUU
DNA
mRNA 5’ 3’
Gln&Cys&Ile
GTCAAACGTCCG5’ 3’
Val%&%Lys%&%Arg%&%Pro
CAGTTTGCAGGC 5’ 3’
GUCAAACGUCCG5’ 3’
真核生物におけるスプライシング
TCAATATCGGGGGTAATAATGTTTTTACATTCCCAAGACTTTGCCACAATTGTAAGGTCTACTCCTCTTATTTCTATAGATTTGATTGTGGAAAACGAGTTTGGCGAAATTTTGCTAGGAAAACGAATCAACCGCCCGGCACAGGGCTATTGGTTCGTTCCTGGTGGTAGGGTGTTGAAAGATGAAAAATTGCAGACAGCCTTTGAACGATTGACAGAAATGGGTAAGTTTTATGGTATCTGGCAAGACTTTTCAACGCATTATATAGTTATTTTGAAATTACCGAAGTCACAACAGCTGATAAATGATGACGATGTGCAAACAAATGATGCGATTGGCTTAGATTAATTGCTGTAGTTATGGCCGGTGGTACAGGCAGTCGTCTTTGGCCACTTTCTCGTGAACTATATCCAAAGCAGTTTTTACA
TCAATATCGGGGGTAATAATGTTTTTACATTCCCAAGACTTTGCCACAATTGTAAGGTCTACTCCTCTTATTTCTATAGATTTGATTGTGGAAAACGAGTTTGGCGAAATTTTGCTAGGAAAACGAATCAACCGCCCGGCACAGGGCTATTGGTTCGTTCCTGGTGGTAGGGTGTTGAAAGATGAAAAATTGCAGACAGCCTTTGAACGATTGACAGAAATGGGTAAGTTTTATGGTATCTGGCAAGACTTTTCAACGCATTATATAGTTATTTTGAAATTACCGAAGTCACAACAGCTGATAAATGATGACGATGTGCAAACAAATGATGCGATTGGCTTAGATTAATTGCTGTAGTTATGGCCGGTGGTACAGGCAGTCGTCTTTGGCCACTTTCTCGTGAACTATATCCAAAGCAGTTTTTACA
TCAATATCGGGGGTAATAATGTTTTTACATTCCCAAGACTTTGCCACAATTGTAAGGTCTACTCCTCTTATTTCTATAGATTTGATTGTGGAAAACGAGTTTGGCGAAATTTTGCTAGGAAAACGAATCAACCGCCCGGCACAGGGCTATTGGTTCGTTCCTGGTGGTAGGGTGTTGAAAGATGAAAAATTGCAGACAGCCTTTGAACGATTGACAGAAATGGGTAAGTTTTATGGTATCTGGCAAGACTTTTCAACGCATTATATAGTTATTTTGAAATTACCGAAGTCACAACAGCTGATAAATGATGACGATGTGCAAACAAATGATGCGATTGGCTTAGATTAATTGCTGTAGTTATGGCCGGTGGTACAGGCAGTCGTCTTTGGCCACTTTCTCGTGAACTATATCCAAAGCAGTTTTTACA
TCAATATCGGGGGTAATAATGTTTTTACATTCCCAAGACTTTGCCACAATTGTAAGGTCTACTCCTCTTATTTCTATAGATTTGATTGTGGAAAACGAGTTTGGCGAAATTTTGCTAGGAAAACGAATCAACCGCCCGGCACAGGGCTATTGGTTCGTTCCTGGTGGTAGGGTGTTGAAAGATGAAAAATTGCAGACAGCCTTTGAACGATTGACAGAAATGGGTAAGTTTTATGGTATCTGGCAAGACTTTTCAACGCATTATATAGTTATTTTGAAATTACCGAAGTCACAACAGCTGATAAATGATGACGATGTGCAAACAAATGATGCGATTGGCTTAGATTAATTGCTGTAGTTATGGCCGGTGGTACAGGCAGTCGTCTTTGGCCACTTTCTCGTGAACTATATCCAAAGCAGTTTTTACA
WatsonとCrickがDNAの二重らせん構造を発見
ヒトゲノムを発表
Venterらがインフルエンザ菌の全ゲノムを決定
ヒトゲノムプロジェクトがスタート
MullisがPCR法を発明
Sangerらが塩基配列決定法を開発
ゲノム研究の多様化
分子
DNA mRNA タンパク質
転写 翻訳
tRNA
遺伝子 トランスクリプト (転写産物) タンパク質
個体 トランスクリプトーム (全転写産物)
プロテオーム (全タンパク質)
集団 メタゲノム メタトランスクリプトーム
ゲノム
メタプロテオーム
メタゲノム解析 例えば、
メタゲノム解析:
ゲノムDNAを抽出 DNA断片 ショットガン ライブラリー
クローニング
クローニング ベクター
シーケンシング (配列決定)
1000~2000 bp
ACGTAGCTACGTAGCATCGATCGAT
CCCTGTGGCGTA
ATCATCGTACGA
TCT
TGTGTGTAACACATCGATCGACGCGCC
TAAAAAGCAT
GCATGCTAGC
ATCCAT
ACGTAGCTACGTAGCATCGATCGAT
CCCTGTGGCG
TAATCATCGT
ACGATCT GGCTCGTATACGATATATAAAGCATCGTT
環境中微生物のDNA情報を網羅的に解析 ・培養を介さない ・微生物DNAをまるごと抽出・まるごと解析
特定領域の増幅
断片化
メタゲノム解析から分かること
ACGTAGCTACGTAGCATCGATCGAT
CCCTGTGGCGTA
ATCATCGTACGA
TCT
TGTGTGTAACACATCGATCGACGCGCC
TAAAAAGCAT
GCATGCTAGC
ATCCAT
ACGTAGCTACGTAGCATCGATCGAT
TGTGTGTAACACATCGATCGA
CGCGCC
GGCTCGTATACGATATATAAAGCATCGTT
機能ベースの解析
有用遺伝子の探索
バイオインフォマティクス
集団ベースの解析
環境の総合的理解
菌種(組成) 菌量(割合)
データベース 代謝系の予測(栄養源)
病原体(細菌・ウイルス)の探索や特定 細菌叢変化のモニタリング
Interna>onal%Nucleo>de%Sequence%Database%Collabora>on%
% GenBank NCBI%%
DDBJ)DNA%Database%Japan
ENA)(European%Nucleo>de%Archive)
EMBL&EBI%%
8. 細菌ゲノムの特徴
%
%
初期に全ゲノムが決定された細菌の一例
ゲノムを構成する染色体とプラスミドの イメージ
DNA上におこる突然変異
欠失
逆位 重複
挿入
DNA上におこる突然変異
TGGCTACGA
TGGTTACGA
組換え
同義変異 (Leu→Leu)
TGGTTACGA
TGGTTTCGA
点突然変異 非同義変異 (Leu→Phe)
形質転換:細胞外部からDNA を導入し、その形質(特徴)を変える
形質転換:細胞外部からDNA を導入し、その形質(特徴)を変える
加熱 病原性に 関わる因子
混ぜる
%%
プラスミドを使った形質転換の一例 T4
%
%DNA
バクテリオファージの生活環
Chromosome Plasmids
Iguchi A. et al. 2009 J. Bacteriol
EPEC E2348/69株の全ゲノム解析