98365919 nghien cuu che bien nhung san pham ho tro tieu hoa tu loi khuan probiotics tom tat

7/21/2019 98365919 Nghien Cuu Che Bien Nhung San Pham Ho Tro Tieu Hoa Tu Loi Khuan Probiotics Tom Tat

1/11

1

Hi nghnghin cu khoa hc sinh vin ln XNm hc 20102011

NGHIN CU CH BIN NHNG SN PHM H TR H TIU HA T

LI KHUN PROBIOTICS

Trn Th Vn Anh, V Th Kim Ngn, Trng Th Yn Linh

Lp 08SH1D Khoa Khoa Hc ng Dng

TM TT:Ngy nay vic s dng cc li khun Probiotics ng dng trong cc

sn phm h tr tiu ha ngy cng ph bin. Nghin cu c thc hin nhm kho st

kh nng thu sinh khi ca vi khun L.caseitrn mi trng ti u MRS v mi trng

ci bin rau ci xanh, ng thi tin hnh kho st kh nng to bo t ca vi khun

B.clausii, to ra mt s ch phm sinh khi v bo t vi khun dng bt kh v dng

lnggip a dng ha cc ch phm probiotics hin c trn th trng Vit Nam .

QU TRNH NGHIN CU V KT QU

1.Vt liu v phng php nghin cu

1.1 Vi sinh vt

+ Chng Lactobacillus casei phn lp t sa chua ung Yakult ca Cng ty

Honkusha.

+ ChngBacillus clausiiphn lp tThuc tiu ha Enterogermina ca Cng ty

Sanofi-Aventis.

1.2 Mi trng

Sdng mi trng MRS v mi trng ci bin rau ci xanh kho st c tnh

v khnng thu sinh khi vi khunL.casei.

Mi trng Cao tht Pepton v Acetate nhn ging, kho st khnng thu

sinh khi v to bo tvi khunB.clausii.

1.3 Phng php nghin cu

Sdng cc phng php nghin cu vi sinh vt thng dng trong nghin cu

kho st cc c tnh ca vi sinh vt v mt sphng php kho st ng cong sinh


2/11

2


trng, phng php nhn ging v thu nhn sinh khi vi khun, phng php xc nh

slng tbo vi sinh vt

2. Kt quv tho lun

2.1 Phn lp vi khun

Tmu sa chua ung Yakult ca Cng ty Honkusha Vit Nam v mu thuc h

tr tiu ha Enterogemina ca Cng ty Sanofi-Aventis phn lp c hai chng vi

khunL.caseivB.clausii.

Hnh 1. Hnh thi khun lc

L.casei

Hnh 2. Hnh thi khun lc

B.clausii

Cc chng vi khun c lm thun v em gi ging trn ng thch nghing

tin hnh nhn ging.

2.2 Nui cy v thu sinh khi ca vi khun L.casei

xc nh thi gian thu sinh khi ti u, chng ti tin hnh xc nh ng

cong sinh trng ca vi khunL.caseibng cch o OD610nmmt tbo vi khun thay

i trong vng 48 ting trong hai mi trng rau ci xanh lng v MRS lng.


3/11

3


th1. Mi tng quan gia thi gian v mt tbo sng ca L .caseitrong mi

trng rau ci xanh

th2. Mi tng quan gia thi gian v mt tbo sng ca chngL.caseitrong mi trng MRS

Sau khi tin hnh xy dng ng cong sinh trng ca L.casei trn hai mi

trng, tin hnh xc nh slng tbo trong qung thi gian vi khun t sinh khi

ln nht bng phng php m trc tip trn bung m hng cu.

Thu sinh khi vi khun bng phng php ly tm10.000 vng/5 pht 100mL mi

trng nhn ging cp 2, sau ra li vi nc ct v trng v em ly tm li. Sinh

khi vi khun thu c em i sy kh v cn khi lng cho ra sn phm dng bt

hoc em ha vi 10mL nc ct v trng cho ra sn phm dng dch lng.

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0 10 20 30 40 50

OD610nm

Thi gian(gi)

0

0.5

1

1.5

2

0 10 20 30 40 50 60

OD

610nm

Thi gian (gi)


4/11

4


2.2.1 Sn phm sinh khi dng dch lng ca L.caseitrn mi trng ci bin

rau ci xanh

S lng t bo vi khunc trong 1mL mi trng rau ci xanh: 26,25 triu t

bo

Sn phm cha 26,25 x 100 = 2,625 ttbo/ 10mL

2.2.2 Sn phm sinh khi L.caseitrn mi trng MRS

Hnh 3. Sinh khi vi khun L.caseithu c sau khi li tm

S t bo vi khun c trong 1mL mi trng MRS: 1,255 (tt bo/mL)

Khi lng sinh khi vi khun sau khi sy kh: 0,41g(hiu sut t 41%)

+ Sn phm dng bt khTng ng vi 0,41g sn phm cha 1,225 x 100 =125,5 t t bo

+ Sn phm dng lng

Sn phm scha 1,225 x 100 = 122,5 t t bo/10mL

Hnh 4. Sn phm sinh khi L.casei dng lng


5/11

5


Nhn xt khnng thu sinh khi gia hai mi trng rau ci xanh v MRS:

Da trn kt qukho st vslng tbo vi khun trong hai mi trng MRS v mi

trng ci bin rau ci xanh, nhn thy slng tbo vi khun c mt trong mi trng

rau ci xanh t hn so vi mi trng MRS. Tuy nhin, khi so snh gi thnh ca hai mi

trng, mi trng rau ci xanh vn c gi r hn rt nhiu so vi mi trng MRS

(nhiu ha cht t tin). Ngoi ra, ng cong sinh trng cho thy thi gian thu sinh

khi caL.caseitrong mi trng rau ci xanh ssm hn so vi MRS.

2.3 Nui cy v thu sinh khi v to bo t vi khun B.clausii

Trc khi tin hnh thu sinh khi ta tin hnh o mt tbo thay i trong 48

ting xc nh ng cong sinh trng ca vi khunB.clausii.

th3. Mi tng quan gia thi gian v mt tbo sng ca chng B.clausii

trong mi trng Cao tht-Pepton

2.3.1 Thu nhn sinh khi B.clausii

Tin hnh xc nh s lng t bo vi khun trong khong thi gian ti u bng

phng php m trc tip trn bung m hng cu, sau em ly tm thu sinh khi vi

khun ri ha ton b sinh khi thu c vi 10mL nc ct v trng.

Stbo vi khun c trong 1mL mi trng: 131,5 (triu tbo/mL)

Sn phm sinh khi vi khunB.clausiidng lng scha 131,5 x 100 = 1,315 tt

bo/10mL

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

0 10 20 30 40 50

OD

610nm

Thi gian (gi)


6/11

6


2.3.2 Thu nhn bo tB.clausii

Khnng hnh thnh bo tcaB.clausiic kho st trn 4 iu kin:

- Mi trng Cao thtPepton nhit 15C trong 2 tun

- Mi trng Cao thtPepton nhit 15C trong 3 tun

- Mi trng Acetate nhit 15C trong 1 tun

- Mi trng Acetate nhit phng trong 1 tun

Sau khong thi gian kho st, tin hnh nhum bo txc nh stn ti ca

bo ttrong mi trng nui cy.

Hnh 5. Bo tchng B.clausii

Kt qucho thy bo tB.clausii xut hin trn cc mi trng trn.

Sau tin hnh m slng bo thnh thnh trong bn iu kin trn bng

phng php m trc tip trn bung m hng cu, kt qu thu c c trnh by

trong bng sau:


7/11

7


Mi trng Cao thtPepton Acetate

iu kinNhit 15C

trong 2 tun

Nhit 15C

trong 3 tun

Nhit

15C trong 1

tun

Nhit

phng trong

1 tun

Slng bo tm

c trong 5 ln187 245 305 255

Slng bo t/mL93,5 triu bo

t/mL

122,5 triu

bo t/mL

15,25 triu

bo t/mL

12,75 triu

bo t/mL

Slng tbo m

c trong 5 ln

(trc khi cho to bot)

243 283

Slng tbo/mL 121,5 triu tbo/mL 14,15 triu tbo/mL

Tlhnh thnh bo t 76,95% 100,82% 107,77% 86,57%

Bng 3.1 Sliu so snh tlhnh thnh bo t

Da vo bng kt qu s liu trn, ta c th nhn thy trong cng mi trng

nui cy, khnng hnh thnh bo tcaB.clausiiphthuc vo thi gian, nhit v

thnh phn mi trng. i vi mi trng Cao thtPepton, sau mt khong thi gian,

cht dinh dng trong mi trng s cn dn, mi trng nui cy s tr thnh mi

trng khc nghit kch thch vi khun to bo t, mt khc iu kin nhit thp cng

thc y qu trnh hnh thnh bo tvi khun. Khi so snh trn hai mi trng, vi khun

c khnng to bo tnhiu hn trn mi trng Acetate l mi trng ngho cht dinh

dng.

Ly 100mL dch nhn ging xc nh c bo t ln nht trn em ly tm

10.000 vng/5 pht, thu cn bo tra vi nc ct v trng v em ly tm li ln hai, ta

thu c bo tcaB.clausii.


8/11

8


Hnh 6.Bo tB.clausii thu c sau khi li tm

Sau khi ly tm, ton bbo tvi khun c chuyn vo ng nghim cha 10mL

nc ct v trng to dch huyn ph bo t.

Sn phm cha 122,5 x 100 = 1,225 tbo t/ 10mL

Hnh 7. Sn phm lng bo tca chng B.clausii

2.4 Don gi thnh cc sn phm Probiotics

Tin hnh tnh s bgi thnh ca ha cht sdng trong pha chmi trng

nui cy vi sinh vt, c thchng ti sdng ha cht pha 100mL mi trng thu

c cc sn phm Probiotics nghin cu.

Chng ti thu c bng don kt qugi thnh s bsn phm v km theo

so snh vi mt ssn phm Probiotics hin c trn thtrng.


9/11

9


Sn phm ProbioticsThtch (trng

lng)

Hm lng vi

sinh vtGi

Sinh khi khL.casei 0,41g 125,5 ttbo 5000 VN

Sinh khiL.caseilng 10mL 125,5 ttbo 5000 VN

Sinh khiL.casei trn mi

trng rau ci xanh10ml 2,625 ttbo 200VN

Sinh khiB.clausii lng 10mL 1,315 ttbo 3000 VN

Bo tB.clausiilng 10mL 1,225 tbo t 3000 VN

Sa chua ung Yakul t 65ml 6,5 ttbo 4000 VN

Sa chua ung Probi 65mL 13 ttbo 3000 VN

Enterogermina 2mL 2 tbo t 6500 VN

Bng 3.2 Don s bgi thnh ca cc sn phm thu c Probiotics v so snh

vi mt ssn phm Probiotics trn thtrng

Nhn xt:

+ i vi sn phm cha L.casei

Sau khi tnh ton s b gi thnh, thu c kt qu nh bng trn. Gi thnh

phm ca sn phm sinh khi caL.caseitng ng so vi Enterogermina, nhng s

lng tbo c trong sinh khi ca sn phm cha L.caseinhiu hn gp nhiu ln so

vi sbo t trong Enterogermia. Bn cnh nhng u thv s lng, vi nhng c

tnh gipL.casei c thsng st qua mi trng acid ca ddy i vo rut m vn m

bo hot tnh v c tc dng vng tiu ha nh mong mun. Trong khi , dng bo

tcaB.clausiic thi vo thnh rut nhng cn c thi gian pht trin tbo t

thnh tbo, nn sn phm ny cha thc tc dng ngay lp tc ging nhL.casei. y

chnh l khnng cnh tranh trong lnh vc dc phm ca sn phm chng ti nghin

cu.

Tuy nhin, thu c sinh khi caL.caseiphi tin hnh trong mi trng vi

ha cht mc tin. V vy nhm chng ti tin hnh kho st trn mi trng ci bin rau

ci xanh. Sau thi gian kho st chng ti c ththu c hm lng vi sinh vt l xp

x2,5 ttbo, nhng vi gi thnh rt thp. C thni, nu c trin khai quy m


10/11

10


cng nghip v m bo c iu kin mi trng v trng ti u th y l mc gi rt

cnh tranh vi nhng sn phm khc.

+ i vi sn phm chaB.clausii

Ngoi ra, nhm chng ti cn tin hnh kho st thm v thu sinh khi, bo t

caB.clausiitrn mi trng Cao thtpepton th thu c sn phm v gi thnh tng

ng vi sn phm Enterogermina. V thi gian hn ch, chng ti cha thi su vo

nghin cu trn mi trng Acetate to bo t. Nhng vi nh gi s bban u, chng

ti nhn thy t l sinh bo t trn mi trng Acetate ln hn mi trng Cao tht

pepton. Nn nu c trin khai thu bo ttrn mi trng Acetate chng ta c ththu

c slng bo tln hn nhiu.

KT LUN

Sau gn 5 thng nghin cu, chng ti nghin cu cho ra cc sn phm htr

tiu ha tli khun Probiotics, a dng ha sn phm Probiotics trn thtrng.:

1. Sn phm sinh khi vi khunL.caseidi hai dng: bt v lng.

2.Sn phm sinh khi v bo tB.clausii.

3.Kho st thnh cng khnng thu sinh khi caL.caseitrn mi trng ci bin

rau ci xanh cho ra sn phm c gi thnh r.

4.Kho st s bkhnng to bo tca vi khunB.clausiicc iu kin khc

nhau.

TI LIU THAM KHO

Ti liu ting Vit

[1]L Thnh Hng c im v vai tr ca probiotic ngi v ng vt

Lun vn Tt nghip 2010


11/11

11


[2]Mai m Linh, Minh Phng, Phm ThTuyt, Kiu Hu nh, Nguyn

ThGiangc im sinh hc ca cc chng vi khun lactic phn lp trn a bn H

NiTp ch Khoa hc HQGHN, Khoa Tnhin v Cng ngh24 (2008) 221-226

[3]Phan ThPhng Tho Nghin cu ng dng vi khun Bacillus subtilisvo sn phm ln men tu hc khnng h tr tiu haLun vn Tt nghip

Trng H Tn c Thng, nm 2005

[4]Ti liu Th nghim vi sinh i cng trng H Tn c Thng

[5]Thng co bo ch ngy 15/07/2006 Cng ty Sanofi-Aventis _ Bc s Nguyn

ThNgc Dip

[6] n Cng ngh sn xut acid lactic - Trng i Hc S Phm KThut Tp HCh Minh - GVHD Ng Lm Tun Anh

Ti liu ting Anh

[7] Sandholmand Maria Saarela, edited by Tiina Mattila - Funcitional dairy

products 2003CRC Press

Trang web in t

[8]http://en.wikipedia.org/wiki/Bacillus_clausii

[9]http://en.wikipedia.org/wiki/Lactobacillus_casei

[10]http://www.probiotic.org/lactobacillus-casei.htm

[11]http://www.ehow.com/about_5531574_lactobacillus-casei.html

[12]http://en.wikipedia.org/

[13]http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Bacillus_clausii

[14]http://free.vietscience.org
http://en.wikipedia.org/wiki/Bacillus_clausiihttp://en.wikipedia.org/wiki/Lactobacillus_caseihttp://www.probiotic.org/lactobacillus-casei.htmhttp://www.ehow.com/about_5531574_lactobacillus-casei.htmlhttp://en.wikipedia.org/http://en.wikipedia.org/http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Bacillus_clausiihttp://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Bacillus_clausiihttp://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Bacillus_clausiihttp://free.vietscience.org/http://free.vietscience.org/http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Bacillus_clausiihttp://en.wikipedia.org/http://www.ehow.com/about_5531574_lactobacillus-casei.htmlhttp://www.probiotic.org/lactobacillus-casei.htmhttp://en.wikipedia.org/wiki/Lactobacillus_caseihttp://en.wikipedia.org/wiki/Bacillus_clausii

98365919 nghien cuu che bien nhung san pham ho tro tieu hoa tu loi khuan probiotics tom tat

Documents