A mutagenezis célja, hasznaA mutagenezis célja, haszna

Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT

Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára

A TIP120 fehérje néhány jellemzőjeA TIP120 fehérje néhány jellemzője

1230 AS, szimpla polipeptid1230 AS, szimpla polipeptid

Affinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységévelAffinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységével

Az iniciációs komplex összeszerelődését serkentiAz iniciációs komplex összeszerelődését serkenti

A funkció betöltésében fontos a molekula N-terminális 1/3-aA funkció betöltésében fontos a molekula N-terminális 1/3-a

A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, Coenorhabditisban, Drosophilában,Coenorhabditisban, Drosophilában, emberben, emberben, ArabidopsisbanArabidopsisban

I.I. A TIP120 fehérje A TIP120 fehérje szerepe a szerepe a

FehérjeszintézisbenFehérjeszintézisben

II.II. A TIP120 fehérje A TIP120 fehérje szerepe a szerepe a

fehérjedegradációs fehérjedegradációs folyamatokbanfolyamatokban

A génkifejeződésA génkifejeződés

Szakaszai Transzkripció = „átírás”

Transzláció = „fordítás”

DNS

Fehérje

mRNS

TFIIH

TFIIA

A transzkripciós iniciációs komplex A transzkripciós iniciációs komplex kialakulásakialakulása

TATA

TBP

POLIITFIIF

TFIIB

TIP120 TFIIE

Az ubiquitin-protein ligázokAz ubiquitin-protein ligázok

Fontos típusuk az SCF-komplex Fontos típusuk az SCF-komplex (ROC1-(ROC1-SSKP1-KP1-ccullin1/cdc53-ullin1/cdc53-FF box protein) box protein)

SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál-SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál-transzdukcióban fontos fehérjéktranszdukcióban fontos fehérjék

cul1rocSKP1

F

szubsztrát

E2Ub

Nd8

A CAND1 fehérje szerepe az SCF A CAND1 fehérje szerepe az SCF komplex működésébenkomplex működésében

Gátolja a cul1-SKP1 interakciótGátolja a cul1-SKP1 interakciót SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1; SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1;

CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1 CAND1 kiütése RNS-CAND1 kiütése RNS-

interferenciával:SKP1-cul1 komplex interferenciával:SKP1-cul1 komplex mennyisége nőmennyisége nő

A CAND protein gátolja az A CAND protein gátolja az SCF komplex működésétSCF komplex működését

cul1

ROC

SKP1

CAND1

cul1 rocSKP1

F

szubsztrát

E2Ub

Nd8

Inszerciós mutagenezisInszerciós mutagenezis

Növényi gén

exon/intronpromóter 5' UTR 3' UTR

T-DNSLB RBT-DNS inszerció

Funkcióvesztéses mutációFunkcióvesztéses mutáció

A H911 vonalA H911 vonal

Columbia:normál

fenotípus

H911/4:törpe fenotípus

Növények magassága

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

cm

A normál növények átlagosmagassága

A törpe növények átlagosmagassága

T-DNS inszerció pozíciója a H911 T-DNS inszerció pozíciója a H911 vonalbanvonalban

Protein: feltételezett TBP kölcsönható fehérje (120 kD) (TBP Interacting Protein, TIP120)

T-DNS inszerció: 13. exon (3301bp)Gén: At2g02560

R L

2. Krom., BAC T8K22