a neutrophil gelatinase klinikai jelentősége
DESCRIPTION
A Neutrophil Gelatinase klinikai jelentősége. Dr. Bobek Ilona. osztályvezető főorvos. Fővárosi Önkormányzat Egyesített Szent István és Szent László Kórház, Budapest. NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED LIPOCALIN KLINIKAI JELENTŐSÉGE Bobek Ilona. Fővárosi Önkormányzat - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
A Neutrophil GelatinaseA Neutrophil Gelatinaseklinikai jelentősége klinikai jelentősége
Fővárosi Önkormányzat Egyesített Szent István és Szent László Kórház, BudapestFővárosi Önkormányzat Egyesített Szent István és Szent László Kórház, Budapest
Dr. Bobek IlonaDr. Bobek Ilonaosztályvezető főorvososztályvezető főorvos
NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED LIPOCALIN KLINIKAI JELENTŐSÉGELIPOCALIN KLINIKAI JELENTŐSÉGE
Bobek IlonaBobek Ilona
Fővárosi Önkormányzat Egyesített Szent István és Szent László Kórház - Rendelőintézet
Budapest
BEST KidneyBEST Kidney JAMA, 2005;294:813-818JAMA, 2005;294:813-818
29 269 beteg
AKI: 1 7385,7 %
Non AKI: 27 531
RRT: 126072,4 %
Non RRT: 46827,6 %
BEST KidneyBEST Kidney JAMA, 2005;294:813-818JAMA, 2005;294:813-818
RRT típusa:folyamatos 80.0 %intermittáló 16.9 %peritoneális/lassú folyamatos UF 3.2 %
Túlélők ITO távozást követő dialysis igénye: 13.8 %Összkórházi halálozás: 60,3 % (ITO: 52%)
Kórházi halálozás független rizikó tényezője: ORvasopressor használata 1.95mesterséges lélegeztetés 2.11szeptikus shock 1.36kardiogén shock 1.41hepatorenális szindróma 1.87
AKUT VESEELÉGTELENSÉG (AKI) AKUT VESEELÉGTELENSÉG (AKI) FOLYAMATAFOLYAMATA
Vaidya VS, Ferguson MA, Bonventre JV. Biomarkers of Acute Kidney Injury.Annu Rev Pharmacol Toxicol 2008;48:463-493
?
Biológiai óra megelőzi a klinikai órát !
AKI DIAGNÓZISAKI DIAGNÓZIS
TRADICIONÁLIS: TRADICIONÁLIS: szérum kreatinin, BUNszérum kreatinin, BUN
• se Kreat változásai időben késleltetettek se Kreat változásai időben késleltetettek • a RRT kezelés kezdési időpontjának nem jó a RRT kezelés kezdési időpontjának nem jó indikátoraiindikátorai• értéküket számos faktor befolyásoljaértéküket számos faktor befolyásolja
KORAI BIOMARKEREK: KORAI BIOMARKEREK: „ troponin-like” ?„ troponin-like” ?
BIOMARKER FOGALMABIOMARKER FOGALMA
A biomarkerek biológiai paraméterek, amelyek normális A biomarkerek biológiai paraméterek, amelyek normális és kóros folyamatokat, beavatkozásokra adott válaszokat és kóros folyamatokat, beavatkozásokra adott válaszokat jeleznek, objektív értékkel kifejezhetőek. jeleznek, objektív értékkel kifejezhetőek.
Használhatóságukat meghatározza a szenzitivitásuk, Használhatóságukat meghatározza a szenzitivitásuk, specificitásuk, időgörbéjük.specificitásuk, időgörbéjük.
AKI IDEÁLIS BIOMARKEREAKI IDEÁLIS BIOMARKERE
• Non invazív. • Könnyen detektálható hozzáférhető mintákban, pl: szérum, vizelet.
• AKI-ra erősen érzékeny és specifikus. • Könnyen, megbízhatóan mérhető. • Választ ad a sérülés etiológiájára, természetére, időtartamára. • A sérülés és a működés markere. • AKI súlyosságának, reverzibilitásának jelzője.• Segít a beavatkozások által okozott sérülés és az arra adott válasz monitorozásában. • Más biológiai tényezők nem befolyásolják. • Nem drága.
Soni Blood Purif 2009;28:165-174Soni Blood Purif 2009;28:165-174
AKI BIOMARKEREKAKI BIOMARKEREKBiomarkers for the diagnosis and risk stratification of acute kidney injury: A Biomarkers for the diagnosis and risk stratification of acute kidney injury: A
systematic review, SG Coca et al, Kidney International ,2007 systematic review, SG Coca et al, Kidney International ,2007
BIOMARKEREK VALIDÁLÁSAsystemic review,2007, SG Cocca
Használhatóság:
• A már fennálló Aki differenciál diagnózisára: se Cystatin C, vizelet KIM-1, vizelet IL-18
• AKI korai diagnózisára használható: se Cystatin C, vizelet NGAL, IL-18
•A halálozás rizikójának megállapítására: KIM-1, IL-18
NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED LIPOCALIN
NGAL
2010
NGAL Publikáció (PUBMED
0102030405060708090
2000 2002 2004 2006 2008 2010
NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED LIPOCALIN (NGAL) molekula
Lipocalin családhoz tartozó kis fehérje, amelyet a neutrophilek és egyéb epithel sejtek (pl:prox. tubulus) választanak ki.
Humán NGAL 178 aminosavból álló monomer/dimer/trimer polypeptide lánc.
Kalkulált molekula súly: 22kDa, de a glycosyláció miatt 25 kDa.
NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED LIPOCALIN (NGAL) mérése
Western blot: vizelet, serum
ELISA: kísérletes
NGAL antitest: klinikum
Serum: pNGAL
ELISA validált: Dent 2007 Crit Care
Vizelet: uNGAL
ELISA validált: Bennett 2008 Clin J Am Soc Nephrol
NGAL Klinikai alkalmazásának lehetőségei
NGAL diagnosztikus és prognosztikus határértéke függ a vizsgált betegcsoporttól.
50 (pediátria) és 400 µg/L (ITO) között változik mind a plazmában, mind a vizeletben.
NGAL Klinikai alkalmazásának lehetőségeiAKI korai Biomarkere
AKI időpontja ismert: szívsebészet, kontrasztanyag használata
AKI időpontja ismeretlen: intenzív terápiapolitrauma
sürgősségi ellátás
AKI kimenetelének jelzője: halálozás, RRT igény
Polycystás vesemegbetegedés: cysta növekvő mennyisége
Megbetegedés aktivitásának, súlyosságának jelzőjegyermekkori lupus nephritis, IgA nephropathia, idiopathiás glomerulonephritis
Biomarker: agytumor kimutatása, terápia hatásossága
bélrendszer gyulladásos megbetegedései
emlő tumor
NGAL : Korai Biomarker tanulmányokNGAL : Korai Biomarker tanulmányokSzívsebészetSzívsebészet
Év Beteg Sérülés ideje
Minta Vizsgálat Eredmény
Mishra 2005 71 gyerm. ismert p,u Western blot + research Elisa
2h uNGAL és pNGAL magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t
Dent 2007 120 gyerm. ismert p Triage ® NGAL
2h pNGAL magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t
Bennett 2008 196 gyerm. ismert u Architect® 2h uNGAL magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t
Wagener 2006 81 felnőtt ismert u Immunoblotting
1h uNGAL ↑
Xin 2008 33 felnőtt ismert sz, u ELISA 2h uNGAL és IL-18 magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t,szNGAL nem
Tuladhar 2009 50 felnőtt ismert p,u ELISA 2h uNGAL és pNGAL magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t
NGAL : Szívsebészeti műtétet követőenNGAL : Szívsebészeti műtétet követően
Plazma
Vizelet
Mishra J, Dent C, Tarabishi R, et al.Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) as a biomarker for acute renal failure after cardiac
surgeryLancet 2005;365:1231-38
NGAL : Szívsebészeti műtétet követőenNGAL : Szívsebészeti műtétet követően
Mishra J, Dent C, Tarabishi R, et al.Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) as a biomarker
for acute renal failure after cardiac surgery
Lancet 2005;365:1231-38
NGAL : Szívsebészeti műtétet követőenNGAL : Szívsebészeti műtétet követően
Mishra J, Dent C, Tarabishi R, et al. Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) as a biomarker for acute renal failure after cardiac surgery
Lancet 2005;365:1231-38
NGAL : Korai Biomarker tanulmányokNGAL : Korai Biomarker tanulmányokKontrasztanyag Kontrasztanyag
Év Beteg Sérülés ideje
Minta Vizsgálat Eredmény
Hirsch 2007 91 gyerm. ismert p,u ELISA 2h uNGAL és pNGAL magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t
Bachorzewska- Gajewska
2007 100 felnőtt ismert sz, u ELISA 2,4,8h szNGAL szignif.↑4,8,24 uNGAL szignif.↑
NGAL : Korai Biomarker tanulmányokNGAL : Korai Biomarker tanulmányokIntenzív osztály, Sürgősségi osztályIntenzív osztály, Sürgősségi osztály
Év Beteg Sérülés ideje
Minta Vizsgálat Eredmény
Zappitelli 2007 140 gyerm. nem ismert
u ELISA 24-48h uNGAL jelzi az AKI-t
Wheeler 2008 143 gyerm. nem ismert
sz ELISA 24h ITO felvétel szNGAL magas szenz. de nem spec. AKI-ra
Makris 2009 31 felnőtt nem ismert
u ELISA ITO felvétel uNGAL magas szenz. és spec. jelzi az AKI-t
Cruz 2010 301 felnőtt nem ismert
p Triage ® NGAL pNGAL jó AKI (48h), súlyosság,RRT jelző
Bagshaw 2010 83 felnőttseptic-nonseptic
nemismert
p, u Triage ® NGALARCHITECT®
septikus AKI p,u NGAL ↑, szeptikus AKI uNGAL 12h, 24h marad ↑
Nickolas 2008 635 felnőttER
nem ismert
u Immunoblotting Felvételi uNGAL ↑, jelzi az AKI-tDiff diagn. Preren azotémia, CKD
NGAL : Gyermek ITO, korai BiomarkerNGAL : Gyermek ITO, korai Biomarker
Zappitelli et al.Urinary neutrophil gelatinase associated lipocalin is an early marker of acute kidney injury in critically
ill childrenCritical Care 2007; 11:R84
NGAL : Gyermek ITO, korai BiomarkerNGAL : Gyermek ITO, korai Biomarker
Zappitelli et al.Urinary neutrophil gelatinase associated lipocalin is an early marker of acute
kidney injury in critically ill childrenCritical Care 2007; 11:R84
NGAL : Gyermek ITO, korai BiomarkerNGAL : Gyermek ITO, korai Biomarker
Zappitelli et al.Urinary neutrophil gelatinase associated lipocalin is an early marker of acute
kidney injury in critically ill childrenCritical Care 2007; 11:R84
- 2 nap [AUC] 0,78
NGAL : Korai Biomarker: Felnőtt intenzív osztályNGAL : Korai Biomarker: Felnőtt intenzív osztály
Cruz et al.Plasma neutrophil gelatinase-associated lipocalin is an early biomarker for acute
kidney injury in an adult ICU populationIntensive Care Med 2010; 36:444-451
NGAL : összefüggés az AKI rizikó tényezőivelNGAL : összefüggés az AKI rizikó tényezőivel
Év Beteg Sérülés ideje
Minta Vizsgálat Eredmény
Wagener 2008 426 felnőtt ismert u Immunoblotting uNGAL korrelált a CPB idővel aorta Xclamp idővel,sCreat nem korrelált
NGAL : AKI kimenetelének jelzőjeNGAL : AKI kimenetelének jelzőjeHalálozás, RRT igényHalálozás, RRT igény
Év Beteg Sérülés ideje
Minta Vizsgálat Eredmény
Dent 2007 120 gyerm. ismert p Triage ® NGAL pNGAL 2h szintje korrelál az AKI idejével, kórházi tartózkodás idejével,pNGAL 12h mortalitás prediktora
Bennett 2008 196 gyerm. ismert u Architect® 2h uNGAL szintje az AKI súlyosságának, idejének, kórházi tartózkodás, mortalitás, RRT igény
Cruz 2010 310 felnőtt nem ismert
p Triage ® NGAL pNGAL jó RRT jelző
Bagshaw 2010 83 felnőttseptic-nonseptic
nemismert
p, u Triage ® NGALARCHITECT®
pNGAL RRT jelző (AuROC 0.70; 95% CI 0,58-0,82)
NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED NEUTROPHIL GELATINASE ASSOCIATED LIPOCALIN (NGAL)LIPOCALIN (NGAL)
ELTÁVOLÍTÁSA EXTRACORPORÁLIS ELTÁVOLÍTÁSA EXTRACORPORÁLIS TECHNIKÁVAL: in vitro tanulmányTECHNIKÁVAL: in vitro tanulmány
Bobek I, Gong D, de Cal M, Cruz D, Chionh C, Lentini P, Ronco C.Bobek I, Gong D, de Cal M, Cruz D, Chionh C, Lentini P, Ronco C.
Nephrológia, Dialízis és Transzplantációs osztálySt. Bortolo Kórház
Vicenza - Olaszország
IN VITRO TANULMÁNY
HÁTTÉR:
Nem ismert, hogy az extracorporális technikák (HF, HP) befolyásolják-e, és ha igen milyen mértékben az NGAL szintet, annak klinikai használhatóságát.
CÉL:
Az NGAL – Antigén konvekcióval és adszorpcióval való eltávolításának kinetikáját vizsgáltuk polysulfon high flux membrán használata során.
IN VITRO TANULMÁNY KIVITELEZÉSEMesterséges HF és HP 120 percen át.
Zero balance HF: Qb 200 ml/min, Quf 1200 mL/h, 0,9% NaCl szubsz
30 % htk, heparinizált vvt 500 ml-re higítva FFP-vel.
HP: Qb 200 ml/min 0,9% NaCl
NGAL-Ag cél koncentráció: 400 μg/L.
Polysulfon membrán: 0.15 m2 (D150 Haemofilter, Medica S.r.l, Medollo, Italy) .
Tip of venous catheter
Arterial port
Venous port
EREDMÉNYEK HF
HAEMOFILTRÁCIÓHAEMOFILTRÁCIÓNGAL-Ag koncentrációNGAL-Ag koncentráció
0
100
200
300
400
500
600
blood pre 5 30 60 90 120
blood pre arterial venous UFNG
AL
-Ag
antig
én k
once
ntrá
ció
(μg/
L
min
HAEMOFILTRÁCIÓHAEMOFILTRÁCIÓNGAL-Ag sieving koefficiensNGAL-Ag sieving koefficiens
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
0 5 30 60 90 120 min
Siev
ing
koef
ficie
ns
EREDMÉNYEK HP
HAEMOPERFÚZÓHAEMOPERFÚZÓNGAL-Ag koncentrációNGAL-Ag koncentráció
NG
AL
-Ag
antig
én k
once
ntrá
ció
(μg/
L)
min0
100
200
300
400
500
600
Blood pre 5 30 60 90 120
Saline pre arterial venous
IN VITRO TANULMÁNY ÖSSZEFOGLALÓ
In vitro tanulmányunk igazolta, hogy az NGAL-Ag adszorbálható és ultrafiltrálható polysulfon membránok által.
A fenti tényt figyelembe kell venni amikor az NGAL-Ag szintjét mint az akut veseelégtelenség biomarkerét használjuk extracorporális kezelések alatt.
AKI IDEÁLIS BIOMARKERE az NGAL?AKI IDEÁLIS BIOMARKERE az NGAL?
• Non invazív. √• Könnyen detektálható hozzáférhető mintákban, pl: szérum, vizelet. √
• AKI-ra erősen érzékeny és specifikus. ?• Könnyen, megbízhatóan mérhető. √
• Választ ad a sérülés etiológiájára, természetére, időtartamára. ? • A működés mellett a sérülés markere is. ? • AKI súlyosságának, reverzibilitásának jelzője. ?• Segít a beavatkozások által okozott sérülés és az arra adott válasz monitorozásában. ?• Más biológiai tényezők nem befolyásolják. ø• Nem drága. ?
KÖSZÖNET