adnan menderes Üniversitesi tıp fakültesi enfeksiyon hastalıkları … · 2013. 3. 22. ·...
TRANSCRIPT
-
M. Özlem Ersoy, Serhan Sakarya, Necati Günay, Güliz Güleç, Barçın Öztürk, M. Bülent Etuğrul, Serkan Öncü
Adnan Menderes Üniversitesi
Tıp Fakültesi Enfeksiyon Hastalıkları ve Kl. Mik. A.D
-
Kistik Fibrozis, sindirim sistemi, endokrin ve solunum sistemi gibi birçok sistemi ilgilendiren yüksek mortaliteye sahip otozamal resesif genetik bir hastalıktır.
Epitelyumde çözünmüş madde transportunun bozulmuş olması en karakteristik patolojidir. Bu patolojiye bağlı olarak hava yollarında oluşan dehidratasyon ve artmış mukus sekresyonu özellikle kronik bakteriyel enfeksiyonların oluşması için çok elverişli bir ortam oluşturmaktadır.
Özellikle Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, veStenotrophomonas maltophilia gibi aynı veya yakın türlerden oluşan Gram negatif bakteriler bu hastalarda sıklıkla izole edilmektedir.
KF li hastalardan izole edilen izolatlarda biyofilim oluşturma gibi fenotipik farklılıklar, akla biyofilim yapının kistik fibrozis akciğer enfeksiyonlarında enfeksiyonun eradike edilememesi ve antibiyotik direncinde en etkili virülans faktör olduğunu düşündürmektedir.
-
Kistik fibrozisli (KF) hastalarda oluşan
P.aeruginosa enfeksiyonlarında
mikroorganizmanın in vitro ortamda fenotipik
yapı özelliklerinin araştırılarak;
1. Aynı fenotipik özellikleri olan mikroorganizmalar mı
enfeksiyona neden oluyor?
2. Mikroorganizma enfekte ettikten sonra çevresel
koşullara bağlı olarak fenotipik yapı mı değiştiriyor?
Sorusuna cevap bulmaktır.
-
GEREÇ VE YÖNTEM
-
Çalışmamızda green florasan protein (GFP) transfer
edilmiş P. aeruginosa, normal (BEAS) ve KF (IB3-1)
bronşiyal, ve normal (1HEA) ve KF (CFTE) trakeal epitel
hücresi kullanılarak in vitro koşullarda;
◦ Aderans: kantitatif (fluorometrik) ve kalitatif (florasan mikroskopik)
olarak 24 kuyucuklu hücre kültür plaklarına ekilmiş hücreler ile,
◦ Büyüme oranları: fluorometrede 37 oC de inkübasyonda 485-535 nm
dalga boyunda 0, 6, 8, 12 ve 16. saatlerdeki fluoresans değerlerine
bakılarak,
◦ Slime üretimi: Kristal viyole boyama yöntemi ile slime üretimine bakılarak
belirlendi.
-
Trakeal Bronşiyal0
10
20Normal CF
*
Ad
hera
ns
(flu
ore
san
Un
it/1
mg
pro
tein
)
p
-
hücre
0 6 8 12 16
0
5
10
151HEA CFTE BEAS IB3-1 Kontrol
saat
Flu
ore
san
s ü
nite
-
BEAS
IB3-
1
Cont
rol
0.0
0.5
1.0
1.5 *, **A
bso
rban
s (O
D)
.*IB3-1 hücresindeki slime üretimi kontrol grubuna göre daha fazladır (p:0.0122).** IB3-1 hücresindeki slime üretimi BEAS hücresindeki slime üretimine göre daha fazladır. (p: 0.0035)
-
SONUÇ
-
P.aeruginosa’nın bronşiyal KF epitelinde aderansı
azalırken, biyofilm üretiminin artması ve morfolojik
yapısının değişimi,epitelyum yüzey yapısında oluşan
yapısal değişiklikler sonucu oluşan olumsuz ortam veya
bu değişikliklere neden olan genetik uyarının bakteri
üzerine direkt etkisine bağlı olduğu düşündürmektedir.
Tedaviye direnç gelişiminde bakterinin bu tür fenotipik
değişimleri göstermesi direncin temel nedenidir.