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Aislamiento hongos Aislamiento hongos fitopatógenosfitopatógenos
Curso: Diagnóstico de enfermedades
vegetales.Ing. Agr. Vivienne Gepp, MSc.
3 de junio de 2011
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Objetivos
• Conocer las principales técnicas que se usan para aislar hongos fitopatógenos.
• ¿de dónde?
• ¿cómo?
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¿De qué aislar?
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¿De qué aislar?
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¿De qué aislar?
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¿Cómo aislar hongos?
• Objetivo: – obtener un cultivo
puro del patógeno
• Técnicas de aislamiento:– desde el signo– desde tejido afectado– indirecto
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Aislamiento directo a partir del signo.
• Cuando la muestra vegetal presenta signo es posible tomar una pequeña porción del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo.
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Aislamiento directo a partir del signo.
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Aislamiento directo a partir del signo.
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Inducción del signo
• Cámara húmeda
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Semillas
• Rollo de papel absorbente – desinfección previa ?– 200 ppm 2,4D ?– -18 a -20ºC por 24 h ?
• Medio de cultivo– PDA + antibiótico
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Aislamiento a partir de trozos vegetales
• Sembrando trozos de tejido vegetal de la zona de avance del patógeno .
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Aislamiento a partir de trozos vegetales
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Aislamiento a partir de trozos vegetales
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Aislamiento indirecto
• Inocular tejido/órgano sano
• Aislar desde zona de avance
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Uso de cebos
• Para capturar Phythophthora spp del suelo o agua:– trozos de manzana verde – trozos de limón
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Obtención de colonias puras
• Trozo de hongo - ¿de dónde?
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Obtención de colonias puras
• Trozo de hongo - ¿de dónde?
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Cultivos monospóricos
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Bibliografía - aislamiento
• DHINGRA, O.D.; SINCLAIR, J.B. 1985. Basic plant pathology methods. Boca Raton : CRC, 355 p.
• FOX, F. T. V. 1993. Principles of diagnostic techniques in plant pathology. Wallingford : CAB International, 213p.
• FRENCH, E.R. y HERBERT, T. 1980. Métodos de investigación fitopatológica. Libros y materiales educativos, nº 43. San José, Costa Rica, IICA. 289p.