Ruppen Sandrine, BMA 11-14, MCL Niederwangen, Spezial Chemie

Akkreditierungskonforme Evaluation des Parameters Amiodaron von

aktuell HPLC auf HPLC-MS

1. Zusammenfassung / Abstract

Quellenverzeichnis: 1 Dr. Vögtli, A. [Stand 22.02.2014] Amiodaron. http://www.pharmawiki.ch/wiki/index.php?wiki=Amiodaron 2 Dr. Volkmann und Kollegen. [Stand 25.02.2014] Desethylamiodaron. http://www.laborvolkmann.de/analysenspektrum/HTML/index.html

Abbildungsverzeichnis: Abb. 5.1 Ruppen, S. (2014) Korrelationsanalyse der Amiodaronbestimmung mit den 74 Seren/Plasma. Niederwangen, eigene Abbildung

Amiodaron ist ein Herzmedikament welches gefährliche

Nebenwirkungen hat. Weil eine falsche Medikamentendosierung

tödlich enden kann, wird empfohlen, den Amiodaronspiegel im

Serum/Plasma regelmässig kontrollieren zu lassen.

Der Goldstandard beim Therapeutic Drug Monitoring (TDM) ist

die HPLC-MS Methode. Das MCL Labor in Niederwangen

analysiert den Parameter Amiodaron bislang auf der HPLC-

Methode. Um einen Wechsel der Methoden zu ermöglichen,

wird zuerst ein Methodenvergleich durchgeführt.

In dieser Arbeit wurden 74 Proben von Patienten, welche

Amiodaron zu sich nehmen, getestet. Die Proben wurden zuerst

auf der herkömmlichen HPLC Methode analysiert und dann auf

der neuen HPLC-MS Methode. Mit diesen Resultaten wurde ein

Methodenvergleich nach Passing & Bablok erstellt. Daraus

ergibt sich, beim Amiodaron, eine Proportionalität von 1.25. Die

Präzision liegt bei einem Variatonskoeffizient von <10% und die

Richtigkeit beträgt zwischen 85-115%.

6.1. Korrelationsanalyse nach Passing & Bablok

Wie in der Abb. 5.2 ersichtlich ist, eine Abweichung von der

Regressionsgeraden (schwarze Linie) zur Identitätsgeraden (graue

Linie). Idealerweise entspricht die Regressionsgerade der

Identitätsgeraden, welche durch den 0-Punkt geht und einen Winkel

von 45° aufzeigt. Der Achsenabschnitt der Korrelationsanalyse des

Parameters Amiodaron beträgt 0.11, ideal wäre 0 und die Steigung

beträgt 1.25, ideal wäre 1. Das MCL Labor lässt eine Abweichung

von maximal 15% zu. Somit wird das Kriterium, mit einer nicht

erklärbaren Abweichung von 25%, nicht erfüllt.

Schlussfazit ist, dass die Methodenevaluation keinen Erfolg zeigt und

der Parameter Amiodaron kann nicht auf dem HPLC-MS Gerät

übernommen werden.

Die Zielsetzung dieser Diplomarbeit ist die

akkreditierungskonforme Evaluation des Herzmedikamentes

Amiodaron von HPLC auf HPLC-MS.

1.Fragestellung: Korrelieren die Messergebnisse des

Massenspektrometers mit der herkömmlichen Methode?

- Beträgt die Differenz der Patientenergebnisse von HPLC

und HPLC-MS weniger als 15%?

- Ist die Präzision von weniger als 10% erfüllt?

- Ist die Richtigkeit unter 15%?

2.1. Amiodaron

Dieses Herzmedikament „ist in Form von Tabletten oder als

Injektionslösung im Handel“ erhältlich. „Amiodaron ist ein jodiertes

Benzofuran-Derivat, welches vom Kumarin Khellin abgeleitet ist.“ „Es

hat eine sehr lange Halbwertszeit von 20 – 100 Tagen.“

Amiodaronhydrochlorid ist „ein weisses, feines, kristallines Pulver,

das in Wasser sehr schwer löslich ist.“1

2.2. Desethylamiodaron

„Desethylamiodaron ist ein Stickstoff desethyliertes Derivat des

Amiodarons. Es ist der wirksamste Metabolit des Amiodaron.“2

2.3. Klinische Bedeutung

•Pharmakokinetik: Nicht jedes Individuum hat denselben

Stoffwechsel und Medikamentenmetabolismus.

•Die Arzneimittelspiegel im Blut korrelieren besser mit der

therapeutischen Wirkung, als mit der verabreichten Dosis.

•Viele Pharmazeutika wirken, bei zu hoher Dosis, toxisch.

4.1. Material

Um das Herzmedikament Amiodaron im Blut bestimmen zu können,

wird Serum/Plasma verwendet.

Ansonsten werden noch viele Reagenzien, Lösungen, Kalibratoren

und Kontrollen verwendet, welche aus Platzgründen nicht alle

aufgelistet werden. Natürlich wird auch ein HPLC Gerät und ein

HPLC-MS Gerät benötigt.

4.2. Methodik

Messprinzip HPLC (Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie)

Messprinzip MS (Massenspektrometrie)

4.3. Vorgehen

Mit dem sogenannten „Tuning“ wird das HPLC-MS Gerät richtig

eingestellt. (Einmalige Installation des Parameters)

Danach werden die Proben, nach einer bestimmten Vorschrift, zur

Messung vorbereitet. Zum Schluss werden die vorbereiteten Proben

auf dem HPLC-MS Gerät analysiert und ausgewertet.

Amiodaron HPLC ( mol/l)

Am

iod

aro

n H

PL

C ( m

ol/l)

5.1. Methodenvergleich

nach Passing & Bablok

(Korrelationsanalyse)

In der Abb. 5.1 sind alle

74 Patientenresultate

erfasst. Diese

Korrelationsanalyse stellt

den Methodenvergleich

der Amiodaron-

bestimmung dar. Die

Regressionsgerade nach

Passing & Bablok beträgt

y = 0.11 + 1.25x. Der

schwarze Strich

kennzeichnet die

Regressionsgerade und

die graue Linie stellt die

Identitätsgerade dar.

Abbildung 5.1 Korrelationsanalyse der Amiodaron-

bestimmung mit den 74 Seren/Plasma

2. Einleitung

3. Ziele und Fragestellungen 4. Material, Methodik, Vorgehen

5. Ergebnisse / Resultate

6. Diskussion