aktivitas imunostimulator kombinasi ekstrak kayu …eprints.unwahas.ac.id/1026/1/cover.pdfii...
TRANSCRIPT
i
AKTIVITAS IMUNOSTIMULATOR KOMBINASI EKSTRAK KAYU MANIS
(Cinnamomum Verum) DAN SAMBILOTO (Andrographis Paniculata)
TERHADAP IgG MENCIT BALB/C YANG DIINDUKSI VAKSIN
HEPATITIS B
SKRIPSI
Oleh :
Siti Saidah
145010091
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS WAHID HASYIM
SEMARANG
2018
ii
AKTIVITAS IMUNOSTIMULATOR KOMBINASI EKSTRAK KAYU MANIS
(Cinnamomum Verum) DAN SAMBILOTO (Andrographis Paniculata)
TERHADAP IgG MENCIT BALB/C YANG DIINDUKSI VAKSIN
HEPATITIS B
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana
Farmasi Program StudiI lmu Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Wahid Hasyim
Semarang
Oleh:
Siti Saidah
145010091
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS WAHID HASYIM
SEMARANG
iv
SURAT PERNYATAAN
Yang bertanda tangan di bawah ini saya:
Nama : Siti Saidah
NIM : 145010091
Judul Skripsi :Aktivitas Imunostimulator Kombinasi Ekstrak Kayu Manis
(Cinnamomum Verum) Dan Sambiloto (Andrographispaniculata)
Terhadap IgG Mencit Balb/C Yang Diinduksi Vaksin Hepatitis B.
Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan
saya, juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan
orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam
daftar pustaka.
Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk digunakan sebagaimana mestinya.
Semarang, 5 Maret 2018
Siti Saidah
v
MOTTO DAN PERSEMBAHAN
“ opportunities don’t happen. You create them. (Chris Grosser)”
Karya Ilmiah ini aku persembahkan kepada :
Ibu dan Bapakku yang tidak pernah lelah untuk
menyayangiku, terima kasih atas semua doa yang selalu
kau berikan kepadaku dalam setiap hembusan nafasmu.
Masku, Nawoto terima kasih atas semua dukungan dan
kesabaran yang telah kamu berikan kepadaku
Adik-adikku Inayah, wiwik dan fitrotul semoga kalian
selalu semangat untuk mengejar cita-cita.
Almamaterku
vi
KATA PENGANTAR
Puji syukur senantiasa penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala
rahmat serta hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
penulisan skripsi yang berjudul “Aktivitas Imunostimulator Kombinasi Ekstrak
Kayu Manis (Cinnamomum Verum) Dan Sambiloto (Andrographispaniculata)
Terhadap IgG Mencit Balb/C Yang Diinduksi Vaksin Hepatitis B”. Skripsi ini
disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh derajat Sarjana
Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang. Penulis
mengucapkan banyak terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu dalam
penyusunan skripsi ini, sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Rasa
terima kasih juga penulis haturkan kepada :
1. Ibu Aqnes Budiarti, S.F., M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Wahid Hasyim Semarang
2. Ibu Maria Ulfah, S.Farm., M.Sc., Apt selaku dosen pembimbing yang telah
memberikan bantuan, bimbingan, semangat, perhatian dan kesabarannya selama
penelitian dan penyusunan skripsi ini.
3. Bapak Drs. H. Ibrahim Arifin, M.Sc., Apt serta Ibu Ririn Lispita W, M.Si., Med.,
Apt selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan koreksi terhadap
skripsi ini.
4. Dosen-dosen di Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yang
telah memberikan bekal ilmu pengetahuan sebagai dasar penulisan skripsi ini.
vii
5. Seluruh staf di Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi Universitas Wahid
Hasyim Semarang yang telah membantu pelaksanaan penelitian ini.
6. Bapak Nur Hasan dan Ibu Alfafa terimakasih atas semua dukungan dan doanya
selama ini.
7. Sismiyati, Metalia, Maulida, Layyina Mawardah, Gita Karmila, Ummu Jauharin,
Siswanto, Asani, Andi dan Efa yang selalu ada dalam suka dan duka.
8. Keluarga Louis, Kholifah, Arif Mirza dan Lina Wahyuni terima kasih karena
sudah menjadi partner penelitian yang menyenangkan.
9. Staf Laboratorium Parasitologi Universitas Gajah Mada Yogyakarta.
10. Teman-teman Farmasi A angkatan 2014, terima kasih atas solidaritas,
kebersamaan selama kita bersama.
Semoga Allah SWT senantiasa melimpahkan berkat-Nya kepada pihak- pihak
yang telah berjasa dalam penyusunan skripsi ini. Penulis menyadari sepenuhnya
bahwa skripsi ini masih memiliki kekurangan, untuk itu segala kritik dan saran yang
membangun sangat penulis harapkan demi perbaikan di masa mendatang. Semoga
penelitian ini dapat memberikan sumbangan yang berarti bagi ilmu pengetahuan pada
umumnya dan dunia farmasi pada khususnya.
Semarang, 5 Maret 2018
Siti Saidah
viii
DAFTAR ISI
Halaman
COVER ............................................................................................................. i
HALAMAN JUDUL ......................................................................................... ii
PENGESAHAN ................................................................................................. iii
SURAT PERNYATAAN .................................................................................. iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ....................................................................... v
KATA PENGANTAR ....................................................................................... vi
DAFTAR ISI ...................................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ............................................................................................. xii
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xiii
INTISARI ......................................................................................................... xiv
ABSTRACT ........................................................................................................ xv
BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1
A. Latar Belakang Masalah .................................................................. 1
B. Rumusan Masalah............................................................................ 4
C. Tujuan Penelitian ............................................................................. 4
D. Manfaat Penelitian ........................................................................... 5
E. Tinjauan Pustaka.............................................................................. 5
1. Sistem Imun ............................................................................... 5
2. Kekebalan Imun Humoral ......................................................... 9
ix
3. Imunoglobulin G ....................................................................... 10
4. Imunomodulator ........................................................................ 11
5. Kayu Manis................................................................................ 12
6. Sambiloto ................................................................................... 14
7. Ekstraksi .................................................................................... 16
8. Vaksin Hepatitis B .................................................................... 17
9. ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Assay) ......................... 18
10. Levamisol .................................................................................. 19
F. Landasan Teori ............................................................................... 19
G. Hipotesis ......................................................................................... 20
BAB II. METODE PENELITIAN ................................................................... 21
A. Jenis dan Variabel Penelitian ......................................................... 21
B. Bahan Penelitian............................................................................. 21
C. Alat Penelitian ................................................................................ 22
D. Jalannya penelitian ......................................................................... 22
1. Determinasi Tanaman ................................................................ 22
2. Pengumpulan Bahan dan Pembuatan Serbuk Simplisia ............ 22
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Sambiloto dan Kayu Manis ............ 23
4. Kriteria Inklusi dan Eksklusi ..................................................... 24
5. Perizinan Ethical Clearence ...................................................... 24
6. Pengelompokkan Hewan Uji ..................................................... 24
7. Perlakuan Hewan Uji ................................................................. 25
x
8. Penetapan Kadar IgG Dengan ELISA Tidak Langsung ............ 27
E. Analsis Data .................................................................................. 38
F. Skema Jalannya Penelitian ........................................................... 29
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 30
A. Determinasi Tanaman ................................................................... 30
B. Pembuatan Ekstrak Sambiloto dan Kayu Manis .......................... 30
C. Penenuntuan Aktivitas Imunomodulaor ....................................... 33
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN......................................................... 44
A. Kesimpulan ................................................................................... 44
B. Saran ............................................................................................. 44
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 45
LAMPIRAN ....................................................................................................... 51
xi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Grafik Produksi Antibodi IgG ..................................................... 10
Gambar 2. Kayu Manis .................................................................................... 13
Gambar 3. Sambiloto ........................................................................................ 15
Gambar 4. Serbuk Kayu Manis ....................................................................... 31
Gambar 5. Serbuk Sambiloto .......................................................................... 31
Gambar 6. Reaksi TMB Dan Peroksidase Pada Metode ELISA ................. 34
Gambar 7. Histogram IgG hari ke-14 ............................................................. 36
Gambar 8. Histogram IgG hari ke-28 ............................................................. 41
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Data Uji LSD Pada Hari ke-14 ............................................... 36
Tabel 2. Data OD IgG Hari Ke-14 ................................................................... 60
Tabel 3. Data OD IgG Hari Ke-28 ................................................................... 67
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Determinasi Tanaman Sambiloto dan Kayu Manis ................ 51
Lampiran 2. Jalannya Penelitian ..................................................................... 54
Lampiran 3. Data Perhitungan Preparasi Sampel Uji .................................. 57
Lampiran 4. Nilai OD IgG ............................................................................... 59
Lampiran 5. Nilai OD IgG hari ke-14 ............................................................. 60
Lampiran 6. Analisis Statistika Data OD IgG Hari Ke-14 ........................... 61
Lampiran 7. Nilai OD IgG Hari Ke-28 ........................................................... 67
Lampiran 8. Analisis Statistika Data OD IgG Hari ke-28 ............................ 68
Lampiran 9. Ethical Clearence ......................................................................... 70
xiv
INTISARI
Daun Sambiloto dan Kayu Manis mengandung banyak komponen kimia yang
dapat digunakan sebagai agen imunostimulan. Penelitian ini bertujuan untuk
mengkaji efek imunostimulan dari kombinasi ekstrak etanol Sambiloto dan Kayu
Manis dengan melihat ekspresi sistem imun humoral (IgG) pada mencit Balb/C yang
telah di induksi vaksin Hepatitis B.
Ekstraksi kedua bahan menggunakan etanol 96% dengan cara soxhletasi
kemudian dikentalkan dengan rotary evaporator. Perlakuan pada hewan uji dilakukan
dengan pemberian oral pada masing-masing ekstrak 150 mg/kgBB dan kombinasi
ekstrak Sambiloto dan Kayu Manis 1:1, 1:2, dan 2:1. Pengamatan sistem imun
Humoral IgG dengan menggunakan metode ELISA tidak langsung.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian kombinasi ekstrak Sambiloto
dan Kayu Manis dapat meningkatkan sistem imun humoral (IgG) tertinggi yaitu pada
pemberian dengan dosis ES:EKM 2:1 (300mg/KgBB:150mg/KgBB) baik pada serum
hari ke-14 dan serum pada hari ke-28. Dimana pada uji imunostimulan pada hari ke-
14 terdapat perbedaan bermakna antara pemberian ES:EKM 2:1, Sambiloto tunggal
terdapat perbedaan bermakna dengan kontrol negatif dan kontrol normal.
Kata kunci : Sambiloto, Kayu Manis, Imunostimulan, IgG, ELISA tidak
langsung
xv
ABSTRACT
Andrographis and cinnamon contains a lot of chemical components that can
be used as agent imunostimulan. this study aims to assess the effects imunostimulan
of combination extract ethanol Andrographis herbs and Cinnamon by looking at the
expression of the immune system humoral (IgG) in mice Balb / C that has been in the
induction of vaccine Hepatitis B.
Extraction materials using ethanol 96% by Soxhletasi then in thicken with
Rotary Evaporator. treatment of animals test done with oral administration on each
extract 150mg/kgbb and combination extract Andrographis herbs and Cinna
mon 1: 1, 1: 2, and 2:1.
Observation of the immune system humoral IgG by using the method Elisa
indirectly.the results showed that the provision of a combination of extract
Andrographis herbs and Cinnamon can increase the immune system humoral (IgG)
highest that is in the provision of doses of ES:EKM 2: 1 (300mg / kgbb: 150mg /
kgbb) good on serum the 14th and serum day to 28. where in the test imunostimulan
day 14th there are significant difference between the provision of ES:EKM 2: 1, bitter
single there are significant difference with negative control and control normal.
Keywords : Andrographis herbs and Cinnamon, Imunostimulan, IgG, ELISA
Indirect.