amélioration du diagnostic microbiologique des...
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Amélioration du diagnostic microbiologiquedes endocardites infectieuses
à hémoculture négative :trois premiers cas à Malassezia restricta
Linda HOUHAMDI-HAMMOU
Laboratoire de Bactériologie : Pr. VANDENESCH, F.
Institut des Agents Infectieux, Hospices Civils de Lyon
Journée de l’endocardite infectieuse 4ème édition
14/12/2017
EI : outils diagnostiques
Clinique : Microbiologique :
Imagerie: Anatomopathologie :
EI
Culture
Sérologie
BioMol
Staphylocoques36,3%
Streptocoques -Entérocoques
48,3 %
HACCEK1,2%
Autres6%
Candida spp.1,2%
Polymicrobienne1,8%
Non documentée
5,2%
EI : étiologies microbiennes
HACCEK* : Haemophilus, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Cardiobacterium, Capnocytophaga, Eikenella, Kingella.Autres ** : Coxiella burnetii, Bartonella quintana, Tropheryma whipplei, qq cas : Gordonia bronchialus, Entérobactéries, P. acnes, Neisseria …
Adapté de Cahill and Prendergast. Lancet, 2016
Objectif de l’étude :
Améliorer le diagnostic microbiologique
des EI certaines
sans documentation étiologique
Patients et Méthodes (1)
Valves cardiaque disponiblesn = 171
EI certainesn = 67
- Non conforme (n = 1)- EI exclues (n = 82) - Culture valvulaire positive (n = 21)
• Étude rétrospective (2011-2015)
• Diagramme d'inclusion des valves cardiaques :
HC positiven = 20
PCRm positiven = 30
HC/PCRm/Séro/Histo négatives n = 3
HC/PCRm/Séro neg / Histo posn = 14
n = 13
1 QI
HC : hémoculture. PCRm : PCR maison sur valve. Histo : histologie. Séro : sérologies bactériennes (Coxiella burnetii, Bartonella, Brucella). QI : quantité insuffisante
Patients et Méthodes (2)
retrouvée dans le nodule de flanc droit du patient N°2 un mois avant son décès par un sepsis récidivant non documenté.
3 témoins positifs : 2 à S. aureus + 1 à Tropheryma whipplei4 témoins négatifs : 4 valves d’EI exclue
16S and 18S rDNA
Treize étiologies bactériennes
13 patients PCR 16Spositive
3 patients PCR 18Spositive
• 5 mono- bactériennes :• 2 Streptococcus mitis• 1 St. cristatus• 1 Enterococcus cecorum• 1 Moraxella spp.
• 8 poly- bactériennes :• 4 Streptococcus oral Taxon - St. oralis*• 1 St. sineusis - St. oligofermentas• 1 St. oral Taxon - Neisseraia subflava/sicca*• 1 Abiotrophia defectiva - Neisseria pharyngia• 1 Enterococcus faecalis - E. cecorum*
16 patients inclus
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I
Contrôles (3 valves EI certaines, 4 valves EI exclues + les contrôles du kit) : résultats attendus
* : cas à histologie négative
Trois étiologies fongiques
• 3 Malassezia restricta
13 patients PCR 16Spositive
3 patients PCR 18Spositive
16 patients inclus
Contrôles (3 valves EI certaines, 4 valves EI exclues + les contrôles du kit) : résultats attendus
Malassezia : généralités• Levures lipophiles lipo-dépendantes. Classe : Basidiomycètes.
• Microbiote cutané habituel de l’homme.
• Mycoses cutanées fréquentes non contagieuses.
• Quelques atteintes profondes avec fongémie rapportées chez nouveau-nés prématurés ou patients sous nutrition parentérale.
M. globosa. Culture sur milieu de Dixon (x 1000)
M. furfur. Bourgeonnement en microscopie électroniqueM. globosa. Pityriasis versicolor
N Engl J Med (1981, 2007). Lancet (1979). JID (1987). J Pediatr (1983, 1984, 1985). Pediatr Infect Dis (1984)
T = 0
39°C, détresse respiratoireaigue et mauvaise évolution
neurologique
Y+6 and W1
Arrêt cardio-pulmonaire
M-15
Remplacementvalvulaire
mécanique
Vancomycine, gentamicine et rifampicinePiperacilline/tazobactam,
vancomycine et clindamycine
Y+6 Décès
Hématoxyline-éosine safran
Gr, x400
Hématoxyline-phloxine-safran
Gr, x100
Acide périodique de SchiffGr, x400
Auto-immunohistochimie (sérum dilué au 1:500)
Gr, x100
Grocott-GomoriGr, x400
Patient N°1. Homme/66 ans (EIHN en 2011)
Valve aortique« positive à Malassezia
restricta »
Valve aortique« positive à Malassezia
restricta »
DécèsM+6
Limitation thérapeutique
T = 0
Nouveau sepsis + apparition de nodule
du flanc droit
Nutrition parentérale SmofKabiven®
M-2 W+2
Caspofungine et daptomycine(Candida non albicans – ECBU + C. glabrata buccal et rectal)
Caspofungine, daptomycine,Imipénème et gentamicine
Daptomycine, gentamicine
et ceftriaxone Imipénème, daptomycine et amikacine (Klebsiella BMR - ECBU)
M+1
“ Lésions de grattage -
membre supérieur droit ”
Remplacement valvulaireaortique biologique
Valve aortique. GMS
GMS: Grocott-Gomori méthénamine argentAuto-IHC: autoimmunohistochimieValve aortique. GMS
Valve aortique. Auto-IHC (sérum dilué au 1:500)
Nodule du flanc droit. Auto-IHC(sérum dilué au 1:500)
Gr, x25
Gr, x200
Gr, x1000
Gr, x200
Patient N°2. Femme/72 ans (EIHN en 2013)
1er remplacement valvulaire biologique(aortique et mitrale)– IE à St. anginosus
M-10 M-7 M+3 M+4 Évolutionfavorable
T = 0
Amoxicilline et
gentamicine
clindamycin and
rifampicin
Nutrition parentérale SmofKabiven®
M+1
Daptomycine,
ciprofloxacine et
fosfomycine
Daptomycine, imipénème
et ciprofloxacine
Caspofungine (4 j)
Amphotéricine B +
5-fluorocytosine,
daptomycine, imipénème
et ciprofloxacine
Fluconazole2ème remplacement valvulaire (mitrale)
“ escarres sacrés
et du cuir chevelu ”
Valve mitrale « positive à Malassezia
restricta »
Patient N°3. Femme/42 ans (EIHN en 2015)
3ème remplacement valvulaire (mitrale)
Réactions sérologiques croisées
IFI. Immunofluorescence indirecte. IEP. Immunoélectrophorèse. T = 0. Date de chirurgie cardiaque positive à M. restricta. M-(+)X. X mois avant(après) T = 0.
Intervalles
de
référence
Patient
N°1Patient N°2 Patient N°3
Kit EI
(T = 0)
Kit EI
(M-2)
Kit EI
(T = 0)
Kit EI
(M-7)
Kit EI
(T = 0)
Kit EI
(M+3)
Kit EI
(M+4)
C. albicans Ag mannanes
(Unit/mL)
Négative: < 1.4
Positive: > 2.60.08 0 0 0.65 0.1 0 0
C. albicans Ac anti-mannanes
Dépistage - IFI (titre)Positive: ≥ 160 0 1/80 1/160 1/80 1/160 1/320 1/40
Confirmation - IEP (arc)Négative: 0
Positive: ≥ 10 2 2 2 2 2 2
Discussion et conclusions
M. restricta =agent causal d’EIHN
PCR, Grocott, auto-IHC,clinique, thérapeutique,
épidémio
- Décès d’EI récidivantes sous caspofungine (résistance naturelle)
- Évolution favorable sous amphoB+F-cytosine/fluconazole
3 révélés par des complications neurologiques
3 associés aux soins : dispositifs intra-vasculaires
après remplacements valvulaires
2 en dénutrition sévère SmofKabiven®
Impact thérapeutique majeur de séro-réaction croisée avec Ac anti-mannanes de C. albicans
M. restricta mal diagnostiquée comme C. albicans
Algorithme décisionnel de diagnostic des EIHN :- GMS, - PCR panfongique,- Culture spécifique Malassezia spp.
Incidence réelle
Merci pour votre attention