生物科技與生命倫理 ~dna 的真相 ~
Post on 17-Jan-2016
79 Views
Preview:
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
6/5科學實作練習活動
生物科技與生命倫理~DNA 的真相 ~
DNA 萃取原理
將複雜的細胞分子混合物加入有機溶媒,除去蛋白質及其他成分,就可以純化 DNA 。
一般常用酚及氯仿 (phenol/chloroform) 可使蛋白質變性 (denaturaion) 的特性來進行萃取的步驟, DNA 和 RNA 不溶於有機溶媒中,而溶於水層。
另外,分子選殖 (molecular cloning) 常利用洋菜膠(agarose) 來分離不同大小的 DNA 片段或用以純化DNA 。
放置恆溫水槽 65℃ for 6 minutes
放置恆溫水槽 98℃ for 2 minutes
口腔黏膜細胞
DNA 萃取溶液*
口腔細胞D
NA
萃取步驟
*組裝水平電泳膠片等膠片凝 固約 15 分鐘
DNA 水平電泳槽
Agarose( 膠片 )
( 三分一的高度 )
1. 拿 Loding dye + 自己口腔萃取 DNA溶液 染色 1:52. 電壓 100V :電流由負極往正極流3. 加好 SAMPLE 等待 25 分鐘左右
Etbr 染色原理
EtBr 會嵌入核酸配對 ( 雙股 DNA 或單股DNA 、 RNA 的自我配對二級結構 ) 之間。
EtBr 受到紫外線照射時會發出橘紅色的螢光,與核酸結合時的螢光強度約是游離態時的 20 倍。藉此可偵測核酸。
(1) 溴化乙啶 (ETBR) 染色(2) 在使用 UV 照射(3) 最後使用電泳膠片顯像儀, 看自己 DNA 序列
( 跑好電泳膠片 )
1. 注意事項 : (1)ETBR 是一個致癌化學物質 ,使用前請戴手 套,使用請小心,觸碰到 ETBR 請別亂摸周遭環境2.ETBR 廢棄物要在陽光下,照射 N 禮拜才會分解掉
top related