3 obtención de componentes sanguineos fraccionamiento
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Obtención de ComponentesSanguíneos: Fraccionamiento
JUAN CARLOS CALDERON M. D.
MAYO 2010
Ca. 1786 Bellevue Hospital, NY
1892. Adler J, “Transfusión de sangre de cabra”, detalle. (Simon Bernheim"Transfusion de sang de chevre et tuberculose pulmonaire")
Dr. Lewisohn, 1915
Dr. Durán, 1937
Botella para Colecta de sangre 1945
Bolsa de sangre de Baxter, 1954
Transfusión sanguínea en una ambulancia
Hemoterapia
• Los progresos en la obtención y conservación de los diferentescomponentes sanguíneos han hechoposible la administración separada de las distintas fracciones hemáticas.
Hemoterapia Moderna
Hemoterapia
Colecta de donante
Aferesis de plaquetas
Plasmaferesis
Densidad de los componentes sanguíneos
Importante conocerla en el banco de sangre moderno para una adecuada separación de los componentes sanguíneos
SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA SANGRE POR GRADIENTE DE CENTRIFUGACIÓN SEGÚN SUS
DENSIDADES ESPECÍFICAS.
SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA SANGRE POR GRADIENTE DE CENTRIFUGACIÓN SEGÚN SUS
DENSIDADES ESPECÍFICAS.
AUTOMATIZACION DEL BANCO DE SANGRE
• Distintas configuraciones bolsas de extracción:
– “Arriba-Abajo”
– “Arriba-Arriba”
– “Bioseguras”
• Filtración prealmacenamiento
• Fraccionadores automáticos
CLP: Capa Leucoplaquetaria, CHPL: Concentrado Hematies, Leucocitos y plaquetas
Conservación
Como consecuencia de fraccionar la donación de sangre total.
Los componentes sanguíneos obtenidos precisan condiciones diferentes para su conservación.
Condiciones óptimas deAlmacenamiento
En el caso de componentes celulares (hematíes y plaquetas) el almacenamiento debe asegurar no solo la FUNCIÓN sino también suVIABILIDAD.
En el caso del plasma y sus derivados, deben conservar la función de las proteínas, especialmente de los factores de coagulación. (Termodependientes).
Hematíes o Glóbulos Rojos
Almacenamiento de los hematíes
OBJETIVO:• Mantenimiento de la viabilidad
celular:– Supervivencia de los hematíes a las
24 horas de la transfusión (≥75%).
• Mantenimiento de su función celular:– Capacidad de las células
transfundidas para transportar normalmente el oxígeno a los tejidos.
• Refrigerados entre 2º C a 6º C
Almacenamiento de los hematíes
Produce una serie de alteraciones:
• “Lesión de almacenamiento”:
– 1. Cambios bioquímicos
– 2. Cambios biomecánicos
– 3. Cambios Oxidativos
Metabolismo
Bioquímico
Lactato
Depleción del sustrato
El glutatión reducido (GSH) es un tripéptido que se encuentra
presente en elevadas concentraciones dentro del eritrocito (2 mM).
La HbNO transfiere el NO a los grupos tiol (-SH) de ß93Cys
para formar S-NitrosoHb (SNO-Hb). SNO-Hb ↓
LESIÓN POR ALMACENAMIENTO
Oxidativos
SNO-Hb ↓
LESIÓN POR ALMACENAMIENTO
Biomecánicos
Hemólisis
Morfología
Vesiculación
Area de Membrana
Area/Volumen
Deformabilidad
Fosfatidil – Serina
Volumen
Gradiente Na/K
Biomecánicos
LESIÓN POR ALMACENAMIENTO
Oxidativos
Oxidación de la Hemoglobina
Desnaturalización de la Hemoglobina
Peroxidación de los Lípidos
Antígenos anti Bd3
Sustancias liberadoras bioactivas
Daños en el citoesqueleto
Metabolismo del Hematíe
• Dos fosfatos orgánicosdesempeñan un papelfundamental:
– 2, 3 -difosfoglicerato (2,3-DPG)
– Adenosintrifosfato (ATP)
Metabolismo del Hematíe
• 2,3-DPG hace que la hemoglobina tenga una mayor afinidad
por el O2 cesión menor del mismo a los tejidos.
Metabolismo del Hematíe
Grupos S-nitrosotioles – S nitrosohemoglobina
Acción sobre arteriolas y capilares incremento del
flujo sanguíneo
1. Cambios bioquímicos
a) Descenso progresivo en los niveles de 2,3-DPG.
b) Progresivo descenso en la concentración de ATP y cambios morfológicos en los hematíes.
c) Cambios metabólicos:• Preferencia vía glicólisis anaerobia frente a
la pentosa fosfato, perdiendo poderreductor volviéndose más sensible a ataques oxidativos.
• Los niveles de 2,3-DPG disminuyen linealmente las dos primeras semanas durante el almacenamiento.
• Recuperación rápida de la mitad de los niveles de 2,3-DPG a las 12 horas de transfundidos.
• A las 24 horas niveles normalesde 2,3-DPG.
1. Cambios bioquímicos: 2,3-DPG
Metabolismo Hematíe
90% vía Glucólisis anaerobia
• Energía: ATP
• NADH: Mantiene el hierro reducido (ferroso).
• 2,3-Difosfoglicerato: Regula afinidad de la hemoglobina por el oxígeno
Soluciones de almacenamiento
• ACD: Acido-Citrato-Dextrosa
• CPD: Citrato-Fosfato-Dextrosa
Retrasa la pérdida de 2,3-DPG, mejorando la función y ligeramente la supervivenciaal incrementar el pH.
• CPD-A: Citrato-Fosfato-Dextrosa-Adenina.
Adenina se desamina en inosina rápidamente → niveles aceptables de ATP.
2.Cambios biomecánicos
a) Pérdida de fosfolípidos de la membrana eritrocitariay una distribución anómala de los mismos:
– Equinocitos y esferocitos
b) Aumento de la fragilidad osmótica:
– Hemólisis de los hematíes
Soluciones aditivas
• CPDA-1; CPDA-2– Incremento cantidad de glucosa
• SAG-M:– Manitol como protector de la membrana
eritrocitaria.
• ADSOL:– Incremento dosis de adenina 27 mg/dL– Mayor cantidad de Manitol (750 mg)– Solución salina Isotónica (0.9gr/dL)
• OPTISOL (AS-5):– Buena dosis de adenina 30 mg/dL– Menor cantidad de Manitol que todas las
del mercado (525 mg)– Cantidad de NaCl, levemente menor que
la del plasma (0.877 gr/dL)
Viabilidad de los hematíesRefrigerados
• ACD ó CPD: 21 días
• CPDA: 35 días
• Soluciones aditivas:
• SAG-M [Salina, adenina, glucosa, manitol]: 42 días.
• ADSOL: 42 días. (45?)
• OPTISOL: 42 días.
A FUTURO
• Estandarización de los concentrados de hematíes
• Disminución riesgotransfusional por infección
• Concentrados de hematíesuniversales
• Alargamiento de caducidadactual:– EAS-61 Para almacenamiento
hasta por 9 semanas– EAS-64 Para almacenamiento
hasta por 10 semanas– EAS-76 Para almacenamiento
hasta por 11 semanas
A FUTURO• Alargamiento de caducidad
actual (Cont.)
– Estas soluciones cumplen con los estándares de la FDA (hemólisis <1%; Sobrevida de GR >75% al final del tiempo de preservación de cada uno).
– Otras soluciones están en estudio y son diseñadas para recuperar y aumentar los niveles de ATP y 2,3 DPG en los GR almacenados por varias semanas
Plaquetas
Ciclo de preparación
Ciclo de preparación
Almacenamiento de plaquetas
• El almacenamiento debe asegurar
no sólo la FUNCIÓN si no también
su VIABILIDAD.
• No contienen ADN ni ARN
activación y liberación de sus
gránulos incapaces de
resintetizarlos.
• Particularmente susceptibles a
dañarse si se almacenan de manera
incorrecta.
Plaquetas: Cambios Morfológicospor Activación
Puntos críticos en la conservaciónde las plaquetas
• Temperatura
• pH
• Intercambio gaseoso
Proceso de reparación de una herida 1
Conservación de Plaquetas
• Temperatura:– Frío produce DAÑO
PLAQUETARIO las plaquetas cambian su forma DISCOIDAL por ESFÉRICA.
• 18-24ºC• Observación del fenómeno del
remolino u “ondas muaré” (“Swirling”)
Proceso de reparación de una herida 2
ACTIVACION PLAQUETARIA
Puntos Críticos en Consevación Plaquetaria
• Temperatura
• pH
• Intercambio Gaseoso (CO2 O2)
Conservación Plaquetaria
• Temperatura
– Frío produce daño plaquetario las plaquetascambian su forma discoidal por esférica
– 18° a 24° C
– Observación del fenómeno de “Swirling”(remolino u ondas Muaré) Fenómeno causado porla diferente refractariedad de la luz por lasplaquetas.
Swirling plaquetario
Swirling Plaquetario
Plaquetas normales de forma discoide
Plaquetas normales de forma discoide
Refracción de la Luz = “Swirling”
Swirling Plaquetario
pH bajo o alteración metabólica alteran la forma plaquetaria y
pierden su forma discoide, como resultado no hay refracción de
la luz = No “Swirling”
Conservación Plaquetaria
• pH
– Pérdida rápida de Glucógeno plaquetario, hay aumento del lactato pH
– pH de 6.2 a 6.8 = Cambios reversibles
– pH < 6.2 = Cambios irreversibles en la plaqueta
• Proceso es Irreversible cuando:– Hinchazón o pérdida de la forma discoide
– Aglutinación
– Lisis
– pH limites = 6.4 a 7.4
Conservación Plaquetaria
Intercambio Gaseoso:• Bolsa de conservación debe ser
gas permeable– Oxigenación adecuada– Eliminación del CO2 resultante del metabolismo
del ácido Láctico
• Mantener la agitación continua– Facilitar el intercambio gaseoso a través de la
pared de PVC de la bolsa– 24 Hrs sin agitación, los daños son reversibles.
Conservación Plaquetaria
• Viabilidad Plaquetaria = 7 días
• Periodo Máximo de conservación = 5 días
– Riesgo aumentado de sepsis en receptores por contaminación bacteriana
Conservación Plaquetaria
• RD 1088/2005 hasta 7 días si
se emplean métodos de
detección o reducción de la
contaminación bacteriana
– Azul de Metileno (Theraflex)
– Intercept – Cereus (Amotosalem)
– Mirasol – Caridian BCT (este usa
Riboflavina e iluminación)
El problema
Estafilococo spp
Estreptococo spp
El problema: CONTAMINACION
Causas más probables: A- Limpieza del área de venopunción deficiente o inadecuada
B- Set de donación abierto
C- Bacteremia asintomática del donante (E. Coli)
D- Defectos de manufactura del set
PLASMA FRESCO CONGELADO
Volumen: 200 a 250 ml
Proteínas: 12 grs (albúmina)
Contiene:Agua
Sodio
Todos los factores de coagulación lábiles y estables
PLASMA FRESCO CONGELADO
1 ml de PFC x Kgr de peso del paciente, eleva la mayoría de los factores de coagulación en +/- 1% de su actividad
NO DEBE USARSE COMO EXPANSOR PLASMÁTICO DE ELECCIÓN.
PLASMA FRESCO CONGELADO
INDICACIONES:
Hemorragia por defecto de factores de coagulación sin terapia específica
Intoxicación por cumarínicos y PT mayor 16 sg
PTT mayor de 55 sg (No por heparina)
PT y PTT mayor de 1,5 del promedio normal en pacientes prequirúrgicos ó INR de 1.6
PLASMA FRESCO CONGELADO
INDICACIONES:
Deficiencias de factores II, V, VII, IX, X, XI
CID en fase hemorrágica
Transfusión masiva
Deficiencia de antitrombina III, proteína C y S
Hemofilia B
Tratamiento de la PTT con plasmaféresis
CRIOPRECIPITADO
Volumen: 10 a 20 ml
Fibrinógeno: 300 a 350 mg.
Factor VIIIC: 80 a 100 UI
F. Von Willebrand: 70%
Factor XIII
Trombina
Fibronectina
CRIOPRECIPITADO
INDICACIONES:
• Hemofilia A: deficiencia de factor VIIIC
• Enfermedad de Von Willebrand
• Hipofibrinogenemia
• Disfibrinogenemia con hemorragia
• Aporte de fibronectina tisular
DOSIS: 2 U por 10 Kg de peso
Parámetros previos al fraccionamiento a tener en cuenta
• Extracción: 450 mL +/- 50 mL (405 a 495 mL) + anticoagulante: 63 mL de CPDA-1 o 63 mLCPD + 100 mL SAG/Manitol (Optisol = AS5)
• Temperatura de conservación:– Refrigerada entre +20° C y +24°C en placas de
1,4 Butanodiol (desde +37°C hasta 22°C)
– Hasta un máximo de 18 a 24 horasprefraccionamiento (depende de la temperaturamedioambiantal) con un mínimo de 2 horas antes del fraccionamiento
Cadena continua de producción
Donante de
sangre
Paciente
La calidad en todos los aspectos del trabajo en banco de sangre
MUCHAS GRACIAS!
SIEMPRE ES UN PLACER TRABAJAR PARA UN GRUPO SELECTO COMO ES EL DE USTEDES!!!
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