คู มือการใช งาน hplc shimadzu รุ น lc-20aการท า wizard...

คูมือการใชงาน HPLC Shimadzu รุน LC-20A

กับ Software รุน LCsolution

ตัวแทนจําหนายผลิตภัณฑ อะไหล และบริการ บริษัท พาราไซแอนติฟค จํากัด

968 ถนนพระราม 4 แขวงสีลม เขตบางรัก กรุงเทพฯ 10500 โทรศัพท 02-632-4300 โทรสาร 02-637-5496-7 www.barascientific.com

คํานํา

LCsolution Software เปน Software ที่ใชในการควบคุมการทํางานของเครื่อง HPLC และทําการคํานวณผลเชิงปริมาณหรือคาํนวณผลเชิงคุณภาพ ในเอกสารฉบับนี้จะกลาวถึงมาตรฐานการใชงาน LCsolution Software ตามลําดับ

1

สารบัญ

หัวขอ หนา

1. เตรียม Mobile Phaseและ Solvent สําหรับลางเข็ม ไวตามสายของ Reservoir 3 2. การเปดเครื่อง HPLC และ Login เขา LCsolution Software 4 3. การสรางและ Download Method เพื่อควบคุมการทํางานเครื่อง HPLC 6 4. การเปด Method และ Download Method เพื่อใชงาน 21 5. การ Purge Mobile Phase และ Autosampler 22 6. การติดตั้ง Column และ Connect เครื่อง HPLC 25 7. การ Initial System กอนทําการวิเคราะหและการทํา Baseline Check 26 8. การทํา System Check เพื่อตรวจสอบความพรอมใชของอุปกรณ 29 9. การวิเคราะหแบบ Single Start และ Batch Processing 31 10. การลางระบบเครื่อง HPLC 37 11. การ Disconnect และปดเครือ่งHPLC 38 12. การ Login เขาใชงาน LC Postrun Analysis เพื่อทํา Post Run Analysis 39 13. การปรับคา Data Analysis Parameter ของ Method 40 14. การทํา Wizard เพื่อกําหนดวิธีการคํานวณ Calibration curve และ Save Method 46 15. การประมวลผลผาน Batch Processing กรณีที่มี Batch File 51 16. การประมวลผลผาน Batch Processing กรณีที่ไมมี Batch File 53 17. การ Print Report ของ Post Run Analysis 56 18. การหาคา S/N และ LOD/LOQ 59 19. การ Shutdown เครื่อง HPLC แบบอัตโนมัติ 65

2

1. เตรียม Mobile Phase และ Solvent สําหรับลางเข็ม ไวตามสายของ Reservoir

1.1. กรอง Mobile Phase และ Solvent สําหรับลางเข็มดวยกระดาษกรองขนาด 0.2-0.45 um 1.2. ในกรณีที่ไมมี Degasser Unit ใหนํา Mobile Phase และ Solvent สําหรับลางเข็มไป Degas ดวย

เครื่อง Ultrasonic Bath ประมาณ 10 นาที 1.3. นํา Mobile Phase และ Solvent สําหรับลางเข็มไวตามสายของ Reservoir

3

2. การเปดเครื่อง HPLC และ Login เขา LCsolution Software

2.1. การเปดเครื่อง HPLC มี 2 กรณีคือ 2.1.1. กรณีใช CBM-20A เปน System Controller ใหเปดเครื่องอื่นกอนแลวเปด CBM-20Aเปน

ลําดับสุดทาย 2.1.2. กรณีใช CBM-20Alite เปน System Controllerซ่ึงจะติดตั้งอยูในPump LC-20AT, LC-20AD

และ LC-20AB ใหเปดเครื่องอื่นกอนแลวเปด Pump LC-20AT, LC-20AD และ LC-20AB

2.2. เปดเครื่อง Computer 2.3. การ login เขา LCsolution Software

2.3.1. Double Click ที่ Icon LCsolution

2.3.2. Click ที่ Operation แลว Double Click ที่ Icon Instrument1

2.3.3. ใส User ID เปน Admin แลว Click ที่ OK

4

หลังจาก Login เขา LCsolution Software จะปรากฏหนาจอซ่ึงจะประกอบไปดวยสวนตางๆ ดังรูป

r r

r

l

r

r

5

Title Ba

r

r

Instrument Control Ba

r

Assistant Ba

Toolba

Data Explore

3. การสรางและ Download Method เพื่อควบคุมการทํางานเครื่อง HPLC

3.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Window > Show Window > Data Acquisition

3.2. Click ที่ Menu Bar เลือก File > New Method File

3.3. Click ที่ Icon Click ที่ Icon Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Click ที่ ที่ Instrument Parameters View จะปรากฏหนาจอ

ตั้งคา Parameter ตางๆ ดังนี ้

6

Data Acquisition

LC Time Program LC Stop Time : เวลาที่ใชในการวิเคราะหตอหนึ่งตวัอยาง

แลว Click ที่ Apply to All acquisition time

Pump

Mode : เลือก Mode ตามระบบเครื่อง

7

กรณีที่เครื่องเปนระบบ Isocratic Flow

Pump A.Flow : อัตราการไหลของ Mobile Phase

Pressure Limits Maximum : Pressure Limit ของ Column

8

กรณีที่เครื่องเปนระบบ High Pressure Gradient Binary Gradient

Ternary Gradient

9

Binary Pump

Total Flow : อัตราการไหลของ Mobile Phase B Conc : อัตราสวนการผสมของ Mobile Phase Line B ที่

ตองการ Pressure Limits

Maximum : Pressure Limit ของ Column

หมายเหต ุ อัตราสวนการผสมของ Line B และ C โดยที่อัตราสวนที่เหลือเปนของ Line A รวมกันแลวจะตองกับ 100%

10

กรณีที่เครื่องเปนระบบ Low Pressure Gradient

Total Pump A Flow : อัตราการไหลของ Mobile Phase Solvent B.Conc : อัตราสวนการผสมของ Mobile Phase Line B ที่ตองการ Solvent C.Conc : อัตราสวนการผสมของ Mobile Phase Line C ที่ตองการ Solvent D.Conc : อัตราสวนการผสมของ Mobile Phase Line D ที่ตองการ

Pressure Limits Maximum : Pressure Limit ของ Column

หมายเหต ุ อัตราสวนการผสมของ (Line B+ Line C + Line D) โดยที่อัตราสวนที่เหลือเปนของ Line A รวมกันแลวจะตองกับ 100%

11

Detector A SPD-20A,SPD-20AV

Wavelength Wavelength Ch1 : ความยาวคลื่นที่ตองการ

12

RF-10AXL

Click ที่ Lamp On Wavelength

Excitation Wavelength : ความยาวคลื่นที่ตองการ Emission Wavelength : ความยาวคลื่นที่ตองการ

13

RID-10A

CDD-10Avp และ CDD-10 Asp

14

PDA

Model: SPD-M20A Lamp : เลือกใช Lamp ที่ตองการ

15

Column Oven

Click ที่ Enable Oven Oven Temperature : อุณหภูมิที่ตองการ

16

Column Click ที่ Settings เพื่อเลือกใช Column หรือแกไขขอมูลของ Column

17

Fraction Collector

Click ที่ Fraction collection Width : ใสคาที่ตองการ Slope : ใสคาที่ตองการ Level : ใสคาที่ตองการ Vial volume : ปริมาตรการเกบ็ตอหนึ่ง Vial Delay volume : ปริมาตร Delay Volume จาก Flow Cell ของ Detector ถึง Valve Sig. Delay volume : ปริมาตร Delay Volume จาก Flow Cell A ถึง Flow Cell B Rack Type : หมายเลข Rack ที่ใช Start vial No : Vial แรกที่เกบ็ Fraction End : Vial สุดทายที่เก็บ Fraction

18

Controller

Autosampler

Click ที่ Detect Rack เพื่อตรวจสอบ Sample Rack อัตโนมัติ 3.4. Click ที่ Menu Bar เลือก File > Save Method File As

ใน Folder ที่ตองการแลวตั้งชื่อ Method ตามตองการ

19

3.5. Click ที่ Menu Bar เลือก Acquisition > Download Instrument Parameter

หรือ Click ที่ Icon

20

4. การเปด Method และ Download Method เพื่อใชงาน 4.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Window > Show Window > Data Acquisition

4.2. File > Open Method File เลือก Method ที่ตองการ จาก Folder ที่ตองการ

เปด Method file ที่ตองการใชงาน

4.3. Click ที่ Menu Bar เลือก Acquisition > Download Instrument Parameter

หรือ Click ที่ Icon

21

5. การ Purge Mobile Phase และ Autosampler

5.1. การ Purge Mobile phase แบงออกเปน3 กรณ ีกรณีท่ี 1 เครื่องเปนระบบทีม่ี 1 Pump หรือมากกวา

1. เปด Drain Valve โดยหมุนปุม Drain Valve ทวนเข็มนาฬกิาประมาณ 90 องศา

2. กดปุม ที่ตัวเครื่องของ Pump สังเกตเมื่อ Mobile Phase ไหลอยางตอเนื่อง

และไมมีฟองอากาศใหกดปุม อีกครั้งเพื่อหยุด Purge หรือรอจนเครื่อง Purge เสร็จ

3. หมุนปุม Drain Vale กลับตําแหนงเดิม (หมุนใหตึงมือ)

22

กรณีท่ี 2 เครื่องเปนระบบทีม่ี 1 Pump แตใช Low pressure gradient Unit จะมีสายA, B, C และ D

เปน Mobile phase 1. ใหปรับคาที่ Instrument Monitor View

2. ใส % B.Conc.เปน 100%แลวกด Enter

3. หมุนปุม Drain Valve ทวนเข็มนาฬิกา 90 องศา แลวกดปุม ที่ตัว Pumpรอจน Purge Mobile phase เสร็จ (ใส Line % C.Conc.และ D.Conc. เปน 100%แลว Purge)

4. กรณีตองการ Purge LineA ใหใส Line อื่น เปน 0 % 5. เมื่อ Purge Mobile Phase เสร็จหมุนปุม Drain Valve กลับตําแหนงเดิม

23

กรณีท่ี 3 เครื่องเปนระบบที่มี 2 Pump แตอยูในเครื่องเดยีว (LC-20AB)

1. ใหปรับคาที่ Instrument Monitor View

2. ใส % B.Conc.เปน 100%แลวกด Enter

3. หมุนปุม Drain Valve ทวนเข็มนาฬิกา 90 องศา แลวกดปุม ที่ตัว Pumpรอจน purge Mobile phase เสร็จ

4. กรณีตองการPurge LineA ใหใส Line B เปน 0 %

5.2. การ Purge Auto Sampler (ในกรณีที่มีเครือ่ง Auto sampler)

ClickปุมPurge sampler ที่ Instrument Control Bar

24

6. การติดตั้ง Column และ Connect เคร่ือง HPLC 6.1. การติดตั้ง Column ใหใส Column ตามทิศทางของลูกศรของ Column

6.2. การConnect เครื่อง HPLC ให Click ที่ Icon Instrument On/Off ที่ instrument control bar เครื่องจะทํางานตาม Method ที่เปดมาใช

25

7. การ Initial System กอนทําการวิเคราะหและการทํา Baseline Check จะทําการตรวจสอบ Baseline หลังจาก Flow Mobile Phase เขาระบบ 3-5 เทาของปริมาตร Column

โดยคํานวณจาก Column Volume (mL) = ¶ r2L/1000

เมื่อ ¶ = 3.14 r = I.D. Column/2 (mm) L = ความยาว Column (mm)

กรณีที่เปน Detector SPD-20A,SPD-20AV,RF-10AXL, CDD-10Avp และ CDD-10 Asp 1. สังเกตเมื่อ Baseline ขนานกบัแกน X และที่มุมบนดานซายแสดงสถานะ Ready แสดงวา Baseline

นิ่ง

2. Click ที่ Zeros Detector ที่ Icon ที่ Instrument Control Bar

กรณีที่เปน Detector RID-10A

1. Click เปด RID R.Flow On/Off ที่ Icon ที่ Direct Control Toolbar ให Mobile Phase Flow ผานระบบอยางนอย 20 นาท ีที่ Flow Rate 1 mL/min

2. Click ปด RID R.Flow On/Off ที่ Icon ที่ Direct Control Toolbar

3. Click ที่ Balance RID ที่ Icon ที่ Direct Control Toolbar เมื่อตัวเลขแรกจากซายทีจ่อ LCD ของ Detector หยุดนิ่งอยูในชวง ±50 แสดงวา Baseline นิ่ง กรณีที่คาตวัเลขเกินชวงที่กําหนดใหทาํตามขอ 1-3 ใหม

4. Click ที่ Zeros RID ที่ Icon ที่ Direct Control Toolbar

26

กรณีที่เปน Detector SPD-M20A 1. Click ที่ Menu Bar เลือก Acquisition > Plot Start

หรือ Click ที่ เพื่อทํา Baseline

2. สังเกตเมื่อ Baseline ขนานกบัแกน X และที่มุมบนดานซายแสดงสถานะ Ready แสดงวา Baseline นิ่ง

3. Click ที่ Zeros Detector ที่ Icon ที่ Instrument Control Bar

27

การทํา Baseline Check 7.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Method > Baseline Check Parameters

7.2. จะปรากฏหนาจอ Baseline Check Parameters

7.3. ตั้งคา Check คา Noise และ Drift ใชเวลาประมาณ 15 นาที แลวกด OK

7.4. Click icon Baseline Check ที่ Instrument Control Bar 7.5. รอใหตรวจสอบ Baseline (ถาตรวจสอบ Baseline คาที่ไดนอยกวาคา Threshold จะปรากฏ Pass)

28

8. การทํา System Check เพื่อตรวจสอบความพรอมใชของอุปกรณ 8.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Instrument > System Check

หรือ Click ที่ Icon ที่ Instrument Control Bar หรือ Click ที่ Icon แลว Click ที่

Icon ที่ Assistant Bar จะปรากฏ System Check Window

8.2. Click ที่ Check Level เปน Complete Click ที่ Format เปน Normal และ Click ที่ Run จะปรากฏ

หนาจอ System Check

29

เมื่อทําการตรวจสอบองคประกอบตางๆ เรียบรอยจะปรากฏหนาจอที่ System Check Window จะแสดงสถานะเปน 100%

8.3. Click ที่ View Resultsที่ System Check Window และดูที่ Summary บรรทัดบนสุดวาผลการตรวจสอบเปน Pass หรือ Fail

8.4. การทํา System Check ทําเพื่อตรวจสอบวาองคประกอบตางๆ ของเครื่องอยูในสภาวะที่พรอมใชงานหรือไม ในกรณีที ่Summary เปน Fail ใหติดตอฝาย Service ของบริษัท พาราไซแอนติฟค จํากัด

30

9. การวิเคราะหแบบ Single Start และ Batch Processing 9.1. กรณีที่วเิคราะหตัวอยางแบบ Single Start

การวิเคราะหตวัอยางหนึ่งตวัอยางตอหนึ่งครั้ง 1. Click ที่ Menu Bar เลือก Acquisition > Single Run

หรือ Click ที่ Icon ที่ Toolbar หรือ Click ที่ Icon Click ที่ Icon

แลว Clickที่ Icon ที่ Assistant Bar จะปรากฏ Single Run Window

31

Acquisition Information

Sample Name : ตั้งชื่อตามตองการ Sample ID : ตั้งชื่อตามตองการ Data file : ช่ือขอมูลที่จัดเก็บในระบบ Computer

Click ที่ Auto Increment เพื่อให Run Number ของ Data file อัตโนมตัิตามตองการ Sampler

Vial# : ตําแหนงตัวอยางที่ตองการวิเคราะห Injection Volume : ปริมาตรตัวอยางที่ตองการเปนไมโครลิตร

2. หลังจากระบใุสรายละเอียดของตัวเรียบรอยแลว กดปุม OK กรณีที่เปน Manual Injector เมื่อมี Data Acquisition Start Window ขึ้นมาจึงจะสามารถฉีดตัวอยางได

กรณีที่เปน Auto Injector เครื่องจะทําการฉีดตัวอยางอตัโนมัติ

32

9.2. กรณีที่วเิคราะหตัวอยางแบบ Batch Processing การวิเคราะหตวัอยางมากกวาหนึ่งตวัอยางตอหนึ่งครั้ง

1. Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Click ที่ Menu Bar เลือก Edit > Table Easy Setting

จะปรากฏหนาจอ

33

Batch Table : New Method File : เลือก Method File ที่ตองการ Standard Vial : ตําแหนงตัวอยางที่ตองการวิเคราะห Injection Volume : ปริมาตรตัวอยางที่ตองการเปนไมโครลิตร Data file : ช่ือขอมูลที่จัดเก็บในระบบ Computer Unknown Vial : ตําแหนงตัวอยางที่ตองการวิเคราะห Injection Volume : ปริมาตรตัวอยางที่ตองการเปนไมโครลิตร Data file : ช่ือขอมูลที่จัดเก็บในระบบ Computer

2. Click ที่ OK แลวจะปรากฏหนาจอ

34

3. Click ที่ Menu Bar เลือก Save Batch File As ใน Folder เดียวกับ Data File แลวตั้งชื่อ Batch Table ตามตองการ

35

4. Click ที่ Menu Bar เลือก Batch Start

หรือ Click ที่ Icon ที่ Toolbar หรือ Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar กรณีที่เปน Manual Injector เมื่อมี Data Acquisition Start Window ขึ้นมาจึงจะสามารถฉีดตัวอยางได

กรณีที่เปน Auto Injector เครื่องจะทําการฉีดตัวอยางอตัโนมัติ

36

10. การลางระบบเครื่อง HPLC 10.1. กรณีที่ใช Mobile Phase เปน Buffer ใหลางระบบดวยน้าํเปนลําดับแรก 10.2. ควรFlow ดวย Organic Solvent ในระบบ Flow Lineของเครื่องทุกครั้งหลังการใชงาน 10.3. กรณีใช Mobile Phase เปน Organic Solvent สามารถเก็บเครื่องได

37

11. การ Disconnect และปดเครือ่งHPLC

11.1. Click ที่ Icon Instrument On/Off ที่ Instrument Control Bar เพื่อหยดุการทํางานของตัวเครื่อง HPLC

11.2. Click ที่ Menu Bar เลือก File > Exit

เพื่อปดโปรแกรม LCsolution

11.3. ปดเครื่องHPLCโดยปดเครื่อง System Controller CBM-20A หรือ LC-20AT, LC-20AD และ LC-

20AB 11.4. ปดเครื่องอื่นๆที่เหลือแลว ปด Computer

38

12. การ Login เขาใชงาน LC Postrun Analysis เพื่อทํา Post Run Analysis

12.1. Double Click ที่ Icon LCsolution

12.2. Click ที่ Icon Postrun

39

13. การปรับคา Data Analysis Parameter ของ Method 13.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Window > Show Window > LC Data Analysis หรือ PDA Data

Analysis(กรณทีี่ Detector SPD-M20A)

หรือ Click ที่ Icon Click ที่ Icon หรือ ที่ Icon กรณีที่ Detector เปน PDA Model : SPD-M20A ที่ Assistant Bar

13.2. Click ที่ Select Browse Folder ที่ Data Explorer แลวเลือก Folder ที่ตองการเปด Data File แลว Click ที่ Close

40

13.3. Click ที่ Data File Tab ที่ Data Explorer แลว Double Click หรือ Click Data File ที่ตองการแลว

ลาก Mouse ไปที่หนา Chromatogram View

(Data ที่ใชควรเปน Data ที่ใชเปน Standard ในกรณีที่จะทํา Single Level Calibration หรือใช Data ที่มีความเขมขนต่ําที่สุดใน Calibration Curve ในกรณีทีจ่ะทํา Multi Level Calibration)

41

13.4. Click ที่ Menu Bar เลือก Method > Data Analysis Parameter

หรือ Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar จะปรากฏหนาจอ Data Analysis Parameter (Method in Data File)

13.5. Click ที่ Integration Tab เปล่ียนคาตัวเลขในบรรทัด Slope แลว Click ที่ OK (การปรับคา Parameter ของการคํานวณพืน้ที่ใตกราฟควรปรับใหเสน baseline ตัดฐานPeak)

42

กรณีที่ Detector เปน PDA Model : SPD-M20A

43

Click ที่ Multi Chrom Click ที่ Wavelength (nm) Column เปล่ียนเปนความยาวคลื่นที่ตองการ

44

Click ที่ Integration Tab เปล่ียนคาตัวเลขในบรรทัด Slope แลว Click ที่ OK การปรับคา Parameter ของการคํานวณพื้นที่ใตกราฟควรปรับใหเสน baseline ตัดฐานPeak

45

14. การทํา Wizard เพื่อกําหนดวิธีการคํานวณ Calibration curve และ Save Method 14.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Table Edit > Wizard

หรือ Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar จะปรากฏหนาจอ Compound Table Wizard 1/5

Click ที่ Next

46

14.2. จะปรากฏหนาจอ Compound Table Wizard 2/5 แลว Click ที่ชอง Select ตรงตําแหนง Retention Time ของสารมาตรฐาน

Click ที่ Next

47

14.3. จะปรากฏหนาจอ Compound Table Wizard 3/5

Click ที่ Quantitative Method เปน External Standard

Calibration Curve #of Calib Level : ใสจํานวนของความเขมขน Standard Curve Fit Type : Linear Unit : หนวยความเขมขนที่ตองการ

Click ที่ Next

48

14.4. จะปรากฏหนาจอ Compound Table Wizard 4/5

Identification Window/Band : Window Window : 5 Peak Selection : Closest Peak

Retention Time Update เปน Replace Click ที่ Next

49

14.5. จะปรากฏหนาจอ Compound Table Wizard 5/5

Click ที่ตาราง Name ใสช่ือสารตามเวลา ใสความเขมขนของสารในตาราง Conc.แลว Click ที่ Finish

14.6. Click ที่ Menu Bar เลือก File > Save Method As

หรือ Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Save Methodไวใน Method ที่ใชงาน

50

15. การประมวลผลผาน Batch Processing กรณีท่ีมี Batch File 15.1 Click ที่ Menu Bar เลือก Window > Show Window > Batch Table

หรือ Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar 15.2 Click ที่ Menu Bar เลือก File > Open Batch File แลวเปด Batch File ที่ตองการ

ในกรณีแกไขตาราง

• ตาราง Sample Type เฉพาะแถวแรกเลือก Standard(I)(เมื่อตองการทําCalibration Curveใหม)

• ตาราง Sample Type เลือก Standard สําหรับความเขมขนของสารมาตรฐานอื่น • ตาราง Sample Type เลือก Unknown สําหรับตัวอยาง • ตาราง level# ใสตัวเลขตามระดับความเขมขนของสารมาตรฐาน

15.3 เมื่อมีการแกไขตารางให Save Batch File ไวใน File เดิมหรือ Click ที่ Menu Bar

15.4 Click ที่ Icon Batch Start ที่ Assistant Bar

15.5 Click ที่ Icon Method Development ที่Assistant Bar เพื่อดู Calibration Curve

51

15.6 Click ที่ Menu Bar เลือก File > Print Image > Print เพื่อส่ังพิมพ Calibration Curve

52

16. การประมวลผลผาน Batch Processing กรณีท่ีไมมี Batch File 16.1 Click ที่ Menu Bar เลือก Window > Show Window > Batch Table

หรือ Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar 16.2 Click ที่ Menu Bar เลือก File > New Batch File

Click icon Data ที่หนา Data Explorer ใหปรากฏ data file

53

16.3. Click Data File ที่ตองการแลวลาก Mouse ไปที่หนา ฺBatch Table

จะปรากฏตารางของ Batch ดังนี ้

ในกรณีแกไข

• ตาราง Sample Type เฉพาะแถวแรกเลือก Standard (I) (เมื่อตองการทําCalibration Curveใหม) • ตาราง Sample Type เลือก Standard สําหรับความเขมขนของสารมาตรฐานอื่น • ตาราง Sample Type เลือก Unknown สําหรับตัวอยาง • ตาราง level# ใสตัวเลขตามระดับความเขมขนของสารมาตรฐาน

54

16.4. Click ที่ Menu Bar เลือก File > Save Batch File As เพื่อ Save Batch File ไวใน Folder เดียวกับ Data File

16.5. Click ที่ Icon Batch Start ที่ Assistant Bar

16.6. Click ที่ Icon Method Development ที่Assistant Bar เพื่อดู Calibration Curve

16.7. Click ที่ Menu Bar เลือก File > Print Image > Print เพื่อส่ังพิมพ Calibration Curve

55

17. การ Print Report ของ Post Run Analysis 17.1. Click ที่ Menu Bar เลือก Window > Show Window > LC Data Analysis หรือ PDA Data

Analysis(กรณทีี่ Detector SPD-M20A)

หรือ Click ที่ Icon Click ที่ Icon หรือ ที่ Icon กรณีที่ Detector เปน PDA Model : SPD-M20A ที่ Assistant Bar

17.2. Click ที่ Data File Tab ที่Data Explorer แลว Double Click หรือ Click Data File ที่ตองการแลวลาก Mouseไปที่หนา Chromatogram View

56

จะปรากฏหนาจอ

57

17.3. Click ที่ Icon ที่ ที่ Assistant Bar จะปรากฏหนาจอแลว Click ที่ Print เพื่อส่ังพิมพ

58

18. การหาคา S/N และLOD/LOQ

18.1 Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar 18.2 Click ที่ File > Open Batch File แลวเปด Batch File ที่มี Calibration Curve

18.3 Click Method Development ที่Assistant bar

59

18.4 จะปรากฏหนาจอ Calibration Curve แลว Click ที่ Menu Bar เลือก Method > QA/QC Parameters

60

18.5 จะปรากฏหนาจอ QA/QC

เลือก Sample Type เปน Standard Report Type เปน Calibration Detail: ตาราง Item เลือกให Report โดย Clickที่ S/N, Detection Limit (DL) และ Quantitation Limit (QL)

18.6 Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar แลว Click ที่ Icon ที่ Assistant Bar

61

18.7 Click ที่ Icon Setting ที่ Assistant Bar แลว Click เลือก QA/QC ดังรูป

18.8 Click ที่ Icon Batch Start ที่ Assistant bar

62

18.9 Click เลือก All File Tab ที่ Data Explorer แลวเลือก เปด File ตามตองการ

63

แสดง Report excel

64

19. การ Shutdown เคร่ือง HPLC แบบอัตโนมตั ิ 19.1. สราง Batch File สําหรับฉีดตัวอยาง

• ใสตําแหนงของ vial บรรทัดสุดทายเปน -1 • เลือก Method Clean (method สําหรับลาง Column) • Data file ช่ือ Clean

19.2. Save Batch file แลว Click ปุมBatch start ที่ Assistant bar Click Batch Start

19.3. Click icon Shutdown ที่ Instrument Control bar

19.4. Click Shutdown Method File แลวเลือกเปดMethod ที่ตรงกับMethod ใน Batch บรรทัดสุดทาย

65

19.5. Click OK จะมีขอความ (Registered to the Batch Queue) กด OK 19.6. จะปรากฏตางราง

เมื่อเครื่องฉีดตัวอยางเสร็จถึงบรรทัดสุดทายเครื่องจะปดระบบอัตโนมตัิ

66