actualitzacions sobre diagnòstic de les rickettsiosis ...€¦ · els artròpodes actuen de...
Post on 04-Sep-2020
0 Views
Preview:
TRANSCRIPT
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Actualitzacions sobre diagnòstic de les Rickettsiosis
Isabel SanfeliuMª Mercè Nogueras
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Classificació i taxonomiaRickèttsies febres tacades patògenesRickettsiosis a EuropaDiagnòsticDiagnòstic molecular
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
ClínicaRickèttsies: classificació
Ordre
Rickettsiales
Família
Rickettsiaceae
Anaplasmaceae
Gènere
Rickettsia
Orientia
Ehrlichia
Anaplasma
Grup tacades Grup tifus
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
ClínicaRickèttsies patògenes fins 1984
Rickettsia rickettsii Rickettsia conorii
Rickettsia sibirica
Rickettsia australis
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
ClínicaTaxonomia
Criteris de seqüència genòmica. Any 2012
•17 espècies patògenes. 6 subespècies
•Més de 40 espècies descrites no patògenes
•23 genomes seqüenciats
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Genome sequence-based phylogenetic tree of Rickettsia species. This tree was constructed by aligning the 597 orthologous genes of all studied genomes. CMR ,Tick-Borne Rickettsioses around the World October 2013 Volume 26 Number 4
Rickèttsies arbre genòmic
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
ClínicaRickèttsies a Europa
Tick-Borne Rickettsioses around the World October 2013 Volume 26 Number 4
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Rickettsia spp. estudiades pel nostre grup
Espècie Malaltia Vector LocalitzacióR. conorii Febre botonosa Rhipicephalus sanguineus Area Mediterrània
R. slovaca TIBOLA/DEBONEL Dermacentor spp. Europa
R. massiliae/Bar29 Innominada Rhipicephalus spp. Europa, Amèrica
R. felis Rickettsiosis transmesa per puces Ctenocephalides felis Mundial
Grup de les febres tacades
Grup del tifus
Espècie Malaltia Vector LocalitzacióR. typhi Tifus murí Ctenocephalides felis
Xenopsylla cheopis Mundial
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Característiques microbiològiques Rickettsia
Cocbacils gram negatius, aerobis. Petit tamany 0.3-0.5x0.8-2 µm.Paret cel·lular amb ac.muràmic i diaminopimèlic i membranacitoplasmàtica. DNA i RNA i ribosomes.
Multiplicació per fissió binària i s’inhibeixen per antibiòtics. Paràsitsintracel·lulars obligats.
No es tenyeixen be per Gram, sí per Gimenez i Giemsa. Làbils a les condicions ambientals.
Transmissió a través d'artròpodes. Per picades de lespaparres o puces. Els artròpodes actuen de reservorisi vectors. L’home és un hoste accidental.
Transmissió transovàrica en el vector. Distribució dela malaltia determinada per la del vector.
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Diagnòstic
Criteris clínicsEpidemiològicsHistopatològicsProves de laboratori:
Mètodes directes:Examen directeCultiu
Mètodes indirectes:Tècniques serològiques
PCR:Directe de mostresDe cultiu
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Examen Directe Es tenyeixen amb: Giemsa, Giménez, IFD amb anticossos
monoclonals específics i marcats amb fluoresceïna.
Cultiu Cultiu cel·lular. Cultiu shell-vial.
Sang total heparinitzada, sèrum, escara, biòpsia lesió, o frotis lesió.
Diagnòstic
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Es retira el medi S’inoculen 500µl de mostra
Es centrifuga
Es retira l’inòculS'afegeix medi i s’incuba a 37ºC
Cultiu cel·lular ràpid (shell-vial)
Centrifugació de les mostres sobre capes de línies cel·lulars, cèl·lules HELA, VERO, MRC5.
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Cultiu shell-vial revelat
El sobrenedant, es guarda per inocular-lo en cultiu cel·lular. També per fer PCR.
GiménezIF
Es detecta per tinció IF o per Gimenez.
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Cultiu shell-vial. Estudi
Ten Years’ Experience of Isolation of Rickettsia spp. from Blood Samples Using the Shell-Vial Cell Culture Assay
MARIELA QUESADA, ISABEL SANFELIU, NEUS CARDEÑOSA,AND FERRAN SEGURASabadell, Barcelona, Spain
Ann. N.Y. Acad. Sci. 1078: 578–581 (2006). New York Academy of Sciences.doi: 10.1196/annals.1374.115
Es va cultivar la sang de 59 pacients amb febre botonosa Mediterranea (FBM) en shell-vial. 5d’elles van ser positives i van ser identificades com R. conorii per PCR -RFLP.
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Mètodes serològics. IFI
La IFI és la tècnica de referència. Es troba comercialitzada per algunes espècies de
Rickettsia Detecta classes de immunoglobulines IgG, IgM. Cribatge 1/40. Reccions creuades entre diferents espècies
R. conorii Bar 29 R. typhi R. slovaca R. felis
Nº sèrums (%) 23 (10.8) 18 (8.5) 19 (8.9) 12 (5.6) 7 (3.3)
Específics (%) 13 (6.1) 11 (5.1) 15 (7) 8 (3.7) 0
Total 212
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Suero R.conorii R.massilae/Bar 29 1 1:256 1:256 2 1:512 1:1024 3 1:2048 1:2048 4 1:1024 1:1024 5 1:512 1:1024 6 1:1024 1:2048 7 1:256 1:256 8 1:128 1:256 9 1:2048 1:2048 10 1:256 1:2048 11 - 1:512 12 1:128 1.512 13 - 1:128 14 1.256 1.128 15 1:512 1.2048
Estudi en pacients. Reaccions creuades
Tècniques de immunoblot
Tècniques de cros-absorció
Actualitzacions Rickettsiosis. Març 2015
Societat Catalana de MalaltiesInfeccioses i Microbiologia
Clínica
Agraïda per la vostra atenció
top related