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Soluciones Agilent para Análisis Medioambientales: Electroforesis Capilar Agilent 7100
Análisis de Iones mediante l i t del nuevo sistema de
Electroforesis Capilar 7100. U lt ti Rá idUna alternativa Rápida,Eficaz y Versátil
Nueva Agilent 7100-CE
Fundamentos de la Electroforesis Capilar (CE)
Si-OH Si-O- + H+
-4 2u x 10 (cm /Vs)EOF
Silica
1
2
3
4
pH
1
3 4 5 6 7 8
Flujo Electroosmótico (EOF): j ( )pH’s básico incrementa EOF
- -
- + +--
--
-
ÁNODO
CÁTODO
-
EOF ---
++
+
++
-- - +
++
++
+ÁNODO
CÁTODO-
EOF
++
--
---+
++
++
++
+
+++
+++
+--
---
--
+- - -
pH ÁCIDO
++
pH BÁSICO
+ ++
+
---
---
Nueva Agilent 7100-CEPág. 2
Elevada Eficacia de separación gracias al perfil de flujo plano del EOF
FLUJO IONES FLUJO ELECTROOSMÓTICO (EOF) + FLUJO ELECTROFORÉTICO (EPF)
Fundamentos de la Electroforesis Capilar (CE)FLUJO IONES = FLUJO ELECTROOSMÓTICO (EOF) + FLUJO ELECTROFORÉTICO (EPF)
+ EOF
EOF
EPF
EPF
neutras
+
-
EOF
EOF
EOF
+ÁNODO
EPF
EPF
-CÁTODO
Adicionando [tensoactivos catiónicos]<CCMse podrá invertir sentido EOF
---
EOF
EOF
EPF
EPF
EPF no se detecta-
DETECTOR
-
DETECTOR
Señal
ELECTROFORETOGRAMA
+ -+ -neutras
Adicionando [tensoactivos iónicos] >CCM se podrán también separar las especies neutras (modalidad MEKC)
Tiempo0
Nueva Agilent 7100-CEPág. 3
especies neutras. (modalidad MEKC)
Modalidades, Aplicaciones y Detección UV/VIS Indirecta
S ll M l l Small MoleculesS ll M l l Small Molecules
Modalidades: CZE, MEKC (neutros), CGE (sep. por tamaño), CIEF (sep. por pI), ITP, (preconcentr.)…
Aplicaciones:Small Molecules
Cation /Anion analysisSmall Molecules
Chiral analysisSmall Molecules Polar compounds,
e.g. basic drugs
Small Molecules Natural products in
complex matices
Large Molecules Large Molecules Large Molecules Large MoleculesLarge Molecules Proteins, e.g.
Antibodies
Large Molecules Peptides & peptide
map
Large Molecules xNA and
Oligonucleotides
Large Molecules Molecule interactions
e.g. Protein-DNA
DETECCIÓN UV/VIS INDIRECTA DETECTOR SEÑAL
¿Cómo Detectar por UV/VIS Analitos SIN Cromóforo?
Permite la detección por UV/VIS de analitos que NO absorben. Utiliza un
tampón que absorbe a la long. onda de t b j ( i t l d t t )
X mUA
0 mUA
trabajo (pero sin saturar al detector).
0 mUA
X mUAMuy utilizada para Análisis de
Aniones y Cationes:
Nueva Agilent 7100-CEPág. 4
Análisis de Aniones con Inversor EOF e Identificación Rápida de Aniones con DAD
Tampón Aniones Agilent (p/n:8500-6797) (ajustado a pH:8.2)
10 ppm anionesCap : 50µm/ l efec = 40cm BF
mAU
8
DAD1 A, Sig=350,80 Ref=245,10 (DEMOIONS\ANIONS10.D)
rC
l
H2P
O4S
O4
NO
3
NO
2
F
10
12
Identificación Rápida de Aniones con DAD
Cap.: 50µm/ l.efec.= 40cm -BF3
Temperatura: 40ºCVoltaje: -30KVInyec: 200 mbars·seg
245 nm
i
0
2
4
6
8 Br
RELACIÓN ALTURAS*(en escala normalizada con respecto a
un anión transparente)NO2: 210nm ~ 220 ~ 245/2
min1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
mAU
1015
DAD1 B, Sig=350,80 Ref=220,10 (DEMOIONS\ANIONS10.D)
15
20
15
NO
3
Br
Cl
H2P
O4S
O4
NO
2
F
NO2 y NO3 absorben a 220nm (el resto no) NO2: 210nm 220 245/2
NO3: 210nm<<220 ~ 245/2Br: 210nm ~60% (220 ~ 245)
Transparentes (Cl,SO4,F, H2PO4,...) 210nm = 220 = 245
220 nm
min1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
-525
0
5
10
B ( )
2 4 )1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
mAU
101520
DAD1 C, Sig=350,80 Ref=210,10 (DEMOIONS\ANIONS10.D)
Br
Cl
H2P
O4S
O4
NO
3
NO
2
F
20
25
30
mAU
NO2 , NO3 y Br absorben a 210nm (el resto no)
AnionesÁreas *
220nm/ 245nm
Áreas *
210nm/ 245nm
Transpa- 2 4 3 0
210 nm
min1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
-50
5
0
5
10
15Transpa
rentes 2.4 3.0
Br 2.3 1.8
NO2 1.1 2.0
NO 1 1 0 2
Nueva Agilent 7100-CEPage 5
NO3 1.1 0.2* Valores utilizando Tampón Aniones Agilent (p/n:8500-6797)
Análisis de Iones
Análisis rápidos en matrices complejas con
Agilent dispone de una amplia gama de Kits, Reactivos y métodos para lograr
fi i l l b t i jmatrices complejas con mínima preparación de
muestra(frecuentemente sólo disolver) Datos tomados de Página 98
mayor eficacia en el laboratorio, por ej. para Aniones, Cationes (incluyendo de
cationes de transición), ácidos orgánicos,…
Nueva Agilent 7100-CEPage 6
(frecuentemente sólo disolver) Datos tomados de Página 98 CE-Primer: P/N 5990-3777EN
Sistema de Electroforesis Capilar Agilent 7100hv
Capilares tipo
Cassette CapilarDetector "Diode-
Array"
tipo“Burbuja”
HV
Carro de viales (termostatizado)
Rellenado Tampón
Desecho Tampón
Nueva Agilent 7100-CEPage 7
Electroforesis Capilar/Masas: CE/MS
+++
+++
++++
++
gas de nebulización
+
+
++
+
++
+
++ +
++++ ++
+
++
+
++
++ ++ +
+
+ ++
++
++
+ ++
+
+++
+
+
+
+
+++
++++
capilar
cámara de
++ + ++ ++
CE/DAD CE/MSBasta cambiar
+ ++ +
+
+cámara delíquidonebulizador
Agilent es el único proveedor para el portafolio completo CE-MS
Los sistemas CE-MS de Agilent ofrecen: • La sensibilidad excepcional del MS.• Sistema de nebulización “conecte y opere“.• La tecnología de nebulización más robusta.
bi d l i id Espectrómetros de Masas
combinada con la conmutación más rápida entre LC- y CE-MS.
A li i l
Agilent Series 6000
Aplicaciones clave:• Análisis de impurezas en fármacos CE-QQQ, CE-QTOF• Estudios metabolómicos CE-QTOF/QqQ• Análisis de proteinas y glicanos CE TOF/QTOF/QqQ
Nueva Agilent 7100-CEPage 8
• Análisis de proteinas y glicanos CE-TOF/QTOF/QqQ
Aportaciones de la Electroforesis Capilar (CE) y Posicionamiento “versus” Cromatografía Iónica en Análisis Medio Ambientales
Electroforesis Capilar Cromatografía IónicaEnorme Flexibilidad y Versatilidad
A áli i d t d ti d lit
Específica para IonesM t i t d b tibl lAnálisis de todo tipo de analitos (iones y
neutros).en todo tipo de matrices.Matriz muestra debe ser compatible con las
columnas (evitar materia orgánica y metales transición).
Bajo coste Coste apreciable:Bajo costeRobusto y Económico capilar sílice fundida
(tubo vacío).
Mínima preparación muestra.
Coste apreciable:Columnas de intercambio iónico y supresoras.
La matriz no debe interferir con las columnas. coste preparación muestra.
Rapidez y Automatización de la Operación:
Cambio entre Aniones y Cationes
Lentitud e intervención Manual: requiere que el usuario cambie las columnas y
fases móviles del cromatógrafo.Cambio entre Aniones y Cationes
automático sin intervención del usuario
Nueva Agilent 7100-CEPage 9
Electroforesis Capilar Agilent 7100
¿Preguntas?Capilar Agilent 7100
¿ g
• CE con la mayor sensibilidad delmercado.
• Único proveedor con el portafolioÚnico proveedor con el portafolio completo CE-MS.
• Único proveedor que ofrece capilares “burbuja”, sistema decapilares burbuja , sistema de rellenado y linealidadexcepcionales.
• La mejor reproducibilidad deLa mejor reproducibilidad de inyección.
Más información en www.agilent.com/chem/ce
http://www.chem.agilent.com/en-US/products/instruments/electrophoresis/Pages/default.aspx
Nueva Agilent 7100-CEPage 10
p g p p g pCE-Primer: P/N 5990-3777EN
Muchas GraciasMuchas Gracias por su Atenciónp
Electroforesis Capilar Agilent 7100Estamos a su disposición en
tel.: 901.11.6890 customercare spain@agilent com www agilent com/chem
Nueva Agilent 7100-CEPage 11
customercare_spain@agilent.com www.agilent.com/chem
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