az újszülöttkori galactosaemia szűrés eredményei és ... · tejtáplálás után...

Az újszülöttkori galactosaemia szűrés eredményei és

differenciáldiagnosztikai lehetőségei

Balázs Imre

SZTE ÁOK Gyermekgyógyászati Klinika és Gyermekegészségügyi CentrumAnyagcsere-Szűrő Laboratórium

Magyar Orvosi Laboratóriumi Szakdolgozók EgyesületeIX. Nagygyűlés; Bük, 2005. szeptember 29-30.

A kötelező egészségbiztosítás ellátásairól szóló

1997. évi LXXXIII. törvény 83.§ ( 3 )bekezdésének a) és b) pontjában

megfogalmazottak alapjánPhenylketonuriaGalactosaemiaHypothyreosisBiotinidase hiány

betegségekre van kötelező szűrés.

Mire irányul?

A veleszületett anyagcsere betegségek korai diagnosztizálására.

Klasszikus angol meghatározása:

Egy enzim vagy hormon aktivitásának monogenetikus működési zavara az intermedier anyagcsere folyamatban.

Országos szűrőcentrumok

1. Fővárosi Önkormányzat Budai Gyermekkórháza

2. SZTE Gyermekklinika

Országos szűrőcentrumok

1. SZTE Gyermekklinika

2. Fővárosi Önkormányzat Budai Gyermekkórháza

Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:

Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem

NÉV:

NÉV:

Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:

Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem

NÉV:

NÉV:

Schleicher-Schüll szűrőpapír - Guthrie kártya

NÉV:

Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:

Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem

NÉV:

Koraszülött: igen - nemSzül. Idő:Vérvétel ideje:Vérvétel helye:Anyja neve:Irányítószám:Lakcím:

Tejtáplálás elkezdve: igen - nemAntibiotikum: igen – nemVércsere, transf.: igen – nem

NÉV:

NÉV:

Schleicher-Schüll szűrőpapír - Guthrie kártya

Mi a galactosaémia?Enzimhiányon alapuló veleszületett anyagcsere betegség.

/ autoszomális, recesszív /

• Galaktóz Szőlőcukor

Tejcukor ( Laktóz )

Vékonybél bolyhainak tövében laktáz enzim

Glükóz

( diszaharid )

monoszaharid monoszaharid

monoszaharid

Története:

1908 Von Ruess galactosaemia felfedezése/ megfigyelés anyatej táplálásnál /

1917 Tejmentes diéta bevezetése

1935 Mason és Turner Leroir cukor metabolizmusának leírása / 1970 Nobel dij /

1956 Galactosaemia génjének felfedezése

1963 Guthrie és Paigen újszülöttkori szűrés bevezetése

1970 SZOTE szűrés megkezdése

1975 Kötelező szűrés bevezetése

ATP galaktóz aldózreduktáz galaktitolNADPH + H NADP

galaktokinázADP

galaktóz-1-PUTP

gal.-1-P uridil transzf. Weidemann

P ~ P UDP galaktóz

UDP gal.-4-epimeráz

UDP glükóz Beutler

UDPG pirofoszforiláz

glükóz-1-P

- Galaktokináz enzimhiány:újszülöttkorban tünetmentestejtáplálás után galactosaemia, cataractafelnőttkorban a galaktitól miatt vakság

-Galaktóz-1-PUT enzimhiány:/ klasszikus galactosaemia /

hányás, hasmenés, elhúzódó sárgaságveseelégtelenség, máj megnagyobbodásfejlődési zavar, cataractamentális retardáció

-Duarte - galactosaemia

Galactosaemia újszülöttkori tömegszűrése Guthrie metabolitgátláson alapulómikrobiológiai módszerével történik.

Elve: galaktózra érzékeny mutáns E. colibaktérium-törzset tartalmazó agaróz táptalajra helyezzük fel a vérrel átitatott szűrőpapír korongokat

„ Mikrobiológiai „tömegszűrés”

Zavaró tényezők:

Ál-pozitív eredmény:1. ha olyan antibiotikumot kapott az

újszülött ami gátolja az E-coli növekedését2. bármilyen szennyezés ami kioltási zónát ad

Ál-negatív eredmény:1. ha vérmintát a tejtáplálás megkezdése előtt

vették le2. ha a szűrőpapír nem volt megfelelően átitatva3. ha az újszülött transzfúziót kapott

ATP galaktóz aldózreduktáz galaktitolNADPH + H NADP

galaktokinázADP

galaktóz-1-PUTP

gal.-1-P uridil transzf. Weidemann

P ~ P UDP galaktóz

UDP gal.-4-epimeráz

UDP glükóz Beutler

UDPG pirofoszforiláz

glükóz-1-P

Weidemann teszt: galaktóz 30 mg % fölött

Elve: A galaktóz – dehidrogenáz ( Gal-DH )

enzim a galaktózról a NAD-ra hidrogént

visz át, fluoreszkáló NADH-t képezve.

Kontroll (mg % ) Minta

20 25 30 35 40

Beutler próba: a galaktgalaktóózz--11--foszffoszfáátt--uridiluridil--transzfertranszferáázz ( G-1-PUT ) enzim hiányának kimutatása a klasszikusgalaktozémia diagnózisának megerősítésére

Minta: heparinnal levett teljes vér ( vérgáz-kapillárisban ) azonos körülményekközött levett, tárolt és szállítottegészséges kontroll minta

Elve: G-1-PUT jelenlétében a NADPredukálódik fluoreszkáló NADPH-tképezve

Vér + galaktóz-1-foszfát + NADP

30‘ 60‘ 90‘ 120‘

Kontroll:

Minta:

Idő ( perc ) 0 30 60 90 120

Kontroll

Galactosaemiaheterzygote

Galactosemic

Duarte variant

Duarte variantheterozygote

összgalaktóz — totál galaktóz mérése/ galaktóz és galaktóz-1- foszfát /

alkalikus foszfatázGalaktót –1- foszfát Galaktóz

galaktóz dehidrogenázGalaktóz + NAD+H2O Galaktono (1,4) lakton +

NADH + H

diaphoraseNADH + NBT ( sárga ) NBT ( ibolya ) + NAD

/ nitroblu-terazolium /

Specifikus enzimvizsgálatok: galactokinase

gal.-1-P uridil transzferase

Németország

A szűrésből kimaradó populációk pl.:

roma

török

észak afrikai

1956 Galactosaemia génjének felfedezéseMa már több száz mutációt ismerünk

Galactokinase: P28T

G1PTU enzim: Q188RK285N

Duarte: G1391AN314D

THE END

Köszönöm a figyelmet!