basica clinica - miel.unlam.edu.ar
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA MATANZA
Departamento de Ciencias de la Salud Carrera: MEDICINA
ARTICULACION
BASICA CLINICA
COMUNITARIA I
GUIA T.P :
INTRODUCCIÓN A LA MICROSCOPÍA Y EPITELIOS
DESCUBRIENDO UN MUNDO INVISIBLE!!!!
2021
OBJETIVOS
Aprender el correcto uso del microscopio y material de laboratorio
Reconocer las diferencias entre la microscopia óptica y elctronica
Interpretar correctamente los diversos criterios para la clasificación de los epitelios
Relacionar la fisiología del tejido con su morfología
Bibliografía recomendada:
o Biología Celular y Molecular de De Robertis Editorial El Ateneo
o Histología Texto y Atlas de Di Fiore Editorial El Ateneo
o Histología Texto y Atlas color con Biología Celular y Molecular de Ross y Pawlina Editorial Panamericana
o Histología 3ra Edición de Finn Geneser Editorial Médica Panamericana
Guía de Contenidos Mínimos
1. Describa las partes más relevantes de un microscopio óptico
2. ¿A cuántos micrones equivalen 3 mm?
3. ¿A qué se denomina Sistema Internacional de Unidades (SI)?
4. Describa los pasos para la obtención final de un preparado histológico?
5. ¿Qué diferencia existe entre célula, tejido, órgano, sistema?
6. ¿Cuáles son las características qué adquieren las células con las tinciones de hematoxilina
y eosina?
7. ¿Qué permite la fijación?
8. ¿Por qué se utiliza la inclusión tisular en parafina?
Mapa Conceptual para estudio
Introducción
Hoy aceptamos sin oposición, que los organismos están formados por células. Hubo un largo
camino para llegar a esta conclusión, ya que el tamaño de la mayoría de las células es menor que
el poder de resolución del ojo humano, que es de aproximadamente 200 micras (0.2 mm).
Poder de Resolución se define como la menor distancia a la que se pueden discriminar dos
puntos.
Para poder ver las células se necesitó la invención de aparatos con mayor poder de resolución que
el ojo humano: el microscopio. Éstos usan la luz visible y lentes de cristal que proporcionan los
aumentos. Su poder de resolución máximo es de 0.2 micras, mil veces mayor que el ojo
humano. Pero incluso con el uso de los microscopios se tardó en llegar a identificar a las células
como unidades que forman a todos los seres vivos, lo cual fue debido fundamentalmente a la
diversidad de formas y tamaños que presentan y también a la mala calidad de las lentes que
formaban parte de los primeros microscopios.
Medidas
El Sistema Internacional de Unidades (SI), conocido también como el sistema métrico moderno, es
el estándar científico de pesas y medidas. Este sistema se compone de siete unidades
básicas y muchas unidades suplementarias, derivadas y especiales. También alberga ciertas
unidades que no pertenecen propiamente al sistema pero que son de uso común.
Existen medidas que no pueden dejar de saberse (de cualquier modo, puede utilizarse el sistema
on line Physicslink.com para convertir cualquier unidad a la unidad correspondiente del SI.
Un micrómetro equivale a:
Una milésima de milímetro: 1 µm = 0,001 mm = 1 × 10-3 mm Una millonésima de metro: 1 µm
= 0,000 001 m = 1 × 10-6 m Mil nanómetros: 1 µm = 1000 nm
1 mm = 1000 µm1 m = 1 000 000 µm1 nm = 0,001 µm
Un nanómetro es una milésima de micrón. Y un angstrom es una décima de nanómetro.
Micrómetro es el nombre correcto del micrón (o micra). Micrómetro significa millonésima
de metro (y por lo tanto milésima de milímetro). Nanómetro significa mil millonésima de metro (y
por lo tanto milésima de micrómetro). Angstrom son 10^-10 (10 elevado a la potencia -10) m, una
diez mil millonésima de metro
Tamaño celular
El tamaño de las células se expresa en micrómetros (µm). Como dijimos anteriormente,
un micrómetro o micra es la milésima parte de un milímetro. Una célula eucariota típica mide
entre 10 y 30 µm. Pero hay células eucariotas que se escapan de las dimensiones más comunes y pueden ser muy
pequeñas, como los espermatozoides, cuya cabeza puede medir menos de 4 µm de diámetro,
mientras que otras como los huevos de algunas aves o reptiles pueden medir más de 10
centímetros. Más pequeñas que las células eucariotas son las células procariotas que suelen
medir en torno a 1 o 2 µm de diámetro, siendo las más pequeñas los micoplasmas con
dimensiones menores a 0.5 µm.
Como ya citáramos, la célula es la unidad fundamental de los seres vivos, compuesta
por numerosas organelas. El conjunto de células se agrupan formando diferentes tejidos y
estos darán origen a los diferentes órganos.
Hay diferentes tipos de tejidos:
Epitelial
Conectivo (que incluye al cartílago, hueso y a la sangre)
Muscular
Nervioso
Varios tejidos tienen una sustancia intercelular, como es el caso del tejido conectivo. Es decir, que
se trata de un tejido no compuesto sólo por células sino también por la llamada Matriz
Extracelular, que tiene diferentes componentes que aseguran nutrición, resistencia, flexibilidad,
etc. Es por esta razón que el tejido conectivo ha recibido el nombre de “tejido de sostén”. Las
estructuras vasculares y de sostén de este tejido reciben el nombre de “estroma” para
diferenciarlo del parénquima de los órganos, formado habitualmente por tejido epitelial.
Recuerde: en los preparados histológicos que observará a lo largo de la carrera,
deberá muchas veces diferenciar el parénquima del estroma
Historia de la recepción del descubrimiento celular
La idea de que la materia se subdivide en unidades pequeñas se remonta a los
griegos. Leocippus y Demócrito dijeron que la materia se componía de pequeñas
partes a las que llamaron átomos (sin parte), que ya no podían dividirse más.
Otros como Aristóteles, sin embargo, defendían una continuidad en la materia, donde no
habría espacios vacíos.
Desde esta época hasta el siglo XVII hubo científicos y pensadores que se posicionaron en
uno u otro bando.
El descubrimiento celular se remonta a principios del siglo XVII cuando logran fabricarse las
primeras lentes, apareciendo los primeros microscopios, que en realidad estaban
destinados a comprobar la calidad de las telas y no para el estudio de los
microorganismos o de la célula en sí.
En el año 1600, A. H. Lippershey junto a Z. Janssen y al hijo de este último (H.
Janssen) inventaron el microscopio compuesto, formado por dos lentes de aumento, una a
cada lado de un tubo.
En 1610, Galileo Galilei describe la cutícula de los insectos, habiendo adaptado
lentes del telescopio al microscopio y en 1625Francisco Stelluti describe la superficie de las
abejas.
Robert Hooke, hacia 1664, estudiando el corcho y observando una disposición en celdas o
en forma de panal de abeja, publicó un libro titulado Micrographia, donde describe la
primera evidencia de la existencia de las células.
Entre 1670 y 1680 N. Grew y M. Malpighi extendieron estas observaciones a otras
plantas, poniendo nombre a diversas estructuras vegetales y estudió en animales la red
capilar.
La mala calidad de la microscopia produjo deducciones aberrantes como por ejemplo:
Gaurtier d’Agosty sostuvo que podía ver niños completamente formados en la cabeza de
un espermatozoide, el homúnculo.
1670. A. van Leeuwenhoek construyó en la misma época microscopios simples, con una
sola lente, pero con una perfección que le permitió alcanzar los 270 aumentos, es
considerado como el padre de la microbiología. Observó gotas de agua, sangre,
esperma, glóbulos rojos, etcétera. Llegó a pensar que todos los animales estaban
formados por glóbulos, pero no alcanzó a asociarlos con las celdas de las plantas.
1827. G. Battista Amici corrigió muchas aberraciones de las lentes de los microscopios.
La “teoría celular” comenzó en Francia entre 1820 y 1830, con H. Milne-Edwards y F. V.
Raspail, quienes publicaron que los tejidos estaban formados por unidades globulares pero
con desigual distribución.
R. J. H. Dutrochet, también francés, R. escribió:
“Si uno compara la extrema simplicidad de esta estructura chocante, la célula, con la
extrema diversidad de su contenido, está claro que constituye la unidad básica de un
estado organizado, en realidad, todo es finalmente derivado de la célula”.
1831 R. Brown descubre el núcleo
En 1838 M. J. Schleiden formaliza el primer axioma de la teoría celular para las plantas:
todas las plantas están formadas por unidades llamadas células yT. Schwan hizo extensivo
ese concepto a los animales y por extensión a todos los seres vivos.
El considerado padre de la patología, R. Virchow propuso en 1856 a la célula como
la forma más simple de manifestación viva y que a pesar de ello representa completamente
la idea de vida, es la unidad orgánica, la unidad viviente indivisible, consolidando
para mediados del siglo XIX la teoría celular.
Hacia 1932 aparece el microscopio electrónico. El microscopio óptico usa el espectro de la luz
visible, pero por sus propiedades de longitud de onda no puede discriminar dos puntos que estén a
menos de 0.2 micras de distancia. Con el microscopio electrónico se pudieron estudiar
estructuras internas de la célula que eran del orden de nanómetros (10-3 micras). Hacia 1960 ya se
había explorado la célula a nivel ultraestructural
Introducción a Microscopía
Conociendo el microscopio
En el microscopio óptico, podemos reconocer dos sistemas bien
diferenciados:
a) SISTEMA ÓPTICO
OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
b) SISTEMA MECÁNICO
SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular,
trinocular (cuando tiene fototubo), multicabezal… etc.
REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y
micrométrico que consigue el enfoque correcto.
Normas para el uso correcto del Microscopio
Retirar la funda protectora
Enchufar /Encender el microscopio
Colocar el objetivo en el menor aumento
Subir el condensador utilizando el tornillo macrométrico
Colocar el preparado sobre la platina
Sujetar el preparado con las pinzas/guías
Enfocar el preparado observando por el ocular
Lentamente mover el tornillo macrométrico
Recorrer todo el preparado y observar toda la muestra
Elegir el sitio a observar con mayor aumento
Ajustar con el tornillo micrométrico
Nunca utilizar el tornillo macrométrico con el mayor aumento ya que puede partir
Finalizada la observación alejar la platina y colocar el objetivo con menor aumento
Retire la muestra y apague la/s lámpara/s
Cubra el microscopio con la funda protectora
La técnica apropiada para esquematizar un preparado es:
a) Siempre debe realizarse en un círculo
b) Colocar las referencias de las estructuras reconocidas en el preparado
c) Mencionar el aumento utilizado, recordando que se obtiene multiplicando
el aumento del ocular por el aumento del objetivo.
ACTIVIDAD
A. Realice un cuadro comparativo entre microscopio óptico; microscopio electrónico de
barrido y microscopio electrónico de transmisión
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
Existen diversos pasos necesarios para poder observar un tejido. Cada uno de estos pasos es
imprescindible y debe realizarse de manera ordenada con sus tiempos, sin los cuales no sería
posible el diagnóstico histológico en medicina.
Definición: Se denomina “técnica histológica” al conjunto de operaciones y
procedimientos a los que se somete una muestra organizada, con el objetivo de facilitar
la observación de las piezas al microscopio permitiendo de esa manera observar
estructuras no visibles al ojo humano.
o Obtención de la muestra: la muestra puede obtenerse a partir de diferentes
métodos:
Raspado
Aspiración
Aguja
Endoscopía
Corte quirúrgico
Cateter
Disección
o Fijación: es esencial para preservar la morfología y composición química de los tejidos y
las células, la mayoría de los preparados provienen de piezas sumergidas en formol al
10%.
Los métodos de fijación se pueden clasificar en dos tipos: físicos y
químicos.
Los fijadores físicos se basan o bien en una congelación muy rápida del tejido o bien en
la aplicación de calor elevado. Se utilizan cuando los fijadores químicos alteran la
estructuras que queremos observar, cuando necesitamos una fijación muy rápida,
o cuando el tipo de tejido y la técnica que usaremos lo requiera. Existen variantes de
esta técnica como son la criodesecación o liofilización y la crio -sustitución.
Los métodos de fijación por calor no son frecuentes, solo para el estudio de microorganismos
Los métodos químicos utilizan soluciones acuosas compuestas por moléculas
fijadoras que establecen puentes entre las moléculas del tejido, manteniéndolas en
sus lugares originales e impidiendo su degradación. Hay dos métodos básicos de
fijación con fijadores líquidos: inmersión y perfusión
o Inmersión: En el método de inmersión las piezas de tejido se sumergen en la solución
fijadora.
o Perfusión: Por este procedimiento la solución fijadora se introduce a través del sistema
circulatorio por el cual accede a todas las células del tejido gracias a la red de capilares.
Mediante este método se puede fijar un animal completo introduciendo la solución
fijadora a través del ventrículo izquierdo del corazón
o Inclusión: para que el material pueda ser cortado en laminillas muy
delgadas, se lo suele incluir en parafina, en un pequeño recipiente cubico a unos 55 °C,
que al enfriarse se convierte en un bloque sólido, llamado vulgarmente “taco” con el
tejido incluido en su interior
o Corte del material: el “taco” se corta con un instrumento llamado “micrótomo”,
esto permite obtener laminillas de 2 a 15 um de espesor. Todos poseen varias partes
comunes: una cuchilla, un portabloques y un sistema mecánico que permite
acercar el bloque de parafina a la cuchilla, a una distancia que se corresponde con el
grosor de la sección que pretendemos obtener, y realizar el corte.
o Coloración: casi todos los componentes celulares y de la matriz extracelular son
transparentes, es por eso que se emplean colorantes como: hematoxilina-
eosina, que tiñen a los componentes celulares y de la matriz extracelular con cierta
especificidad.
Tinción con hematoxilina-eosina
En preparados teñidos con la técnica hematoxilina-eosina podemos observar tres tipos
de estructuras:
a) Basófilas: hematoxilina: color azulado -violáceo; ej.: núcleo
b) Acidófilas: eosina: color rosa; ej.: mitocondrias
c) Negativas: no se tiñen con esta técnica: lípidos, glúcidos, glucógeno
Sección de un glomérulo de un riñón de mamífero obtenida a partir de una inclusión en parafina
y teñido con hematoxilina-eosina. Los núcleos aparecen de color violáceo (hematoxilina) y
el citoplasma de color rosado (eosina).
Reacción de PAS
Todas las estructuras ricas en glúcidos; como por ejemplo: lamina basal, mucinas, acido
hialurónico, proteoglicanos, células caliciformes del intestino grueso, etc. Dando un color purpura
Células caliciformes de intestino grueso
Coloración de Sudán
Todas las estructuras ricas en lípidos, como por ejemplo: vaina de mielina de las neuronas, gotas
de inclusión de colesterol (en células de la corteza suprarrenal por ejemplo), lípidos en células
adiposas o células hepáticas, etc.
Lípidos en células hepáticas
Coloración Tricrómica de Mallory
Se utilizan diversos colorantes ácidos.
En esta fotografía se observa la tinción de las fibras de colágeno con el Tricrómico de Mallory.
OBSERVACION DEL MATERIAL
Cuando se observa un preparado histológico, debe reconstruirse mentalmente la
estructura tridimensional del tejido en estudio a partir de la imagen bidimensional que le provee
el microscopio óptico. En la siguiente figura se muestran imágenes derivadas de distintas
incidencias de corte de una estructura tubular continua.
Esto es muy importante al momento de realizar la observación, ya que permitirá una mejor
interpretación del preparado y también evita emitir juicios equivocados.
Tejido Epitelial
Guía de Contenidos Mínimos
1. Describa las características histológicas de este tejido
2. ¿Cómo se clasifican los epitelios y cuáles son los criterios que se utiliza?
3. ¿Cómo suele observarse en el microscopio óptico los núcleos del epitelio plano
simple, cúbico, cilíndrico y seudoestratificado?
4. ¿Qué características determinan que el epitelio sea cilíndrico
seudoestratificado?
5. ¿Qué criterios se deben tener en cuenta al clasificar el tipo de tejido epitelial
estratificado?
6. ¿Cuál es el aparato o sistema que está cubierto por epitelio cilíndrico?
7. ¿Cuál es el aparato o sistema qué suele estar cubierto por epitelio cilíndrico
seudoestratificado ciliado?
8. ¿A qué se denomina epitelio de transición y donde suele observarse?
9. Realice un cuadro con los siguientes ítems: Tipo de tejido/ Características/
Función/ Localización
10. ¿Qué es la lámina basal? ¿Cómo está formada?
11. ¿Qué son las uniones occludens, adherens y los desmosomas?
Mapa Conceptual Epitelios
EPITELIOS
Clasifican en
Epitelio Simple Epitelio Compuesto Epitelio Seudoestratificado
El epitelio es un tejido formado por células estrechamente apretadas y con poca o ninguna
sustancia intercelular, hecho que lo diferencia notablemente del tejido conectivo.
Una propiedad básica de las células epiteliales es su tendencia a establecer contactos
mutuos y formar así láminas que terminan recubriendo superficies y revistiendo cavidades.
El ectodermo y el endodermo son capas germinativas “epiteliales” y la mayor parte de los órganos
con epitelio derivan de estas hojas germinativas.
Por ejemplo, la piel tiene un epitelio llamado epidermis (como verá después, este epitelio es plano
estratificado) y se origina del ectodermo. El tubo digestivo tiene un epitelio procedente del
endodermo, una glándula exocrina comunica por medio de conductos con un epitelio superficial,
etc.
El tejido epitelial se encuentra en dos formas: a) como hojas de células contiguas (epitelios) que
cubren el cuerpo en su superficie externa y lo revisten en la superficie interna y b. como glándulas,
originadas en células epiteliales invaginadas.
Responda:
a) ¿Cuál es el origen embriológico de este tejido?
b) ¿Qué características morfológicas presenta?
c) ¿Cómo se denomina al epitelio que reviste la superficie interna de los vasos sanguíneos
d) ¿Cómo se denomina el epitelio que recubre las cavidades serosas organismo (pleura, peritoneo, etc.)
Algunos tipos de células epiteliales se especializan en la secreción de sustancias: son células
glandulares. Estas pueden ser dispersas entre otras células de una membrana epitelial o pueden
formar órganos especializados llamados glándulas. Tanto las glándulas unicelulares como las
pluricelulares se clasifican en exocrinas y endocrinas
e) Mencione cuales son las diferencias histológicas entre un glándula endocrina, exocrina y mixta. Luego de observar el grafico investigue y menciones por lo menos dos ejemplos en cada caso
f) Describa y esquematice las difrencias entre las glánduas exocrinas y mencione
ejemplos de cada una
Estos tejidos tienen múltiples funciones:
Protección
Transporte transcelular de moléculas a través de las capas epiteliales.
Secreción de moco, hormonas, enzimas, entre otros, de diversas glándulas
Absorción de material de una luz (ej. tubo digestivo o ciertos túbulos renales)
Excreción
Función receptora
g) ¿Cómo se nutren los epitelios
Este tejido descansa sobre una estructura que se observa en microscopio óptico, de
composición glicoproteica, que le brinda sostén mecánico y la separa del tejido conectivo
subyacente denominada membrana basal.
La lámina basal está compuesta por: lámina densa: está localizada entre el epitelio y el tejido
conjuntivo subyacente. Posee una red de filamentos finos compuestos por laminina; moléculas de
colágeno IV; diversos proteoglucanos y glucoproteínas asociadas y la lámina lúcida: es el
espacio que esta entre la lámina basal y las células relativamente claro donde se encuentran las
regiones extracelulares de las moléculas de adhesión celular, en su mayoría receptores de
fibronectina y laminina (proteínas transmembrana llamadas integrinas)
Recordar: las funciones de la membrana basal es dar soporte al mismo, lo hace resistente y al
mismo tiempo flexible, participa en la adhesión de las células epiteliales y en algunos tejidos como
el riñón, participa en el proceso de ultrafiltración para la formación de la orina. También la lámina
basal es sustrato para la migración celular en el desarrollo e induce cambios en las células para su
diferenciación y maduración.
h) Coloque las referencias correspondientes en el siguiente esquema:
Polarización celular: Región Apical; Basal y Lateral
Región Apical: En esta región muchas células
epiteliales pueden presentar modificaciones
estructurales especiales en su superficie. Estas
alteraciones son: a) Microvellosidades; son
prolongaciones citoplasmáticas digitiformes en la
superficie apical de la mayoría de las células
epiteliales. b) Estereocilios; son microvellosidades
inmóviles de una longitud extraordinaria que facilitan
la absorción. C) Cilios; son estructuras citoplasmática
móviles capaces de mover líquido y partículas sobre
las superficies epiteliales.
Uniones celulares
CASO CLINICO:
Un paciente se presenta luego de la ingesta de medicación analgésica con la aparición
abrupta de ampollas en zonas
diferentes del cuerpo (codos,
rodillas, una en el tronco).
Se realizó una biopsia de las
lesiones y se observó lo
siguiente:
e
Recuerde de Biología Celular uniones
intercelulares:
a) Unión oclusiva: ………………………………………………… …………………………………………………
b) Unión adherente: ………………………………………………… …………………………………………………
c) Desmosoma: ………………………………………………… …………………………………………………
d) Unión comunicante: …………………………………………………
…………………………………………………
e) Hemidesmosoma: ………………………………………………… …………………………………………………
d
c
b
a
i) Marque el epitelio (estamos viendo piel), donde se encontraría la membrana basal y
observe los espacios subepidérmicas (ampollas) en este caso. Ahora mire la
siguiente fotografía y señale las diferencias con la del caso clínico.
Por lo general se denominan vesículas a las lesiones cutáneas ligeramente elevadas que
están rellenas de líquido. Las vesículas de mayor tamaño y cuyo diámetro supera los 0,5 cm
se denominan ampollas. Existen diferentes mecanismos de producción de las ampollas.
Algunas de ellas se producen en el seno de la epidermis (intraepidérmicas), otras son
subepidérmicas (entre el estrato basal de la epidermis y la lámina basal), etc. Muchas se
producen por la acción nociva de anticuerpos sobre los desmosomas o sobre
componentes de la membrana basal.
j) Indique el tipo de epitelio que observa y menciones características distintivas
Endotelio
Vagina
Tráquea
Tiroides
Intestino Delgado
Vejiga
Piel
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