diafanizacion y tinción Ósea con alizarina

Secuencia de aparición de centros de osificación en embriones y fetos bovinos

mediante la técnica de diafanización y tinción ósea con alizarina

Carlos A. Mejía G.Biólogo M. Sc.

Morfología, UdeA

PROTOCOLOTécnica modificada de Dawson

• Etapas

• Fijación

• Deshidratación

• Tinción

• Diafanización

Fijación-Evisceración

• Formol 5%

• Especímenes pequeños

• Especímenes grandes

Extraer encéfalo

Extraer bloque toracoabdominal

Deshidratación- Coloración

• Etanol al 70% (1 día)

• Etanol al 70% + I2 (1 día)

• Etanol al 70% (1 día)

• KOH al 2% + Alizarina (1 día)

Diafanización yMontaje permanente

• KOH al 2% (1 semana) (2 veces)

• KOH al 2%:NH4OH (v/v) (1:1) (1semana)(2 veces)

• KOH al 2%: NH4OH : GLICERINA (v/v) (1:1:1)

(1semana) (2 veces)

• NH4OH : GLICERINA (v/v) (1:1) (1semana) (2 veces)

• GLICERINA (v/v) (1semana) (2 veces)

Día 37

Día 40

Día 45

PERIODO EMBRIONARIOEstructura ósea Edad (Días) Longitud C-R (cm) OSIFICACIONCLAVICULA 37 2.2 MEMBRANOSAMANDIBULA 40 2.8 MEMBRANOSAMAXILAR 45 3.5 MEMBRANOSAPALATINO 45 3.5 MEMBRANOSAFRONTAL 45 3.5 MEMBRANOSAHUMERO 45 3.5 ENDOCONDRALFEMUR 45 3.5 ENDOCONDRALRADIO 45 3.5 ENDOCONDRALULNA 45 3.5 ENDOCONDRALTIBIA 45 3.5 ENDOCONDRALFIBULA 45 3.5 ENDOCONDRALTEMPORAL 45 3.5 MEMBRANOSACOSTILLAS 45 3.5 ENDOCONDRAL

NO osificación en CLAVICULA Día 47

Día 58

Día 60

Día 70

Día 76

Día 90

PERIODO FETAL (día 46 a día 90)

Edad: 58 días Longitud C-R: 6cmANILLO TIMPANICO ( E) ESCAPULA( E) PARIETAL (M) CIGOMATICO (M)INCISIVO ( E) NASAL (M) LACRIMAL (M) OCCIPITAL BASILAR (E) APOFISISESTILOIDES (E) OCCIPITAL ESCAMOSA (M) ALAS ESFENOIDES (M)CUERPO VERTEBRAL C2 hasta L5 (E) ARCOS VERTEBRALES C1 hasta L2(E)ILION (E) METACARPOS(E) METATARSOS (E) FALANGES DISTALES (E)

Edad: 60 días Longitud C-R: 7cmISQUION 50 7 (E) CUERPO ESFENOIDES (E)

Edad: 70 días Longitud C-R: 10.5cm VOMERONASAL(M) FALANGE PROXIMAL (E)

Edad: 76 días Longitud C-R: 13cm FALANGE MEDIA (E)

Edad: 90 días Longitud C-R: 14.5cmCALCANEO (E) ESTERNEBRAS E1 A E5 (E)

Secuencia de aparición de centros de osificascion en la cabeza de bovinos

1………………………… 2…………………………….. 3……………………………..

4. …………………………… 5……………………………… 6………………………………

Secuencia de aparición de centros de osificación en las extremidades de los bovinos.

BIBLIOGRAFÍA• Dawson, A. B. 1926. A note on the staining of the

skeleton of cleared specimens with alizarin red S.Stain Tech., 1: 123-124.

• Barone R. (1976): Anatomie Comparée desMammifères Domestiques. Tome I: Atlas y texto.Ostéologie. Ed. Vigot Fréres

• Mejía, C.A 1985. Observaciones sobre eldesarrollo del sistema esquelético en loshumanos durante las primeras 20 semanas degestación. Revista Actualidades Biológicas

Muchas gracias!!!

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