diagnostika pankreatu akutnÍ, chronickÁ …ukb.lf1.cuni.cz/ppt/pan_edo_exo14_tisk.pdf ·...
Post on 17-Jun-2019
228 Views
Preview:
TRANSCRIPT
Seminář ÚLBLD, duben 2014
MUDr.Petr Kocna CSc.http://gweb.zde.cz
PATOBIOCHEMIE PANKREATUENDOKRINNÍ - EXOKRINNÍ
2
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
DIAGNOSTIKA PANKREATUAKUTNÍ, CHRONICKÁ PANKREATITÍDA
EXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATUPANKREATICKÉ ENZYMY V SÉRU, STOLICI
DECHOVÉ TESTY
INSUFICIENCE PANKREATU
3
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ENDOKRINNÍINSUFICIENCE
EXOKRINNÍINSUFICIENCE
α - AMYLÁZALIPÁZA
FOSFOLIPÁZA A2FOSFOLIPÁZA B
ELASTÁZATRYPSIN
CHYMOTRYPSINKARBOXYPEPTIDÁZA
KALIKREINY
INSULINGLUKAGON
SOMATOSTATINPPP - PROTEIN
4
Langerhansůvostrůvek
Sekreční aciny
ENDOKRINNÍSEKRECE
EXOKRINNÍSEKRECE
EXOKRINNÍ A ENDOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Robert Sorenson and Todd Clark BreljeUniversity of Minnesota, USA
Three color fluorescence confocal microscroscopic image ofan isolated islet of Langerhans. The green cells are insulin
containing beta cells, the blue cells are glucagon containing alpha cells and the red cells are somatostatin containingdelta cells, gamma cells - pancreatic polypeptide protein.
ENDOKRINNÍPANKREAS
LANGERHANSOVYOSTRŮVKY
5
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
INSULIN
GLUKAGON
GLUKÓZA
GLYKOGEN
HLADINA GLUKÓZY V KRVISNÍŽENÁ
ZVÝŠENÁ
6
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
HORMON
TYROSINKINÁZA
RECEPTORα - subunit
BUNĚČNÁMEMBRÁNA
ATP
RECEPTORβ - subunit
INSULIN
EXTRACELULÁRNÍPROSTOR
CYTOSOL
GLUCOSETRANSPORTER
GLUT-4ADP
Tyr
IRS - 1INSULIN RECEPTOR
SUBSTRATE
FOSFORYLACE
TRANSLOKACE GLUT-4PHOSPHATIDYLINOSITOL
3-KINASE
INSULINOVÝRECEPTORTE¨TRAMER
2α, 2β
7
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
PP
P
PPP
PPP
GlycogenSynthase
c-Jun
EEF2K
eIF4EEF2
TranslationAnti-apoptosis
Gene Expression
Translation
Fatty AcidSynthesis
ATP
Citra
telya
se
Glucose
EBS
GeneExpression
P
P
p70S6K
JNK
eIF4EBP Insulin Degradation
& Receptor
Dephosphorylation H+
eIF2B
BAD
14-3-3BAD
MEKs
ERKs
PKC
PPP
PAPSc-CbI
PPtase1
GSK3
NckIRS1SHCP
PP Crk
SOS
GTP
mTOR
FKHRL1
Lipid Raft
Flotillin
RasCAPGLUT4Translocation
TRE
GRB10
INSULIN
Receptor
Internalization
Elk
c-Fos
InsulinReceptor
PIP3 PIP2
AktPKB
H+
EAIEAIInsulin
S6
Rac
PI3K
PDK
GLUT4
GRB2
Fyn
lnsulin Receptor Pathway
RafGLUT4
Vesicle
c-CbI
Insulin
PSHCIRS1/2
PIP2PIP3
Rab4
C 2007-2009SABiosciences
8
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
DIABETES MELLITUS I.TYPU - IDDM,DESTRUKCE β-BUNĚK LANGERHANSOVÝCH OSTRŮVKŮ
α - buňky GLUCAGON
β - buňky INSULIN
δ - buňky GASTRINSOMATOSTATIN
β - buňky DESTRUKCE
FIBRÓZA
AUTOPROTILÁTTKY β - buňky
9
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
10
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Laboratorní diagnostika a sledování stavu diabetu mellituČeská společnost klinické biochemie ČLS JEP a
Česká diabetologická společnost ČLS JEPFriedecký B. - http://www.diab.cz/modules/Standardy/sledovani.pdf
56789
101112131415
NON OBES DIAB56789
101112131415
NON OBES DIAB
δ 13C (DOB) za 90 min25 mg 13C-glukózy
NON - neobézní kontrolyOBES - obézní kontrolyDIAB - diabetici 2.typu
Comparison of the [13C]Glucose Breath Test to the Hyperinsulinemic-EuglycemicClamp When Determining Insulin Resistance
Lewanczuk RZ, Breay WP, Toth EL.: Diabetes Care 2004; 27: 441–447
‰ δ 13CPDB
11
DECHOVÝ TEST s 13C - GLUKÓZOU
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
12
PANKREATICKÉ ENZYMYpH OPTIMUM Centroacinární
buňky
α - AMYLÁZALIPÁZA
FOSFOLIPÁZA A2FOSFOLIPÁZA B
ELASTÁZATRYPSIN
CHYMOTRYPSINKARBOXYPEPTIDÁZA
KALIKREINY
6.5 -7.27 - 9
5.8 -7.76
8.67 - 9
7.5 - 8.57.5 - 7.8
7 - 8
EXOKRINNÍ PANKREASSEKREČNÍ ACINY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
13
SEKRETIN
CCK-PZ
TVORBA ŽLUČE
PANKREATICKÁŠŤÁVA
HCO3-, VODAENZYMY
SPECIFICKÁ STIMULACE HORMONYSEKRETINCHOLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN
0.7 l/den
2.0 l/den
REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
14
Akutní pankreatitída
Trvalé změny - NE
Kalcifikující Obstrukční Zánětlivá
Chronická pankreatitída
Trvalé změny - ANO
Pankreatitída
Akutní pankreatitída
Trvalé změny - NE
Kalcifikující Obstrukční Zánětlivá
Chronická pankreatitída
Trvalé změny - ANO
Pankreatitída
MARSEILLE-ROME KLASIFIKACE
ONEMOCNĚNÍ PANKREATUPANKREATITIDA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
modified from: http://www.library.oit.edu/ereserves/data/DH203Cope6.ppt15
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ŽLUČOVÉKAMENY
ALKOHOL
DIETNÍ CHYBA
INFEKCE
LÉKY
TRAUMA
1
23
45
6
AKUTNÍ PANKREATITÍDA
DŮSLEDKY,PROCESY
UVOLNĚNÍMEDIÁTORŮ
BUNĚČNÁAKTIVACE
POŠKOZENÍACIN. BUNĚK
SPOUŠTĚCÍMECHANISMUS
16
ALKOHOLŽLUČ.KAMENY
JINÉ
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
AKTIVACEACINÁRNÍHO
TRYPSINOGENU
NEUTROFILMONOCYTLYMFOCYT
EPITHEL
IL1, IL6, IL8,IL10, IL11,
TNF, NO, PAF
LOKÁLNÍABSCES
NEKRÓZA
SYSTÉMOVÉARDSŠOKUVOLNĚNÍ
PANKREATICKÝCHEMZYMŮ
TRYPSINELASTÁZA
FOSFOLIPÁZADALŠÍ
AKUTNÍ PANKREATITIDAPATOGENETICKÉ SEKVENCE
PAF - PLATELET ACTIVATING FACTORTNF - TUMOR NECROSIS FACTOR-α
17
AKTIVAČNÍ KASKÁDA PANKREATU
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
TAP - TRYPSINOGEN ACTIVATION PEPTIDECAPAP - CARBOXYPEPTIDASE B ACTIVATION PEPTIDE
TRYPSINOGEN
ENTEROKINÁZA
CHYMOTRYPSINOGEN
PROELASTÁZA
PROKARBOXYPEPTIDÁZA
TRYPSIN
ELASTÁZA
CHYMOTRYPSIN
KARBOXYPEPTIDÁZA
TAP+
CAPAP+
18
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ACTIM™ PANCREATITIS DIPSTICK - TAP TESTIMUNOCHROMATOGRAFICKÝ RAPID TEST PRO DETEKCI TRYPSINOGENU 2 V MOČIMONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKOUDOBA VYŠETŘENÍ - 5 MINUTCITLIVOST TESTU - 50 μg/lVÝROBCE - Medix Biochemica - Finland
Pancreas. 2005 Apr;30(3):243-7. Chen YT, Chen CC,Wang SS, et al.: Rapid urinary trypsinogen-2 test strip in the diagnosis of acute pancreatitis.
Hepatogastroenterology. 2002 Jul-Aug;49(46):1130-4.Kylanpaa-Back ML, Kemppainen E, Puolakkainen P, et al.Comparison of urine trypsinogen-2 test strip with serum lipase in the diagnosis of acute pancreatitis.
J Clin Gastroenterol. 2002 Apr;34(4):459-62. Smotkin J,Tenner S.: Laboratory diagnostic tests in acute pancreatitis.
19
KOMPLEX TRYPSINOGEN - PSTI
C-TERM
N-TERM
SS MUTACEHP
R117H
AC
PSTI
from: Whitcomb DC., www.pancreas.org/assets/hp_presentation/Hereditary_Pancreatitis.ppt
TRYPSIN JE INHIBOVÁNPANCREATIC SECRETORY TRYPSIN INHIBITOREM
SCHOPNÝ INAKTIVOVAT AŽ 20% TRYPSINU
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
AKTIVAČNÍ KASKÁDA - PATOLOGIE
©Copyright Science Press Internet Services
AUTOREGULAČNÍINAKTIVACE
AKTIVNÍHO TRYPSINU
AUTOREGULAČNÍINAKTIVACE U HP
BLOKOVÁNA MUTACÍ
20
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ELISA-elastázaLipázaAmylázaRIA-elastáza
Keima V., Teich N., Reich A., Fiedler F., Mössner J.Polyclonal pancreatic elastase assay is superior to monoclonal assay
for diagnosis of acute pancreatitisClinical Chemistry 1997, 43: 2339-234421
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MARKERY AKUTNÍ PANKREATITIDY
ČASOVÝ PROFIL
ENZYMYV MOČI
ENZYMYV SÉRU
1
3
4
2
AMYLÁZA
MAKROAMYLÁZA
22
4
2
1
CHYMOTRYPSIN
ELASTÁZA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
23
AKTIVITA AMYLÁZYμkat/l
VM = 6.5
V0 = 4.2
VA = 13.1
SEPARACEGELOVOU FILTRACÍ
NA KOLONĚSEPHADEXU G-100
PRŮKAZ MAKROAMYLÁZY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
štěpení endopeptidázou
57
60
1
91
96
116N-ProCT
Calcitonin
Katacalcin
24
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
PROKALCITONIN - MOLEKULÁRNÍ DATA
PCT JE 116-AMINOKYSELINOVÝ PROHORMONKALCITONINU SELEKTIVNĚ ODPOVÍDÁ NA PROCES SYSTÉMOVÉ, SEPTICKÉ INFEKCEČASNÁ A SPOLEHLIVÁ DIAGNOSTIKAVZESTUP PŘI SEPSI NENÍ PROVÁZEN VZESTUPEM KALCITONINUVZESTUP PCT MŮŽE BÝT DETEKOVÁN JIŽ ZA 2-3 HODINY PO ZAČÁTKU SEPTICKÉ INFEKCESNADNÁ METODA DETEKCE IMMUNOCHEMICKY
25
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
PROKALCITONIN - ZÁKLADNÍ FAKTA
BRAHMS PCT-QImmunochromatografický test pro detekciPCT - prokalcitoninu v séru a plasmě,požadavek je 200 μl séra nebo plasmy,výsledek rapid testu je za 30 minut,nevyžaduje žádné přístrojové vybavení,doporučen pro rychlou diagnostiku AP
BRAHMS PCT-LIALuminescence immunoassay metoda sedvěma monoklonálníma protilátkama, proti C-terminální a centrální sekvencicatacalcinu. Anti-catacalcinové protilátky jsou immobilizovány na povrchu zkumavky,anti-calcitoninové protilátky jsou značenyluminescent acridin derivátem.Metoda vyžaduje luminometr, požadavek20 μl séra nebo plasmy.
26
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
27
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CHRONICKÁ PANKREATITÍDA
VÝVOD
OSTRŮVEK
ACINUSTUK
HISTOLOGICKÝ OBRAZCHRONICKÉ PANKREATITÍDY
HISTOLOGICKÝ OBRAZPANKREATU
28
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CHRONICKÁ PANKREATITÍDA
FIBRÓZAPSEUDOCYSTA
KALCIFIKACE
LITHIÁZAmodified from: http://www.library.oit.edu/ereserves/data/DH203Cope6.ppt
29
CHRONICKÁ PANKREATITIDA
CYSTICKÁ FIBRÓZA1 : 1600 - 1 : 2500 PORODŮ
KLINICKÁ PREVALENCE7 : 100 000
Gullo L., Eur. J. Pediatrics 1997, Oct;156(10): 770- 772Elastáza-1 ve stolici u dětí s cystickou fibrózou (cut-off level 132 mg/g) specificita je 100%, senzitivita je 96%.
Lankisch PG. Curr Gastroenterol Rep. 2004 Apr;6(2):126-31.Now that fecal elastase is available in the United States, should clinicians start using it?
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
LABORATORNÍ METODYS-CCK 95/75 400$ neTrypsin 90/50 100$ nePLT 90/50 200$ neFChT 85/35 100$ neFELA 95/55 100$ ne
KLINICKÁ VYŠETŘENÍANAMNÉZA, SUBJEKTIVNÍ
OBJEKTIVNÍ NÁLEZ,EFEKT TERAPIE
METODA SENZITIVITA TĚŽKÉ/LEHKÉ FORMY CENA $ % KOMPLIKACÍ
DIAGNOSTIKA CHRONICKÉ PANKREATITÍDY
30
KOMPLEXNÍ DIAGNOSTIKADIAGNÓZA, STAGING/GRADING,
FOLLOW-UP, MONITORING TERAPIE
ZOBRAZOVACÍ METODYERCP 95/65 1000$ 5-10%EUS 96/65 700$ 0.1%CT 90/55 550$ neUS 80/50 200$ neMRCP 95/60 600$ ne
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
31
CHRONICKÁ PANKREATITIDAZOBRAZOVACÍ METODY ERCP
ŠŇŮRA PEREL
ERCPPAPILA MINOR
D.WIRSUNGID.SANTORINI
ERCP KLASIFIKACEPANKREATITID
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
32
CHRONICKÁ PANKREATITIDAZOBRAZOVACÍ METODY
ERCPKALCIFIKACE
WIRSUNGU
CTKALCIFIKACE
WIRSUNGU
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
33
CHRONICKÁ PANKREATITIDAERCP/RTG - DIAGNOSTIKA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Chronic Pancreatitis. Anthony N. Kalloo, Lynn Norwitz, Charles J. Yeohttp://www.hopkinsmedicine.org/gastroenterology_hepatology/
_pdfs/pancreas_biliary_tract/chronic_pancreatitis.pdf 34
CHRONICKÁ PANKREATITIDACHIRURGICKÁ LÉČBA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Chronic Pancreatitis. Anthony N. Kalloo, Lynn Norwitz, Charles J. Yeohttp://www.hopkinsmedicine.org/gastroenterology_hepatology/
_pdfs/pancreas_biliary_tract/chronic_pancreatitis.pdf
35
SEKRETIN-PANKREOZYMIN TESTCCK - MRPC, ENDOSCOPIC PFT
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
MRCP ZOBRAZENÍ PANKREATUPODÁNÍ SINCALIDU, ANALOG CCK-8Asp-Tyr(SO3H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2
PO 10 MINUTÁCH CCK
36
NATIVNÍ PREPARÁTZBYTKY POTRAVYVLÁKNA CELULÓZY
BARVENÍ FRIEDIGER’S REAGENS- SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ- TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ- ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE
SVALOVÁ VLÁKNA
ŠKROBOVÁ ZRNKA
TUKOVÉ KAPÉNKY
MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Gastroenterologie für die PraxisMünchen, 1975
37
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU
38
KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICISBĚR STOLICE - 72 hod.
REFERENČNÍ METODAEXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU
S-CCK TEST
FAT 72 hod.
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
39
PROVEDENÍ TESTUZAVEDENÍ ŽALUDEČNÍ + DUODENÁLNÍ SONDYSTIMULACE i.v. SEKRETIN + PANKREOZYMINODBĚR DUODENÁLNÍ ŠŤÁVY - FRAKCE
DIAGNOSTICKÝ VÝZNAM‘GOLD STANDARD’ FUNKČNÍCH TESTŮ
LABORATORNÍ TECHNIKAANALÝZA DUODENÁLNHO OBSAHUSTANOVENÍ AMYLÁZY, LIPÁZY, BIKARBONÁTUVÝPOČET ‘VÝDEJE’ PANKREATICKÝCH ENZYMŮ
REFERENČNÍ HODNOTYOBJEM 165-536 ml/h, HCO3
- 9.8-39.7 mmol/hTRYPSIN 9.3-171 j/20 min AMYLÁZA 34-204 j/20 min
SEKRETIN-PANKREOZYMIN TESTPZS TEST, “GOLD STANDARD”
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
40
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and itscorrelation with faecal elastase-1 in patients with chronic pancreatitis
Manfredi R. el al. Radiol med. - DOI 10.1007/s11547-011-0774-6
MRCP VÝPOČET OBJEMU SEKRECE
FUNKČNÍ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE
41
Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and its correlation
with faecal elastase-1Manfredi R. el al. Radiol med. 2012
Exocrine Pancreatic Function Test13C-Mixed Triglyceride Breath Test.
Kocna, P. et al.: Pancreatology 2006; 6: 331
korelace r = 0.535korelace r = 0.573
KORELACE FELA x QMRCP, FELA x MTG
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
42 Chowdhury R.S., Aliment.Pharmacol.Therap.2003
POZITIVNÍ
NEGATIVNÍ
SUSP. CHP: BOLEST, PRŮJEM, HUBNUTÍ, DM
SERUM TRYPSIN, FELANEBO SONO/US
S-CCK, JINÝ PŘÍMÝ TEST, CT (NENÍ-LI FUNKČNÍ TEST)
ERCP, EUS
TERAPIE
POZITIVNÍ
POZITIVNÍ
NEGATIVNÍ
NEGATIVNÍ
JINÁ DIAGNÓZA NEŽ CHP
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
0%
20%
40%
60%
80%
100%
1970 1975 1980 1985 1990 1995 2000
13C-BT FELA FCHT FAT LUNDH PLT BT-PABA SCCK
0%
20%
40%
60%
80%
100%
1970 1975 1980 1985 1990 1995 2000
13C-BT FELA FCHT FAT LUNDH PLT BT-PABA SCCK
43 Boeck WG, Curr.Gastroent.Rep. 2001, 3: 95-100
FELA
13-BT
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ŽÁDNÁ STIMULACE
ELASTÁZAVE STOLICI
NEPŘÍMÁSTIMULACE STIMULAČNÍ
POKRM SUBSTRÁT
SEKREČNÍ KAPACITAGRADING CHP
DIGESTIVNÍ FUNKCETRÁVENÍ (TUKŮ)
44
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
250mg13C-MTG
KUKUŘIČNÝCHLÉB
20g RAMA
PANKREATICKÁLIPÁZA
SUBSTITUČNÍTERAPIE
PERORÁLNÍ PODÁNÍ
SUBSTITUČNÍLIPÁZA
ANALÝZA13C-MARKERU
TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU
PRINCIP 13C- MTG DECHOVÉHO TESTU
45
13C-substrát
perorální podání
enzymatickáhydrolytickáfunkce GIT
13C
absorpce
13C
eliminace
stanovenípoměru 13C/12C
kumulativní výdej CO2
cPDR
13CO2
produkce CO2
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
46
40 - 120 kIU LIPÁZY
TERAPIE OK
TERAPIE OK
KOMBINACE S PPI
TERAPIE OK
DG. MALABSORPCEBAKT.PŘERŮSTÁNÍJINÉ PŘÍČINY MS
NEÚSPĚŠNÁ TH.
PABA, PLT, 13C-MTG TESTSE SUBSTITUCÍ
NEÚSPĚŠNÁ TH.
SUBSTITUČNÍ TERAPIE
RESEKCE PANKREATU
40 - 120 kIU LIPÁZY
TERAPIE OK
TERAPIE OK
KOMBINACE S PPI
TERAPIE OK
DG. MALABSORPCEBAKT.PŘERŮSTÁNÍJINÉ PŘÍČINY MS
NEÚSPĚŠNÁ TH.
PABA, PLT, 13C-MTG TESTSE SUBSTITUCÍ
NEÚSPĚŠNÁ TH.
SUBSTITUČNÍ TERAPIE
RESEKCE PANKREATU
Kahl S., Best Pract.Res.Clin.Gastro. 2004
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
47
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
STANOVENÍ CHYMOTRYPSINU VE STOLICI
Kód VZP: 81477166 bodů
NOVÁ TECHNOLOGIEDETEKCE PROTEINU POMOCÍ
POLYKLONÁLNÍCH AbKLASICKÁ ELISA 96 JAMEK
NORMÁLNÍ HODNOTY > 6.4 µg/mlDIALAB / IMMUNDIAGNOSTIK
CHYMOTRYPSIN
Suc-Ala2-Pro-Phe-pNA Suc-Ala2-Pro-Phe + pNA
CHROMOGENNÍ METODANORMÁLNÍ HODNOTY 3 - 6 U/g
Bioserv Fecal pancreatic Elastase 1 ELISA
ScheBo® • Pancreatic Elastase 1 Stool Test
monoklonální protilátka
polyklonální protilátka
• specificita pankreatického proteinu• stabilita při pasáži GIT• nereaguje na substituční preparáty• FDA approved test
48
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
STANOVENÍ ELASTÁZY-I VE STOLICI
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
0
200
400
600
800
1000
1200
0 200 400 600 800 1000 1200 14000
200
400
600
800
1000
1200
0 200 400 600 800 1000 1200 1400
PELA, Bioservpolyklonální Ab
FELA, ScheBoTechmonoklonální Ab
277 VZORKŮ STOLICE, ScheboTech x Bioserv ELISA 225 - SHODNÝ VÝSLEDEK TESTU (0 - 100 - 200 scale)
SHODA METOD JE POUZE 81.2%KORELAČNÍ KOEFICIENT - SPEARMAN'S r = 0.751
15x nízká FELAnormální PELA
19x nízká PELAnormální FELA
49 50
STANOVENÍ ELASTÁZY-I VE STOLICI PŘI CHP
368 VZORKŮ STOLICE ScheboTech ELISA ELASTÁZA 1155 KONTROL (NON-CHP), 213 CHP KLASIFIKOVÁNO A-B-C-D
CHP - A CHP - CCHP - B CHP - D1400
1200
1000
800
600
400
200
0 80,2
543,3486,4
309,7 269,9
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
51
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Zkušenosti laboratořeÚKBLD 1.LF UK a VFN
2001 - 2006IR analytické systémy
Isomax 4000HeliFAN plus
52
NDIRS - Nondispersive Isotope-selective Infrared Spectroscopy
IRIS - Infra Red ISotope AnalyserIRMS - Isotope Ratio Mass Spectrometry
LC-MS s IRMS detektoremLARA - Laser Assisted Ratio Analyzer
Laser Optogalvanic Effect SpectroscopyMCS - Molecular Correlation Spectroscopy
Isotope specific IR light emision
ANALYTIKA DECHOVÝCH TESTŮ - 13C
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
53
HeliView - IRMS ANALYZÁTORDECHOVÝCH TESTŮNA BÁZI UHLÍKU 13C
Kód VZP: 81701 467 bodů
analytika, odb. 801, IRMS
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
54
ANALYZÁTOR 13CO2 - IR DETEKCE
HeliFAN PlusIR spectrophotometr
Fischer Analysen Instr.
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
55
ZDROJ IRλ = 2 - 8 μm
12CO2
13CO2
VZOREK
REF.PLYN
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
NonDispersive Isotope-selective
InfraRed Spectroscopy
ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE
56
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
OptoAkustický detektorLehrer & Luft typ
Lehrer E and Luft K F 1938German Patent No 730478
An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detectorDaniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: 281 - 286
- absorpce IR- změna tlaku- deformace membrány- akustický signál
ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE
ANALYZÁTOR 13CO2 - IR, MCS
BreathID, OridionReal-time, on-line, kontinuální měření
Microstream technologie
57
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
SOUPRAVY DECHOVÝCH TESTŮ
58
TESTOVACÍSUBSTANCE
ODBĚROVÉZKUMAVKY
ODBĚROVÉTRUBIČKY
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ANALÝZA VYDECHOVANÉHO VZDUCHU
59
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
NÁDECH VÝDECH
CO2 = 0,04 %
CO2 = 5,20 %
CO2 ÷ 2,5 - 3,5 %
NÁDECH - VÝDECH (BEZ ZADRŽENÍ DECHU) NÍZKÁ KONC.CO2
NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU - KRÁTKÝ VÝDECH NÍZKÁ KONC.CO2
NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU NA 10 sec - DLOUHÝ VÝDECH KONC.CO2 JE OK
60
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
VOLBA SUBSTRÁTU
13C - DECHOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU
13C - TRIOLEIN13C - HIOLEIN13C - MIXED
TRIGLYCERIDE13C - CHOLESTERYL
OCTANOATE13C - TRIPALMITIN13C - TRIOCTANOIN13C - STARCH13C - BzTyrAla
STEATORHEA > 11 - 14 g/denINTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZASPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE
VÝDEJ LIPÁZY < 90 kU/hodPANKREAT. CHOLESTEROL ESTERÁZA
STEATORHEA > 11 g/denMALABSORPCE TUKŮTKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30%SEKRECE AMYLÁZY < 10%KORELACE s PABA testem
61
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3
O
CH - O - 13C - (CH2)6 - CH3
O
CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3
O
PANKREATICKÁ LIPÁZA
1,3 DI - STEAROYL
2 - (13C) - OCTANOYL
JATERNÍ β - OXIDACE
13CO2 V DECHU
METABOLICKÉ PROCESY 13C-MTG
0,00010,00020,000
30,00040,00050,00060,000
70,00080,000
1 2 3 4 5 6 70,000
10,00020,000
30,00040,00050,00060,000
70,00080,000
1 2 3 4 5 6 762
KUMULATIVNÍ VÝDEJ 13CO2 v %
MTG - DECHOVÝ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE
38
00
251
401
40
533
535521
NORMÁLNÍ
PATOLOGICKÝ
ELASTÁZA VE STOLICI μg/g
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
cut - off = 30 %
05
10152025303540
Control CyFi05
10152025303540
Control CyFi
5; 10 mg/kg 13C-MTGcPDR 6 hodin
13Carbon mixed triglyceride breath testand pancreatic enzyme supplementation in cystic fibrosis
Amarri S. et al.: Archives of Disease in Childhood 1997; 76: 349–351
CF bez enzym.suplementace2400 IU lipázy/kg/potravy4800 IU lipázy/kg/potravy
cPDR 13C
63
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
DECHOVÝ TEST s 13C - MIXED TRIGLYCERIDY
Exocrine Pancreatic Function Test – 13C-Mixed Triglyceride Breath Test. Kocna, P., Vanickova, Z., Krechler, T., Lukas, M., Dosedel, J., Kohout, P.:
Pancreatology 2006; 6: 331
cPDR 13C
250 mg 13C-MTGcPDR 6 hodin
64
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
20
30
40
50
60
A B C D20
30
40
50
60
A B C D
CHRONICKÁPANKREATITÍDA
KATEGORIE A, B, C, D
DECHOVÝ TEST s 13C - MIXED TRIGLYCERIDY
0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 9500,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 95065
CUT-OFF FELA: 200 μg/g
FELA μg/g
CUT-OFF MTG: 30 %
PATOLOGICKÝ
100 μg/gcPDR MTG (%)
NORMÁLNÍ
13C-MTG - DECHOVÝ TEST & FELA VE STOLICI
220 DECHOVÝCH TESTŮ 13C-MTG122 CHP - 62 KONTROL (NON-CHP)
SHODA MTG & FELA - 80.2 % (170/212)
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
CHP-ACHP-BCHP-CCHP-DNON-CHP
0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 9500,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 95066
CUT-OFF FELA: 200 μg/g
FELA μg/g
CUT-OFF MTG: 30 %
100 μg/gcPDR MTG (%)
NORMÁLNÍ
SOUBOR CHP-B (n=33)BEZ KLINICKÝCH PROJEVŮ ZTRÁTY FUNKCÍ
NEMAJÍ DIABETES, STEATORHOEU
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
87.9 % PACIENTŮ CHP-BNORMÁLNÍ HODNOTAMTG TESTU > 30.0 %
13C-MTG - DECHOVÝ TEST & FELA VE STOLICI
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm
67
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
Medline on-linenejnovější publikace
Přímý link na MZČRNárodní číselník
http://gelab.zde.cz
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm
http://gelab.zde.cz
68
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.
ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ginet/index.htm
http://gweb.zde.cz
http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ge_atlas/ge_frames.htm
http://geatlas.zde.cz
http://www1.lf1.cuni.cz/ukb/lectures.htm
top related