extracció d’adn
Post on 06-Jan-2016
39 Views
Preview:
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
1
Extracció d’ADN
2
PRÀCTICA DE L’EXTRACCIÓ D’ADN
3
OBJECTIU Mitjançant una tècnica molt senzilla
podem extraure ADN de teixit animal i comprovar la seva estructura filamentosa.
L’extracció es basa en el fet que els ions salins són atrets cap a les càrregues negatives de l’ADN permetent la seva dissolució i posterior extracció.
4
MATERIAL
Tisores Homogeneïtzador (batedora o morter) Tela per filtrar (Gasa espessa) Vareta de vidre Vas de precipitats Pipeta Tub d’assaig
5
PRODUCTES QUÍMICS
Detergent líquid comercial NaCl 2M Alcohol etílic de 96º Aigua destil·lada
6
PRODUCTE NATURAL
20g de timus de vedella
7
PROTOCOL
Passos 1r
2n
3r
4t
Triturar els 20g de timus amb 100mld’aigua a la batedora fins obtenir unamassa homogènia i semilíquida.Deixar reposar, que sedimentin les partícules més grans.Amb les gases o tela filtrar repetides vegades el sobrenadant que no quedinpartícules sòlides.
Afegir un volum igual de NaCl 2M per tal de produir un mitjà hipertònic. Afegir sabó líquid diluït 6ml i barrejar amb la vareta de vidre.
Amb la pipeta afegir lliscant per la paret del tub d’assaig 60ml d’alcohol.
8
LA POSADA EN MARXA DE LA CLASSE PRÀCTICA
VEGEM-HO EN IMATGES
9
VEGEM-HO EN IMATGES
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
1
En la tasca de filtratge del sobrenadant el que estem fent és retirar les partícules sòlides: fibres conjuntives, cèl·lules musculars, vasos sanguinis, etc...
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
20
2 Amb la solució de NaCl 1M el que aconseguim és crear un medi hipertònic on farà que s’hi produeixi la ruptura dels embolcalls nuclears.
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
21
3Amb el sabó líquid diluït alliberem el DNA de les proteïnes ja que el detergent forma un complex amb aquestes.
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
22
Quan per les parets afegim l’alcohol fred creem dues capes i a la interfase, l’ADN es desenrotlla i precipita distingint-se un embull de fibres blanques gelatinoses.
QUÈ HA SUCCEÏT A CADASCUN DELS PASSOS?
4
23
Amb la vareta dipositem alguns d’aquests filaments sobre un portaobjectes i afegim unes gotes d’orceïna acètica i es deixa 8 minuts que es tenyeixin, rentem amb aigua destil·lada, muntem amb gota de glicerina i cubre i ho portem a observar al microscòpi.
COMPLETEM LA PRÀCTICA AMB UNA PREPARACIÓ
24
REALITZACIÓ:
DEPARTAMENT DE CIÈNCIES EXPERIMENTALS
Han participat en la realització de la pràctica:
Professors: Ignacio Pujals Gemma Balasch
Alumnes: Javier Bermudez Laia Forner Saman Iqbal
top related