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Pruebas de identificación de Enterobacterias
Curso de Microbiología – Area III
Facultad de Veterinaria – UdelarIntegrantes: Ignacio
FagundezFederico García
EnterobacteriasEntendemos por enterobacterias a las que pertenecen a clasificación de Gram (–)Se encuentran frecuentemente en el tracto intestinal de animales superiores. No forman esporas, y son anaerobias facultativas.
Con excepción de los géneros Salmonella, Shigella y Yersinia (patógenas profesionales), provocan invasión en el cuerpo en los lugares normalmente estériles.
Casi todos los MO son oportunistas.
Clasificación de las mismas• Gram -• Anaerobias• Móviles o Inmóviles• Fermentan lactosa• Presencia o ausencia de capsula• No forman esporas
Providencia Citrobacter
Shigella EnterobacterSalmonella Escherichia coliSerratia KlebsiellaYersinia Morganella
Proteus
1 – Cultivo Puro a partir de mi muestra
2 – Observación macroscópica y microscópica
3 – Pruebas Bioquímicas:Pruebas Primarias
Pruebas Secundaria
Pruebas de Identificación
Mac Conkey: Agar selectivo y diferencial para el aislamiento de Enterobacterias. Contiene: sales biliares y cristal violeta inhibe Gram + Lactosa + indicador rojo neutro Lactosa +
Latosa -
SS (Salmonella-Shigella): Medio selectivo y diferencial para aislamiento de Enterobacterias, especialmente Shigella y Salmonella.
Selectividad:Sales biliares y verde brillantes: Inhiben Gram (+)
ColiformesProteus spp
Diferencialidad:Fermentación de Lactosa y formación de ácido sulfhídrico a partir de tiosulfato de sodio
Pruebas Primarias:•Oxidasa•Catalasa•Caldo Tioglicolato•Movilidad•Presencia de esporas
Pruebas Secundarias:•IMViC•TSI•Coagulasa•Urea
IMViCIndol:Determina la presencia de la enzima triptofanasa
Reactivo de Kovacs
Rojo Metilo:Detecta la capacidad de fermentar, y por lo tanto la formación de Ácido.
Indicador de pH: Rojo Metilo(indica acidez)
Voges-Proskauer:Detecta la fermentación con formación de Acetoína.
VP (+) = AcetoínaVP (-) = Sin Acetoína
Citrato:Determina la utilización del citrato como única fuente de carbono y energía.
Indicador de pH:Azul de bromotimol (detecta alcalinidad)
+-
TSI (Triple azúcar de hierro)Es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación de enterobacterias según:•Fermenten o no glucosa.•Fermenten o no lactosa o sacarosa.•Produzcan o no ácido sulfhídrico.•Produzcan o no gas.
• Bacilo Gram (-) • Anaerobio facultativo • Móvil por flagelos peritricos (que rodean su
cuerpo) • No forma esporas• Capaz de fermentar la glucosa y la lactosa• Se encuentra en tracto gastrointestinal tanto de
humanos como animales superiores.
E. COLI
SALMONELLA• Bacilo Gram (-) • Anaerobio facultativo • Móvil por flagelos peritricos (que rodean su
cuerpo) • No desarrollan cápsula, ni esporas• Capaz de fermentar la glucosa, pero NO lactosa• No producen ureasa
SHIGELLA• Gram (-) • Anaerobio facultativo • Inmóviles• No desarrollan esporas• Capaz
de fermentar la glucosa, pero NO lactosa
PCR (Reacción en cadena de la
polimerasa)• La PCR ofrece alta sensibilidad y alta especificidad.• Logra un diagnostico rápido y preciso.• Su objetivo principal es la multiplicación in Vitro de uno o
varios segmentos de ADN, por acción una enzima ADN polimerasa (ADN dependiente termoestable).
Conclusión• Podemos concluir que, a través de los medios
de cultivo, las técnicas bioquímicas y los estudios moleculares llegamos a la identificación completa de Escherichia Coli, Salmonella y Shigella.
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