isolasi kandungan kimia tumbuhan
Post on 01-Mar-2018
229 Views
Preview:
TRANSCRIPT
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
1/18
6/17/201
ISOLASI KANDUNGAN KIMIA
TUMBUHAN
Endang Dwi Wulansari
Prinsip
Ekstraksi
Pemurnian awal
Pemurnian lanjut
Identifikasi
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
2/18
6/17/201
TAHAP EKSTRAKSI
Ekstraksi lazimnya dilakukan dengan melarutkan suatuserbuk bahan dalam pelarut tertentu
1. Pemilihan Pelarut Ekstraksi
penting untuk memperhatikan sifat kimia dan
sifat fisika dari komponen yang akan diekstraksi
atau diisolasikelarutan, pH, stabilitas senyawa
Dapat menggunakan pelarut air/pelarut organik
untung/ruginya apa ?
KEUNTUNGAN-KERUGIAN
Murah
Mudah didapat
Dapat ditumbuhi jamur
Dapat menghidrolisissenyawa (dalamkeadaan asam)
TD tinggi, shgpenguapan butuh suhutinggi,waktu lama
Mahal
Selektif
Tidak menghidrolisis
senyawa
TD rendah, shg
penguapan butuh suhu
rendah, waktu cepat
AIR PELARUT ORGANIK
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
3/18
6/17/201
Pelarut tunggal
Untuk tujuan isolasi zat tunggal dg kepolaran ttt
Kepolaran pelarut disesuaikan dg kepolaran
senyawa yg akan diisolasi
Pelarut ganda
Untuk tujuan isolasi berbagai macam senyawa dg
kepolaran berbeda
Perlu diperhatikan urutan kepolaran
Deret eluotropi, dari non polarpolar
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
4/18
6/17/201
Pelarut
Pelarut yang lazim digunakan pada
proses ekstraksi adalah n-heksana,benzena, diklorometan (CH2Cl2),
kloroform (CHCl3), aseton, etil asetat,
metanol atau etanol, dan air.
Semua pelarut yang digunakan dalam
proses ekstraksi adalah pelarut teknis
yang didestilasi terlebih dahulu atau
p.a. Destilasi pelarut teknis ini penting
untuk selalu diperhatikan sebab
pelarut teknis seringkali mengandungbahan kimia yang dapat mengacaukan
proses isolasi.
Pelarut Ekstraksi
komponen yang akan diisolasi bersifat ionik (misalnya
senyawa garam organik) atau sangat polar (seperti turunan
glikosida) pelarut metanol/air atau campurannya, p.u
kloroform
komponen minyak atsiri pelarut seperti n-heksana,
benzena atau eter (dietil eter).
Pengotor ekstrak dari bahan daun adalah klorofil, bisa
dieliminasi dengan menambahkan air hangat pada ekstrak
(setelah ekstrak diuapkan dan dilarutkan dalam etil asetat)
Pengotor ekstrak dari bahan kulit adalah tanin, bisa
dieliminasi dengan menambahkan dietileter.
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
5/18
6/17/201
2. Pemilihan cara ekstraksi
Dipertimbangkan :
tujuan akan diekstraksi ad habis atau tidak
Tekstur dan kadar air bahan tanaman
stabilitas
Cara ekstraksi :
Cara dingin :
Maserasi
Perkolasi
Perasan/penekanan
Cara panas : Perebusan (infus, dekokta, digesti)
Refluks
Soxhlet
Destilasi , eufleurasi
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
6/18
6/17/201
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
7/18
6/17/201
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
8/18
6/17/201
Cara panas, kontinyu, exhaustive
Rangkaian alat soxhlet
3. Penanganan hasil ekstraksi
Pemekatan
Penghilangan lemak
penyimpanan
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
9/18
6/17/201
PEMEKATAN
SUHU KAMAR
Penguapan pada udara terbuka, tanpa pemanasan
Penguapan dengan penghisapan
Penguapan dengan gas N2
SUHU YANG DITINGKATKAN
Penguapan pada tekanan atmosfer (w.b, destilasi)
Penguapan dengan pengurangan tekanan (rotary
evaporator)
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
10/18
6/17/201
1
Rotary evaporator
Dengan penurunan
tekanan maka
cairan akan
mendidih di bawah
titik didihnyawaktu cepat
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
11/18
6/17/201
SUHU YANG DITURUNKAN
Freeze dryer (liofilisasi)
Prinsip : ekstrak didinginkan, kristal air yang
terbentuk disublimasikan
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
12/18
6/17/201
1
PENGHILANGAN LEMAK
Lemak dihilangkan karena lemak akan
mengecoh dari larutannya
Dalam suasana basa, lemak akan membentuk
sabun sehingga sulit dipisahkan
Ditambah eter, kloroform, n-heksana laludikocok
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
13/18
6/17/201
1
PENYIMPANAN
Ekstrak air diusahakan disimpan dalam bentuk
ekstrak kering
Disimpan dengan pendinginan
Bila perlu ditambah pengawet yang dapat
menguap pada waktu diuapkan, misal : toluena
Untuk zat tunggal dapat digunakan cararekristalisasi
Pelarut tunggal
2 pelarut
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
14/18
6/17/201
1
untuk pemisahan awal zat rumit, 2 cara yang lazim
digunakan, yaitu
secara fisika (partisi)
secara kimia (pengaturan pH dan pelarut)
1. Partisi
Partisi dilakukan apabila jumlah komponen di dalam
ekstrak terdapat puluhan senyawa. Dasar dari
pemisahan dengan cara partisi adalah perbedaan
kelarutan, dan syarat yang harus dipenuhi untuk
melakukan hal ini adalah bahwa dua pelarut yang
digunakan tidak saling bercampur. Dua pelarut yang
tidak saling bercampur adalah n-heksana-metanol,kloroform-air, dan etil asetat-air.
2. Pengaturan pH dan Pelarut :
Pemisahan alkaloid dengan pembentukangaramnya
Pemisahan fenol dari campurannya denganpembentukan senyawa fenolatnya
Eugenol + NaOH Na-Eugenolat
(larut p.organik) (larut air)
asam
Pemisahan senyawa kumarin dari campurannyadengan pembentukan senyawa kumarinatnya
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
15/18
6/17/201
1
suatu teknik pemisahan campuran menjadi
komponennya berdasarkan perbedaan migrasi
masing-masing komponennya dalam fase diam
akibat pengaruh dari fase gerak
Separate
Analyze
Identify
Purify
QuantifyComponentsMixture
Pemisahan lanjut zat rumitKromatografi
Illustration of Chromatography
Components Affinity to Stationary Phase Affinity to Mobile Phase
Blue ---------------- Insoluble in Mobile Phase
Black
Red
Yellow
Mixture Components
Separation
Stationary Phase
Mobile Phase
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
16/18
6/17/201
1
Analisis komponen dengan KLT
Ada 2 tujuan :1. Untuk analisis, mengetahui berapa jumlah
komponen (noda) yang ada dalam ekstrak atau
fraksi.
Eluen campuran n-heksana-etil asetat, umumnya
cocok untuk golongan terpenoid, sementara
campuran kloroform-metanol cocok untuk golongan
fenolik.
2. Untuk mencari fase gerak/eluen yang sesuai untuk
proses fraksinasi.
Eluen yang murah untuk tujuan ini adalah campuran
n-heksana-etil asetat atau n-heksana-aseton.
Tahapan KLT ??
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
17/18
6/17/201
1
PemurnianBeberapa teknik kromatografi yang dapat digunakan untuk pemurnian adalah:
-Kromatografi Vakum Cair (KVC) -Kolom gravitasi
-Kromatografi Kolom Tekan (KKT) -KLT preparatif
-Kromatografi sentrifugal (chromatotron)
Tahap Identifikasi
Perlu dilakukan uji kemurnian isolat dulu
Fraksi-fraksi yang memberikan noda kromatogram
tunggal dengan nilai Rf sama dengan
standarnya, digabung dicek kemurniannya,
dielusi dengan 3 (tiga) system eluen yang
berbeda-beda (sifat polaritasnya).Misal; system I campuran heksana:etilasetat;
system II campuran kloroform:metanol; system
III campuran heksana:kloroform:etilasetat.
Jika blm murni ??? 1 tahap kromatografi lagi
-
7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan
18/18
6/17/201
Identifikasi senyawa hasil isolasi (isolat) :
Organoleptis
Analisis golongan senyawa
Analisis spektra
Spektra uv-vis
Spektra ir
Spektra massa
Spektra NMR
Semoga cukup jelas
top related