material de bioquimica enzimas
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ESTABILIDADE DE ENZIMAS
Estabilidade Enzimtica X Atividade EnzimticaAtividade Enzimtica: dada pela medio da velocidade inicial da reao sob uma faixa de condies determinadas. Estabilidade Enzimtica: Capacidade das enzimas de reter sua capacidade cataltica sob diferentes condies de reao ao longo do tempo funo biolgica das enzimas esta intimamente associada sua estrutura tridimensional.
1
Atividade Enzimtica
Velocidade inicial da reao determinada pela faixa linear da formao de produto.
Estabilidade das Enzimas
Desnaturado
Nativo
Estado termodinamicamente mais estvel em condies fisiolgicas Os estados de equilbrio da desnaturao das protenas consistem na alterao das propriedades fsico qumicas da soluo de modo a deslocar o equilbrio valor da constante de equilbrio.
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Fatores que Influenciam a Estabilidade Temperatura pH Fora inica Presena de agentes desnaturantes Atividade da gua Presso
Efeito da TemperaturaDesnaturao por desdobramento da Molcula- liberdade conformacional aumenta a elevadas temperaturas reversvel na zona de transio
Desnaturado
Nativo
3
Efeito do pH Normalmente valores extremos de pH induzem a desnaturao (muito ou muito ). Alterao da carga dos aminocidos da molcula (anula interaes eletrostticas- promove repulses)- 7 dos 20 aas das protenas alteram sua carga com variao do pH Afeta a estrutura da molcula.
Efeito do pHDesnaturao cida (pH )desaparecimento das cargas negativas (grupos COOH das Asp e Glu). desaparecimento das carga positivas- acmulo negativas grupos COOH e nas tirosinas e cistenas.
Desnaturao alcalina (pH ):
Estrutura interna de uma protenairreversvel aumenta reatividade
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Efeito do pH
Agentes DesnaturantesSubstncias que causam a desnaturao das enzimas- aumentam solubilidade cadeias laterais da protena (hidrfobas e polipeptdica) Na maioria das vezes reversvel (100%). Utilizados p/ caracterizao termodinmica da desnaturao. Ex: cloreto de guanidina e uria
Atividade da guaO nvel e distribuio de gua residual afeta a eficincia cataltica. Falta de gua torna a molcula mais rgida e excesso de gua diminu estabilidade enzimtica (aw
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